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细胞外基质促血管平滑肌细胞迁移及β_3整合素和粘着斑激酶表达 被引量:29
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作者 刘智敏 韩梅 温进坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期163-166,共4页
目的 :研究细胞外基质 (ECM)蛋白促血管平滑肌细胞 (VSMC)迁移与 β3整合素及粘着斑激酶 (FAK)表达之间的关系。方法 :应用细胞迁移实验观察骨桥蛋白 (OPN)和纤连蛋白 (FN)对VSMC迁移活性的影响 ,利用RT-PCR和Western印迹探讨 β3整合素... 目的 :研究细胞外基质 (ECM)蛋白促血管平滑肌细胞 (VSMC)迁移与 β3整合素及粘着斑激酶 (FAK)表达之间的关系。方法 :应用细胞迁移实验观察骨桥蛋白 (OPN)和纤连蛋白 (FN)对VSMC迁移活性的影响 ,利用RT-PCR和Western印迹探讨 β3整合素、FAK和转录因子Gax表达与细胞迁移之间的关系。结果 :VSMC经 1 0、2 0mg/LOPN和 2 0mg/LFN处理后 ,迁移活性分别达对照组的 1 36、1 57和 1 2 6倍 (P <0 0 5)。用相同浓度 (2 0mg/L)OPN和FN刺激细胞 ,随着作用时间延长 ,VSMC迁移距离逐渐增加。Western印迹和RT -PCR结果证实 ,两种基质蛋白促进VSMC迁移与诱导 β3整合素和FAK基因表达及抑制转录因子Gax表达有关。结论 :β3整合素 展开更多
关键词 细胞外基质蛋白 血管平滑肌 结合素类 局部粘着 Β3整合素 粘着激酶
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黄芪、当归对血管平滑肌细胞粘着斑激酶表达和细胞凋亡的影响 被引量:33
2
作者 杨长春 温进坤 韩梅 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期201-203,共3页
目的:探讨黄芪、当归对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)粘着斑激酶(FAK)表达和细胞凋亡的影响。方法:应用RT-PCR、Western blot检测黄芪、当归对FAK表达的影响;应用 Greiss试剂检测 VSMC培养液中NO_2^-含量;应用流式细胞仪检测细胞凋亡... 目的:探讨黄芪、当归对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)粘着斑激酶(FAK)表达和细胞凋亡的影响。方法:应用RT-PCR、Western blot检测黄芪、当归对FAK表达的影响;应用 Greiss试剂检测 VSMC培养液中NO_2^-含量;应用流式细胞仪检测细胞凋亡及bcl-2和caspase-3表达活性。结果:黄芪、当归注射液可以显著抑制由碱性成纤维细胞生长因子所诱导的FAK表达,增加细胞培养液中的NO_2^-含量,诱导cas-pase-3表达。下调bcl-2表达,促进体外培养的VSMC凋亡。结论:黄芪、当归诱导VSMC凋亡与其促进NO合成、抑制FAK表达、诱导促凋亡基因caspase-3表达及下调抗凋亡基因bcl-2表达有关。 展开更多
关键词 黄芪 当归 粘着激酶 血管平滑肌细胞 VSMC FAK 细胞凋亡 中药
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丹参单体IH764-3对H_2O_2刺激肝星状细胞增殖和胶原合成的影响及其机制 被引量:14
3
作者 刘丽 姜慧卿 张晓岚 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期78-81,共4页
目的 :研究IH764 3对H2 O2 刺激的大鼠肝星状细胞 (HSCs)增殖及胶原合成的抑制作用以及对粘着斑激酶(FAK)的影响 ,旨在为临床防治肝纤维化提供理论依据。方法 :以不同剂量IH764 3干预H2 O2 刺激的HSCs,通过3H -胸腺嘧啶 (3H TdR)、3H ... 目的 :研究IH764 3对H2 O2 刺激的大鼠肝星状细胞 (HSCs)增殖及胶原合成的抑制作用以及对粘着斑激酶(FAK)的影响 ,旨在为临床防治肝纤维化提供理论依据。方法 :以不同剂量IH764 3干预H2 O2 刺激的HSCs,通过3H -胸腺嘧啶 (3H TdR)、3H 脯氨酸 (3H pro)掺入法测定HSCs增殖及胶原合成能力 ,应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法检测FAKmRNA。结果 :不同剂量IH764 3(1 0 μg/ml,2 0 μg/ml,30 μg/ml,40 μg/ml)作用于HSCs48h及 30 μg/mlIH764 3作用于HSCs不同时间 (1 2h ,2 4h ,48h) ,与单纯H2 O2 组相比 ,HSCs增殖明显被抑制 (P<0 .0 5) ;胶原合成能力降低 (P <0 .0 5) ;同时FAKmRNA表达下降。结论 :丹参单体IH764 3能够抑制H2 O2 刺激的HSCs增殖及胶原合成 ,下调FAK是IH764 3抑制HSCs增殖及胶原合成的分子机制之一。 展开更多
关键词 丹参单体 肝星状细胞 增殖 胶原 粘着激酶
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尾加压素增加血管平滑肌细胞粘着斑激酶的含量和活力 被引量:14
4
作者 彭旭 尹航 +3 位作者 汪丽蕙 柴三葆 苏加林 唐朝枢 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期455-458,共4页
在体外培养的血管平滑肌细胞上 ,采用蛋白印迹杂交免疫沉淀的方法 ,研究尾加压素Ⅱ (UⅡ )与粘着斑激酶 (FAK)介导的信号传导之间的关系。结果表明 ,UⅡ在 10 -8、10 -7和 10 -6mol/L的浓度时 ,可分别使FAK活力增加 2 2、3 0 4和 0 73... 在体外培养的血管平滑肌细胞上 ,采用蛋白印迹杂交免疫沉淀的方法 ,研究尾加压素Ⅱ (UⅡ )与粘着斑激酶 (FAK)介导的信号传导之间的关系。结果表明 ,UⅡ在 10 -8、10 -7和 10 -6mol/L的浓度时 ,可分别使FAK活力增加 2 2、3 0 4和 0 73倍 ;加入UⅡ (10 -7mol/L) 5min后 ,FAK活力增加 95 % ,但与对照组相比无显著性差异(P >0 0 5 ) ,刺激 10min后 ,FAK活力升高 3 7倍 ,和对照组相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。至 30min时活力显著升高 ,较对照组增加 4 8倍 (P <0 0 1)。UⅡ刺激平滑肌细胞 30min内 ,FAK的蛋白含量无明显变化 ;在UⅡ作用 2h后 ,FAK的含量增加 36 % ,至 4h达高峰 ,与对照组相比增加 5 3% ,6h后降低 ;细胞松弛素B不能抑制UⅡ对FAK的激活 ;丝裂素活化蛋白激酶的抑制剂PD980 5 9(5 0 μmol/L) ,钙调素依赖性蛋白激酶的抑制剂W7(5 0 μmol/L) ,对FAK的激活无影响 (P >0 0 5 ) ;蛋白激酶C的阻断剂H7(5 0 μmol/L) ,可与UⅡ发生协同作用 ,使FAK活力较单纯UⅡ组增加 1 98倍。因此 ,UⅡ与FAK介导的信号转导途径之间存在着密切的关系 ,且这种关系不依赖于细胞骨架的完整性 ,与蛋白激酶C介导的信号转导途径有密切的关系。 展开更多
关键词 粘着激酶 尾加压素 信号转导 血管平滑肌 活力
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Expression of focal adhesion kinase and α5 and β1 integrins in carcinomas and its clinical significance 被引量:12
5
作者 Jian-MinSu LuGui 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2002年第4期613-618,共6页
AIM:To detect the expression pattern of FAK(focal adhesion kinase)and integrinα5andβ1 subunits in different kinds of cancerous tissues and to study their correlation with clinicopathological data including tumor ty... AIM:To detect the expression pattern of FAK(focal adhesion kinase)and integrinα5andβ1 subunits in different kinds of cancerous tissues and to study their correlation with clinicopathological data including tumor type,grade and lymph node status.METHODS:Using an immunohistochemical technique,we examined the expression of FAK and integrin and subunits in cancerous and noncancerous tissues obtained from75patients with gastric carcinomas,21colorectal carcinomas,16 hepatocellular carcinomas,20uterocervical carcinomas,and20breast carcinomas.RESULTS:The staining of FAK was stronger in cancerous than in noncancerous areas,Enhanced expression of FAKwas detected in poor-differentiated carcinoma of the stomach and colorectum.Tumors with lymph node metastases had more FAKprotein than those without metastases.In addition.the deeper the extent of tumor infiltration,the higher the FAKexpression.The expression of integrinα5andβ1subunits was lower in cancerous areas than in noncancerous areas,but it was higher in well-differentiated cancerous tissues than in poor differentiated tissues.The relationship between the expression of integrinα5andβ1subunits and infiltration or metastasis was not significant.Cancerous tissues with stronger FAK expression(++or+++)also had a higher expression of integrinα5andβ1subunits in the tumor and its unaffected margins.CONCLUSION:FAKis a better marker for carcinogenesis and the progression of cancer than integrinα5orβ1subunit,and it may be not only a transformation-linked enzyme but also a progression-linked enzyme. 展开更多
关键词 粘着激酶 肿瘤 临床意义 癌基因
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粘着斑激酶和丝裂原活化蛋白激酶对纤粘连蛋白诱导平滑肌细胞迁移和增殖的影响 被引量:12
6
作者 尹航 汪丽蕙 +3 位作者 霍勇 彭旭 夏春芳 唐朝枢 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期622-625,共4页
目的 研究粘着斑激酶和丝裂原活化蛋白激酶在细胞外基质成分诱导血管平滑肌细胞迁移和增殖中的作用。方法 通过纤粘连蛋白 (FN)诱导培养的平滑肌细胞迁移和增殖 ,以免疫沉淀和Western印迹法检测粘着斑激酶 (FAK)和丝裂原活化蛋白激酶 ... 目的 研究粘着斑激酶和丝裂原活化蛋白激酶在细胞外基质成分诱导血管平滑肌细胞迁移和增殖中的作用。方法 通过纤粘连蛋白 (FN)诱导培养的平滑肌细胞迁移和增殖 ,以免疫沉淀和Western印迹法检测粘着斑激酶 (FAK)和丝裂原活化蛋白激酶 (p4 2 / 4 4MAPK)及其磷酸化的表达量。将FAK反义寡核苷酸 (ODN)经脂质体转染细胞 ,观察其对FAK和p4 2 / 4 4MAPK磷酸化、细胞迁移以及增殖的影响。结果 不同浓度FN(5、10、2 0、4 0、6 0 μg/ml)在有效诱导平滑肌细胞迁移和增殖时FAK和p4 2 / 4 4MAPK也呈明显表达 ,2 0 μg/mlFN可使其磷酸化处于较高的表达量。脂质体可有效地介导ODN转染 ,转染效率为 86 7%± 4 5 %。转染后FAK以及p4 2 / 4 4MAPK磷酸化表达量明显减少 ,10、2 0、4 0和 6 0 μg/mlFN组迁移细胞数也分别显著减少 (2 3 2 6 %、2 1 6 3%、19 31%、17 88% ,P <0 0 5 ) ,5~ 6 0 μg/ml不同浓度的FN组 ,细胞增殖减少 2 7 6 7%~ 4 6 6 7% (P <0 0 5 )。 结论 活化的FAK和p4 2 / 4 4MAPK是细胞外基质诱导平滑肌细胞迁移和增殖的重要信号分子 ,二者之间存在着密切的联系 ,由其介导的信号转导促进了这一过程 。 展开更多
关键词 粘着激酶 丝裂原活化蛋白激酶 纤粘连蛋白 诱导 平滑肌细胞 迁移 增殖 反义寡核苷酸类
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丹参单体通过下调粘着斑激酶诱导H_2O_2刺激的肝星状细胞凋亡 被引量:12
7
作者 姜慧卿 张晓岚 刘丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期18-21,共4页
目的 :研究丹参单体IH764 - 3对H2 O2 刺激的肝星状细胞 (HSCs)凋亡的诱导作用以及此过程中粘着斑激酶 (FAK)的变化。方法 :通过直接细胞计数法测定HSCs增殖 ;光学显微镜及透射电镜技术观察凋亡细胞的形态学改变 ,并应用膜联蛋白 (Annex... 目的 :研究丹参单体IH764 - 3对H2 O2 刺激的肝星状细胞 (HSCs)凋亡的诱导作用以及此过程中粘着斑激酶 (FAK)的变化。方法 :通过直接细胞计数法测定HSCs增殖 ;光学显微镜及透射电镜技术观察凋亡细胞的形态学改变 ,并应用膜联蛋白 (Annexin -V) /碘化丙啶 (PI)联合标记法检测HSCs的凋亡率 ;运用RT -PCR方法观察FAKmRNA表达。结果 :H2 O2 具有刺激HSCs增殖的作用 ;丹参单体IH764 - 3能够诱导H2 O2 刺激的HSCs凋亡 ,并呈剂量依赖关系 :1 0mg/L、2 0mg/L、30mg/L及 40mg/LIH764 - 3干预 48h后各组凋亡率分别为 6 35 %、9 2 8%、1 5 1 0 %、1 9 69% ,而H2 O2 组为 2 30 % ;30mg/LIH764 - 3干预HSCs不同时间 (1 2h、2 4h、48h)的凋亡率分别是6 73 %、1 0 34 %、1 5 1 0 % ,呈时间依赖关系 ;RT -PCR分析表明FAK基因表达强度在加入IH764 - 3后 2h即明显下调 ,1 0mg/L ,2 0mg/L ,30mg/L及 40mg/L组分别比H2 O2 组低了 68 71 %、71 0 0 %、86 72 %、95 1 6 %。结论 :丹参单体IH764 - 3可以诱导H2 O2 刺激的HSCs凋亡 ,下调FAKmRNA表达是其诱导HSCs凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 丹参单体 肝星状细胞 细胞凋亡 粘着激酶 过氧化氢
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基于CD19^(+)B细胞调控FAK/CAPN/PI3K通路研究新风胶囊改善类风湿关节炎机制 被引量:16
8
作者 万磊 刘健 +10 位作者 黄传兵 赵磊 谌曦 范海霞 葛瑶 刘天阳 刘磊 LI Zheng 朱子衡 马熙檬 李舒 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第14期3705-3711,共7页
观察新风胶囊对类风湿关节炎(RA)B淋巴细胞、炎性介质、FAK/CAPN/PI3K通路的影响,探讨新风胶囊改善RA临床症状的机制。观察RA患者关节及全身症状,检测实验室指标[血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、血沉(ESR)、免疫球蛋白(Ig)G、IgA、Ig... 观察新风胶囊对类风湿关节炎(RA)B淋巴细胞、炎性介质、FAK/CAPN/PI3K通路的影响,探讨新风胶囊改善RA临床症状的机制。观察RA患者关节及全身症状,检测实验室指标[血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、血沉(ESR)、免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸抗体(CCP-AB)、C反应蛋白(CRP)]。采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-10、IL-33、趋化因子5(CCL5)、血管内皮生长因子(VEGF),流式细胞术测定外周血CD3^(-)CD19^(+)B细胞,免疫印迹法检测FAK、p-FAK、CAPN、PI3K蛋白。结果显示,新风胶囊能明显改善RA关节及全身症状,提高临床疗效。且新风胶囊能升高HGB,降低PLT、CCP-AB、CRP、ESR指标,上调IL-10表达,下调IL-1β、IL-33、CCL5、VEGF、CD3^(-)CD19^(+)B细胞、FAK、p-FAK、CAPN、PI3K表达(P<0.01)。结果表明,新风胶囊可能通过下调CD3^(-)CD19^(+)B细胞表达,调控炎性细胞因子和趋化因子平衡,抑制FAK/CAPN/PI3K通路异常激活,改善RA临床症状。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 粘着激酶 钙蛋白酶 磷酸肌醇-3激酶 B淋巴细胞 新风胶囊
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FAK反义寡核苷酸促进人肺动脉平滑肌细胞凋亡 被引量:13
9
作者 林春龙 张珍祥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期288-291,共4页
目的:了解黏着斑激酶(focal adhesion kinase FAK)是否参与人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)凋亡。方法:纤黏连蛋白(FN40mg/L)刺激下培养的HPASMCs被用来进行反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODNs)转染以做进一步实验。采用免疫... 目的:了解黏着斑激酶(focal adhesion kinase FAK)是否参与人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)凋亡。方法:纤黏连蛋白(FN40mg/L)刺激下培养的HPASMCs被用来进行反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODNs)转染以做进一步实验。采用免疫印迹方法测定FAK蛋白质及凋亡蛋白半光氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:免疫印迹方法测定结果表明,应用FAKASODNs转染后HPASMCs中FAK的表达明显低于转染前(P<0·01);caspase-3在应用FAKASODNs转染后高于转染前(P<0·05),TUNEL法检测结果表明FAKASODNs转染后细胞凋亡增加。结论:本实验结果表明FAKASODNs抑制细胞增生,促进细胞凋亡。其机制很可能是经caspase-3信号通路促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 粘着激酶 肺动脉 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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粘着斑相关非激酶对骨桥蛋白促血管平滑肌细胞迁移的抑制作用及分子机制 被引量:11
10
作者 刘智敏 韩梅 温进坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期131-137,共7页
为阐明整合素 β3 粘着斑激酶 (FAK)信号途径在骨桥蛋白 (OPN)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)迁移中的作用 ,用FAK磷酸化特异性抑制剂粘着斑相关非激酶 (FRNK)选择性阻断FAK磷酸化 ,观察对OPN 整合素 β3 相互作用所激活的FAK信号通路的影... 为阐明整合素 β3 粘着斑激酶 (FAK)信号途径在骨桥蛋白 (OPN)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)迁移中的作用 ,用FAK磷酸化特异性抑制剂粘着斑相关非激酶 (FRNK)选择性阻断FAK磷酸化 ,观察对OPN 整合素 β3 相互作用所激活的FAK信号通路的影响及其与OPN诱导VSMC迁移之间的关系 .外源性FRNK在VSMC中的过表达可显著抑制OPN诱导的VSMC迁移 ,使跨膜迁移细胞数下降 5 0 5 8% (P <0 0 5 ) .OPN刺激不但明显诱导FAK表达 ,而且还促进其磷酸化 .外源性FRNK对OPN诱导的FAK磷酸化具有显著抑制作用 ,使磷酸化型FAK水平比相应对照细胞下降5 9 1% ,但其对FAK表达不产生明显的影响 .FRNK还具有下调整合素 β3 表达的作用 ,免疫荧光细胞化学分析结果显示 ,在转染FRNK的VSMC中 ,粘着斑蛋白的磷酸化水平降低 ,粘着斑数量明显减少 .结果提示 ,整合素 β3 FAK是介导VSMC迁移的重要信号途径 ,外源性FRNK通过下调 β3 表达、抑制FAK磷酸化和减少粘着斑蛋白磷酸化及粘着斑形成等机制 ,减弱OPN刺激信号的跨膜转导及沿胞内途径传递 ,发挥抑制OPN促VSMC迁移的效应 . 展开更多
关键词 骨桥蛋白 粘着激酶 粘着相关非激酶 血管平滑肌细胞 迁移
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川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子表达的影响 被引量:9
11
作者 孙岚 刘文励 +3 位作者 孙汉英 周银莉 徐惠珍 路武 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期86-89,共4页
为了探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子 (VEGF)表达的影响及其促进放射损伤小鼠骨髓微环境修复的机制和信号通路 ,采用Westernblot法和流式细胞术对放射损伤小鼠骨髓基质细胞中VEGF表达水平 ,粘着斑激酶 (FAK)... 为了探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子 (VEGF)表达的影响及其促进放射损伤小鼠骨髓微环境修复的机制和信号通路 ,采用Westernblot法和流式细胞术对放射损伤小鼠骨髓基质细胞中VEGF表达水平 ,粘着斑激酶 (FAK)和促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)活性变化及骨髓基质细胞凋亡率和细胞周期改变进行分析 ,同时观察川芎嗪对其影响。实验结果表明 ,放射损伤后小鼠骨髓基质细胞VEGF表达明显低于正常水平 ,随时间推移而逐渐升高 ,但照射后第 14天仍未恢复正常 ,而服川芎嗪组VEGF表达在第 14天时已接近正常水平 ;骨髓基质细胞中磷酸化FAK和磷酸化MAPK表达亦有相同变化趋势。放射损伤后 ,骨髓基质细胞停滞于G0 G1期 ,S期减少 ,凋亡率明显增加。随时间推移 ,G0 G1期细胞比例呈由高到低的变化 ,凋亡率也逐渐降低 ,至 14天仍未恢复正常。用川芎嗪治疗后 ,骨髓基质细胞S期合成活跃 ,凋亡率明显下降 ,第 14天时恢复更明显 ,接近正常水平。结论 :川芎嗪可通过促进骨髓基质细胞VEGF的表达加速照射后骨髓造血微环境恢复 ,其机制可能是通过VEGF诱导FAK和MAPK磷酸化途径实现的。 展开更多
关键词 川芎嗪 放射损伤 骨髓基质细胞 VEGF 粘着激酶 促分裂原活化蛋白激酶
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白藜芦醇对高转移卵巢癌细胞中FAK表达及磷酸化水平的影响 被引量:11
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作者 覃燕梅 黎科 +2 位作者 何太平 莫丽儿 梁念慈 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期729-732,共4页
目的研究白藜芦醇对HO-8910PM细胞中FAK表达及FAK磷酸化水平的影响,探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制。方法MTT法测定白藜芦醇的细胞毒作用;Westernblot分析FAK蛋白表达及FAK磷酸化水平;RT-PCR分析白藜芦醇对HO-8910PM细胞中FAKmRNA表达... 目的研究白藜芦醇对HO-8910PM细胞中FAK表达及FAK磷酸化水平的影响,探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制。方法MTT法测定白藜芦醇的细胞毒作用;Westernblot分析FAK蛋白表达及FAK磷酸化水平;RT-PCR分析白藜芦醇对HO-8910PM细胞中FAKmRNA表达的影响。结果白藜芦醇作用HO-8910PM细胞24h后的IC50为(163.40±2.48)μmol·L-1;25、50、100μmol·L-1的白藜芦醇作用HO-8910PM细胞24h后,FAK蛋白和mRNA表达水平下降,FAK磷酸化水平也降低。结论白藜芦醇抗肿瘤侵袭转移机制与FAK表达以及FAK磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 粘着激酶 表达 卵巢癌
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粘着斑激酶在胃癌中的表达及其临床意义 被引量:14
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作者 苏剑敏 桂律 +1 位作者 周逸平 查锡良 《实用癌症杂志》 2000年第4期341-343,共3页
目的 研究粘着斑激酶 (FAK )在胃癌及癌旁组织中的表达及其与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系。方法 应用免疫组织化学ABC法检测 75例胃癌及癌旁组织石蜡标本中FAK蛋白的表达水平。结果 FAK在癌组织中的表达明显高于癌... 目的 研究粘着斑激酶 (FAK )在胃癌及癌旁组织中的表达及其与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系。方法 应用免疫组织化学ABC法检测 75例胃癌及癌旁组织石蜡标本中FAK蛋白的表达水平。结果 FAK在癌组织中的表达明显高于癌旁组织 ,低分化癌组织较高分化、中分化组织中FAK的表达高 ,有淋巴结转移的组织较无转移的表达高 ,浸润程度越深表达越高。结论 FAK可能既是 1种转化相关酶又是 1种演变相关酶。FAK的表达量可作为肿瘤发生、发展过程中 1种较有价值的病理指标。 展开更多
关键词 胃癌 免疫组织化学 粘着激酶
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肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞整合素α_6β_1及粘着斑激酶表达的变化 被引量:9
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作者 刘小菁 傅华 +3 位作者 杨丽 黄明慧 肖文君 王一平 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2001年第6期349-351,共3页
目的 研究正常及肝纤维化时大鼠肝窦内皮细胞(SEC)表面层粘连蛋白(LN)的整台素受体α6β1及粘着斑激酶(FAK)的变化。方法 用胶原酶原位灌注、Percoll不连续密度梯度离心法分离正常及四氯化碳(CCl4)实验性... 目的 研究正常及肝纤维化时大鼠肝窦内皮细胞(SEC)表面层粘连蛋白(LN)的整台素受体α6β1及粘着斑激酶(FAK)的变化。方法 用胶原酶原位灌注、Percoll不连续密度梯度离心法分离正常及四氯化碳(CCl4)实验性大鼠肝纤维化模型中的SEC,并进行体外培养。采用细胞-ELISA和免疫沉淀-蛋白质酪氨酸激酶活性测定的方法,分别观察SEC细胞表面整合素α6β1表达及FAK活性的变化。结果 正常大鼠SEC细胞表面几乎不表达整合素α6β1;在肝纤维化时SEC细胞表面α6β1蛋白表达却明显增加(P<0.05),且细胞中FAK活性明显增高(P<0.05)。结论 在肝纤维化时SEC细胞表面整合素α6β1的表达及FAK活性明显增高,可能在SEC的形态及功能改变中起重要作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝窦内皮细胞 整合素 粘着激酶 大鼠
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粘着斑激酶活化对平滑肌细胞粘附和迁移的影响 被引量:9
15
作者 尹航 汪丽蕙 +3 位作者 彭旭 霍勇 夏春芳 唐朝枢 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期593-596,共4页
目的 :研究粘着斑激酶磷酸化在细胞外基质成份诱导平滑肌细胞粘附和迁移中的作用。方法 :通过纤粘连蛋白 (FN)诱导培养的平滑肌细胞粘附迁移 ,以免疫沉淀和Westernblolt方法检测粘着斑激酶 (FAK)及其磷酸化的表达量。将FAK反义寡核苷酸 ... 目的 :研究粘着斑激酶磷酸化在细胞外基质成份诱导平滑肌细胞粘附和迁移中的作用。方法 :通过纤粘连蛋白 (FN)诱导培养的平滑肌细胞粘附迁移 ,以免疫沉淀和Westernblolt方法检测粘着斑激酶 (FAK)及其磷酸化的表达量。将FAK反义寡核苷酸 (ODNs)经脂质体转染细胞 ,观察对FAK磷酸化、细胞粘附铺展和迁移的影响。结果 :FN在显著诱导平滑肌细胞粘附和迁移时 ,FAK也呈明显表达 ,2 0mg/LFN可使其磷酸化处于较高表达量。脂质体可有效地介导ODNs转染 ,转染效率为 (86 7± 4 5 ) % ,FAK磷酸化表达量明显减少 ,5 - 6 0mg/L不同浓度FN组 ,细胞铺展率减少 17 89% - 2 7 6 7% ,10、2 0、4 0和 6 0mg/LFN组迁移细胞数也分别显著少 2 3 2 6 %、2 1 6 3%、19 31%、17 88% (P <0 0 5 )。结论 :活化的FAK是细胞外基质诱导SMCs粘附和迁移的重要信号分子 ,由其介导的信号转导促进了这一过程 。 展开更多
关键词 粘着激酶 细胞粘附 纤粘连蛋白 平滑肌细胞 细胞迁移 血管成形术 血管再狭窄
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丹参单体IH764-3通过下调H_2O_2刺激的肝星状细胞FAK水平影响MMP-13和TIMP-1的表达 被引量:10
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作者 刘丽 姜慧卿 +1 位作者 张晓岚 赵冬强 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期482-486,I0013,共6页
目的:研究丹参单体IH764-3对H2O2刺激的肝星状细胞(HSC)基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响以及此过程中粘着斑激酶(FAK)的变化。方法:应用RT-PCR方法检测MMP-13及FAK mRNA表达,原位杂交方法检... 目的:研究丹参单体IH764-3对H2O2刺激的肝星状细胞(HSC)基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响以及此过程中粘着斑激酶(FAK)的变化。方法:应用RT-PCR方法检测MMP-13及FAK mRNA表达,原位杂交方法检测TIMP-1mRNA水平,Western blotting技术检测FAK及TIMP-1蛋白表达。结果:IH764-3干预组的MMP-13mRNA在2h的表达强度明显上调,而TIMP-1mRNA表达明显受抑,FAK mRNA表达强度明显下调;IH764-3干预24h组FAK及TIMP-1蛋白表达受抑制。结论:丹参单体IH764-3可以诱导MMP-13表达,抑制TIMP-1表达,下调FAK表达是其中的机制之一。 展开更多
关键词 丹参单体IH764—3 肝星状细胞 基质金属蛋白酶-13 粘着激酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1
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Jianpijiedu Fang improves survival of hepatocarcinoma mice by affecting phosphatase and tensin homolog, phosphoinositide 3-kinase, and focal adhesion kinase 被引量:12
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作者 Baoguo Sun Jun Meng +5 位作者 Ting Xiang Zexiong Chen Yulong Li Lisha Lu Shijun Zhang Xiaolin Chen 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2013年第4期479-485,共7页
OBJECTIVE: To investigate the effect of Jianpijiedu Fang (JPJDF) on phosphatase and tensin homolog (PTEN), phosphoinositide 3-kinase (PI3K), and focal adhesion kinase (FAK), and on the survival of hepatocellular carci... OBJECTIVE: To investigate the effect of Jianpijiedu Fang (JPJDF) on phosphatase and tensin homolog (PTEN), phosphoinositide 3-kinase (PI3K), and focal adhesion kinase (FAK), and on the survival of hepatocellular carcinoma (HCC) nude mice. METHODS: Forty male nude mice were randomly divided into 4 groups. Human HCC tissue was implanted in the livers of three groups. After 24 h, the three groups were treated respectively with JPJDF (37.5 g/kg), saline (20 mL/kg) and Tegafur (FT-207, 160 mg/kg) once a day for 10 weeks. The control group without implanting the tissue was concurrently treated with saline (20 mL/kg). The survival data and body weight of all mice were recorded, and expression levels of PTEN, PI3K and FAK in normal tissue and cancer tissue of the livers were eval-uated with immunohistochemical method. RESULTS: The cumulative survival rate of the mice in the JPJDF group was higher than those of the other groups. The rate of weight loss was the lowest in JPJDF group. The survivability and weight loss rate in FT-207 group were the poorest in all groups. The expression intensity of PTEN was higher in normal tissues than in cancer tissues, and lower in the normal tissues of HCC models than in that of mice without HCC. The PTEN expression intensity in normal tissue and cancer tissue from mice treated with FT-207 were lower than that from the mice treated with JPJDF or saline.The expression intensity of PI3K was higher in cancer tissue than in normal tissue. The PI3K expression intensity was the lowest in normal tissue and cancer tissue from mice treated with JPJDF, and the intensity from mice treated with FT-207 was the highest. In mice treated with JPJDF, the expression intensity of FAK was higher in the normal tissue and lower in the cancer tissue than those of the other treatment groups. CONCLUSION: The mechanism accounting for the prolonged survival of HCC-bearing mice treated with JPJDF might be related to the reduction in weight loss and the benign regulation of PTEN, PI3K, and FAK. 展开更多
关键词 Liver neoplasms Pten protein mouse Phosphatidylinositol 3-kinase Focal adhesion protein-tyrosine kinases Jianpijiedu Fang
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蒲公英提取物抑制人胃癌细胞侵袭迁移能力的实验研究 被引量:11
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作者 孙玉成 朴松山 《中国临床研究》 CAS 2019年第4期477-481,共5页
目的通过研究蒲公英提取物(ETM)对人胃低分化腺癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响,探讨ETM抑制胃癌细胞侵袭转移的作用和可能机制。方法体外培养胃癌SGC-7901细胞,以不同浓度的ETM进行处理,CCK-8法检测细胞增殖活性;细胞划痕实验观... 目的通过研究蒲公英提取物(ETM)对人胃低分化腺癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响,探讨ETM抑制胃癌细胞侵袭转移的作用和可能机制。方法体外培养胃癌SGC-7901细胞,以不同浓度的ETM进行处理,CCK-8法检测细胞增殖活性;细胞划痕实验观察细胞迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的一种:单丝氨酸蛋白激酶(LIMK1),以及基质金属蛋白酶9(MMP9)、粘着斑激酶(FAK)mRNAs表达;Western blot法检测LIMK1、MMP9、FAK蛋白表达。结果 ETM对SGC-7901细胞增殖活力具有明显的抑制作用;ETM浓度达50μmol/L以上时,能抑制SGC-7901细胞侵袭及迁移能力,显著下调LIMK1、MMP9、FAK mRNAs及其蛋白表达,且抑制和下调作用均呈浓度和时间依赖性(P均<0.01)。结论 ETM能抑制SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制与下调LIMK1、MMP9、FAK的表达有关。 展开更多
关键词 蒲公英 胃癌 增殖 侵袭 迁移 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 基质金属蛋白酶 粘着激酶
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低强度脉冲超声波对兔膝骨性关节炎软骨整合素-FAK-MAPKs信号通路蛋白表达的影响 被引量:11
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作者 沈士浩 程凯 +4 位作者 林强 夏鹏 高明霞 任莎莎 李雪萍 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期160-166,共7页
目的:观察低强度脉冲超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对兔膝骨性关节炎(osteoarthritis,OA)软骨中整合素-FAK-MAPKs力化学细胞信号转导通路相关蛋白表达的影响。方法:18只成年新西兰大白兔随机平均分成3组,分为正常对照... 目的:观察低强度脉冲超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对兔膝骨性关节炎(osteoarthritis,OA)软骨中整合素-FAK-MAPKs力化学细胞信号转导通路相关蛋白表达的影响。方法:18只成年新西兰大白兔随机平均分成3组,分为正常对照组(normal control,NC),OA模型组(OA group,OA),OA模型照射组(O+L)。OA组接受右侧后肢前交叉韧带切断(ACLT)处理术后4周接受LIPUS假辐射,O+L组同样手术处理,术后4周接受LIPUS辐射,NC组仅切开关节囊。LIPUS作用6周后,处死实验动物,取右后肢,采用HE染色行改良Mankin评分比较各组胫骨平台关节表面病理学改变。同时,采用Western blot技术检测Ⅱ型胶原,MMP-13,整合素β1的蛋白表达水平以及FAK、MAPKs家族蛋白(p38、ERK1/2、JNK)磷酸化水平。结果:1组织学观察及Mankin评分:LIPUS干预后,OA软骨表层轻微不平整,染色轻度缺失,可见软骨细胞增殖;Mankin评分,NC组:4.67±0.57;OA组:10.57±2.55;O+L组:7.66±1.74。与NC组相比,OA组、O+L组Mankin评分明显增高,但OA组增高更为明显(P<0.05);与OA组相比,O+L组Mankin评分明显降低(P<0.05)。2Ⅱ型胶原、MMP-13含量:LIPUS干预后,II型胶原含量较NC组升高,MMP-13含量有明显下降。3整合素β1-FAK-MAPKs信号通路相关蛋白表达:LIPUS干预使整合素β1、磷酸化FAK表达增高;同时MAPKs信号通路相关蛋白ERK1/2、p38磷酸化水平明显下降,而JNK磷酸化水平无明显变化。结论:LIPUS可以减轻骨性关节炎软骨ECM损伤程度,与LIPUS产生机械应力使关节软骨中细胞表面应力受体之一整合素β1及其下游分子黏着斑激酶FAK磷酸化表达增高,进一步下游的磷酸化p38,ERK1/2表达下调有关。LIPUS的机械效应可经力化学转导途径作用于OA关节软骨,为治疗骨性关节炎提供一种新的思路。 展开更多
关键词 低强度脉冲超声波 骨性关节炎 整合素 粘着激酶 丝裂原活化蛋白激酶
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反义FAK寡核苷酸抑制FAK-ERK1/2介导的平滑肌细胞迁移和粘附 被引量:8
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作者 尹航 汪丽蕙 +3 位作者 霍勇 彭旭 夏春芳 唐朝枢 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期334-338,共5页
目的 研究FAK ERK1 2信号通路在平滑肌细胞迁移和粘附中的作用及FAK反义寡核苷酸对其的调控作用。方法 通过纤粘连蛋白 (fibronectin ,FN)诱导平滑肌细胞迁移和粘附 ,以免疫沉淀和Westernblot方法检测粘着斑激酶 (focaladhesionkinase... 目的 研究FAK ERK1 2信号通路在平滑肌细胞迁移和粘附中的作用及FAK反义寡核苷酸对其的调控作用。方法 通过纤粘连蛋白 (fibronectin ,FN)诱导平滑肌细胞迁移和粘附 ,以免疫沉淀和Westernblot方法检测粘着斑激酶 (focaladhesionkinase,FAK)和细胞外调控激酶 1 2 (extracellularregulationkinase ,ERK1 2 )及其磷酸化的表达量。将FAK反义寡核苷酸 (antisenseoligodeoxynucleotides,ODNs)经脂质体转染细胞 ,观察转染后反义ODN对FAK和ERK磷酸化、细胞粘附和迁移的影响。结果 FN在有效诱导平滑肌细胞迁移和粘附时FAK和ERK1 2也呈明显表达 ,FN2 0 μg·mL- 1 可使磷酸化处于较高表达量。脂质体可有效地介导ODNs转染。转染后FAK及ERK1 2磷酸化表达量明显减少。结论 由活化的FAK和ERK1 2介导的信号转导促进了细胞外基质诱导的SMCs迁移和增殖 ,反义FAKODNs可有效地对此进行抑制。 展开更多
关键词 粘着激酶 细胞外调控激酶1/2 反义寡核苷酸 平滑肌细胞
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