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大鼠骨髓基质干细胞体外诱导分化为类许旺细胞 被引量:11
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作者 侯赛云 朱家恺 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期39-41,共3页
目的 研究大鼠骨髓基质干细胞在体外分化为类许旺细胞的方法。 方法 采用 β 巯基乙醇、全反式视黄酸、Forskolin、碱性成纤维细胞生长因子等依次按顺序诱导。神经胶质纤维酸性蛋白、S 10 0免疫细胞化学染色鉴定、计数诱导前后不同... 目的 研究大鼠骨髓基质干细胞在体外分化为类许旺细胞的方法。 方法 采用 β 巯基乙醇、全反式视黄酸、Forskolin、碱性成纤维细胞生长因子等依次按顺序诱导。神经胶质纤维酸性蛋白、S 10 0免疫细胞化学染色鉴定、计数诱导前后不同时间的细胞阳性表达率。 结果 诱导后骨髓基质干细胞形态改变 ,胞体呈椭圆形 ,有 2~ 3个纤细的细胞突起 ,成纵形栅栏状排列 ,免疫细胞化学染色神经胶质纤维酸性蛋白表达率为 42 5 %~ 6 8 7%、S 10 0表达率为 39 6 %~ 6 0 2 %。 结论 采用 β 巯基乙醇、全反式视黄酸、Forskolin、碱性成纤维细胞生长因子、血小板源生长因子、HRG可以诱导大鼠骨髓基质干细胞在体外分化为类许旺细胞。 展开更多
关键词 外周神经缺损 许旺细胞 骨髓基质干细胞 碱性成纤维细胞生长因子 β-巯基乙醇
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类许旺细胞种植人去细胞神经桥接物后体内外标记示踪及神经功能恢复检测 被引量:12
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作者 王建云 刘小林 +3 位作者 向剑平 朱家恺 邓宇斌 李佛保 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期224-227,i0003,共5页
目的将类许旺细胞种植入去细胞神经桥接物内后观察体外培养下细胞存活情况及体内桥接坐骨神经缺损后细胞存活情况及对神经功能恢复的影响。方法通过Dezawa改良法诱导的类许旺细胞经Hochest33342标记以107/ml显微注入经化学苇取的神经桥... 目的将类许旺细胞种植入去细胞神经桥接物内后观察体外培养下细胞存活情况及体内桥接坐骨神经缺损后细胞存活情况及对神经功能恢复的影响。方法通过Dezawa改良法诱导的类许旺细胞经Hochest33342标记以107/ml显微注入经化学苇取的神经桥接物内,分别体外培养0、5、10、15、20、30d,苏木精-伊红染色及荧光显微镜观察细胞在桥接物内的存活情况。同时将该神经桥接物桥接2cm长的坐骨神经缺损模型,分别于5、10、15、20、30、40d取材,观察细胞在桥接物内的存活情况、再生轴突的生长速度及再生轴突有髓纤维密度;于第30、50、70d进行神经电生理检测;于第40、60、80d进行坐骨神经功能指数测定。同时将无细胞的单纯神经桥接物桥接坐骨冲经缺损及自体坐骨神经切断后原位缝合分别作为对照。结果类许旺细胞在体内外条件下均能在化学萃取后的去细胞神经桥接物中存活。体内环境可能更有利于类许旺细胞的增殖。种植类许旺细胞的实验组各测定指标明显优于无细胞桥接对照组(P<0.05或P<0.01),实验组与自体神经对照组各指标近似(P>0.05)。结论类许旺细胞种植入去细胞神经桥接物后在体内外环境均能存活;种入类许旺细胞的去细胞神经桥接物桥接神经缺损可达到近似自体神经移植桥接的效果。 展开更多
关键词 许旺细胞 神经移值体 示踪 外周神经
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改良法体外诱导骨髓基质干细胞分化为类许旺细胞 被引量:8
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作者 王建云 刘小林 +3 位作者 朱家恺 邓宇斌 向剑平 李佛保 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期186-188,i003,共4页
目的 探讨一种较为有效的诱导方法将骨髓基质干细胞体外定向诱导分化为类许旺细胞。 方法 用Dezawa所述方法 (称为传统诱导法 )加以改良成将所有诱导剂一起联合半量间隔诱导两次的方法 (称为改良诱导法 ) ,诱导后的细胞从形态学、抗S... 目的 探讨一种较为有效的诱导方法将骨髓基质干细胞体外定向诱导分化为类许旺细胞。 方法 用Dezawa所述方法 (称为传统诱导法 )加以改良成将所有诱导剂一起联合半量间隔诱导两次的方法 (称为改良诱导法 ) ,诱导后的细胞从形态学、抗S 10 0和抗GFAP细胞免疫化学染色的阳性率、MTT细胞活性测定及流式细胞仪检测细胞DNA含量来比较此两种方法对细胞的综合作用。 结果 改良法诱导的细胞在形态上更具有许旺细胞的长梭形外观 ,抗S 10 0及抗 GFAP阳性率分别由5 8 1%和 60 3 %提高到 79 4%、81 2 % (P <0 0 5 ) ;MTT法细胞活性测定表明改良法对细胞活性影响小(P <0 0 1) ;流式细胞仪DNA含量测定显示S期DNA含量较高 (P <0 0 5 )。 结论 改良法体外诱导骨髓基质干细胞为类许旺细胞具有诱导效果更好 ,对细胞损害小的优越性。 展开更多
关键词 改良法 体外诱导 骨髓基质干细胞 细胞分化 许旺细胞 MTT法 流式细胞
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冻干去细胞同种异体神经种植类许旺细胞修复坐骨神经缺损的实验研究 被引量:8
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作者 崔勇 张信英 张涛 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2007年第1期28-31,I0005,共5页
目的研究冻干去细胞异体神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法50只成年雌性DA大鼠随机分为5组,每组10只,分别用5种移植物桥接大鼠1.5cm坐骨神经缺损。A组:冻干去细胞异体神经种植类许旺细胞移植组;B组:冻干去细胞异体神经移植组... 目的研究冻干去细胞异体神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法50只成年雌性DA大鼠随机分为5组,每组10只,分别用5种移植物桥接大鼠1.5cm坐骨神经缺损。A组:冻干去细胞异体神经种植类许旺细胞移植组;B组:冻干去细胞异体神经移植组;C组:去细胞异体神经移植组;D组:新鲜异体神经移植组;E组:自体神经移植组。术后4、24周通过大体观察、神经电生理、肌肉湿重及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果。结果术后24周A、E组间差异无统计学意义(P〉0.05),A、E组的各项指标均优于B、C、D组(P〈0.05或P〈0.01)。结论冻干化学去细胞神经是良好的神经移植替代材料。 展开更多
关键词 外周神经 移植 骨髓基质干细胞 许旺细胞
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骨髓间充质干细胞诱导为类许旺细胞的细胞外基质促进周围神经损伤后轴突再生 被引量:2
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作者 赵来赫 夏冰 +7 位作者 马腾 高楗勃 李胜友 高雪 郑毅 胡广文 罗卓荆 黄景辉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第1期33-39,共7页
背景:既往研究发现许旺细胞及骨髓间充质干细胞诱导的类许旺细胞可以促进外周神经损伤后轴突的再生及功能恢复,而由于许旺细胞来源有限而限制了其应用,而且类许旺细胞外基质用于周围神经损伤的治疗鲜有报道。目的:探讨类许旺细胞外基质... 背景:既往研究发现许旺细胞及骨髓间充质干细胞诱导的类许旺细胞可以促进外周神经损伤后轴突的再生及功能恢复,而由于许旺细胞来源有限而限制了其应用,而且类许旺细胞外基质用于周围神经损伤的治疗鲜有报道。目的:探讨类许旺细胞外基质是否有助于周围神经损伤后的神经修复。方法:提取SD大鼠许旺细胞和骨髓间充质干细胞,将骨髓间充质干细胞诱导分化为类许旺细胞,并进行细胞鉴定和制备细胞外基质,在体外环境下将背根神经节神经元和背根神经节组织块接种于细胞外基质上,观察神经轴突生长情况。制备SD大鼠坐骨神经缺损模型,分别用自体神经、类许旺细胞外基质复合聚ε-己内酯导管(诱导组)、许旺细胞外基质复合聚ε-己内酯导管(许旺组)桥接,观察坐骨神经轴突再生及腓肠肌恢复情况。结果与结论:①与骨髓间充质干细胞比较,类许旺细胞p75NTR明显表达(P<0.05),许旺细胞纯度为(95.20±4.63)%;②类许旺细胞外基质和许旺细胞外基质能够在体外环境下促进背根神经节神经元与组织块神经轴突的生长;③体内实验中自体神经组再生神经纤维连贯且排列有序;诱导组和许旺组再生神经纤维贯通缺损区域,与自体神经组类似;④结果表明,类许旺细胞和许旺细胞的细胞外基质能够促进周围神经损伤后轴突再生及修复,为周围神经损伤提供了一种新的来源方便的无细胞疗法。 展开更多
关键词 细胞 骨髓间充质干细胞 诱导 许旺细胞 许旺细胞 细胞外基质 外周神经损伤
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冻干去细胞异种神经和类许旺细胞共移植修复外周神经缺损的实验研究 被引量:3
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作者 崔勇 张信英 +2 位作者 石作为 张成花 吉洪涛 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第4期316-319,共4页
目的研究冻干化学去细胞异种神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法48只成年雌性DA大鼠分别用4种移植物桥接大鼠1.5cm坐骨神经缺损:冻干化学去细胞异种神经与类许旺细胞共移植组、冻干化学去细胞异种神经移植组、化学去细胞异种神经移... 目的研究冻干化学去细胞异种神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法48只成年雌性DA大鼠分别用4种移植物桥接大鼠1.5cm坐骨神经缺损:冻干化学去细胞异种神经与类许旺细胞共移植组、冻干化学去细胞异种神经移植组、化学去细胞异种神经移植组、异种神经移植组。术后4周、24周通过大体观察、神经电生理、肌肉湿重及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果。结果术后24周A组运动神经传导速度和肌肉湿重恢复率优于B、C、D组(P<0.05);组织学检测发现,术后24周A组移植段再生神经纤维较多,以有髓神经纤维为主。结论种植类许旺细胞的冻干化学去细胞异种神经能有效的修复大鼠周围神经缺损。 展开更多
关键词 外周神经 异种神经移植 许旺细胞
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人体许旺细胞培养及扩增的实验研究 被引量:3
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作者 胡韶楠 顾玉东 +1 位作者 徐建光 Alfred Berger 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第2期139-141,i004,共4页
目的探索适合于人体应用的人类许旺细胞的培养方法及其扩增条件,为其应用于组织化人工神经作准备.方法人体截肢或神经移植中多余的肢体外周神经共19条,显微镜下去除结缔组织,修剪成2~3 mm神经段,进行组织块培养,其中12条加入F-12培养... 目的探索适合于人体应用的人类许旺细胞的培养方法及其扩增条件,为其应用于组织化人工神经作准备.方法人体截肢或神经移植中多余的肢体外周神经共19条,显微镜下去除结缔组织,修剪成2~3 mm神经段,进行组织块培养,其中12条加入F-12培养液,7条神经用标准培养液;经重复种植6~8次,在倒置显微镜下观察,当主要为许旺细胞生长时,用无细胞毒性的胶原酶消化分离许旺细胞.得到的细胞用台酚蓝染色计数细胞数和存活率,S-100蛋白染色鉴定许旺细胞纯度.结果两种培养液经培养消化后获得的细胞存活率分别为85.54%和86.93%,许旺细胞纯度分别为82.64%和86.37%,差异均无统计学意义,但用F-12培养液获得的细胞数明显多于标准培养液,分别为14.2×107和5.9×107.结论 F-12培养液的添加物均为能应用于人体的制剂,它与标准培养液一样能用于人类许旺细胞的培养,且能促进许旺细胞的增殖. 展开更多
关键词 实验研究 细胞培养 胶原酶消化分离 许旺细胞 显微镜下观察 培养液 组织块培养 细胞存活率 扩增条件 培养方法 人体应用 人工神经 外周神经 神经移植 结缔组织 细胞生长 细胞毒性 染色鉴定 细胞 组织化 标准 蓝染色
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诱导时间对脂肪干细胞来源的类许旺细胞增殖率的影响 被引量:1
8
作者 黄昭伟 朱昭炜 +4 位作者 许澍洽 林珣珣 韩兵 刘祥厦 许扬滨 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期150-154,共5页
目的观察比较诱导时间对脂肪干细胞(ADSC)向类许旺细胞(iSC)诱导分化时的增殖率的影响。方法2017年3月至2018年10月,选取健康成年雌性SD大鼠腹股沟脂肪分离培养ADSC,流式细胞仪检测ADSC标志阳性蛋白CD29、CD90及阴性蛋白CD45。iSC诱导... 目的观察比较诱导时间对脂肪干细胞(ADSC)向类许旺细胞(iSC)诱导分化时的增殖率的影响。方法2017年3月至2018年10月,选取健康成年雌性SD大鼠腹股沟脂肪分离培养ADSC,流式细胞仪检测ADSC标志阳性蛋白CD29、CD90及阴性蛋白CD45。iSC诱导液培养ADSC。通过S100和GFAP免疫荧光染色确认ADSC分化为iSC。诱导后第1、4、7、10、13、16和19天用光学显微镜观察细胞的形态变化,MTS法检测细胞增殖情况,Tunel染色检测细胞凋亡情况。将数据进行统计学分析。结果iSC均有S100、GFAP蛋白的表达。诱导第7天时细胞增殖率较诱导前明显减慢(A值分别为0.330±0.020和0.400±0.004,P<0.05),并与诱导时间负相关;第19天时,iSC增殖率低于诱导前的50%(A值分别为0.016±0.003和0.400±0.004,P<0.05)。iSC细胞凋亡较同期ADSC明显。结论ADSC诱导的iSC增殖率可能在诱导7d时活力最佳。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 许旺细胞 许旺细胞 诱导 细胞增殖
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脐带间充质干细胞诱导分化为类许旺细胞的实验研究
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作者 祝加学 陆雄伟 +3 位作者 沈尊理 秦金保 王洋 金晨 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第5期834-838,共5页
目的:探讨通过化学诱导的方法,诱导脐带间充质干细胞分化为类许旺细胞,为组织工程神经寻找一种新的种子细胞来源。方法:通过酶消化法,分离获得原代脐带间充质干细胞。体外培养至第3代(P3),以1×103/cm2接种于培养瓶中,待细胞长至亚... 目的:探讨通过化学诱导的方法,诱导脐带间充质干细胞分化为类许旺细胞,为组织工程神经寻找一种新的种子细胞来源。方法:通过酶消化法,分离获得原代脐带间充质干细胞。体外培养至第3代(P3),以1×103/cm2接种于培养瓶中,待细胞长至亚融合状态,吸弃培养液,加入含β-巯基乙醇的培养液预诱导24 h。然后,加入含有全反式维甲酸的培养液进一步诱导72 h。最后,加入含有胶质细胞生长因子的培养液,作用两周。对诱导后的脐带间充质干细胞用免疫荧光及RT-PCR法,进行形态观察和表型鉴定。结果:经过上述诱导过程,脐带间充质干细胞的形态,由开始时的扁平、片状、多极,类似成纤维细胞状,逐渐变为长梭形,双极或三极,类似许旺细胞。同时,表达许旺细胞特异性标志S-100、P75;而且S100,P75的m RNA水平也明显上调,并且可以观测到GFAP的m RNA条带。结论:化学诱导法,可以将脐带间充质干细胞诱导分化为类许旺细胞,有望为组织工程神经提供一种新的许旺细胞来源。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 许旺细胞 诱导 胶质细胞生长因子
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骨髓基质干细胞分化为神经细胞的研究进展
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作者 胡军 刘小林 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2003年第16期1129-1131,共3页
关键词 骨髓基质干细胞 细胞分化 神经细胞 研究进展 神经元 许旺细胞
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