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肺炎克雷伯菌gyrA和parC基因喹诺酮耐药决定区突变与环丙沙星耐药相关性研究 被引量：2
1
作者 何俊英 胡晓玲 孙爱华 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第8期1191-1193,1198,共4页
目的研究肺炎克雷伯菌临床菌株gyrA和parC基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变与环丙沙星耐药的相关性。方法采用琼脂稀释法检测124株临床菌株对环丙沙星的最小抑菌浓度(MIC),K-B法检测临床菌株对其他13种抗菌药物的耐药性,测序分析50株临... 目的研究肺炎克雷伯菌临床菌株gyrA和parC基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变与环丙沙星耐药的相关性。方法采用琼脂稀释法检测124株临床菌株对环丙沙星的最小抑菌浓度(MIC),K-B法检测临床菌株对其他13种抗菌药物的耐药性,测序分析50株临床菌株gyrA和parC基因QRDR喹诺酮耐药决定区。结果 124株临床菌株对环丙沙星耐药和敏感的分别有56株和68株。未见亚胺培南和美洛培南耐药菌株,氨苄西林和哌拉西林总耐药率达99.2%和96.0%。所有敏感株对环丙沙星的MICs≤1mg/L,耐药株对环丙沙星的MICs≥4 mg/L。环丙沙星耐药株gyrA基因突变发生率明显高于敏感株(P<0.05),且Ser83突变发生与MICs大小有关。环丙沙星耐药株parC基因Ser80突变发生率明显高于敏感株(P<0.01),parC基因Ser80突变与耐药程度密切相关。结论亚胺培南和美洛培南可推荐用于本地区肺炎克雷伯菌感染的治疗,gyrA和parC基因突变在环丙沙星耐药中起重要作用。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 GYRA和PARC基因 突变/耐药性 序列分析
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淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型及其突变与耐药相关性研究 被引量：1
2
作者 董继忠 吴森林 孙爱华 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第8期1808-1811,共4页
目的:分析本地区淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型特点及其Gly120和Ala121突变与耐药性关系。方法:多重PCR扩增非产酶淋病奈瑟菌临床菌株porB基因、测序分析Gly120和Ala121突变,并与药敏试验比较。结果:154株非产酶淋病奈瑟菌临床菌株中,... 目的:分析本地区淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型特点及其Gly120和Ala121突变与耐药性关系。方法:多重PCR扩增非产酶淋病奈瑟菌临床菌株porB基因、测序分析Gly120和Ala121突变,并与药敏试验比较。结果:154株非产酶淋病奈瑟菌临床菌株中,porB1A型和porB1B型临床菌株分别占29.9%和70.1%。porB1A型菌株均出现Gly120Asp/Ala121Gly双突变,对青霉素和四环素的耐药率分别为15.2%和10.9%;95.4%porB1B菌株存在出现Gly120和/或Ala121突变,耐药率分别为99.1%和97.2%,其中4株porB1B菌株121和122位氨基酸存在删除突变的菌株对青霉素和四环素的MICs分别高达为8 mg/L～16mg/L和8 mg/L。结论:建立的多重PCR可用于淋病奈瑟菌porB基因分型。本地区流行的非产酶淋病奈瑟菌主要携带porB1B基因,不同基因型临床菌株对抗生素的耐药率有显著性差异(P<0.05)。Gly120和/或Ala121突变增强耐药性仅限于porB1B菌株。 展开更多
关键词 淋病奈瑟菌 porB基因 多重PCR/测序 突变/耐药性
原文传递
淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型及其突变与耐药相关性研究 被引量：1
3
作者 殷网虎 曹美林 +1 位作者 吴云青 徐银海 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期32-36,共5页
了解淋病奈瑟菌临床菌株porB基因型及其产物120和121位氨基酸突变与耐药的相关性。采用多重PCR(mPCR)检测淋病奈瑟菌临床菌株porB基因型,扩增产物测序后分析其编码蛋白的120和121位氨基酸突变情况,二倍平皿稀释法检测临床菌株对青霉素... 了解淋病奈瑟菌临床菌株porB基因型及其产物120和121位氨基酸突变与耐药的相关性。采用多重PCR(mPCR)检测淋病奈瑟菌临床菌株porB基因型,扩增产物测序后分析其编码蛋白的120和121位氨基酸突变情况,二倍平皿稀释法检测临床菌株对青霉素和四环素的耐药性。184株淋病奈瑟菌临床菌株中,99.5%(183/184)检出porB基因,其中61株(33.3%)为porB1A基因型,122株(66.7%)为porB1B基因型。122株porB1B基因型菌株中,117株(95.9%)porB基因120和/或121位氨基酸发生突变,5株(4.1%)porB1B及所有porB1A基因型菌株porB基因120和/或121位氨基酸未突变。117株porB基因120和/或121位氨基酸突变的porB1B基因型菌株中,97.4%(114/117)和95.7%(112/117)分别对青霉素和四环素耐药,2.6%菌株(3/117)对青霉素和四环素敏感。61株porB1A基因型菌株中,仅有2株(3.3%)对青霉素和四环素耐药。研究中采用的mPCR能快速、准确地对淋病奈瑟菌临床菌株porB基因进行分型,这些菌株主要携带porB1B基因且该基因型菌株对青霉素和四环素耐药率显著高于porB1A基因型(P<0.01),该耐药性与porB1B基因120和/或121位氨基酸突变密切相关。 展开更多
关键词 淋病奈瑟菌 porB基因 多重PCR/测序 突变/耐药性
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变性高压液相色谱技术在检测结核分枝杆菌对链霉素耐药性中的应用
4
作者 孙照刚 张健源 +6 位作者 张旭霞 李妍 邱云青 田苗 聂理会 任卫聪 李传友 《结核病与胸部肿瘤》 2007年第3期165-170,共6页
目的利用变性高压液相色谱（DHPLC）技术快速检测结核分枝杆菌rpsL基因的突变，从而对结核分枝杆菌是否耐受链霉素类药物做出初步判断。方法体外药物敏感性试验，确定122株结核分枝杆菌临床分离株对链霉素的敏感程度。提取试验菌株基因... 目的利用变性高压液相色谱（DHPLC）技术快速检测结核分枝杆菌rpsL基因的突变，从而对结核分枝杆菌是否耐受链霉素类药物做出初步判断。方法体外药物敏感性试验，确定122株结核分枝杆菌临床分离株对链霉素的敏感程度。提取试验菌株基因组DNA。扩增rpsL基因片段；分别与H37Rv标准株的相应PCR产物混合、杂交后，利用WAVE核苷酸片段分析系统对各杂交产物进行DHPLC检测；序列测定结果与相应的DHPLC检测结果进行比较以验证DHPLC检测的准确性。通过比较药物敏感性和DHPLC检测结果。建立两者之间的对应关系。此外我们还检测了32株对链酶素敏感的临床分离株进行了DHPLC法检测。以明确该检测方法的特异性。结果结核分枝杆菌临床分离株对链霉素耐药性经体外实验证明，rpsL基因43位氨基酸突变通常会引起较高程度的链霉素耐药性。88位氨基酸突变菌株对链霉素的耐药性较低。链霉素耐药菌中发生rpsL基因突变的菌株约占78．69％（96／122）。其中以43位氨基酸突变为主（75．41％）。利用DHPLC技术检测rpsL基因突变，虽然不能检出缺失突变形式，但与直接测序法相比检出率为98．95％（95／96）。对所有耐受链霉素的结核分枝杆菌临床分离株而言。利用DHPLC技术可以达到77．87％（95／122）的耐药菌检出率，与序列测定法的检出率相近（96／122）。并且根据DHPLC检测图谱能够很好地判断rpsL基因的碱基突变形式。32株链酶素株的DHPLC检测图谱都与H37Rv标准株相同。结论DHPLC法是快速检测出结核分枝杆菌rpsL基因碱基突变的好方法．具有很高的特异性和敏感性。对链霉素耐药菌而言，碱基突变与结核分枝杆菌耐受链霉素类抗生素存在高度的相关关系，因此DHPLC技术用于临床早期检测结核病人对链霉素的耐药性具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核rpsL基因 突变链霉素耐药性 变性高压液相色谱DHPLC
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