穿山龙薯蓣皂苷通过调控自噬治疗胶原诱导性关节炎小鼠模型的机制

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作者 江涛 由涌 +4 位作者 夏东帅 薄思涵 王永为 高亚贤 宋鸿儒 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期645-651,共7页

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫... 目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫的50只小鼠随机分组为CIA模型组、雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷低、中、高剂量组,另有10只小鼠注射等量生理盐水作为对照组。在对小鼠进行连续14天灌胃治疗并观察各组小鼠足爪的炎症程度,取下各组小鼠脾、腹股沟淋巴结和踝关节、膝关节,对踝关节、膝关节进行HE染色,检测各组淋巴结、脾组织中mRNA和蛋白质水平的相关自噬指标。结果与CIA模型组相比,穿山龙薯蓣皂苷高剂量组关节炎指数(AI)评分降低(P<0.05);雷公藤组及穿山龙薯蓣皂苷组足爪厚度差值减小(P<0.01)。与对照组相比,CIA模型组体质量明显下降(P<0.01);小鼠膝关节滑膜和足爪踝关节HE染色结果显示CIA模型组对比对照组出现免疫细胞浸润、骨质侵蚀、软骨破坏和滑膜增生的症状;雷公藤组与穿山龙薯蓣皂苷中、高剂量组对CIA模型有不同程度的治疗作用,可以减轻和预防症状。与CIA模型组相比,雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷治疗组中LC3、Beclin-1的mRNA水平和蛋白水平的表达升高,p62的mRNA水平和蛋白水平的表达降低。结论穿山龙薯蓣皂苷可能通过抑制自噬对CIA模型小鼠起到治疗作用。 展开更多

关键词 穿山龙薯蓣皂苷 自噬 类风湿性关节炎 胶原诱导性关节炎 P62 LC3 BECLIN-1

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基于响应面优化的穿山龙薯蓣皂苷吸入粉雾剂的制备工艺研究 被引量：5

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作者 巨红叶 杨宁梅 +3 位作者 焦莹 胡坤霞 唐志书 宋逍 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期5176-5181,共6页

目的:制备穿山龙薯蓣皂苷吸入粉雾剂并优化工艺及其处方,为其肺部给药系统的设计提供理论基础。方法:以反溶剂沉淀法制备纳米混悬剂,喷雾干燥法制备微粉,分别测定收率、吸湿率、多分散指数和平均粒径,以总评"归一值"为评价指... 目的:制备穿山龙薯蓣皂苷吸入粉雾剂并优化工艺及其处方,为其肺部给药系统的设计提供理论基础。方法:以反溶剂沉淀法制备纳米混悬剂,喷雾干燥法制备微粉,分别测定收率、吸湿率、多分散指数和平均粒径,以总评"归一值"为评价指标,采用星点设计考察进口温度、大豆卵磷脂在辅料总量中的比例以及待喷液浓度3因素对制备工艺的影响,对结果分别进行多元线性和二项式方程拟合,效应面法优选最佳条件并进行预测分析。结果:从相关系数(R2=0.9312,P=0.0001)上看,总评"归一值(OD)"用二项式方程拟合较好,根据优化条件(进口温度140℃,大豆卵磷脂在辅料总量中的比例1∶3.3和待喷液浓度4%,此时归一值最大为0.5908)制备的薯蓣皂苷吸入粉雾剂的收率为94.84%,吸湿率4.03%,平均粒径3.998μm,多分散指数0.492,与预测值相比,误差均小于0.3%。结论:星点设计可用于优化制备工艺和处方,优选的穿山龙薯蓣皂苷吸入粉雾剂制备工艺稳定可行,微粉粒径大小适宜,可满足肺部吸入给药的要求。 展开更多

关键词 穿山龙薯蓣皂苷 吸入粉雾剂 星点设计 效应面法 喷雾干燥

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穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的制备构建及评价研究 被引量：4

3

作者 焦莹 巨红叶 +2 位作者 胡坤霞 唐志书 宋逍 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第19期3747-3754,共8页

该文建立了热高压均质法制备穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的工艺方法,并对星点设计-响应面法优化其工艺处方进行了体外制剂学评价。结果显示按照星点设计-响应面法优化后的最佳工艺处方制备的穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体为类球形... 该文建立了热高压均质法制备穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的工艺方法,并对星点设计-响应面法优化其工艺处方进行了体外制剂学评价。结果显示按照星点设计-响应面法优化后的最佳工艺处方制备的穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体为类球形,粒径为(90.9±0.6)nm,多分散系数为(0.253±0.07),粒度分布均匀,Zeta电位为(-45.7±0.5)m V,包封率为(90.2±0.5)%,载药量为(23.30±0.10)%。结果表明热高压均质法制备的穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体具有良好的理化性质。 展开更多

关键词 穿山龙薯蓣皂苷 纳米结构脂质载体 制备构建 评价

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穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的大鼠在体肠吸收特性研究 被引量：3

4

作者 胡坤霞 焦莹 +4 位作者 巨红叶 韩立柱 王斌 唐志书 宋逍 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1045-1051,共7页

目的:研究穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的大鼠在体肠吸收特性。方法:采用高效液相色谱法测定穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体中穿山龙薯蓣皂苷含量;大鼠在体单向灌流法研究吸收部位,药物浓度对穿山龙薯蓣皂苷肠吸收的影响;比较穿山... 目的:研究穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的大鼠在体肠吸收特性。方法:采用高效液相色谱法测定穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体中穿山龙薯蓣皂苷含量;大鼠在体单向灌流法研究吸收部位,药物浓度对穿山龙薯蓣皂苷肠吸收的影响;比较穿山龙提取物和纳米制剂在体肠吸收特性。结果:穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体在大鼠全肠段均有吸收,其在不同肠段的吸收速率常数(absorption rate constant,Ka)和表观吸收系数(apparent absorption coefficient,Papp)从大到小依次为:回肠>空肠>十二指肠>结肠;不同质量浓度(30,60和120μg·m L^-1)的穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体,其Ka和Papp没有显著性差异,提示在实验浓度范围内,穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体在大鼠全肠段的吸收没有浓度依赖性,吸收机制可能属于被动扩散;穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体组和薯蓣皂苷提取物组比较,Ka和Papp有显著性差异(P <0. 05),且纳米制剂在空肠的吸收系数是薯蓣皂苷提取物的1. 28倍。结论:穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体在空肠和回肠肠段吸收良好且吸收速率不受药物浓度的影响,制备成纳米结构脂质载体后能够增加药物的生物利用度,具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 穿山龙薯蓣皂苷 纳米结构脂质载体 在体肠吸收

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穿山龙薯蓣皂苷酶解产物的分离纯化 被引量：2

5

作者 王元好 刘冰 +1 位作者 鱼红闪 金凤燮 《大连轻工业学院学报》 2005年第1期1-3,共3页

用柱层析法对穿山龙薯蓣皂苷酶解产物进行分离纯化(硅胶柱中以氯仿甲醇洗脱),得到2种单体皂苷和皂苷元。经薄层层析检测,纯化的单体皂苷1为3 (O) (β D 吡喃葡萄糖基) 薯蓣皂苷,得率为样品的33.95%,用高效液相色谱法检测其纯度为93.82%... 用柱层析法对穿山龙薯蓣皂苷酶解产物进行分离纯化(硅胶柱中以氯仿甲醇洗脱),得到2种单体皂苷和皂苷元。经薄层层析检测,纯化的单体皂苷1为3 (O) (β D 吡喃葡萄糖基) 薯蓣皂苷,得率为样品的33.95%,用高效液相色谱法检测其纯度为93.82%。产物2的结构和特征有待进一步研究。 展开更多

关键词 穿山龙薯蓣皂苷 酶水解 纯化 硅胶柱 薄层层析 高效液相色谱

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不同纯化技术对穿山龙水提液的物理化学性质影响 被引量：1

6

作者 梁艳妮 吴亿晗 +4 位作者 王征 刘世军 刘红波 宋忠兴 唐志书 《中国药师》 CAS 2018年第8期1365-1368,共4页

目的:探讨膜分离与大孔树脂吸附技术对穿山龙水提液物理化学性质的影响。方法:采取煎煮2次,10倍量水,每次120 min的水煎煮工艺提取穿山龙,分别采用不同型号的大孔树脂(HP-20、HPD-600、D101、AB-8)吸附及膜分离(陶瓷微滤膜0.8μm、0.2μ... 目的:探讨膜分离与大孔树脂吸附技术对穿山龙水提液物理化学性质的影响。方法:采取煎煮2次,10倍量水,每次120 min的水煎煮工艺提取穿山龙,分别采用不同型号的大孔树脂(HP-20、HPD-600、D101、AB-8)吸附及膜分离(陶瓷微滤膜0.8μm、0.2μm、0.05μm和中空纤维超滤膜50k Da、6k Da)技术纯化穿山龙水提液,测定其电导率,黏度,浊度等物理化学参数及蛋白质、多糖、总黄酮、薯蓣皂苷等物质的含量。结果:穿山龙水提液经不同技术纯化后黏度无显著影响,电导率和浊度纯化后显著减小;通过各物质保留率可看出D101型大孔树脂适合分离纯化薯蓣皂苷,而HPD-600对于各物质的保留都相对较低,与理化参数结果一致。0.2μm微滤膜更适合主含皂苷水提液的分离纯化。结论:理化参数的改变与大分子物质的含量减小有着明显的对应关系:大分子物质含量降低,电导率与浊度减小。与大孔树脂吸附相比,膜分离技术更适合穿山龙水提液中薯蓣皂苷成分的分离纯化,微滤膜比超滤膜对薯蓣皂苷的保留率更高。 展开更多

关键词 穿山龙薯蓣皂苷 水提取 大孔树脂 膜分离

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羊肝源穿山龙薯蓣皂苷-α-L-鼠李糖苷酶的分离及其动力学特性 被引量：4

7

作者 王红英 钱斯日古楞 +2 位作者 鱼红闪 臧姝 金凤燮 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期663-667,共5页

对羊肝中含有的水解穿山龙薯蓣皂苷鼠李糖糖基的穿山龙薯蓣皂苷-α-L-鼠李糖苷酶进行了分离、纯化，并对其动力学特性进行了研究．结果表明，粗酶液经DEAE—Cellulose离子交换层析柱纯化后，其比活提高了19．9倍．在pH=6．8、反应温度... 对羊肝中含有的水解穿山龙薯蓣皂苷鼠李糖糖基的穿山龙薯蓣皂苷-α-L-鼠李糖苷酶进行了分离、纯化，并对其动力学特性进行了研究．结果表明，粗酶液经DEAE—Cellulose离子交换层析柱纯化后，其比活提高了19．9倍．在pH=6．8、反应温度为42℃、反应时间为8h和底物浓度为23mmol／L的条件下，该酶达到其最高活力．在10～200mmol／L范围内，Fe^2＋和Cu^2＋对酶活力有明显的抑制作用，Mg^2＋和Zn^2＋对酶活力有微弱的激活作用，而Ca^2＋对酶有较强的激活作用．采用SDS—PAGE方法测得酶蛋白分子量为71000．选择穿山龙薯蓣皂苷、人参皂苷Re和芦丁为酶反应底物，进行酶的底物专一性研究发现，穿山龙薯蓣皂苷-α-L-鼠李糖苷酶对其底物具有高度专一性． 展开更多

关键词 穿山龙薯蓣皂苷-α-L-鼠李糖糖 羊肝 酶分子量 水解活性

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穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因的亚克隆及表达 被引量：1

8

作者 王庆宇 金凤燮 鱼红闪 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第10期5799-5802,共4页

[目的]克隆并表达穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因。[方法]将穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因亚克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K,再将构建后的表达载体电转化到毕赤酵母GS115中,并诱导表达该基因。[结果]重组酵母菌在0.5%甲醇中培养144 h后,所提取的... [目的]克隆并表达穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因。[方法]将穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因亚克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K,再将构建后的表达载体电转化到毕赤酵母GS115中,并诱导表达该基因。[结果]重组酵母菌在0.5%甲醇中培养144 h后,所提取的酶蛋白具有穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶的活性,经SDS-PAGE分析,确定其相对分子质量为58 kD。[结论]穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因得到了表达。 展开更多

关键词 穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶 巴斯德毕赤酵母 基因表达

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穿山龙薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠电压门控Ca2+通道基因表达的影响 被引量：14

9

作者 唐春颖 冷锦红 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2018年第3期25-27,共3页

目的：通过观察痛性糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经中钙离子通道蛋白表达,探究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变（PDPN）的治疗作用。方法：实验参照Sally等造模方法诱发糖尿病大鼠,以钾离子皮下透入致痛,采用WQ-9E... 目的：通过观察痛性糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经中钙离子通道蛋白表达,探究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变（PDPN）的治疗作用。方法：实验参照Sally等造模方法诱发糖尿病大鼠,以钾离子皮下透入致痛,采用WQ-9E痛阈测定仪测定痛阈值,符合条件者列为PDPN模型大鼠。将大鼠分为STZ模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组和强的松组。采用RT-PCR技术法分别于2周、4周、8周,检测各组大鼠坐骨神经中钙离子蛋白表达水平。结果：与模型组相比,各治疗组的钙离子通道m RNA表达在4周和8周两个时间点上呈下降趋势（P〈0.01）,8周时薯蓣皂苷高剂量组大鼠坐骨神经的钙离子通道m RNA表达低于薯蓣皂苷低剂量组和强的松组（P〈0.01,P〈0.05）。结论：高剂量组薯蓣皂苷对PDPN的作用优于低剂量组,同时优于强的松组,反映出穿山龙提取物薯蓣皂苷能够缓解PDPN,效果超过强的松。说明穿山龙提取物薯蓣皂苷可以下调痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经钙离子通道m RNA表达,对痛性糖尿病周围神经病变有一定的治疗作用。 展开更多

关键词 穿山龙提取物薯蓣皂苷 痛性糖尿病周围神经病变 电压门控Ca^2+通道

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穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠钠通道基因表达的影响 被引量：8

10

作者 冷锦红 侯丽 +1 位作者 邓丽 鞠宝兆 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第10期2372-2374,I0012,I0013,共5页

目的：观察穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠Nav 1. 7通道mRNA表达的影响。方法：SPF级雄性Wistar大鼠80只,随机取14只为正常对照组,其余大鼠腹腔一次性注射链脲佐菌素STZ（53 mg/kg）造模,72 h后测大鼠尾静脉血血糖〉... 目的：观察穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠Nav 1. 7通道mRNA表达的影响。方法：SPF级雄性Wistar大鼠80只,随机取14只为正常对照组,其余大鼠腹腔一次性注射链脲佐菌素STZ（53 mg/kg）造模,72 h后测大鼠尾静脉血血糖〉 16. 7 mmol/L作为观察对象,持续喂养2周,将60只成模大鼠随机分为模型组,薯蓣皂苷高、低剂量组,强的松组,分别于药物治疗后第4、8周,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠坐骨神经Nav 1. 7mRNA表达情况。结果：与同期模型组比较,各治疗组大鼠坐骨神经Nav 1. 7mRNA表达水平下调（P 〈0. 01）,低剂量组较同期高剂量组Nav 1. 7mRNA表达上调（P 〈0. 01）,强的松组与同期低剂量组比较,坐骨神经Nav 1. 7mRNA表达水平下调（P 〈0. 05）。结论：薯蓣皂苷可以减轻PDPN大鼠坐骨神经的损伤。 展开更多

关键词 穿山龙提取物薯蓣皂苷 痛性糖尿病周围神经病变 Nav1.7

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穿山龙薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠电压门控钾离子通道基因表达的影响 被引量：4

11

作者 唐春颖 冷锦红 《世界中西医结合杂志》 2018年第4期501-504,513,共5页

目的通过观察痛性糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经中钾离子通道蛋白表达,探究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变的治疗作用。方法实验参照Sally等造模方法诱发糖尿病大鼠,以钾离子皮下透入致痛,在James等方法的基础上... 目的通过观察痛性糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经中钾离子通道蛋白表达,探究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变的治疗作用。方法实验参照Sally等造模方法诱发糖尿病大鼠,以钾离子皮下透入致痛,在James等方法的基础上略加改进测定神经传导速度,采用WQ-9E痛阈测定仪测定痛阈值,符合条件者列为PDPN模型大鼠。将大鼠分为模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组和强的松组。采用RT-PCR技术法分别于2周、4周、8周,检测各组大鼠坐骨神经中钾离子蛋白表达水平。结果与模型组比较,各治疗组的K离子通道mRNA表达在2周、4周、8周,3个时间点上呈上升趋势(P<0.05,P<0.01),8周时薯蓣皂苷高剂量组大鼠坐骨神经的K离子通道mRNA表达明显高于薯蓣皂苷低剂量组和强的松组(P<0.05)。结论薯蓣皂苷高剂量组和低剂量组钾离子通道mRNA表达水平均呈现逐渐升高的趋势,且高剂量组上升明显,效果明显优于强的松组。说明穿山龙提取物薯蓣皂苷可以升高痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经K离子通道mRNA表达,减轻神经性及炎症性疼痛,对痛性糖尿病周围神经病变有一定的治疗作用。 展开更多

关键词 穿山龙提取物薯蓣皂苷 痛性糖尿病周围神经病变 电压门控钾离子通道

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