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题名3种纯化重组禽流感病毒NS1抗原方法的比较
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作者
霍惠玲
李永清
赵燕岭
张莉
章振华
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机构
河北省兽药监察所
北京市农林科学院畜牧兽医研究所
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出处
《生物技术通讯》
CAS
2007年第5期774-777,共4页
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基金
河北省省校合作基金项目(03820417D)
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文摘
目的:摸索出最佳分离纯化和复性重组禽流感病毒NS1抗原的方法,得到高纯度的重组蛋白。方法:将重组质粒pET32a-NS1转染大肠杆菌BL21(DE3)后获得表达,分别以尿素变性、复性,Ni-NTA His.Bind Resin亲和,以及脱氧胆酸钠-N-十二烷基肌氨酸钠(DOC-SKL)洗涤溶解等3种纯化方法从表达产物包涵体中分离纯化NS1蛋白,并进行比较研究。结果:原核表达得到相对分子质量约45000的目的蛋白;3种纯化方法均能分离和纯化出NS1重组蛋白,其中尿素纯化的蛋白纯度为50%～60%,Ni-NTAHis.Bind Resin亲和纯化的蛋白纯度为80%～90%,DOC-SKL纯化的蛋白纯度达95%以上;Western blot检测表明,复性后的纯化蛋白具有良好的生物学活性。结论:应用十二烷基肌氨酸钠洗涤纯化是最佳的纯化NS1蛋白的方法,所获得的蛋白可作为包被ELISA的抗原。
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关键词
禽流感病毒ns1抗原
重组抗原
纯化
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Keywords
avian influenza virus ns1 protein
recombinant antigen
purified methods
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分类号
Q503
[生物学—生物化学]
Q78
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