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达格列净干预改善糖尿病肾病模型大鼠的肾脏损伤 被引量:26
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作者 王琴 沈呈 +1 位作者 廖静 杨烨 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第8期1216-1222,共7页
背景:达格列净在糖尿病肾病引起的肾功能损伤中具有明显的肾脏保护作用。目的:探索达格列净是否可通过MicroRNA-126改善糖尿病肾病大鼠肾脏损伤的可能机制。方法:建立SD大鼠糖尿病肾病模型,将造模成功的糖尿病肾病大鼠随机分为模型组、... 背景:达格列净在糖尿病肾病引起的肾功能损伤中具有明显的肾脏保护作用。目的:探索达格列净是否可通过MicroRNA-126改善糖尿病肾病大鼠肾脏损伤的可能机制。方法:建立SD大鼠糖尿病肾病模型,将造模成功的糖尿病肾病大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、达格列净组,每组6只,分别给予同等剂量生理盐水、二甲双胍500 mg/(kg·d)、达格列净10 mg/(kg·d)灌胃,1次/d;另取6只正常饮食大鼠作为正常组,12周后各组大鼠均麻醉处死。检测空腹血糖、血肌酐、尿素氮、24 h尿微量白蛋白水平,以实时荧光定量PCR检测大鼠肾脏MicroRNA-126水平,通过实时荧光定量PCR、Western blot及免疫组化检测大鼠肾脏转化生长因子β1、血管内皮生长因子受体2及磷酸酶和张力蛋白同系物水平;采用电镜、苏木精-伊红及Masson染色观察大鼠肾脏超微结构及形态病理学变化。结果与结论:①模型组空腹血糖、血肌酐、尿素氮、24 h尿微量白蛋白及转化生长因子β1、血管内皮生长因子受体2水平较正常组明显升高(P<0.05),MicroRNA-126及磷酸酶和张力蛋白同系物水平明显下降;二甲双胍组和达格列净组空腹血糖、血肌酐、尿素氮、24 h尿微量白蛋白及转化生长因子β1、血管内皮生长因子受体2水平较模型组明显降低(P<0.05),MicroRNA-126及磷酸酶和张力蛋白同系物水平明显升高;其中达格列净组的上述作用更加明显(P<0.05);②肾脏组织病理学显示,二甲双胍组和达格列净组大鼠肾脏病变程度较模型组减轻;与二甲双胍组相比,达格列净组大鼠肾脏足突排列良好,肾脏形态相对正常;③结果说明,达格列净可能通过上调糖尿病肾病大鼠肾脏MicroRNA-126水平,抑制转化生长因子β1及血管内皮生长因子受体2的表达,促进磷酸酶和张力蛋白同系物的表达,延缓糖尿病肾病大鼠的肾脏损伤过程。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 达格列净 肾脏 MicroRNA-126 转化生长因子β1 血管内皮生长因子受体2 磷酸酶力蛋白同系物
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miR-494在阿霉素诱导大鼠心肌细胞损伤中的作用及机制研究
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作者 沈盛晖 叶建华 +2 位作者 吴相忠 冯频频 彭鹏 《心电与循环》 2024年第4期316-322,I0001,共8页
目的探讨miR-494在阿霉素(DOX)诱导大鼠心肌细胞损伤中的作用及机制。方法将大鼠H9C2细胞分为4组:对照组、DOX组、DOX+阴性对照(NC)模拟物组、DOX+miR-494模拟物组;除对照组,其余3组均采用5μmol/L DOX与细胞共孵育法构建心肌细胞损伤模... 目的探讨miR-494在阿霉素(DOX)诱导大鼠心肌细胞损伤中的作用及机制。方法将大鼠H9C2细胞分为4组:对照组、DOX组、DOX+阴性对照(NC)模拟物组、DOX+miR-494模拟物组;除对照组,其余3组均采用5μmol/L DOX与细胞共孵育法构建心肌细胞损伤模型;后两组分别进行NC模拟物、miR-494模拟物转染。采用细胞计数试剂盒8法检测细胞活力,实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-494、磷酸酶和张力蛋白同系物(PTEN)m RNA表达水平,原位末端转移酶标记染色法检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、PTEN、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-494与PTEN的相互作用。结果与对照组比较,DOX组H9C2细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平以及LDH、CK-MB含量均明显升高(均P<0.01),而细胞活力、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低(均P<0.01);与DOX+NC模拟物组比较,DOX+miR-494模拟物组H9C2细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平以及LDH、CK-MB含量均明显降低(均P<0.01),而细胞活力、Bcl-2蛋白表达水平均明显升高(均P<0.01)。PTEN与miR-494存在结合位点;PTEN-WT的荧光素酶活性被miR-494模拟物明显抑制(P=0.010),而PTEN-MUT的荧光素酶活性不受miR-494模拟物影响(P=0.707)。与对照组比较,DOX组H9C2细胞中p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平均明显降低(均P<0.01);与DOX+NC模拟物组比较,DOX+miR-494模拟物组H9C2细胞中p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平均明显升高(均P<0.01)。结论miR-494可能通过靶向抑制PTEN表达来调控PI3K/Akt信号通路,以改善DOX诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 阿霉素 miRNA-494 心肌细胞 磷酸酶力蛋白同系物 磷脂酰肌醇3-激/蛋白B信号通路
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长链非编码RNA GAS5在肿瘤相关巨噬细胞中的调控机制
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作者 李琳 李建东 +2 位作者 高志康 徐浩 崔艳峰 《中国实用医药》 2021年第31期192-195,共4页
目的 探讨长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)在肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中的调控机制。方法 诱导外周血单核细胞分化为M0、M1、M2巨噬细胞和TAMs,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测四种巨噬细胞上清液中肿瘤细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、... 目的 探讨长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)在肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中的调控机制。方法 诱导外周血单核细胞分化为M0、M1、M2巨噬细胞和TAMs,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测四种巨噬细胞上清液中肿瘤细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)的表达;实时定量-聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测四种巨噬细胞GAS5和磷酸酶和张力蛋白同系物(PTEN) mRNA的表达;选取手术肝癌切除的癌组织及其癌旁组织,qRT-PCR检测癌四种组织及其癌旁组织GAS5和PTEN mRNA的表达。结果 相较于M0,M1中IL-1β、TNF-α、IL-12表达上调,IL-10表达下降;M2和TAMs中IL-10表达上调,IL-1β、TNF-α、IL-12表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。相较于M0,GAS5和PTEN mRNA在M1中表达均有不同程度的上调,GAS5和PTEN mRNA在M2、TAMs中表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与正常癌旁组织相比,肝癌组织的GAS5和PTEN表达明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 GAS5和PTEN参与巨噬细胞的M1样极化,在M2巨噬细胞和TAMs中被抑制,GAS5和PTEN参与肝细胞癌(HCC)的发生发展。 展开更多
关键词 肝细胞癌 长链非编码RNA GAS5 磷酸酶力蛋白同系物 肿瘤相关巨噬细胞
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定心方上调ApoE^(-/-)小鼠PTEN表达抑制动脉粥样硬化形成的分析 被引量:4
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作者 张宇 程赛博 +5 位作者 赵丹丹 苏志杰 张蕾 徐煜凌 周凤华 贾钰华 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期111-115,共5页
目的:探讨定心方(DXR)对Apo E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠人第十号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同系物(PTEN)的影响,以及DXR抗AS的可能机制。方法:将50只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组,辛伐他汀组,DXR低、中、高剂量组,另取10只C57/BL6J小... 目的:探讨定心方(DXR)对Apo E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠人第十号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同系物(PTEN)的影响,以及DXR抗AS的可能机制。方法:将50只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组,辛伐他汀组,DXR低、中、高剂量组,另取10只C57/BL6J小鼠作为正常组。分别给予DXR低、中、高组按剂量9.25,18.59,37.18 g·kg-1·d^(-1)DXR药液ig,辛伐他汀组按剂量0.005 g·kg-1·d^(-1)ig辛伐他汀,高脂饲料喂养16周后处死,苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉斑块面积,检测小鼠血脂以及血清中丙二醛(MDA),总超氧化物歧化酶(T-SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),总抗氧化能力(T-AOC)水平。蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测胸主动脉PTEN蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血脂及MDA明显升高(P<0.05),T-SOD,GSH-Px,T-AOC水平降低,胸主动脉PTEN蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,DXR中、高剂量组能明显降低ApoE^(-/-)小鼠血脂水平,升高T-SOD,GSH-Px,T-AOC水平,并降低MDA水平(P<0.05),且能上调ApoE^(-/-)小鼠主动脉PTEN蛋白表达水平(P<0.05)。DXR各剂量组斑块面积较模型组明显缩小(P<0.05)。结论:DXR可通过调节ApoE^(-/-)小鼠血脂代谢,抑制氧化应激,上调PTEN蛋白表达,进而抑制ApoE^(-/-)小鼠AS的发生发展。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 定心方 氧化应激 人第十号染色体缺失磷酸酶力蛋白同系物
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