磷酸甘油酸变位酶 被引量：8

1

作者 宋林霞 徐振彪 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期86-89,共4页

磷酸甘油酸变位酶(phosphoglycerate mutase,PGM)是糖代谢过程中的关键酶,催化3-磷酸甘油酸和2-磷酸甘油酸之间的相互转换。根据催化反应中对辅因子2,3-二磷酸甘油酸的依赖关系分为两种类型:辅因子依赖型PGM(dPGM)和辅因子非依赖型PGM(i... 磷酸甘油酸变位酶(phosphoglycerate mutase,PGM)是糖代谢过程中的关键酶,催化3-磷酸甘油酸和2-磷酸甘油酸之间的相互转换。根据催化反应中对辅因子2,3-二磷酸甘油酸的依赖关系分为两种类型:辅因子依赖型PGM(dPGM)和辅因子非依赖型PGM(iPGM)。本文对PGM的分类、结构及功能进行了详细介绍。 展开更多

关键词 磷酸甘油酸变位酶 分类 功能

原文传递

日本血吸虫重组抗原SjPGAM-SjEnol的保护性免疫效果评价 被引量：6

2

作者 郭凡吉 王艳 +7 位作者 李晔 彭金彪 洪炀 邱春辉 陈实 傅志强 石耀军 林矫矫 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期246-251,共6页

目的构建日本血吸虫重组表达质粒pET32a-SjPGAM-SjEnol并在大肠埃希菌（E.coli BL21）中表达,观察重组抗原在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法利用生物信息学技术筛选SjPGAM和SjEnol富含人源（HLA）Ⅱ类、鼠源（H2-d）Ⅱ细胞结... 目的构建日本血吸虫重组表达质粒pET32a-SjPGAM-SjEnol并在大肠埃希菌（E.coli BL21）中表达,观察重组抗原在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法利用生物信息学技术筛选SjPGAM和SjEnol富含人源（HLA）Ⅱ类、鼠源（H2-d）Ⅱ细胞结合表位且与宿主同源性较小的肽段,将对应编码的核苷酸序列进行拼接,构建重组质粒pET32a（＋）-SjPGAM-SjEnol,并在E.coli BL21中表达。用蛋白质印迹（Western blotting）分析该重组抗原的抗原性。用小鼠实验评估重组抗原的免疫保护效果,即将55只雄性BALB/c小鼠均分成5组,其中3个试验组分别用重组抗原pET32a-SjPGAM-SjEnol（A组）、pET28a-SjPGAM（B组）、pET28a-SjEnol（C组）（各27μg）与206佐剂混合后免疫小鼠,每次间隔2周,共免疫3次。同时设佐剂对照组（D组）和空白对照组（E组）。末次免疫后2周,每鼠经腹部皮肤分别感染日本血吸虫尾蚴40±2条,感染后6周,经肝门静脉灌注法收集成虫和检测每克肝虫卵数（EPG）,计算减虫率和肝脏减卵率。各组小鼠分别于免疫前、各次免疫后1周尾部取血和剖杀时收集血清,应用ELISA检测血清特异性IgG抗体水平。结果确定SjPGAM的96~147、SjEnol的233~312肽段为重组片段。PCR扩增出一条含编码这两个肽段的核苷酸序列的重组DNA序列,大小447bp。获得的重组蛋白pET32a-SjPGAM-SjEnol相对分子质量（Mr）为33000。Westernblotting结果显示,该重组蛋白可被日本血吸虫成虫抗原免疫兔血清识别,具有良好的抗原性。小鼠免疫实验结果显示,与空白组相比,A组获得39.7%的减虫率和64.9%的肝减卵率,其减虫率与B组（18.5%）、C组（14.7%）比较,差异有统计学意义（均P〈0.05）;肝减卵率与B组（47.5%）、C组（30.5%）比较,差异也有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。ELISA结果显示,第3次免疫后A组的特异性IgG抗体达到较高水平（2.372±0.268）,与D组（0.490±0.138）� 展开更多

关键词 日本血吸虫 磷酸甘油酸变位酶 烯醇酶 多表位疫苗 免疫保护

下载PDF 职称材料

磷酸甘油酸变位酶研究进展 被引量：7

3

作者 王芬 李润花 殷国荣 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2012年第3期353-357,共5页

磷酸甘油酸变位酶(PGAM)是一种糖酵解酶,与碳水化合物转运、新陈代谢、催化活性及生长发育有关。PGAM首先在酵母中发现,随着其氨基酸序列和晶体结构的发现,在人、大肠埃希菌、日本血吸虫和刚地弓形虫等多种生物体中发现该蛋白。本文综... 磷酸甘油酸变位酶(PGAM)是一种糖酵解酶,与碳水化合物转运、新陈代谢、催化活性及生长发育有关。PGAM首先在酵母中发现,随着其氨基酸序列和晶体结构的发现,在人、大肠埃希菌、日本血吸虫和刚地弓形虫等多种生物体中发现该蛋白。本文综述了来源于脊椎动物、无脊椎动物、原生动物等的PGAM蛋白的理化性质及其研究进展。 展开更多

关键词 磷酸甘油酸变位酶 糖酵解酶 刚地弓形虫

原文传递

日本血吸虫磷酸甘油酸变位酶SjPGAM基因的克隆、表达及功能分析 被引量：5

4

作者 周岩 林矫矫 +6 位作者 姚利晓 王欣之 石耀军 陆珂 刘金明 傅志强 陶丽红 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1550-1555,共6页

磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyceratemutas)是糖酵解过程中的一种重要酶,主要催化3-磷酸甘油酸转化为2-磷酸甘油酸。利用PCR技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个PGAM家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含753bp,编码250个氨基... 磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyceratemutas)是糖酵解过程中的一种重要酶,主要催化3-磷酸甘油酸转化为2-磷酸甘油酸。利用PCR技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个PGAM家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含753bp,编码250个氨基酸,理论分子量28.26kD,理论等电点7.01。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型PGAM家族特征,推测为血吸虫的PGAM基因,命名为SjPGAM(GenBank Accession No.EU374631)。实时定量PCR分析显示该基因在14d和19d童虫中的表达量明显高于其他发育阶段,42d雄虫中的表达量高于雌虫。构建了该基因的原核重组表达质粒pET-28a(+)-PGAM,在大肠杆菌系统中成功获得了表达,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别。SjPGAM基因及其表达产物的获得,为探索PGAM基因家族在血吸虫能量代谢过程中碳水化合物转运、新陈代谢调节和生长发育提供了重要基础。 展开更多

关键词 日本血吸虫 糖酵解 磷酸甘油酸变位酶 克隆

下载PDF 职称材料

植物iPGAM的研究进展 被引量：1

5

作者 谢鑫 刘娜 魏凤菊 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1-7,共7页

辅因子非依赖型磷酸甘油酸变位酶(Cofactor-independent phosphoglycerate mutase,iPGAM)是在真菌和高等植物中发现的金属酶,是糖酵解和糖异生过程中的一个关键酶。随着原核生物、无脊椎动物等物种中iPGAM基因被克隆、蛋白晶体结构的解... 辅因子非依赖型磷酸甘油酸变位酶(Cofactor-independent phosphoglycerate mutase,iPGAM)是在真菌和高等植物中发现的金属酶,是糖酵解和糖异生过程中的一个关键酶。随着原核生物、无脊椎动物等物种中iPGAM基因被克隆、蛋白晶体结构的解析及其生物学功能的陆续报道,近些年,植物iPGAM的功能开始受到关注。阐述了植物iPGAM蛋白的结构特点及作用机制,着重对已报道的拟南芥、水稻和玉米中iPGAMs的系统进化关系以及生物学功能进行了概述。 展开更多

关键词 植物 辅因子非依赖型 磷酸甘油酸变位酶

下载PDF 职称材料

多杀性巴氏杆菌HN06株磷酸甘油酸变位酶gpmA基因的序列分析及其原核表达 被引量：1

6

作者 曾东柱 李慧 +2 位作者 孔汉金 郭锐 吴斌 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期57-60,共4页

为探索糖酵解关键酶磷酸甘油酸变位酶的功能,采用PCR方法从多杀性巴氏杆菌HN06株中扩增出了磷酸甘油酸变位酶基因gpmA,将其克隆到表达载体pET-30a(+)中,测序验证后转入表达菌株大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达。结果显示,重组菌可表达... 为探索糖酵解关键酶磷酸甘油酸变位酶的功能,采用PCR方法从多杀性巴氏杆菌HN06株中扩增出了磷酸甘油酸变位酶基因gpmA,将其克隆到表达载体pET-30a(+)中,测序验证后转入表达菌株大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达。结果显示,重组菌可表达出分子质量约为32ku的重组融合蛋白,在终浓度为20mmol/L IPTG诱导3h的情况下表达良好。表达的蛋白以可溶性蛋白的形式存在于菌体中。表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白。经过Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗多杀性巴氏杆菌HN06株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有良好的反应原性。 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌 磷酸甘油酸变位酶 gpmA基因 原核表达 纯化 免疫印迹

原文传递

红细胞内2,3-二磷酸甘油酸的测定及其在儿科临床的意义

7

作者 刘玺成 《国际儿科学杂志》 1982年第3期121-126,共6页

早在20年代人们就发现在人和哺乳类动物的红细胞内存在高浓度的2,3-二磷酸甘油酸(简称2,3-DPG),但直到60年代人们才认识到2,3-DPG对血红蛋白氧亲和力的重要的调节作用。此后,随着对2,3-DPG结构及其在体内作用机理的深入了解,测定2,3-DP... 早在20年代人们就发现在人和哺乳类动物的红细胞内存在高浓度的2,3-二磷酸甘油酸(简称2,3-DPG),但直到60年代人们才认识到2,3-DPG对血红蛋白氧亲和力的重要的调节作用。此后,随着对2,3-DPG结构及其在体内作用机理的深入了解,测定2,3-DPG的水平已成为衡量体内血红蛋白氧亲和力的重要指标之一。用来监测一些疾病(如慢性肺部疾患、先天性紫绀型心脏病、贫血等) 展开更多

关键词 氧亲和力 调节作用 红细胞 红血球 血红蛋白 HBF 二磷酸甘油酸 DPG 氢离子浓度 pH值 磷酸甘油酸变位酶 儿科临床

原文传递

细粒棘球绦虫磷酸甘油酸变位酶的表达、定位和诊断价值的初步评价

8

作者 宋宏宇 梁雨晴 +6 位作者 华瑞其 史媛 阳爱国 郭莉 袁东波 谢跃 杨光友 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期194-200,206,共8页

目的克隆、表达细粒棘球绦虫磷酸甘油酸变位酶(EgPGAM),分析其免疫反应性及其在原头节、包囊及成虫中的分布情况,对EgPGAM的诊断价值进行初步评价。方法提取细粒棘球蚴原头节RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增EgPGAM基因,测序。通过多种生物信... 目的克隆、表达细粒棘球绦虫磷酸甘油酸变位酶(EgPGAM),分析其免疫反应性及其在原头节、包囊及成虫中的分布情况,对EgPGAM的诊断价值进行初步评价。方法提取细粒棘球蚴原头节RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增EgPGAM基因,测序。通过多种生物信息学软件分析EgPGAM的理化性质、保守结构域、抗原表位和同源性等。利用Mega 5.0软件进行序列特征分析,采用邻接法构建系统进化树。将EgPGAM基因连接至pET32a表达载体,转入大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)中进行诱导表达,镍柱纯化,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析其表达情况并进行蛋白质免疫印迹(Western blotting)分析。免疫荧光定位分析EgPGAM在原头节、包囊及成虫中的分布。采用ELISA评价EgPGAM的诊断价值。结果EgPGAM长756 bp,共编码251个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量(Mr)约28000,等电点为8.29,不含信号肽,无跨膜区。EgPGAM含有12个高保守的氨基酸位点、3个保守的催化活性位点、1个底物结合位点和7个B抗原表位。EgPGAM的氨基酸序列与多房棘球绦虫、猪带绦虫、华支睾吸虫、秀丽隐杆线虫、人和羊的PGAM序列相似性分别为99%、94%、78%、45%、57%和4%。SDS-PAGE分析结果显示,EgPGAM在E.coli BL21(DE3)中大量表达,主要以可溶形式存在;Western blotting分析结果显示,EgPGAM可与感染细粒棘球蚴的绵羊血清发生反应。免疫荧光定位显示,EgPGAM主要分布在原头节表皮层和顶突沟,包囊生发层和成虫薄壁组织。建立的间接ELISA敏感性为55.6%(15/27),特异性为86.4%(89/103)。结论EgPGAM广泛分布于细粒棘球蚴和细粒棘球绦虫中,具有较好免疫反应性,但敏感性较低,不适合作为细粒棘球蚴病的候选诊断抗原。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 磷酸甘油酸变位酶 原核表达 免疫定位 酶联免疫吸附试验

原文传递

重叠延伸PCR法构建华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶突变体CsPGM-H190Q

9

作者 徐振彪 史雪君 +3 位作者 姜庆玲 任重敢 薛乐 宋林霞 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第12期158-160,共3页

为了研究华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶的活性位点,试验通过生物信息学分析和重叠延伸PCR的方法,对该酶的底物结合位点进行突变,得到突变体基因CsP GM-H190Q,将其克隆至表达载体pET-24b(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG进... 为了研究华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶的活性位点,试验通过生物信息学分析和重叠延伸PCR的方法,对该酶的底物结合位点进行突变,得到突变体基因CsP GM-H190Q,将其克隆至表达载体pET-24b(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG进行诱导表达。结果表明:华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶突变体蛋白(CsP GM-H190Q)的分子质量为29.0 ku,Ni-NTA HisTrap柱纯化后得到纯度较高的蛋白。 展开更多

关键词 重叠延伸PCR 华支睾吸虫 磷酸甘油酸变位酶 突变体 H190Q 纯化

原文传递

颅内肿瘤及脑肿瘤

10

《国外科技资料目录（医药卫生）》 1998年第12期159-160,共2页

关键词 脑肿瘤 个案报告 颅内肿瘤 诊断 颅底肿瘤 颅咽管瘤 磷酸甘油酸变位酶 手术经验 恶性黑色素瘤 症状性

全文增补中

磷酸甘油酸变位酶活性动力学法测定及临床应用

11

作者 张一兵 罗喜钢 +2 位作者 张淑芹 王尚云 高雅文 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第9期2075-2076,2085,共3页

目的:建立一种适用于生化自动分析仪动力学测定磷酸甘油酸变位酶(phosphoglyceromutase,PGAM)的方法并评价此方法的可靠性。为进一步探讨人体血清PGAM活性在急性心肌梗死和脑出血等疾病中的早期作用建立良好的方法基础。方法:PGAM活性... 目的:建立一种适用于生化自动分析仪动力学测定磷酸甘油酸变位酶(phosphoglyceromutase,PGAM)的方法并评价此方法的可靠性。为进一步探讨人体血清PGAM活性在急性心肌梗死和脑出血等疾病中的早期作用建立良好的方法基础。方法:PGAM活性测定采用3-磷酸甘油酸为底物,经烯醇化酶等一系列偶联,以340 nm波长在自动分析仪上测定,根据NADH吸光度变化可求出PGAM总活性。结果:通过一系列参数的测定建立了良好的能适应生化自动分析仪的PGAM活性测定方法。结论:酶偶联法操作简单、测定快速、稳定性好,灵敏度和精确度高,抗干扰性强,可在全自动生化分析仪上应用;实验证明PGAM对于早期诊断心肌梗死,判断预后有一定价值;另一方面,脑出血时PGAM变化特点是:脑出血发作后,PGAM的活性在2 h内即可上升,然后下降,与心肌梗塞有明显不同,所以测定PGAM活性有助于临床上的鉴别诊断。 展开更多

关键词 磷酸甘油酸变位酶 心肌梗死 脑出血 动力学法

原文传递

华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶的圆二色谱分析

12

作者 徐振彪 宋林霞 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第5期184-185,297,共3页

为了研究华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶(Cs PGM)的二级结构,试验通过IPTG诱导含Cs PGM基因表达载体p ET24b-Cs PGM的大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经表达纯化得到Cs PGM蛋白,并采用圆二色谱研究该蛋白在不同条件下的二级结构组成和变化。... 为了研究华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶(Cs PGM)的二级结构,试验通过IPTG诱导含Cs PGM基因表达载体p ET24b-Cs PGM的大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经表达纯化得到Cs PGM蛋白,并采用圆二色谱研究该蛋白在不同条件下的二级结构组成和变化。结果表明:在室温条件下,Cs PGM的二级结构中β-折叠含量最高,其次为无规则卷曲和α-螺旋,而β-转角的含量最低,不同底物可引起其二级结构发生变化。 展开更多

关键词 华支睾吸虫 磷酸甘油酸变位酶 诱导表达 纯化 二级结构 圆二色谱

原文传递

三角帆蚌dPGAM基因的克隆与表达分析

13

作者 应晨怡 谢陈南 +5 位作者 张根芳 周淼 许海方 黄芸洁 陈旭旭 杨受保 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1913-1920,共8页

为探究贝类磷酸甘油酸变位酶(PGAM)基因的功能,以紫色和黄色家系三角帆蚌为试验材料,采用RACE-PCR法克隆得到三角帆蚌1个辅因子依赖型磷酸甘油酸变位酶基因(dPGAM)的cDNA序列,命名为HcdPGAM,并对其进行生物信息学和表达特性分析。结果表... 为探究贝类磷酸甘油酸变位酶(PGAM)基因的功能,以紫色和黄色家系三角帆蚌为试验材料,采用RACE-PCR法克隆得到三角帆蚌1个辅因子依赖型磷酸甘油酸变位酶基因(dPGAM)的cDNA序列,命名为HcdPGAM,并对其进行生物信息学和表达特性分析。结果表明,HcdPGAM基因包含1个750 bp的开放阅读框,编码1个含250个氨基酸的假定蛋白,并含有1个保守的组氨酸磷酸酶结构域;HcdPGAM与其他动物PGAM的氨基酸序列均具有较高的相似性(58.8%~82.0%)。实时荧光定量PCR分析显示,HcdPGAM在所检测的紫色蚌和黄色蚌的鳃、外套膜、闭壳肌、消化腺、性腺组织和血淋巴细胞6种组织中均有表达,其中在闭壳肌中的表达量相对较高,且紫色系蚌闭壳肌中的表达水平显著高于黄色系,表明该基因与三角帆蚌的能量代谢与生长发育有关,是贝类分子辅助育种的一种潜在的标记;嗜水气单胞菌诱导可极显著上调HcdPGAM基因的表达水平(24 h和48 h),表明HcdPGAM基因在贝类抗细菌感染的免疫反应相关能量代谢过程中也发挥着重要作用。本研究结果为明确贝类PGAM的功能和筛选三角帆蚌不同颜色家系间的特异性分子标记提供了一定的理论依据。 展开更多

关键词 三角帆蚌 磷酸甘油酸变位酶 克隆 表达

下载PDF 职称材料

磷酸甘油酸变位酶活性测定方法建立

14

作者 罗喜钢 张一兵 +1 位作者 张淑芹 王尚云 《辽宁医学院学报》 CAS 2008年第1期55-57,共3页

目的建立一种适用于生化自动分析仪动力学测定磷酸甘油酸变位酶(phosphoglyceromutase,PGAM)的方法并评价此方法的可靠性。为进一步探讨人体血清PGAM活性在急性心肌梗死和脑出血等疾病中的早期作用建立良好的方法基础。方法PGAM活性测... 目的建立一种适用于生化自动分析仪动力学测定磷酸甘油酸变位酶(phosphoglyceromutase,PGAM)的方法并评价此方法的可靠性。为进一步探讨人体血清PGAM活性在急性心肌梗死和脑出血等疾病中的早期作用建立良好的方法基础。方法PGAM活性测定采用3-磷酸甘油酸为底物,经烯醇化酶等一系列偶联,以340nm波长在自动分析仪上测定,根据NADH吸光度变化可求出PGAM总活性。结果通过一系列参数的测定建立了良好的能适应生化自动分析仪的PGAM活性测定方法。结论全自动酶偶联法操作简单、测定快速、稳定性好,灵敏度和精确度高,抗干扰性强,可在全自动生化分析仪上应用。 展开更多

关键词 磷酸甘油酸变位酶 心肌梗死 脑出血 动力学法

下载PDF 职称材料

三角褐指藻磷酸甘油酸变位酶基因可能侧翼序列的筛选、克隆以及序列测定 被引量：7

15

作者 王广策 孙海宝 曾呈奎 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期259-264,共6页

采用RT PCR的方法从酵母中成功地得到了磷酸甘油酸变位酶的cDNA基因 ,分别用32 P和地高辛 ddUTP标记以用作探针。以32 P标记的探针筛选三角褐指藻基因组文库 ,获得了 4kb的阳性DNA片段 ;进一步分析发现 ,该 4kb片段的真正阳性区域是位... 采用RT PCR的方法从酵母中成功地得到了磷酸甘油酸变位酶的cDNA基因 ,分别用32 P和地高辛 ddUTP标记以用作探针。以32 P标记的探针筛选三角褐指藻基因组文库 ,获得了 4kb的阳性DNA片段 ;进一步分析发现 ,该 4kb片段的真正阳性区域是位于片段端部的30 6bp的序列 ,因此认为该序列为三角褐指藻磷酸甘油酸变位酶基因的侧翼部分。克隆该30 6bp的DNA片段 ,并且测定其序列。结果表明 ,该 30 6bp的DNA片段包含两个同向重复序列 ,每个重复序列的大小为 1 1 6bp ,在每个重复序列中均含有GGTTCAATGT区域 ,这与一般常见的真核基因 5′端的CAATbox有相似之处。 展开更多

关键词 筛选 克隆 三角褐指藻 基因组文库 磷酸甘油酸变位酶基因 侧翼序列

下载PDF 职称材料

清肺口服液黄酮类成分对呼吸道合胞病毒感染小鼠坏死性凋亡的影响 被引量：9

16

作者 凌晓颖 丁雅荔 +1 位作者 陶嘉磊 袁斌 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第13期4019-4027,共9页

目的研究清肺口服液黄酮类成分对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠坏死性凋亡的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组及黄酮类成分低、高剂量(30、60 mg/kg)组和利巴韦林(46 mg/kg)组,建立RSV感染的... 目的研究清肺口服液黄酮类成分对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠坏死性凋亡的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组及黄酮类成分低、高剂量(30、60 mg/kg)组和利巴韦林(46 mg/kg)组,建立RSV感染的小鼠模型,给药4 d后,苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化;qRT-PCR检测肺组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和RSV-F mRNA表达;流式细胞术检测肺组织细胞坏死性凋亡率;ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)水平;Western blotting检测肺组织受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein 1,RIP1)、RIP3、混合系列蛋白激酶样结构域(mixed lineage kinase domain-like,MLKL)、磷酸甘油酸变位酶5(phosphoglycerate mutase 5,PGAM5)、动力相关蛋白1(dynamin-related protein1,DRP1)蛋白表达;免疫荧光检测肺组织RIP1和RIP3的共定位以及p-MLKL与上皮细胞的共定位。结果与模型组相比,黄酮类成分组小鼠肺组织病理损伤减轻;肺组织中IL-6、TNF-α和RSV-F m RNA表达水平降低(P<0.05、0.01);肺组织细胞坏死性凋亡率下降(P<0.05、0.01);BALF中HMGB1和LDH水平降低(P<0.05、0.01);肺组织RIP1、RIP3、MLKL、PGAM5、DRP1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01);肺组织RIP1/RIP3坏死复合物的形成减少,肺上皮细胞中p-MLKL的荧光表达降低。结论清肺口服液黄酮类成分可能通过调节RIP1/RIP3/MLKL/PGAM5/DRP1信号通路,抑制坏死性凋亡,改善RSV感染的小鼠肺部炎症损伤。 展开更多

关键词 清肺口服液 黄酮类成分 呼吸道合胞病毒 坏死性凋亡 受体相互作用蛋白激酶1 受体相互作用蛋白激酶3 混合系列蛋白激酶样结构域 磷酸甘油酸变位酶5 线粒体动力相关蛋白1

原文传递

PGAM1通过激活Warburg效应调控宫颈癌细胞恶性生物学行为的机制研究 被引量：9

17

作者 傅柳陶 王青元 +1 位作者 卫兵 王文艳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第9期1398-1402,共5页

目的探讨磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)在宫颈癌组织中的表达情况以及可能的生物学机制。方法收集行手术切除的67例宫颈癌患者的新鲜宫颈癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法检测PGAM1的表达情况并分析与患者病理特征的关系。构建PGAM1基... 目的探讨磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)在宫颈癌组织中的表达情况以及可能的生物学机制。方法收集行手术切除的67例宫颈癌患者的新鲜宫颈癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法检测PGAM1的表达情况并分析与患者病理特征的关系。构建PGAM1基因沉默稳转Hela宫颈癌细胞株,分析PGAM1基因沉默对Hela细胞凋亡和增殖活性的影响。采用qRT-PCR和Western blot法检测PGAM1对Akt/m TOR信号通路关键分子的影响。结果 (1)宫颈癌组织中PGAM1高表达率为58.21%,明显高于癌旁组织(P<0.05)。(2)不同临床分期、分化程度、浸润深度的患者宫颈癌组织中PGAM1的高表达率差异有统计学意义(P<0.05)。(3)Hela细胞sh PGAM1基因沉默后,细胞凋亡率较空白对照组(NC组)明显增加,细胞增殖活性明显降低(P<0.05)。(4)Hela细胞sh PGAM1基因沉默后,与NC组比较,PTEN mRNA和蛋白相对表达量明显上调,而p-Akt、p-m TOR mRNA和蛋白相对表达量明显降低(P<0.05)。结论肿瘤组织PGAM1蛋白高表达与宫颈癌的发生、发展有关,通过激活Akt/m TOR信号通路诱导的Warburg效应,促使肿瘤细胞的增殖,抑制其凋亡。 展开更多

关键词 磷酸甘油酸变位酶1 宫颈癌 Warburg效应 糖代谢 Akt/mTOR信号通路

下载PDF 职称材料

尿酸对大鼠肾细胞线粒体损伤及Pgam5/Drp1表达的影响 被引量：7

18

作者 封宝红 伍军 +4 位作者 张艳霞 朱戈丽 巩雪敏 毕智敏 胡曼莉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1110-1114,共5页

目的:探讨尿酸干预大鼠肾细胞对其线粒体损伤及磷酸甘油酸变位酶家族成员5(Pgam5)和发动蛋白相关蛋白1(Drp1)表达的影响。方法:0.6 mmol/L尿酸干预大鼠肾细胞NRK-52E,采用MTT法检测细胞活力,Hochest 33258染色观察细胞形态,流式细胞术... 目的:探讨尿酸干预大鼠肾细胞对其线粒体损伤及磷酸甘油酸变位酶家族成员5(Pgam5)和发动蛋白相关蛋白1(Drp1)表达的影响。方法:0.6 mmol/L尿酸干预大鼠肾细胞NRK-52E,采用MTT法检测细胞活力,Hochest 33258染色观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡水平,透射电镜观察线粒体形态结构,免疫荧光染色观察Pgam5和Drp1阳性表达情况,RT-qPCR检测线粒体中Pgam5 m RNA的表达水平,Western blot检测细胞质基质中Pgam5和Drp1蛋白表达水平。结果:与正常细胞比较,尿酸干预组细胞活力显著降低,凋亡率显著升高,线粒体肿胀、空泡化,嵴断裂,线粒体中Pgam5的m RNA表达显著降低,而细胞质基质中Pgam5和Drp1的蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:尿酸可破坏肾细胞线粒体结构,上调细胞质基质中Pgam5/Drp1表达,诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 尿酸 线粒体 细胞凋亡 磷酸甘油酸变位酶家族成员5 发动蛋白相关蛋白1

下载PDF 职称材料

PGAM5在胰腺癌中的表达及其与临床病理指标的关系

19

作者 薛松 胡加海 董祥宁 《癌变．畸变．突变》 CAS 2024年第1期29-34,共6页

目的:探讨胰腺癌组织磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)的表达水平及其与胰腺癌患者临床病理指标的关系。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)和基因型组织表达(GTEx)的RNA-seq数据集,分析胰腺癌和正常组织中PGAM5 mRNA的表达差异。选取2018年01月—2... 目的:探讨胰腺癌组织磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)的表达水平及其与胰腺癌患者临床病理指标的关系。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)和基因型组织表达(GTEx)的RNA-seq数据集,分析胰腺癌和正常组织中PGAM5 mRNA的表达差异。选取2018年01月—2020年12月于滁州市第一人民医院就诊的胰腺癌患者86例,另外收集6对新鲜胰腺癌组织及癌旁组织。采用Western blot检测6对新鲜胰腺癌组织匀浆中PGAM5蛋白的表达水平;免疫组织化学(IHC)检测PGAM5蛋白在86例胰腺癌组织中的表达水平,并分析其与患者临床病理指标之间的相关性。采用Cox回归模型进行单因素和多因素分析,采用Kaplan-Meier曲线进行生存分析。结果:生物信息学分析显示,在胰腺癌组织中,PGAM5 mRNA的表达水平高于正常组织,差异具有统计学意义(P<0.01)。Western blot检测显示PGAM5蛋白在新鲜胰腺癌组织中表达水平较癌旁组织中显著升高(P<0.01)。IHC染色显示PGAM5蛋白在胰腺癌组织中呈棕黄色颗粒状,主要在细胞胞浆中表达;IHC半定量分析发现,与对应的癌旁正常组织相比,PGAM5蛋白在胰腺癌组织中的表达水平显著升高(P<0.01)。PGAM5蛋白的表达水平与胰腺癌患者TNM分期(P=0.001)、肿瘤长径(P=0.006)和远处转移(P=0.004)相关,与年龄(P=0.772)、性别(P=0.911)和淋巴结转移(P=0.085)无明显相关。Spearman相关分析表明,PGAM5蛋白表达水平与TNM分期(r=0.428,P<0.01)、肿瘤长径(r=0.276,P=0.010)、淋巴结转移(r=0.238,P=0.027)和远处转移(r=0.304,P=0.004)相关,与年龄(r=0.013,P=0.902)和性别(r=0.042,P=0.699)无明显关系。单因素分析和多因素分析均提示,PGAM5[HR=2.125,95%CI(1.210,3.646),P=0.008]是胰腺癌患者生存预后的独立影响因素。Kaplan-Meier生存曲线显示,PGAM5蛋白高表达组的胰腺癌患者中位总生存期(OS)为17个月,PGAM5低表达组的中位OS为27个月,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:PGAM5蛋白在胰腺癌组� 展开更多

关键词 磷酸甘油酸变位酶5 胰腺癌 临床病理特征 预后

下载PDF 职称材料

CircOGDH通过调控miR-195-5p/PGAM5轴对氧糖剥夺/复糖复氧诱导的小胶质细胞损伤的影响

20

作者 李向男 杨松涛 +4 位作者 李林 张云鹤 张志勇 李建民 付爱军 《河北医学》 CAS 2024年第9期1440-1446,共7页

目的:探讨环状RNA OGDH(CircOGDH)通过调控miR-195-5p/磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)轴对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的小胶质(MG)细胞损伤的影响。方法:将体外培养的HMC3细胞分为:NC组(正常培养)、OGD/R、si-NC组、si-CircOGDH组、mimic... 目的:探讨环状RNA OGDH(CircOGDH)通过调控miR-195-5p/磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)轴对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的小胶质(MG)细胞损伤的影响。方法:将体外培养的HMC3细胞分为:NC组(正常培养)、OGD/R、si-NC组、si-CircOGDH组、mimic NC组、miR-195-5p mimic组、si-CircOGDH+inhibitor NC组、si-CircOGDH+miR-195-5p inhibitor组。除NC组外,剩余组在转染对应物质前构建OGD/R模型。qRT-PCR法测定CircOGDH、miR-195-5p、PGAM5 mRNA表达水平;测定各组细胞增殖、凋亡、活性氧(ROS)及炎性因子水平;Western blot检测Cleaved caspase-3、Bax表达;双荧光素酶基因实验检测CircOGDH与miR-195-5p、PGAM5与miR-195-5p之间的靶向关系。结果:与NC组对比,OGD/R组miR-195-5p表达、OD450值均降低,CircOGDH、PGAM5 mRNA表达、凋亡率、ROS及炎性因子水平、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达均升高(P<0.05);对比OGD/R组和si-NC组,si-CircOGDH组miR-195-5p表达、OD450值均升高,CircOGDH、PGAM5 mRNA表达、凋亡率、ROS及炎性因子水平、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达均降低(P<0.05);miR-195-5p mimic组分别与OGD/R组、mimic NC组对比,CircOGDH无显著差异(P>0.05),miR-195-5p表达、OD450值均升高,PGAM5 mRNA表达、凋亡率、ROS及炎性因子水平、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达均降低(P<0.05);与si-CircOGDH+inhibitor NC组对比,si-CircOGDH+miR-195-5p inhibitor组CircOGDH差异不显著(P>0.05),miR-195-5p表达、OD450值均降低,PGAM5 mRNA表达、凋亡率、ROS及炎性因子水平、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达均升高(P<0.05)。双荧光素酶基因实验显示miR-195-5p和CircOGDH、PGAM5均存在靶向关系。结论:沉默CircOGDH可促进OGD/R诱导的HMC3细胞增殖,抑制其炎症反应和凋亡,可能与调控miR-195-5p/PGAM5轴有关。 展开更多

关键词 环状RNA OGDH miR-195-5p 磷酸甘油酸变位酶5 氧糖剥夺/复糖复氧 小胶质细胞

下载PDF 职称材料