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糖尿病大鼠肾组织Smurf2表达及其与SnoN蛋白降解的关系 被引量：6
1
作者 刘瑞霞 郭兵 +4 位作者 肖瑛 石明隽 王圆圆 桂华珍 张国忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1743-1748,共6页
目的:观察Smad泛素化调节因子2(Smurf2)和核转录共抑制因子SnoN在糖尿病(DM)大鼠肾组织的动态表达,并初步探讨Smurf2在DM大鼠肾组织SnoN蛋白表达变化中的作用。方法:链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射复制DM大鼠模型,随机分为DM2、4、8、12、16... 目的:观察Smad泛素化调节因子2(Smurf2)和核转录共抑制因子SnoN在糖尿病(DM)大鼠肾组织的动态表达,并初步探讨Smurf2在DM大鼠肾组织SnoN蛋白表达变化中的作用。方法:链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射复制DM大鼠模型,随机分为DM2、4、8、12、16和24周组,每组均设鼠龄匹配的正常对照组(n=6)。生化方法测血糖、血肌酐(Scr)及24h尿蛋白量,计算肾脏指数;HE染色观察胰腺和肾组织病理学改变;免疫荧光染色检测胰腺组织胰岛素、肾组织Smurf2和SnoN的表达;Westernblotting检测肾皮质Smurf2、SnoN、转化生长因子β1(TGF-β1)和磷酸化Smad2(p-Smad2)蛋白的表达;RT-PCR检测肾皮质Smurf2和SnoN的mRNA。结果:(1)DM各组血糖、血Scr、24h尿蛋白量和肾脏指数均高于正常对照组,正常胰腺组织胰岛素表达强,DM大鼠胰岛素表达则明显减弱;(2)Smurf2和SnoN蛋白均主要表达于肾小管上皮细胞,从DM2周始各DM组Smurf2、TGF-β1和p-Smad2蛋白表达均多于正常对照组,DM4周起各DM组SnoN蛋白均少于正常对照组,DM各组SnoNmRNA与正常组相比无显著差异,Smurf2mRNA随病程进展逐渐增多;(3)Smurf2和SnoN蛋白的表达量呈显著负相关(r=-0.88,P<0.01)。结论:在糖尿病肾病发病过程中SnoN蛋白的表达减少可能与Smurf2介导其泛素化降解有关。 展开更多
关键词 smad泛素化调节因子2 SNON 磷酸化smad2 糖尿病肾病
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五味子乙素减轻博莱霉素诱导的肺纤维化 被引量：6
2
作者 魏菲 刘斌 +2 位作者 肖娜 曹波 魏路清 《天津中医药大学学报》 CAS 2017年第3期200-204,共5页
[目的]观察五味子乙素对小鼠肺纤维化的保护作用,并初探其可能的作用机制。[方法]将96只小鼠随机分为4组:空白对照(N)组,模型(M)组,地塞米松(DM)组,五味子乙素(Sch-B)组,每组24只。N组气管内滴入0.9%氯化钠注射液,其余各组小鼠经气管给... [目的]观察五味子乙素对小鼠肺纤维化的保护作用,并初探其可能的作用机制。[方法]将96只小鼠随机分为4组:空白对照(N)组,模型(M)组,地塞米松(DM)组,五味子乙素(Sch-B)组,每组24只。N组气管内滴入0.9%氯化钠注射液,其余各组小鼠经气管给予博莱霉素溶液建立肺纤维化模型。造模后第2天,N组和M组每日灌胃给予橄榄油,DM组给予地塞米松腹腔注射3 d,Sch-B组灌胃给予五味子乙素治疗。各组分别于治疗后第7、14、28天随机处死8只,进行肺组织苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察小鼠肺组织病理形态变化,用酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测小鼠血清中白介素-6(IL-6)水平,试剂盒检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和羟脯氨酸(HYP)含量,用免疫组化检测肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad2(p-Smad2)以及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达量来评价治疗效果。[结果]Sch-B组小鼠肺泡炎及肺纤维化程度较M组均明显减轻(P<0.05),血清中IL-6水平明显下降(P<0.05),抗氧化指标较M组有所升高(P<0.05),肺组织TGF-β1、pSmad2及α-SMA蛋白表达明显减少(P<0.05)。[结论]五味子乙素能减轻小鼠肺纤维化程度,可能是通过减轻炎症反应,增强机体抗氧化能力和通过调节TGF-β1、p-Smad2和α-SMA蛋白发挥作用。 展开更多
关键词 五味子乙素 肺纤维化 抗炎 抗氧化 转化生长因子Β1 磷酸化smad2
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PTEN和磷酸化Smad2在原发性肝癌中的表达 被引量：5
3
作者 吴淑坤 王宝菊 +4 位作者 杨燕 田拥军 鲍俊杰 冯新华 杨东亮 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期567-571,共5页
目的探讨肝癌等组织中10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）和磷酸化Smad2（P-Smad2）表达的意义。方法采用免疫组织化学技术检测肝癌组织、癌旁肝组织和非癌性肝组织中P-Smad2和PTEN的表达。结果31份肝癌组织中PTEN表达以... 目的探讨肝癌等组织中10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）和磷酸化Smad2（P-Smad2）表达的意义。方法采用免疫组织化学技术检测肝癌组织、癌旁肝组织和非癌性肝组织中P-Smad2和PTEN的表达。结果31份肝癌组织中PTEN表达以细胞质和细胞膜明显,细胞核基本不表达；25份癌旁及13份非癌性肝组织中则以细胞核和细胞质强表达,细胞膜弱表达。PTEN在肝癌组织的表达率（64．5％）低于癌旁肝组织（96．0％）和非癌性肝组织（100．0％）,表达强度（4．19±3．31）低于癌旁肝组织（7．88±0．93）和非癌性肝组织（7．77±0．93）,差异均有统计学意义（P＜0．05）。不同病理分级的肝癌组织中PTEN的表达率差异无统计学意义（P＞0．05）,≥Ⅱ级的肝癌组织细胞质表达强度（3．07±2．87）低于＜Ⅱ级（5．80±3．12）的肝癌组织（P＜0．05）。癌旁有、无肝内血管癌栓的肝癌组织中,PTEN表达率分别为45．5％和85．7％,表达强度分别为3．00±3．46和6．28±2．37,差异均有统计学意义（P＜0．05）。PTEN在肝细胞的表达定位与病理类型呈负相关（r=0．34,P＜0．01）,与肝内血管癌栓呈负相关（r=-0．43,P＜0．05）。非癌性肝组织、癌旁肝组织和病理分级＜Ⅱ级的肝癌组织中,P-Smad2表达以细胞核和细胞质明显,≥Ⅱ级的肝癌组织中则以细胞核为主。P-Smad2在肝细胞的表达定位与病理类型呈正相关（r=0．22,P＜0．05）,P-Smad2在细胞核的表达强度。肝癌组织与癌旁肝组织的差异无统计学意义,也与肝内血管有无癌栓无关。肝癌组织中PTEN和P-Smad2表达呈负相关（r=-0．73,P＜0．01）。结论PTEN的表达、强度以及和P-Smad2的核、质转位可能与肿瘤的发展和恶化有关,二者可能存在相互作用,共同参与肝癌的发生机制。 展开更多
关键词 癌 肝细胞 基因 抑制 肿瘤 磷酸化smad2 PTEN
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维立西呱通过环磷酸鸟苷-磷酸化Smad2通路调节慢性心力衰竭C57BL/6小鼠心肌纤维化
4
作者 郑巧文 王孙蓥 +1 位作者 郑彩云 陈平 《中华高血压杂志》 CSCD 北大核心 2023年第12期1238-1246,共9页
目的探讨维立西呱是否通过环磷酸鸟苷(cGMP)-磷酸化Smad2(p-Smad2)通路抑制慢性心力衰竭(心衰)小鼠的心肌纤维化、改善心脏结构与功能。方法动物实验:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、心衰组、心衰+3 mg/(kg·d)维立西呱组... 目的探讨维立西呱是否通过环磷酸鸟苷(cGMP)-磷酸化Smad2(p-Smad2)通路抑制慢性心力衰竭(心衰)小鼠的心肌纤维化、改善心脏结构与功能。方法动物实验:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、心衰组、心衰+3 mg/(kg·d)维立西呱组(心衰-Ver3组)、心衰+10 mg/(kg·d)维立西呱组(心衰-Ver10组),每组10只。腹腔注射阿霉素(5 mg/kg,2次/周,连续6周)构建心衰模型。维立西呱采用灌胃法给药,1次/d,连续8周。心脏超声评价小鼠的心脏结构和功能;天狼猩红染色观察心肌胶原沉积;放射免疫法测cGMP水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原水平;Western-blot法测心肌组织p-Smad2/总Smad2(T-Smad2)水平。细胞实验:组织贴块法培养小鼠心肌成纤维细胞(FBs);以TGF-β_(1)诱导FBsⅠ型胶原、Ⅲ型胶原合成;Western-blot法测FBs p-Smad2/T-Smad2水平;ELISA法测FBs上清液Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原水平。结果动物实验:与空白对照组相比,心衰组舒张末期左心室后壁厚度(LVPWD)、舒张末期室间隔厚度(IVSD)增加,左室射血分数(LVEF)降低(均P<0.05),血浆及左心室心肌组织cGMP水平均降低[血浆cGMP:(4.12±0.86)比(6.24±1.35)nmol/L,P<0.05;左心室心肌组织cGMP:(62.01±9.13)比(145.68±24.29)pmol/mg,P<0.05],心肌组织TGF-β_(1)含量、p-Smad2水平、心肌胶原容积分数(CVF)增加(均P<0.05);与心衰组相比,心衰-Ver3组、心衰-Ver10组LVPWD、IVSD降低,LVEF增加(均P<0.05),血浆及左心室心肌组织cGMP水平增加[血浆cGMP:(6.68±1.13),(15.49±2.07)比(4.12±0.86)nmol/L,P<0.05;左心室心肌组织cGMP:(139.25±21.54),(162.74±30.92)比(62.01±9.13)pmol/mg,P<0.05],心肌组织p-Smad2蛋白水平、CVF降低(均P<0.05),但血浆和心肌组织TGF-β_(1)水平差异无统计学意义(P>0.05)。细胞实验:TGF-β_(1)(1~30 ng/mL)可促进FBsⅠ型胶原、Ⅲ型胶原合成;维立西呱(10-6~10-4mol/L)能抑制TGF-β_(1)(10 ng/mL)诱导的FBs 展开更多
关键词 心力衰竭 维立西呱 环磷酸鸟苷 转化生长因子β_(1) 磷酸化smad2 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 小鼠
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TGF-β1/Smads通路在体外培养的鼻息肉组织重构中的作用 被引量：7
5
作者 李艺敏 谭国静 +4 位作者 江雨 邹璨 胡国华 刘杰 杨玉成 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期737-743,共7页
目的·在体外培养的原代鼻息肉组织中检测探讨TGF-β1/Samds信号通路在鼻息肉组织重构中的作用。方法·筛选慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)和慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)各15例,对照组为单纯鼻中隔偏曲患者10例。在术中收... 目的·在体外培养的原代鼻息肉组织中检测探讨TGF-β1/Samds信号通路在鼻息肉组织重构中的作用。方法·筛选慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)和慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)各15例,对照组为单纯鼻中隔偏曲患者10例。在术中收集鼻黏膜或鼻息肉组织,通过免疫组织化学染色(SP法)检测组织中蛋白表达水平及分布;通过马松(Masson)染色法检测胶原表达差异;通过实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测mRNA表达水平,Western blotting检测蛋白质表达水平。体外培养15例鼻息肉组织,用转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)进行刺激,使用qRT-PCR、Western blotting和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测mRNA、蛋白和上清胶原表达情况。结果·与CRSsNP组相比,CRSwNP组中TGF-β1、Smad2/3的蛋白和mRNA表达均降低(均P<0.05)。在所有CRS中,TGF-β1与pSmad2/3的蛋白表达呈正相关(r=0.991,P<0.01),与Smad2、Smad3mRNA表达均呈正相关(r=0.581,r=0.658,均P<0.01),与胶原表达呈正相关(r=0.982,P<0.01)。在体外培养的鼻息肉中,TGF-β1能促进pSmad2/3、Smad2、Smad3和胶原的表达。结论·TGF-β1/Smads通路在CRSwNP的组织重构中有重要作用,可能是鼻息肉胶原减少、组织水肿的重要原因之一。 展开更多
关键词 慢性鼻-鼻窦炎 鼻息肉 转化生长因子β1(TGF-β1) 磷酸化smad2/3(psmad2/3) 组织重构
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罗格列酮对高脂血症大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响及机制探讨 被引量：2
6
作者 刘厂辉 李建平 阳辉 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期199-202,共4页
目的观察罗格列酮对高脂血症大鼠血管平滑肌细胞凋亡及磷酸化Smad2/3表达的影响。方法高脂饮食复制SD大鼠高脂血症模型,酶消化法原代提取SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行体外培养,取5～8代细胞进行实验。无血清培养24h后:实验一分为4组:... 目的观察罗格列酮对高脂血症大鼠血管平滑肌细胞凋亡及磷酸化Smad2/3表达的影响。方法高脂饮食复制SD大鼠高脂血症模型,酶消化法原代提取SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行体外培养,取5～8代细胞进行实验。无血清培养24h后:实验一分为4组:①对照组,②罗格列酮组(本实验所用罗格列酮均为100μmol/L),③罗格列酮+过氧化物酶体增生激活受体γ(PPAR-γ)阻断剂GW9662组,④罗格列酮+抗转化生长因子β1(anti-TGF-β1)组,分别用Westernblot于1h检测磷酸化Smad2/3水平,24h后流式细胞学检测细胞凋亡;实验二分2组:①对照组,②100μmol/L罗格列酮组,分别于0、0.5、1、2、6、12和24h,用Western-blot检测磷酸化Smad2/3水平。结果 24h后罗格列酮组细胞凋亡率较对照组明显升高(P<0.05),罗格列酮+GW9662组和罗格列酮+抗转化生长因子β1组细胞凋亡率较罗格列酮组明显降低(P<0.05);罗格列酮处理后0.5hVSMCp-Smad2/3表达水平明显高于对照组(P<0.05),且1h达高峰(P<0.05),p-Smad2/3水平达到高峰后又较快下降(P<0.05);罗格列酮+GW9662组和罗格列酮+anti-TGF-β1组p-Smad2/3表达水平较罗格列酮组低(P<0.05)。结论罗格列酮可能通过激活过氧化物酶体增生激活受体γ,诱导血管平滑肌细胞磷酸化Smad2/3表达水平上调从而诱导血管平滑肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 罗格列酮 血管平滑肌细胞 磷酸化smad2/3
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磷酸化ERK、TGF-β受体Ⅱ和磷酸化Smad2蛋白在食管癌组织中的表达及意义 被引量：1
7
作者 何欣蓉 王琼 +1 位作者 蔡燕 付茂勇 《山东医药》 CAS 2012年第7期10-11,20,共3页
目的探讨磷酸化ERK(P-ERK)、TGF-β受体Ⅱ(TβRⅡ)和磷酸化Smad2(P-Smad2)蛋白在食管癌发生、发展中的作用。方法采用Western blot技术检测38份手术切除的食管癌标本和12份癌旁组织标本中P-ERK、TβRⅡ、P-Smad2蛋白表达。结果食管癌组... 目的探讨磷酸化ERK(P-ERK)、TGF-β受体Ⅱ(TβRⅡ)和磷酸化Smad2(P-Smad2)蛋白在食管癌发生、发展中的作用。方法采用Western blot技术检测38份手术切除的食管癌标本和12份癌旁组织标本中P-ERK、TβRⅡ、P-Smad2蛋白表达。结果食管癌组织中TβRⅡ、P-Smad2蛋白表达明显低于癌旁组织,P-ERK蛋白表达明显高于癌旁组织,P均<0.05;P-ERK、TβRⅡ、P-Smad2蛋白表达与食管癌患者年龄、性别及肿瘤组织分化程度、淋巴结转移均无明显相关性;P-ERK、TβRⅡ与P-Smad2蛋白表达亦无明显相关性。结论食管癌组织中存在P-ERK、TβRⅡ和Smad2蛋白表达异常;此可能与食管癌的发病有关。 展开更多
关键词 磷酸化ERK蛋白 TGF-β受体Ⅱ蛋白 磷酸化smad2蛋白 食管癌
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