电针对完全性骶髓损伤神经源性膀胱大鼠尿流动力学及逼尿肌组织中MLCK、MLC、p-MLC的影响 被引量：14

1

作者 邓石峰 余雨荷 +4 位作者 刘笑萌 艾坤 许明 石磊 张泓 《湖南中医药大学学报》 CAS 2020年第6期727-731,共5页

目的通过观察电针"次髎""三阴交""中极"穴对完全性骶髓损伤神经源性膀胱(neurogenic bladder, NB)模型大鼠尿流动力学及逼尿肌组织中肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase, MLCK)、肌球蛋白轻链(m... 目的通过观察电针"次髎""三阴交""中极"穴对完全性骶髓损伤神经源性膀胱(neurogenic bladder, NB)模型大鼠尿流动力学及逼尿肌组织中肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase, MLCK)、肌球蛋白轻链(myosin light chain, MLC)和磷酸化肌球蛋白(phosphorylated myosin, p-MLC)表达的影响,探究电针治疗完全性骶髓损伤后NB的可能机制。方法 48只健康雌性SD大鼠随机分为两组,一组随机分为空白组和假手术组各12只,剩余大鼠采用改良Hassan Shaker脊髓横断法制成骶髓损伤NB大鼠模型,成模后随机分为模型组和电针组各12只,电针组大鼠术后第20天取双侧"次髎""三阴交"及"中极"进行电针干预,连续10 d,1次/d,20 min/次,其余大鼠不做干预处理;干预结束后对比观察各组大鼠尿流动力学检测结果,HE染色后光镜下观察各组大鼠逼尿肌组织形态学变化,Western blot法比较逼尿肌组织中MLCK、MLC、p-MLC蛋白表达情况。结果 (1)与空白组、假手术组相比,模型组大鼠漏尿点压力明显下降(P<0.01),膀胱最大容量和顺应性显著增大(P<0.01);与模型组相比,电针组大鼠漏尿点压力显著升高(P<0.01),膀胱最大容量和顺应性降低(P<0.05或P<0.01)。(2)光镜下空白组、假手术组逼尿肌形态结构正常,模型组肌纤维萎缩严重、大量的间质结构填充,电针组肌纤维轻度萎缩。(3)与空白组、假手术组相比,模型组逼尿肌中MLCK、MLC、p-MLC的含量显著降低(P<0.01);与模型组相比,电针组逼尿肌中MLCK、MLC、p-MLC蛋白含量增高(P<0.05或P<0.01)。结论电针穴位"次髎""三阴交"及"中极"能够减轻完全性骶髓损伤NB模型大鼠逼尿肌萎缩、提高漏尿点压力、降低膀胱最大容量和顺应性从而改善膀胱排尿功能,通过提高逼尿肌组织中MLCK、MLC、p-MLC含量从而增加膀胱逼尿肌的收缩能力可能是电针产生治疗效应的机制之一。 展开更多

关键词 骶髓损伤 神经源性膀胱 电针 尿流动力学 肌球蛋白轻链激酶 肌球蛋白轻链 磷酸化肌球蛋白

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盐酸法舒地尔治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的潜能与抗炎作用 被引量：14

2

作者 侯绍蔚 刘岳婷 +5 位作者 郭敏芳 刘春云 李艳花 孟建 肖保国 马存根 《中国临床神经科学》 2012年第2期126-134,共9页

目的:探讨盐酸法舒地尔对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果及机制。方法:雌性C57BL/6小鼠,随机分为EAE对照组、盐酸法舒地尔干预组和盐酸法舒地尔治疗组。采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽诱导慢性EAE模型。干预和治疗分别在免... 目的:探讨盐酸法舒地尔对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果及机制。方法:雌性C57BL/6小鼠,随机分为EAE对照组、盐酸法舒地尔干预组和盐酸法舒地尔治疗组。采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽诱导慢性EAE模型。干预和治疗分别在免疫后第3天和症状出现时予以腹腔注射盐酸法舒地尔,观察EAE模型小鼠体重变化和临床症状,进行苏木精-伊红和CD4+T细胞染色,同时检测磷酸化肌球蛋白磷酸酶(p-MYPT1)和核因子(NF-κB)。结果:盐酸法舒地尔可推迟并改善EAE小鼠症状,减轻中枢神经系统炎细胞浸润,抑制脊髓和脑p-MYPT1及脊髓NF-κB的表达。 展开更多

关键词 盐酸法舒地尔 实验性自身免疫性脑脊髓炎 CD4+T细胞 磷酸化肌球蛋白磷酸酶 核因子

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香砂六君子汤调控RhoA/ROCK2/MYPT1信号通路改善功能性消化不良大鼠胃动力的机制 被引量：10

3

作者 刘梦雅 成映霞 +5 位作者 白敏 赵琳娜 李润法 安耀荣 段永强 李亚荣 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1-8,共8页

目的:基于RAS同源基因家族成员A(RhoA)/Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(ROCK2)/肌球蛋白轻链磷酸酶靶向亚基1(MYPT1)信号通路探讨香砂六君子汤对功能性消化不良(FD)大鼠胃动力障碍的干预机制。方法:将60只SPF级雄性SD乳鼠随机分为正常组(n=10... 目的:基于RAS同源基因家族成员A(RhoA)/Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(ROCK2)/肌球蛋白轻链磷酸酶靶向亚基1(MYPT1)信号通路探讨香砂六君子汤对功能性消化不良(FD)大鼠胃动力障碍的干预机制。方法:将60只SPF级雄性SD乳鼠随机分为正常组(n=10)和造模组(n=50),造模组大鼠采用综合造模法复制FD大鼠模型。模型复制成功后将造模组大鼠随机分为模型组、莫沙必利组和香砂六君子汤高、中、低剂量组,共5组,每组10只。正常组和模型组大鼠给予10 mL·kg^(-1)·d^(-1)生理盐水灌胃,莫沙必利组给予1.35 mg·kg^(-1)·d^(-1)莫沙必利灌胃,香砂六君子汤高、中、低剂量组分别给予12、6、3 g·kg^(-1)·d^(-1)香砂六君子汤汤剂灌胃,持续干预14 d。造模和给药前后观察大鼠一般生存状况,测定大鼠体质量、3 h平均进食量。给药干预结束后,测定大鼠肠推进率,采用苏木素-伊红(HE)染色观察胃组织病理改变,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定各组大鼠延髓和胃组织匀浆液中胆碱乙酰转移酶(ChAT)、血管活性肠肽(VIP)含量,采用冰冻切片染色技术观察各组大鼠胃窦平滑肌中腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)酶分布,采用蛋白免疫印迹法检测胃组织中RhoA、ROCK2、磷酸化(p)-MYPT1蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠毛发枯乱、倦懒怠动、行动缓迟,一般生存状况较差,体质量、3 h平均进食量以及肠推进率均明显下降(P<0.05);胃组织病理未见明显异常;延髓和胃组织中ChAT含量减少,胃组织中VIP含量增多,胃窦平滑肌中ATP酶分布明显减少,胃组织中RhoA、ROCK2、p-MYPT1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠一般生存状况明显好转,体质量、3 h平均进食量及肠推进率明显增加(P<0.05);胃组织病理未见明显差异;延髓和胃组织中ChAT含量明显增加,胃组织中VIP含量减少,胃窦平滑肌中ATP酶分布明显增加,胃组织� 展开更多

关键词 香砂六君子汤 RAS同源基因家族成员A(RhoA) Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(ROCK2) 磷酸化肌球蛋白轻链磷酸酶靶向亚基1(p-MYPT1) 功能性消化不良

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补中益气汤治疗脾气虚证大鼠肌无力的机制研究 被引量：12

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作者 周昕欣 王彩霞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期92-95,共4页

目的：研究脾气虚证大鼠体重、肛温、耐寒冷存活百分率、游泳时间和骨骼肌磷酸化肌球蛋白轻链表达变化,明确补中益气汤治疗脾气虚证大鼠肌无力的可能机制。方法：清洁级Wistar大鼠,采用饮食不节和劳倦过度结合法建立脾气虚证模型,单日... 目的：研究脾气虚证大鼠体重、肛温、耐寒冷存活百分率、游泳时间和骨骼肌磷酸化肌球蛋白轻链表达变化,明确补中益气汤治疗脾气虚证大鼠肌无力的可能机制。方法：清洁级Wistar大鼠,采用饮食不节和劳倦过度结合法建立脾气虚证模型,单日喂食甘蓝15-20 g/只,双日胃饲猪油脂3 m L/只,共15 d10造模成功后,实验分为正常组、脾气虚组和补中益气汤组（高、中、低3个剂量组,剂量分别为7.10,3.55,1.78 g·kg^-1）,灌胃给药10 d10分别检测大鼠体重、肛温、耐寒冷存活率、游泳时间,Western blot检测骨骼肌中磷酸化肌球蛋白轻链的表达,比较实验结束前后数值变化。结果：与正常组相比,脾气虚组大鼠的体重、肛温、耐寒冷存活率、游泳时间及磷酸化肌球蛋白轻链表达均显著下降（P〈0.05）;与脾气虚组相比,中、高剂量补中益气汤组的体重、肛温、耐寒冷存活率、游泳时间及磷酸化肌球蛋白轻链表达均显著上升（P〈0.05）。结论：补中益气汤使磷酸化肌球蛋白轻链均表达升高可能是其治疗脾气虚大鼠肌无力的一个重要机制。 展开更多

关键词 补中益气汤 脾气虚 磷酸化肌球蛋白轻链 肌无力

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电针对糖尿病神经源性膀胱大鼠肌球蛋白系统的影响 被引量：3

5

作者 韩栩珂 周冬祺 +4 位作者 王佳艺 朱婵 邱现良 陈一丁 陈秋 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第8期87-93,共7页

目的观察电针对糖尿病神经源性膀胱(DNB)大鼠肌球蛋白系统的影响,并探讨其效应机制。方法采用高脂高糖饲料喂养结合单次腹腔注射链脲佐菌素制备DNB大鼠模型,将大鼠分为正常组、模型组、电针组和假电针组,每组10只。电针组电针“肾俞”... 目的观察电针对糖尿病神经源性膀胱(DNB)大鼠肌球蛋白系统的影响,并探讨其效应机制。方法采用高脂高糖饲料喂养结合单次腹腔注射链脲佐菌素制备DNB大鼠模型,将大鼠分为正常组、模型组、电针组和假电针组,每组10只。电针组电针“肾俞”“膀胱俞”“中髎”“三阴交”,连续8周。检测大鼠糖耐量、尿流动力学及膀胱质量,电镜观察膀胱组织线粒体变化,ELISA检测膀胱组织垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)38、环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)含量,Western blot检测膀胱组织磷酸化肌球蛋白轻链激酶(p-MLCK)和磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)表达。结果与正常组比较,模型组大鼠糖耐量降低,膀胱最大容量、膀胱顺应性明显升高(P<0.05),漏尿点压明显降低(P<0.05),膀胱质量明显增加(P<0.05);逼尿肌细胞线粒体肿胀,线粒体嵴断裂或溶解消失;膀胱组织PACAP38、cAMP和PKA含量明显减少(P<0.01),p-MLCK蛋白表达明显降低(P<0.01),p-MLC蛋白表达明显升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠糖耐量差异无统计学意义(P>0.05),膀胱最大容量、膀胱顺应性明显降低(P<0.05),漏尿点压明显升高(P<0.05),膀胱质量明显降低(P<0.05);逼尿肌细胞部分线粒体轻度肿胀;膀胱组织PACAP38、cAMP和PKA含量明显增加(P<0.01),p-MLCK蛋白表达明显升高(P<0.05),p-MLC蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论电针可通过激活DNB模型大鼠膀胱PACAP/cAMP/PKA信号通路,调控其肌球蛋白系统相关收缩元件磷酸化水平,修复逼尿肌细胞受损的线粒体,调节能量代谢,改善膀胱肥大,调控膀胱内压和顺应性,修复DNB模型大鼠受损的膀胱功能。 展开更多

关键词 电针 糖尿病神经源性膀胱 磷酸化肌球蛋白轻链激酶 磷酸化肌球蛋白轻链 PACAP/cAMP/PKA信号通路 肌球蛋白 大鼠

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大鼠脊髓损伤后肌球蛋白轻链激酶的表达及意义

6

作者 崔敏 刘阳 +1 位作者 唐小勇 邓永兵 《中国实用神经疾病杂志》 2023年第10期1286-1290,共5页

目的研究肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在大鼠脊髓损伤后的表达变化及意义。方法成年雄性SD大鼠100只,按随机数字表分为对照组(n=50)和损伤组(n=50),通过改良Allen’s的方法构建动物模型,建模后于12 h、1 d、3 d、5 d、7 d 5个时间点分别随机... 目的研究肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在大鼠脊髓损伤后的表达变化及意义。方法成年雄性SD大鼠100只,按随机数字表分为对照组(n=50)和损伤组(n=50),通过改良Allen’s的方法构建动物模型,建模后于12 h、1 d、3 d、5 d、7 d 5个时间点分别随机选取10只大鼠,处死后取损伤区脊髓组织,伊文斯蓝检测血-脊髓屏障通透性,通过RT-PCR及Western blot法检测MLCK的m RNA与蛋白表达和磷酸化肌球蛋白轻链(P-MLC)的蛋白表达。结果损伤组血-脊髓屏障通透性较对照组显著增高(P<0.05)。损伤组各时间点MLCK的mRNA与蛋白表达以及P-MLC蛋白表达较对照组显著增高(P<0.05)。结论大鼠脊髓损伤后MLCK表达增加可能参与血-脊髓屏障功能损害的发生机制。 展开更多

关键词 脊髓损伤 血-脊髓屏障 肌球蛋白轻链激酶 磷酸化肌球蛋白轻链

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缺氧诱导因子1α对大鼠血管内皮细胞通透性的调控作用及相关机制 被引量：3

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作者 胡德林 余又新 +8 位作者 梁荣 周舜英 段声梁 蒋智永 孟承颖 蒋薇 王欢 孙业祥 方林森 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期209-217,共9页

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对大鼠血管内皮细胞通透性的调控作用及相关机制。方法取12只雄性SD大鼠,35~38d龄,分离主动脉培养血管内皮细胞,4d后观察细胞形态,并取第2或3代细胞进行以下实验。(1)取大鼠血管内皮细胞,采用随机数字... 目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对大鼠血管内皮细胞通透性的调控作用及相关机制。方法取12只雄性SD大鼠,35~38d龄,分离主动脉培养血管内皮细胞,4d后观察细胞形态,并取第2或3代细胞进行以下实验。(1)取大鼠血管内皮细胞,采用随机数字表法(分组方法下同)分为空白对照组、阴性对照组、HIF-1α干扰序列1组、HIF-1α干扰序列2组和HIF-1α干扰序列3组,每组3孔。阴性对照组和HIF-1α干扰序列1组、HIF-1α干扰序列2组和HIF-1α干扰序列3组细胞经脂质体2000分别转染GV248空质粒和含HIF-1α干扰序列1、干扰序列2、干扰序列3的GV248重组质粒,空白对照组细胞仅加入脂质体2000。转染24h后,采用实时荧光定量反转录PCR法和蛋白质印迹法(检测方法下同)分别检测各组细胞HIF-1α的mRNA和蛋白的表达,选取干扰效率最高的序列。(2)另取大鼠血管内皮细胞,分为空白对照组、阴性对照组和HIF-1α低表达组,每组3孔。空白对照组细胞仅加入脂质体2000,阴性对照组和HIF-1α低表达组细胞经脂质体2000分别转染GV248空质粒及实验(1)中筛选的低表达HIF-1α重组质粒。培养14d,检测各组细胞HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平。(3)另取大鼠血管内皮细胞,分为空白对照组、阴性对照组、HIF-1α高表达组,每组3孔。空白对照组细胞仅加入脂质体2000,阴性对照组、HIF-1α高表达组细胞经脂质体2000分别转染GV230空质粒和HIF-1α高表达重组质粒。培养14d,检测各组细胞HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平。(4)取实验(1)中3组、实验(2)中3组细胞,检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)和带状闭合蛋白1(ZO-1)的mRNA和蛋白表达水平。对数据行单因素方差分析、t检验。结果培养4d,细胞呈梭形,成功培养出大鼠血管内皮细胞。(1)HIF-1α干扰序列1组、HIF-1α干扰序列2组和HIF-1α干扰序列3组细胞HIF-1α的干扰效率分别为47.66%、45.79%、62. 展开更多

关键词 缺氧诱导因子 α亚基 血管 通透性 内皮细胞 肌球蛋白轻链激酶 磷酸化肌球蛋白轻链 带状闭合蛋白1

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背俞指针疗法对GERD大鼠胃起搏区MLCK及P_(MLC20)表达水平的影响 被引量：3

8

作者 黄美祯 谭金晶 +7 位作者 宋庆增 刘礼剑 韦金秀 周晓玲 黎丽群 岑前丽 李建锋 谢胜 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1769-1773,共5页

目的:探讨背俞指针疗法对胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)大鼠食管黏膜及胃起搏区组织肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和磷酸化肌球蛋白调节性轻链(phosphorylation 20kD Myosin light chain pho... 目的:探讨背俞指针疗法对胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)大鼠食管黏膜及胃起搏区组织肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和磷酸化肌球蛋白调节性轻链(phosphorylation 20kD Myosin light chain phosphorylation,P_(MLC20))表达的影响。方法:SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、西药组(枸橼酸莫沙必利分散片联合兰索拉唑肠溶片)和指针组,采用HE染色观察大鼠食管中下段组织的病理变化,荧光定量PCR法检测MLCK mRNA表达,免疫组化法检测MLCK、P_(MLC20)蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组食管鳞状上皮基底细胞中度增生,基底细胞层增厚,固有层乳头延长,固有层内炎细胞浸润,细胞间隙增宽;与模型组比较,指针组和西药组食管黏膜结构基本恢复正常。模型组MLCK mRNA、蛋白及P_(MLC20)表达均明显低于空白组(P<0.05),指针组MLCK mRNA、蛋白及P_(MLC20)表达均明显高于模型组(P<0.05或P<0.01),且指针组MLCK mRNA表达水平明显高于西药组(P<0.05),但MLCK蛋白表达水平明显低于西药组(P<0.05)。结论:GERD的发病与胃起搏区组织的MLCK mRNA、蛋白及P_(MLC20)表达降低有关,背俞指针疗法治疗GERD疗效确切,其机制可能与其上调MLCK mRNA、蛋白及P_(MLC20)表达有关。 展开更多

关键词 背俞指针疗法 胃食管反流病 肌球蛋白轻链激酶 磷酸化肌球蛋白调节性轻链

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磷酸化肌球蛋白轻链及其激酶在耐药颞叶癫癎患者脑组织中的表达 被引量：1

9

作者 李劲梅 何梅 +7 位作者 曾艳 王学峰 肖飞 林涛 朱丹 郭强 卢涌 李红卫 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期529-532,共4页

目的探讨耐药性癫癎颞叶和海马脑组织中磷酸化肌球蛋白轻链(phosphorylation of myosin light chain,P-MLC)及其激酶(myosin light chain kinase,MLCK)的表达在癫癎芽生形成中的作用。方法免疫组化检测32例耐药性颞叶癫癎中P-MLC及其激... 目的探讨耐药性癫癎颞叶和海马脑组织中磷酸化肌球蛋白轻链(phosphorylation of myosin light chain,P-MLC)及其激酶(myosin light chain kinase,MLCK)的表达在癫癎芽生形成中的作用。方法免疫组化检测32例耐药性颞叶癫癎中P-MLC及其激酶MLCK的蛋白质表达水平,并与对照组比较。结果P-MLC免疫组化结果显示,耐药性颞叶癫癎组颞叶光密度值(0.35±0.13)高于对照组(0.19±0.027,P<0.05);耐药组海马光密度值(0.41±0.02)高于对照组(0.10±0.06,P<0.05)。免疫组化结果显示耐药组的MLCK表达水平在颞叶组织和海马组织中较对照组无统计学差异(P>0.05)。结论P-MLC及其激酶MLCK的功能与苔藓纤维芽生关系密切,P-MLC蛋白质产物在耐药性癫中明显升高,但其磷酸化激酶MLCK的表达并不升高,提示MLCK和去磷酸化酶间动态平衡被打破是P-MLC升高的原因,而P-MLC的升高可能在苔藓纤维芽生的形成中发挥重要作用。 展开更多

关键词 磷酸化肌球蛋白轻链 肌球蛋白轻链激酶 苔藓纤维 癫癎耐药

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磷酸化肌球蛋白轻链在大鼠非酒精性脂肪性肝纤维化中的表达 被引量：1

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作者 路燕 宋育林 +1 位作者 季巍巍 许建明 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第4期370-374,共5页

目的探讨运用高脂饮食联合小剂量四氯化碳(CCl4)复制大鼠肝纤维化模型的特点,以及磷酸化肌球蛋白轻链[P-MLC(Thr18/Ser19)]在该纤维化模型中的作用。方法 70只SD大鼠随机分为正常对照组(N)、CCl4组(M1)和高脂饮食联合小剂量CCl4组(M2)。... 目的探讨运用高脂饮食联合小剂量四氯化碳(CCl4)复制大鼠肝纤维化模型的特点,以及磷酸化肌球蛋白轻链[P-MLC(Thr18/Ser19)]在该纤维化模型中的作用。方法 70只SD大鼠随机分为正常对照组(N)、CCl4组(M1)和高脂饮食联合小剂量CCl4组(M2)。N组皮下注射花生油3 ml/kg,2次/周;M1组采用400 ml/L CCl4花生油混合液,3 ml/kg,2次/周皮下注射;M2组采用高脂饮食联合小剂量CCl4造模,其CCl4用量2 ml/kg,浓度和频次同M1组。造模后8周末、10周末分批处死,检测肝功能、血脂、光镜观察大鼠肝脏脂肪变性及肝纤维化程度。免疫组化法检测肝脏P-MLC的表达。结果与N组比较,8周和10周末,M1组血浆球蛋白(GLO)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,P-MLC的表达及肝脂肪变性,纤维化程度均升高,但白球比(A/G)下降。与M1组比较,8周末,M2组ALT、AST下降,但脂肪变性增强;10周末,M2组白蛋白(ALB)、A/G下降,而ALT、AST上升明显;8周和10周末M2组P-MLC的表达及肝纤维化程度均强于M1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高脂饮食联合小剂量CCl4皮下注射复制大鼠肝纤维化模型,具有造模时间短,成功率高的优点。P-MLC的表达随着肝纤维化的进展而增加,P-MLC在非酒精性脂肪性肝纤维化中起着一定的作用。 展开更多

关键词 肝纤维化 模型 大鼠 高脂饮食 四氯化碳 磷酸化肌球蛋白轻链

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法舒地尔对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺后突触损伤的影响 被引量：1

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作者 张伟 张海飞 +7 位作者 马杰 赵静 柴智 刘建春 宋丽娟 姜维佳 肖保国 马存根 《神经损伤与功能重建》 2017年第2期99-102,共4页

目的:探讨法舒地尔(Fasudil)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)氧糖剥夺(OGD)后突触损伤的影响。方法:培养SH-SY5Y细胞,分为空白对照组、OGD组、OGD+法舒地尔组,各3皿。相差光学显微镜下观察细胞突触损伤及修复的细胞形态;Western-Blot检测... 目的:探讨法舒地尔(Fasudil)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)氧糖剥夺(OGD)后突触损伤的影响。方法:培养SH-SY5Y细胞,分为空白对照组、OGD组、OGD+法舒地尔组,各3皿。相差光学显微镜下观察细胞突触损伤及修复的细胞形态;Western-Blot检测ROCKⅡ、磷酸化肌球蛋白磷酸酶(p-MYPT1)、突触后致密物-95(PSD-95)、突触素(Synaptophysin)等蛋白的表达情况。结果:形态学显示法舒地尔可有效修复OGD诱导的神经突触损伤。OGD组ROCKⅡ及p-MYPT1的表达明显高于空白对照组(P<0.05),突触素及PSD-95的表达明显低于空白对照组(P<0.01)。OGD+法舒地尔组ROCKⅡ及p-MYPT1表达水平低于OGD组(P<0.05),而与对照组差异无统计学意义(P>0.05);突触素和PSD-95表达水平高于OGD组(P<0.01);PSD-95表达水平高于空白对照组(P<0.05),突触素的表达与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05),结论:法舒地尔可有效修复OGD诱导的神经突触损伤,增加PSD-95、突触素的表达,抑制ROCKⅡ及p-MYPT1的表达。 展开更多

关键词 法舒地尔 SH-SY5Y细胞 氧糖剥夺 ROCKⅡ 磷酸化肌球蛋白磷酸酶 突触后致密物-95 突触素

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细菌脂多糖诱导人肺动脉内皮细胞表达P-MLCK 被引量：1

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作者 林闽加 白建文 +1 位作者 李锦师 许淑敏 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期385-387,共3页

目的探讨细菌脂多糖(LPS)对人肺动脉内皮细胞(HPAEC)表达磷酸化肌球蛋白轻链激酶(phosphorylated myosin lightchain kinase,P-MLCK)的诱导作用。方法体外培养HPAEC,分别给予生理盐水和2μg/mL LPS孵育1 h,经免疫荧光显微镜和Western bl... 目的探讨细菌脂多糖(LPS)对人肺动脉内皮细胞(HPAEC)表达磷酸化肌球蛋白轻链激酶(phosphorylated myosin lightchain kinase,P-MLCK)的诱导作用。方法体外培养HPAEC,分别给予生理盐水和2μg/mL LPS孵育1 h,经免疫荧光显微镜和Western blotting检测P-MLCK。结果与生理盐水组比较,LPS刺激HPAEC后较生理盐水组细胞数量减少,细胞形态无明显改变。HPAEC在LPS刺激30、60 min后,P-MLCK表达由0.41±0.05分别增加至0.82±0.43和1.56±0.07(P<0.05,P<0.01),同时LPS 30 min组和60 min组比较有显著性差异(P<0.05);LPS刺激60 min后P-MLCK免疫反应细胞由1.25±2.1增加至16.4±4.8(P<0.01)。结论P-MLCK可能与LPS诱导的急性肺损伤所致的内皮细胞屏障功能障碍有关。 展开更多

关键词 人肺动脉内皮细胞 细菌脂多糖 磷酸化肌球蛋白轻链激酶

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当归芍药散含药血清对ET-1诱导的HSC-T6细胞内p-MLCⅡ,MLCⅡ蛋白表达的影响

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作者 蒋沙莎 潘永福 +3 位作者 杨沫 王运来 尹丹丹 许钒 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期14-19,共6页

目的:探究内皮素-1(endothelin-1,ET-1)对大鼠肝星状细胞HSC-T6内磷酸化肌球蛋白轻链Ⅱ(phosphorylated myosin light chainⅡ,p-MLCⅡ),肌球蛋白轻链Ⅱ(myosin light chainⅡ,MLCⅡ)蛋白表达的影响及当归芍药散(Danggui Shaoyao San)... 目的:探究内皮素-1(endothelin-1,ET-1)对大鼠肝星状细胞HSC-T6内磷酸化肌球蛋白轻链Ⅱ(phosphorylated myosin light chainⅡ,p-MLCⅡ),肌球蛋白轻链Ⅱ(myosin light chainⅡ,MLCⅡ)蛋白表达的影响及当归芍药散(Danggui Shaoyao San)含药血清对其的干预作用。方法:将HSC-T6细胞种板后,各组每孔加入DMEM和终体积分数分别为2. 5%,5%,10%,15%,20%的空白大鼠血清,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定HSC-T6细胞的活力,筛选出适合的大鼠血清浓度范围;将细胞分为空白血清组(5%,10%,15%)和当归芍药散含药血清组(5%,10%,15%),酶联免疫吸附测定(ELISA)检测基础状态下细胞培养上清液中ET-1的含量;细胞分为空白血清组(10%),当归芍药散含药血清低、中、高剂量组(5%,10%,15%),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测基础状态下细胞培养上清液中ET-1 mRNA的水平;将细胞分为空白血清组(10%),模型组(10%),当归芍药散含药血清低、中、高剂量组(5%,10%,15%),Y-27632抑制剂组(100μmol·L^-1),除空白血清组外,其余各组均加入10 nmol·L^-1ET-1诱导HSC-T6细胞,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ET-1诱导的HSC-T6细胞中p-MLCⅡ,MLCⅡ蛋白表达。结果:选用血清浓度为5%,10%,15%作为含药血清浓度。与空白血清组比较,当归芍药散含药血清组明显降低基础状态下ET-1含量,ET-1 mRNA相对含量(P <0. 05,P <0. 01)。与空白血清组比较,模型组细胞内p-MLCⅡ,MLCⅡ蛋白表达水平均显著升高(P <0. 01);与模型组比较,当归芍药散含药血清各剂量组及Y-27632抑制剂组均可明显下调p-MLCⅡ,MLCⅡ蛋白表达(P <0. 05,P <0. 01)。结论:当归芍药散含药血清可能通过下调ET-1的含量,抑制ET-1的自分泌,从而下调p-MLCⅡ,MLCⅡ蛋白表达。 展开更多

关键词 当归芍药散 含药血清 HSC-T6细胞 内皮素-1(ET-1) 磷酸化肌球蛋白轻链Ⅱ(p-MLCⅡ)

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