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磷脂酶A_1用于苹果籽油酶法脱胶工艺的研究 被引量:4
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作者 王志远 李晓 慕鸿雁 《粮食与油脂》 北大核心 2016年第6期40-43,共4页
以溶剂浸提法制取的富士苹果籽油为原料,探讨了磷脂酶A_1在苹果籽油脱胶中的应用。设计单因素试验,探讨了加酶量、脱胶时间、脱胶温度、pH以及含水量对苹果籽油脱胶效果的影响;并通过正交试验进行了磷脂酶A_1用于苹果籽油脱胶的优化。... 以溶剂浸提法制取的富士苹果籽油为原料,探讨了磷脂酶A_1在苹果籽油脱胶中的应用。设计单因素试验,探讨了加酶量、脱胶时间、脱胶温度、pH以及含水量对苹果籽油脱胶效果的影响;并通过正交试验进行了磷脂酶A_1用于苹果籽油脱胶的优化。结果表明:苹果籽油理化指标符合一般植物油的标准;磷脂酶A_1用于苹果籽油脱胶,在加酶量45 mg/kg、脱胶时间3.5 h、脱胶温度50℃条件下,脱胶效果最佳,最终含磷量降低至7.8 mg/kg,达到植物油脱胶标准。 展开更多
关键词 苹果籽 磷脂酶A_1 脱胶 含磷量
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高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A_1的研究 被引量:3
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作者 于殿宇 马莺 +2 位作者 刘晶 张佳宁 李琳 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期188-190,205,共4页
研究了高碘酸钠氧化法在纤维素滤纸膜载体上固定化磷脂酶A_1的最佳条件。结果表明,以固定化酶活力为指标,当高碘酸钠浓度为0.15mol/L,活化80min,与浓度为0.05g/mL酶的磷酸盐缓冲溶液(pH为5.8)于戊二醛浓度0.4%、温度4℃交联4h,获得的固... 研究了高碘酸钠氧化法在纤维素滤纸膜载体上固定化磷脂酶A_1的最佳条件。结果表明,以固定化酶活力为指标,当高碘酸钠浓度为0.15mol/L,活化80min,与浓度为0.05g/mL酶的磷酸盐缓冲溶液(pH为5.8)于戊二醛浓度0.4%、温度4℃交联4h,获得的固定化磷脂酶A_1酶活最高为4.8U/cm^2。固定化酶膜的酶学性质为:最适温度35℃;最适pH为9.0。与游离酶相比,pH向碱性偏移1.0;经7次重复使用后,固定化酶膜活力为原酶活的65%以上。SEM结果显示,经高碘酸钠氧化后的纤维素滤纸膜能较好地固定磷脂酶A_1。 展开更多
关键词 磷脂酶A_1 高碘酸钠氧化法 固定化 纤维素滤纸膜
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磷脂酶A_1(Lecitase Ultra)的氨基酸序列分析及催化机理 被引量:2
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作者 张康逸 张丽霞 +2 位作者 王兴国 屈凌波 刘元法 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第2期70-74,80,共6页
研究磷脂酶A_1(Lecitase Ultra)的纯化、酶蛋白的氨基酸序列及活性中心的氨基酸残基组成,并推导水解磷脂酰胆碱(Pc)的机理。超滤法和RP-HPLC纯化酶液,除去了山梨醇和山梨醇盐,纯度97.7%;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI SYNAPT ... 研究磷脂酶A_1(Lecitase Ultra)的纯化、酶蛋白的氨基酸序列及活性中心的氨基酸残基组成,并推导水解磷脂酰胆碱(Pc)的机理。超滤法和RP-HPLC纯化酶液,除去了山梨醇和山梨醇盐,纯度97.7%;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI SYNAPT Q-TOF MS)和二级质谱(MS/MS)对酶蛋白进行分析,确定了氨基酸序列组成;数据库(http://www.matrixscience.com)比对,发现氨基酸序列信息与棉状嗜热丝孢菌(T.lanuginosus)脂肪酶和尖孢镰刀菌(F.oxysporum)脂肪酶高度吻合,序列中1-284是T.lanuginosus脂肪酶的氨基酸序列,序列中285-339是F.oxysporum脂肪酶的氨基酸序列;Lecitase Ultra和Sn-1-C16:0/sn-2-C2:0-PC的分子对接证实了酶活中心的三联体"Ser-His-Asp"催化机理。 展开更多
关键词 磷脂酶A_1 氨基酸序列 二级质谱 催化机理
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酶催化大豆油脱胶最佳工艺条件的研究
4
作者 潘丽 林敏刚 +1 位作者 谷克仁 常振刚 《农业机械》 2012年第16期64-66,共3页
以磷脂酶A1为催化剂,探讨了酶催化大豆油脱胶的最佳工艺条件。通过单因素及正交试验,得到最佳工艺条件为:反应温度48℃、反应时间180min、pH值4.8、加酶量30mg/kg、加水量2.0%和搅拌速度120r/min,可使大豆油含磷量降到5.4mg/kg。
关键词 磷脂酶A_1 大豆油 脱胶
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DEPC、DMPE和DPPG合成磷脂降解杂质的初步研究
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作者 张程程 刘翠平 +1 位作者 厉孝广 潘红娟 《中国医药工业杂志》 EI CSCD 北大核心 2023年第11期1652-1659,共8页
分别建立了HPLC-电雾式检测器(CAD)法分析二芥酰磷脂酰胆碱(DEPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)和二棕榈酰磷脂酰甘油(DPPG)中的有关物质,监测这3种合成磷脂的降解杂质。采用LC-MS法、专一性磷脂酶A_(1)酶解试验结合ACD/Labs软件(Vers... 分别建立了HPLC-电雾式检测器(CAD)法分析二芥酰磷脂酰胆碱(DEPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)和二棕榈酰磷脂酰甘油(DPPG)中的有关物质,监测这3种合成磷脂的降解杂质。采用LC-MS法、专一性磷脂酶A_(1)酶解试验结合ACD/Labs软件(Version 2021)辅助,鉴定3种合成磷脂主要的降解杂质结构,发现上述3种磷脂降解产生了Sn-1-溶血磷脂和Sn-2-溶血磷脂及脂肪酸等共性杂质,并确定了Sn-1-溶血磷脂为优势降解物,为合成磷脂类药用辅料的质量控制和制剂工艺研究提供了参考。 展开更多
关键词 二芥酰磷脂酰胆碱 二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺 二棕榈酰磷脂酰甘油 高效液相色谱法 降解杂质 溶血磷脂 磷脂酶A_(1)
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聚多巴胺纳米粒子固定化磷脂酶A_(1)及其在山茶油脱胶中的应用
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作者 冯芳芳 吴翠玲 侯志刚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期135-142,共8页
利用多巴胺氧化自聚合制备了聚多巴胺纳米粒子(polydopamine nanoparticles,PDANPs),并以其为载体对Lecitase Ultra进行固定化。结果表明,在酶添加量为0.15 mL/mg,固定化时间为9 h的固定化条件下,得到的酶活力回收率和蛋白固载率分别为7... 利用多巴胺氧化自聚合制备了聚多巴胺纳米粒子(polydopamine nanoparticles,PDANPs),并以其为载体对Lecitase Ultra进行固定化。结果表明,在酶添加量为0.15 mL/mg,固定化时间为9 h的固定化条件下,得到的酶活力回收率和蛋白固载率分别为71.2%和78.2%。对PDANPs和制备的固定化酶(PDANPs@Lecitase Ultra)进行透射电镜、傅里叶变换红外光谱和X射线光电子能谱分析,表明成功制备了纳米尺寸的PDANPs,且Lecitase Ultra已成功固定在PDANPs上。与游离的Lecitase Ultra相比,PDANPs@Lecitase Ultra的最适pH升高了1个单位,最适温度升高了5℃,热稳定性和贮藏稳定性显著增强。将PDANPs@Lecitase Ultra用于山茶油脱胶,在较优条件下脱胶油含磷量可降至5 mg/kg以内,重复脱胶10个批次后,仍能保留57.6%的活性,表明PDANPs@Lecitase Ultra有良好的油脂脱胶工业应用前景。 展开更多
关键词 聚多巴胺纳米粒子 磷脂酶A_(1) 固定化 法脱胶 山茶油
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黏质沙雷氏菌磷脂酶A_(1)辅助蛋白PlaS对宿主菌细胞膜的影响及亚细胞定位 被引量:1
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作者 周杰 吴政浩 +5 位作者 李闯 刘庆涛 张会敏 王洲 刘艳 薛正莲 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第24期138-144,共7页
为证明黏质沙雷氏菌磷脂酶A_(1)辅助蛋白PlaS在大肠杆菌BL21(DE3)异源表达中对细胞膜有明显的破坏作用,探究了细胞膜特性的变化,并采用气相色谱-质谱联用技术鉴定了其对细胞膜脂肪酸的影响,通过激光共聚焦显微镜验证了亚细胞水平定位。... 为证明黏质沙雷氏菌磷脂酶A_(1)辅助蛋白PlaS在大肠杆菌BL21(DE3)异源表达中对细胞膜有明显的破坏作用,探究了细胞膜特性的变化,并采用气相色谱-质谱联用技术鉴定了其对细胞膜脂肪酸的影响,通过激光共聚焦显微镜验证了亚细胞水平定位。结果显示:PlaS异源表达后,宿主菌内外膜通透性明显提高、细胞膜流动性与表面疏水性严重下降,表明细胞膜功能已经丧失;脂肪酸饱和程度下降,即直链饱和脂肪酸和反式单不饱和脂肪酸相对含量降低,以及顺式单不饱和脂肪酸相对含量增加、膜刚性增强、流动性减少,细胞膜组分与结构表现异常导致细胞易死亡。激光共聚焦显微镜显示,在宿主细胞膜上发现明显荧光。综上所述,PlaS属于膜蛋白,在大肠杆菌异源表达中会破坏宿主菌细胞膜的结构与功能,表现生长抑制现象,这将为进一步PlaS抑制机理的研究与其功能开发提供一定支持。 展开更多
关键词 磷脂酶A_(1)辅助蛋白PlaS 细胞膜 脂肪酸 亚细胞定位
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