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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨炙甘草汤抗大鼠MIRI致室速和室颤的作用机制 被引量：18
1
作者 郑旭颖 麻春杰 +8 位作者 陈永真 任存霞 牛仁秀 莲花 陈琨 谭晓慧 闫清支 张星 吴昊 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期1-8,共8页
目的:通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路,探讨炙甘草汤干预心肌缺血再灌注损伤(MIRI)致心律失常(室速和室颤)的作用及其机制。方法:将72只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,炙甘草汤低、... 目的:通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路,探讨炙甘草汤干预心肌缺血再灌注损伤(MIRI)致心律失常(室速和室颤)的作用及其机制。方法:将72只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,炙甘草汤低、中、高剂量组(11.43,22.86,45.72 g·kg^-1),稳心颗粒组(2.43 g·kg^-1),连续给药干预10 d。末次给药2 h,采用结扎冠状动脉左前降支法制备大鼠MIRI模型,记录心电图的变化。造模成功后采集血液及心脏组织,检测血清中肌酸肌酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH)及丙氨酸氨基转移酶(AST)的含量;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌肌钙蛋白(CtnI)的含量;免疫组化法检测心肌PI3K,Akt,mTOR的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC-3),自噬标志物Beclin1和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达及磷酸化p-PI3K,p-Akt,p-mTOR的水平。结果:模型组大鼠100%发生室速,91.67%发生室颤;与假手术组比较,模型组大鼠血清CK,LDH,AST以及CtnI的含量显著升高(P<0.01),心肌组织中PI3K,Akt,mTOR表达显著升高(P<0.01),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与Beclin1的相对表达量显著升高(P<0.01),p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR显著降低(P<0.01);与模型组比较,炙甘草汤高剂量组室速、室颤发生率显著降低(P<0.01),较其他给药组持续时间短(P<0.01);炙甘草汤高剂量组CK,LDH,AST水平及CtnI含量显著降低(P<0.01);炙甘草汤给药组的PI3K,Akt,mTOR的表达随剂量的增加而显著降低(P<0.01);LC-3,Beclin1的表达随炙甘草汤各剂量组的增加有不同程度地下降(P<0.01),而PI3K/Akt/mTOR相关蛋白表达比值明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:炙甘草汤预处理能使异常升高的心肌酶CK,LDH,AST,CtnI降低,抑制细胞的过度自噬,上调PI3K,Akt和mTOR的表达,说明炙甘草汤抗MIRI致心律失常的作用可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 炙甘草汤 心肌缺血再灌注损伤 心律失常 磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶b(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路
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基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨补肾通络方对血管性痴呆大鼠海马神经元突触可塑性的影响 被引量：15
2
作者 张杰 周媛 +3 位作者 马云枝 赵敏 代景妍 李思敏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期25-31,共7页
目的:探讨补肾通络方对血管性痴呆(VD)模型大鼠海马神经元突触可塑性的影响及其作用机制研究。方法:选用SPF级SD大鼠,采用双侧颈总动脉分次结扎法,建立VD大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机分为模型组,补肾通络方高、中、低剂量组,胰岛... 目的:探讨补肾通络方对血管性痴呆(VD)模型大鼠海马神经元突触可塑性的影响及其作用机制研究。方法:选用SPF级SD大鼠,采用双侧颈总动脉分次结扎法,建立VD大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机分为模型组,补肾通络方高、中、低剂量组,胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组,并设假手术对照组,分别给予对应的药物灌胃,1次/d,连续4周;其中补肾通络方高、中、低剂量组的灌胃剂量分别为3,1.5,0.75 g·kg^(-1),IGF-1组灌胃剂量20μg·kg^(-1),模型组和假手术组给予同体积的生理盐水灌胃。末次灌胃结束后,采用Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力,原位末端标记法(TUNEL)检测海马神经元细胞凋亡情况,高尔基染色法(Golgi)观察海马神经元突触形态及树突棘数量变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR),突触素(SYP)及淀粉样前体蛋白(APP)蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期、游泳路程明显延长,撤除平台后跨越原平台次数明显减少(P<0.05),细胞凋亡数目明显增多(P<0.05);树突棘数量明显减少(P<0.05);PI3K,Akt,mTOR,SYP蛋白表达明显减少,APP表达明显增多(P<0.05);与模型组比较,补肾通络方组,IGF-1组逃避潜伏期、游泳路程明显缩短,撤除平台后跨越原平台次数明显增多(P<0.05),细胞凋亡数目明显减少(P<0.05);PI3K,Akt,mTOR,SYP蛋白表达明显增多,APP表达明显减少(P<0.05);与IGF-1组比较,在大鼠逃避潜伏期、游泳路程、撤除平台后跨越原平台次数,细胞凋亡数目,树突棘数量,PI3K,Akt,mTOR,SYP,APP蛋白表达等,补肾通络方高剂量组差异均无统计学意义;补肾通络方中、低剂量组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾通络方能够改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR自噬通路,改善海马神经元细胞突触可塑性有关。 展开更多
关键词 血管性痴呆 补肾通络方 磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶b(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路 突触可塑性
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肝豆扶木汤对CuCl_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤的保护作用和机制 被引量：9
3
作者 唐露露 张静 +5 位作者 魏涛华 江海林 董婷 杨悦 钱南南 杨文明 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期48-56,共9页
目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨肝豆扶木汤(GDFMD)对氯化铜(CuCl2)诱导的人肝癌细胞(HepG2)氧化损伤的保护作用。方法:HepG2细胞分为空白组,模型组,GDFMD组,PI3K/mTOR抑制剂... 目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨肝豆扶木汤(GDFMD)对氯化铜(CuCl2)诱导的人肝癌细胞(HepG2)氧化损伤的保护作用。方法:HepG2细胞分为空白组,模型组,GDFMD组,PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235(10 nmol·L-1)组,GDFMD+NVP-BEZ235(10 nmol·L-1)组。采用200μmol·L-1CuCl2构建模型组铜负荷HepG2细胞,酶联免疫吸附测定法(ELISA)观察细胞超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;免疫荧光观察细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K,磷酸化Akt(p-Akt)/Akt,磷酸化mTOR(p-mTOR)/mTOR,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,p62表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞PI3K,Akt,mTOR,Beclin-1,LC3Ⅰ,LC3Ⅱ,p62 mRNA表达。结果:与空白组比较,模型组细胞SOD,GSH-Px活性下降,MDA含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,10%GDFMD含药血清组SOD,GSH-Px活性升高,MDA含量下降(P<0.05,P<0.01);NVP-BEZ235组GSH-Px活性下降,MDA含量升高(P<0.05)。与空白组比较,模型组p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR,p62表达水平显著降低,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,10%GDFMD组p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR,p62表达水平升高,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平下降(P<0.05,P<0.01);NVP-BEZ235组p-PI3K/PI3K,p-mTOR/mTOR表达水平下调,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平升高(P<0.05,P<0.01)。与10%GDFMD组比较,10%GDFMD+NVP-BEZ235组p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR表达水平下降,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平升高(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组LC3Ⅱ蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,10%GDFMD组LC3Ⅱ蛋白表达降低,与10%GDFMD组比较,10%GDFMD+NVP-BEZ235组LC3Ⅱ蛋白表达升高。各组PI3K,Akt,mTOR mRNA相对表达量差异无统计学意义,与空白组比较,模型组p62 mRNA相对表达量显著降低,Beclin-1,LC3Ⅰ,LC3ⅡmRNA相对� 展开更多
关键词 肝豆扶木汤 肝豆状核变性 人肝癌细胞 自噬 磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶b(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路
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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬探讨当归四逆汤对痛风性关节炎大鼠的影响 被引量：4
4
作者 路荣荣 曹越 +2 位作者 雷晓蕾 李茹超 刘必旺 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期78-84,共7页
目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路,探讨当归四逆汤对痛风性关节炎(GA)大鼠自噬水平的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.3 mg·kg^(-1))和当... 目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路,探讨当归四逆汤对痛风性关节炎(GA)大鼠自噬水平的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.3 mg·kg^(-1))和当归四逆汤低、中、高剂量组(6.54、13.08、26.16 g·kg^(-1)),每组10只,并分别给予相应药物灌胃,正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续7 d。于第5天给药1 h后向各组(正常组除外)大鼠右侧踝关节注射尿酸钠混悬液(50 g·L^(-1))建立GA模型,正常组注射等体积的无菌生理盐水。观察大鼠踝关节肿胀情况;测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β水平;观察踝关节病理形态变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜PI3K、磷酸化(p)-PI3K、Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)、自噬效应蛋白(Beclin-1)、泛素结合蛋白(p62)表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测PI3K、Akt、m TOR、LC3、Beclin-1、p62 m RNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀指数显著升高(P<0.01),血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P<0.01),踝关节滑膜组织可见明显炎性细胞浸润和纤维组织增生,滑膜组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、p62蛋白表达显著升高(P<0.01),PI3K、Akt、m TOR、p62 m RNA表达显著升高(P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白和LC3、Beclin-1 m RNA表达降低(P<0.01)。与模型组比较,当归四逆汤中、高剂量组大鼠关节肿胀明显减轻(P<0.05);血清中TNF-α、IL-6、IL-1β表达量显著明显降低(P<0.05);踝关节滑膜组织未见明显炎性细胞浸润,纤维组织增生减轻;滑膜组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、p62蛋白表达量均明显降低(P<0.05),PI3K、Akt、m TOR、p62 m RNA表达量亦明显降低(P<0.05),而LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白和LC3、Beclin-1 m RNA表达量均明显上升(P 展开更多
关键词 当归四逆汤 痛风性关节炎 磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶b(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路 自噬 滑膜组织
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栀子苷调节PI3K/AKT/mTOR信号通路在动脉粥样硬化形成过程中对Th17/Treg功能的影响
5
作者 吴佳 吴进 +1 位作者 肖凯 凌超 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第5期817-822,共6页
目的:观察栀子苷对载脂蛋白E缺乏(ApoE^(-/-))小鼠Th17/调节性T(Treg)细胞失衡的影响及其作用机制。方法:将50只纯合子ApoE^(-/-)雌性小鼠随机分为对照组、模型组和栀子苷低剂量组、栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组。对照组小鼠喂养普... 目的:观察栀子苷对载脂蛋白E缺乏(ApoE^(-/-))小鼠Th17/调节性T(Treg)细胞失衡的影响及其作用机制。方法:将50只纯合子ApoE^(-/-)雌性小鼠随机分为对照组、模型组和栀子苷低剂量组、栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组。对照组小鼠喂养普通饲料,模型组和栀子苷组小鼠喂养高脂饲料。从第8周开始,栀子苷各剂量组每日灌胃栀子苷(25、50、100 mg/kg),连续8周。试验结束时,采用油红O染色评估主动脉及其根部动脉粥样硬化(AS)病变面积比。采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析主动脉组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-17A和IL-10 mRNA表达;采用流式细胞仪分析脾脏中Th17和Treg细胞百分比;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测主动脉组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达。结果:油红O染色病变显示,栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组病变百分比低于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平升高(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平降低(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠脾脏中Th17细胞百分比升高,Treg细胞百分比降低(P<0.05)。栀子苷处理恢复了AS小鼠Th17和Treg细胞的平衡。栀子苷抑制PI3K的表达及AKT和mTOR的磷酸化,MHY1485(mTOR活化剂)减弱了栀子苷对T细胞分化的影响。结论:栀子苷抗AS作用机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号引起的Treg细胞增多和Th17细胞减少有关。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 栀子苷 载脂蛋白E缺乏 Th17/调节性T细胞 磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶b(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路 小鼠 实验研究
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敦煌方大补肺汤联合顺铂对Lewis肺腺癌荷瘤小鼠的干预作用及分子机制
6
作者 肖孟勇 骆亚莉 +4 位作者 齐晓风 罗晶 马琳娜 阮琳峰 连妮妮 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第17期95-104,共10页
目的:探讨敦煌方大补肺汤联合顺铂对Lewis肺腺癌荷瘤小鼠的干预作用及相关分子机制。方法:C57BL/6J小鼠50只,随机挑选10只作为空白组(不造模),40只皮下接种Lewis细胞,复制Lewis肺腺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组(等量生理盐水)、顺铂组... 目的:探讨敦煌方大补肺汤联合顺铂对Lewis肺腺癌荷瘤小鼠的干预作用及相关分子机制。方法:C57BL/6J小鼠50只,随机挑选10只作为空白组(不造模),40只皮下接种Lewis细胞,复制Lewis肺腺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组(等量生理盐水)、顺铂组(5 mg·kg^(-1))、大补肺汤组(14.35 g·kg^(-1)·d^(-1))、大补肺汤联合顺铂组(大补肺汤14.35 g·kg^(-1)·d^(-1)+顺铂5 mg·kg^(-1)),每组10只,连续治疗14 d。观察小鼠一般状况,记录体质量变化,计算抑瘤率、脾指数、胸腺指数,血常规检测外周血白细胞(WBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(HGB),流式细胞术检测脾脏CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)调节性T细胞(Treg)、自然杀伤(NK)细胞表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定肿瘤组织内磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白及mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组体质量降低(P<0.05),脾指数、胸腺指数明显降低(P<0.05),脾脏中NK细胞百分比明显下降(P<0.05),Treg细胞百分比明显升高(P<0.05),WBC、PLT、HGB数量均明显下降(P<0.05);与模型组比较,大补肺汤组肿瘤生长明显抑制,体质量升高,瘤质量明显降低(P<0.05),NK细胞百分比明显升高(P<0.05),Treg细胞比例明显降低(P<0.05),WBC、PLT、HGB数量明显升高(P<0.05),顺铂组肿瘤生长明显抑制,体质量明显降低(P<0.05),瘤质量明显降低(P<0.05),胸腺指数、脾指数明显降低(P<0.05),Treg细胞百分比明显降低(P<0.05),WBC、PLT、HGB数量明显下降(P<0.05),大补肺汤联合顺铂组肿瘤生长明显抑制,瘤质量明显降低(P<0.05),各给药组肿瘤组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白磷酸化及mRNA水平明显降低(P<0.05);与顺铂组比较,大补肺汤联合顺铂组肿瘤生长明显抑制,瘤质量明显降低(P<0.05),体质量明显升高(P<0.05),脾指数、胸腺指数明显升高(P<0.05),NK细胞明显升� 展开更多
关键词 大补肺汤 顺铂 Lewis肺腺癌 免疫细胞 磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶b(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路
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莪连颗粒对胃癌大鼠胃组织自噬及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响 被引量：9
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作者 易志荣 林倚莉 +4 位作者 王煜姣 贾庆玲 张钰琴 谢天一 凌江红 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第22期84-91,共8页
目的:探讨莪连颗粒对胃癌大鼠胃组织自噬及磷酯酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、莪连颗粒组和胃复春组。除正常组常规饲养外,模型组、莪... 目的:探讨莪连颗粒对胃癌大鼠胃组织自噬及磷酯酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、莪连颗粒组和胃复春组。除正常组常规饲养外,模型组、莪连颗粒组及胃复春组使用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)综合法诱导构建胃癌大鼠模型,并分别予以生理盐水、莪连颗粒水溶液(3.240 g·kg(-1))及胃复春水溶液(0.390 g·kg(-1))灌胃,连续48周。剖腹取胃,肉眼观察胃大体改变,采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃组织病理学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠胃组织微管相关蛋白1轻链3β(LC3B),Beclin1,p62,PI3K,Akt,mTOR mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃胀大,胃壁变薄,胃黏膜色泽苍白,皱襞萎缩浅平,走行紊乱,可见结节及赘生物;与模型组比较,莪连颗粒组大鼠胃胀大减轻,胃壁变薄改善,胃黏膜色暗,皱襞减少,走行尚规整,偶见细颗粒状结节。HE染色显示,与正常组比较,模型组大鼠胃组织腺体排列拥挤紊乱,形态多样,细胞形态不一,胞浆嗜碱性,核大深染不规则,可见核分裂像,黏膜肌层浸润破坏;与模型组比较,莪连颗粒组大鼠胃组织腺体排列尚规整,少部分可见轻度异型细胞。与正常组比较,模型组大鼠胃组织LC3B,Beclin1 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05),PI3K,p62,Akt及mTOR mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,莪连颗粒组胃组织LC3B,Beclin1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),PI3K mRNA及p62,Akt,mTOR mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:莪连颗粒可改善胃癌大鼠胃组织细胞异型性,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路促进自噬相关。 展开更多
关键词 莪连颗粒 胃癌 自噬 磷脂酰肌醇-3激酶(pi3k)/蛋白激酶b(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路
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壮医药线点灸通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调节MMP对膝骨性关节炎大鼠的治疗作用
8
作者 张燕珍 梁超 +1 位作者 鲍春龄 陈少萍 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期111-115,共5页
目的通过观察壮医药线点灸对膝骨性关节炎(KOA)模型大鼠的治疗效果,探讨磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调节基质金属蛋白酶(MMP)影响KOA炎症反应作用机制。方法将60只大鼠随机为对照组、... 目的通过观察壮医药线点灸对膝骨性关节炎(KOA)模型大鼠的治疗效果,探讨磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调节基质金属蛋白酶(MMP)影响KOA炎症反应作用机制。方法将60只大鼠随机为对照组、模型组、药线组,雌雄各一半,每组20只,模型组和药线组膝关节注射木瓜蛋白酶,建立大鼠KOA模型,对照组注射等量生理盐水,药线组进行壮医药线点灸治疗。体外培养大鼠膝骨关节软骨细胞,并分为正常组、实验组和实验+LY组,苏木素-伊红(HE)染色观察各组关节软骨组织形态变化,用免疫蛋白印迹法检测大鼠软骨组织及细胞中磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)、Akt、p-Akt、mTOR和MMP-13蛋白的相对表达量,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测关节液中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量。结果对照组软骨细胞分布均匀,软骨层平整,滑膜结构完整;模型组软骨细胞减少且排列杂乱,软骨层不平整;药线组关节软骨边缘不平整,软骨细胞排列杂乱;药线组软骨细胞增生且分布不均,关节软骨表面不规则欠光滑。3组关节软骨关节液的炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量差异均具有统计学意义(F=159.011,790.594,258.998;均P<0.05)。与模型组比较,对照组和药线组TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著降低(均P<0.05),且与对照组比较,药线组TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著升高(P<0.05)。建模成功后,3组关节软骨组织的PI3K、p-Akt、mTOR和MMP-13蛋白表达水平差异均具有统计学意义(F=200.099,462.172,28.451,583.269;均P<0.05);与模型组比较,对照组和药线组PI3K蛋白、p-Akt蛋白和mTOR蛋白的相对表达量均显著升高(均P<0.05),MMP-13蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05),且与对照组比较,药线组PI3K蛋白、p-Akt蛋白和mTOR蛋白相对表达量均显著降低(均P<0.05),MMP-13蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。3组� 展开更多
关键词 壮医药线点灸 磷脂酰肌醇-3激酶(pi3k)/蛋白激酶b(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路 MMP-13 膝骨性关节炎
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附子汤对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖和miR-155表达的影响 被引量：7
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作者 覃万莉 徐玉洁 +6 位作者 潘真真 李小翚 王振华 宋健平 徐勤 黄新安 李常青 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期29-35,共7页
目的:观察附子汤对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖的影响,研究附子汤对miR-155表达的影响并进一步探讨其抗类风湿性关节炎的作用机制。方法:体外培养MH7A细胞,设空白组、附子汤高剂量组(25 g·L^(-1))、低剂量组(12.5 g·... 目的:观察附子汤对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖的影响,研究附子汤对miR-155表达的影响并进一步探讨其抗类风湿性关节炎的作用机制。方法:体外培养MH7A细胞,设空白组、附子汤高剂量组(25 g·L^(-1))、低剂量组(12.5 g·L^(-1))和硫酸羟氯喹阳性药组(0.00625 g·L^(-1)),采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒法检测细胞增殖,流式细胞术检测MH7A细胞周期的改变;应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测药物处理后miR-155及其下游基因含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶-1(SHIP-1)、蛋白激酶B3(Akt3)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、Akt3和mTOR的蛋白表达。结果:附子汤体外在质量浓度6.25 g·L^(-1)以上时,能明显抑制MH7A增殖,且呈明显的量-效关系和时-效关系。与空白组比较,附子汤高、低剂量组G2/M期细胞比例均明显增加(P<0.05),高剂量组G0/G1期细胞比例明显降低(P<0.05),其细胞周期的阻滞作用呈明显的量效关系。与空白组比较,附子汤高、低剂量组miR-155的表达均明显下调(P<0.05);附子汤高剂量组SHIP1 mRNA表达明显上调、Akt3 mRNA表达明显下调(P<0.05),附子汤高、低剂量组mTOR mRNA表达均明显下调(P<0.05)。与空白组比较,附子汤高、低剂量组的PI3K、Akt3和mTOR的蛋白表达均明显下调(P<0.05)。结论:附子汤对MH7A细胞增殖具有显著的抑制作用,作用机制与下调miR-155的表达,从而促进SHIP-1的表达,抑制其下游PI3K/Akt3/mTOR信号通路的基因表达有关。 展开更多
关键词 附子汤 类风湿性关节炎 MH7A细胞 MIR-155 肌醇5-磷酸酶-1(SHIP-1) 磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶b3(akt3)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路
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丹酚酸A对脂多糖诱导人肾小球系膜细胞凋亡的作用机制研究
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作者 冯静 李莉 《安徽医药》 CAS 2022年第7期1287-1291,I0001,共6页
目的 探究丹酚酸A对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人肾小球系膜细胞凋亡的作用机制。方法 该研究起止时间为2018年5月至2019年5月。购买华拓生物生产的HGMC人肾小球系膜细胞,分为A组、B组、C组、D组、E组五组,A组细胞不添加任何药... 目的 探究丹酚酸A对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人肾小球系膜细胞凋亡的作用机制。方法 该研究起止时间为2018年5月至2019年5月。购买华拓生物生产的HGMC人肾小球系膜细胞,分为A组、B组、C组、D组、E组五组,A组细胞不添加任何药物,B组、C组、D组、E组细胞均加入10 mg/L LPS培养,1 h后C组、D组、E组分别加入低剂量丹酚酸A(10 mg/L)、中剂量丹酚酸A(20 mg/L)、高剂量丹酚酸A(40 mg/L)处理24 h后做后续试验。检测细胞增殖、凋亡、细胞周期分布以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路指标表达量。结果 与A组相比,B组细胞凋亡率、G0/G1期细胞分布率降低,S期、G2/M期细胞分布率升高;与B组相比,C组、D组、E组G0/G1期细胞分布率、细胞凋亡率升高,S期、G2/M期细胞分布率降低;与C组相比,D组、E组细胞凋亡率、G0/G1期细胞分布率升高,S期、G2/M期细胞分布率降低(均P<0.05);与D组相比,E组细胞凋亡率(37.59±4.62)%、G0/G1期细胞分布率(86.95±11.62)%升高,S期、G2/M期细胞分布率分别为(10.23±1.03)%、(4.26±1.03)%降低(P<0.05)。与A组相比,B组、C组、D组、E组细胞增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、胱天蛋白酶-3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达量升高,B细胞淋巴瘤相关X蛋白(Bax)表达量降低(P<0.05);与B组相比,C组、D组、E组细胞增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、caspase-3、Bcl-2表达量降低,Bax表达量升高(P<0.05);与C组相比,D组、E组细胞增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、caspase-3、Bcl-2表达量降低,Bax表达量升高(P<0.05);与D组的(26.12±2.25)%、(0.49±0.28)、(0.87±0.45)、(0.59±0.25)、(0.88±0.12)、(1.25±0.20)、Bax表达量(0.87±0.12)相比,E组细胞12 h增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、caspase-3、Bcl-2表达量分别为(19.02±1.06)%、(0.25±0.11)、(0.32±0.15)、(0.25±0.12)、(0.54±0.12)、(0.42±0.22)降低,Bax表达量(1.59±0.22 展开更多
关键词 丹参 肾小球系膜细胞 细胞凋亡 丹酚酸A 脂多糖 磷脂酰肌醇3激酶(pi3k)/蛋白激酶b(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路
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