PI3K/Akt信号通路在小鼠胚胎神经发育中的作用及机制

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作者 李莘 郭晓兰 +7 位作者 郭金 王秀伟 官臻 梁颖超 于佳璐 朱智强 杨爱云 王建华 《发育医学电子杂志》 2023年第5期321-330,共10页

目的探究磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路对小鼠胚胎神经发育的影响及作用机制,进一步阐明PI3K/Akt信号通路相关胚胎神经发育异常的分子机制。方法... 目的探究磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路对小鼠胚胎神经发育的影响及作用机制,进一步阐明PI3K/Akt信号通路相关胚胎神经发育异常的分子机制。方法实验动物为C57BL/6J小鼠,胚胎第7.5天(embryonic day,E7.5)孕鼠随机分为6组,实验组分别腹腔注射12.5、25、50、75、100 mg/kg的LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂),对照组注射生理盐水。E13.5解剖,观察小鼠胚胎畸形情况。确定最佳造模剂量后,取该组小鼠胚胎神经及脊柱样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞凋亡及音猬因子(sonic hedgehog,Shh)信号通路关键基因的mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测蛋白质表达水平。实验细胞选用小鼠神经干细胞NE-4C细胞系,采用噻唑兰法(methylthiazolyldiphenyl tetrazolium bromide,MTT)检测不同浓度LY294002处理后细胞存活情况;采用原位末端标记(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)实验检测细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期。统计学方法采用单因素方差分析和Dunnett’s t检验。结果动物实验结果显示,LY294002给药组出现神经管畸形(neural tube defect,NTD)表型;50 mg/kg组的NTD发生率80.7%(46/57),均为脊髓脊膜膨出和脊柱裂,选为最佳造模剂量。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,给药无畸形组、脊髓脊膜膨出组及脊柱裂组的细胞凋亡标志物肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene P53,P53)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(cysteinyl aspartate-specific proteinase 3,Caspase3)的相对mRNA表达均上升(P<0.01),磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸-3-激酶催化亚基α基因(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate-3-kinase catalytic subunit alpha,PIK3CA)及Shh信号通路关键基因[平滑蛋白(smoothened,Smo)、神经胶质瘤相关癌基因同源物(glioma-associated oncogene homolog,Gli)1及Gli2]的相� 展开更多

关键词 神经管畸形 小鼠 磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶 音猬因子 信号通路 细胞凋亡

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电项针对全脑缺血VD模型大鼠PI3K/AKT/GSK-3β信号通路的影响 被引量：15

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作者 陈晶 胡新颖 +1 位作者 刘勇 韩鹏 《世界中西医结合杂志》 2018年第2期200-203,288,共5页

目的研究电项针对全脑缺血血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/糖原合成酶激酶-3β(Phosphatidylinositol-3 kinase/serine-threonine kinase/glycogen synthase kinase-3β,P13K/AKT/GS... 目的研究电项针对全脑缺血血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/糖原合成酶激酶-3β(Phosphatidylinositol-3 kinase/serine-threonine kinase/glycogen synthase kinase-3β,P13K/AKT/GSK-3β)信号通路的影响。方法采用四血管阻断方法制备VD模型大鼠,电项针组取双侧风池穴、供血穴,电针30 min/次,1次/d,治疗14d。采用Y迷宫评价大鼠学习记忆能力;荧光定量PCR(RT-PCR)、Western blot法检测大鼠海马组织中磷酸化蛋白激酶B(phosphorylatedproteinkinaseB,p-AKT)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(Phosphorylated GSK-3β,P-GSK-3β)mRNA和p-AKT、p-GSK-3β蛋白的表达。结果与模型组比较,电项针组可显著提高VD大鼠Y迷宫学习与记忆正确次数(P<0.01)。与模型组比较,电项针组大鼠海马组织中p-AKT、p-GSK-3βmRNA和p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达均有不同程度的升高(P<0.01)。结论电项针能够改善VD模型大鼠学习记忆能力,具体机制可能是激活PI3K/AKT/GSK-3β信号通路,发挥抗凋亡作用,起到对缺血海马神经元的保护作用。 展开更多

关键词 电项针 血管性痴呆 全脑缺血 磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/糖原合成酶激酶-3β(Phosphatidylinositol-3 kinase/serine-threonine kinase/glycogen synthase kinase-3β P13K/AKT/GSK

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miR-30a对卵巢癌细胞PTEN/PI3K/AKT/mTOR自噬通路及顺铂耐药性的影响 被引量：8

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作者 彭志霞 贾佳 +1 位作者 于东坡 张桦 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第18期3143-3148,共6页

目的:探究miR-30a对人卵巢癌SKOV3细胞自噬及顺铂耐药性的影响,并初步研究其作用机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞和人卵巢癌细胞(耐药)细胞(SKOV3/DDP);将SKOV3/DDP细胞随机分为对照组、miR-30a阴性对照(NC)组和miR-30a模拟(mimi... 目的:探究miR-30a对人卵巢癌SKOV3细胞自噬及顺铂耐药性的影响,并初步研究其作用机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞和人卵巢癌细胞(耐药)细胞(SKOV3/DDP);将SKOV3/DDP细胞随机分为对照组、miR-30a阴性对照(NC)组和miR-30a模拟(mimics)组,SKOV3细胞作为正常组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞miR-30a表达情况;CCK-8法检测各组细胞顺铂耐药性;Annexin V-FITC/PI法检测各组细胞凋亡情况;蛋白印迹分析法检测各组细胞微管相关蛋白轻链3 I/II(LC3I/II)、p62、磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)表达情况;双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-30a与PTEN的靶向关系。结果:与对照组和miR-30a NC组相比,miR-30a mimics组SKOV3/DDP细胞miR-30a表达水平、凋亡率、p62、p-PI3K、p-AKT及p-mTOR水平显著升高(P<0.05),IC 50值、LC3II、PTEN蛋白表达水平及LC3II/LC3I比值显著降低(P<0.05);与正常组相比,对照组SKOV3/DDP细胞上述各指标变化趋势完全相反;mirbase数据库预测显示,miR-30a与PTEN mRNA 3'UTR区有结合位点,与PTEN-3'UTR-WT+miR-30a NC组比较,PTEN-3'UTR-WT+miR-30a inhibitor组荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论:miR-30a可能通过靶向抑制PTEN表达,激活PI3K/AKT/mTOR信号通路调控人卵巢癌细胞自噬,降低卵巢癌细胞的顺铂耐药性。 展开更多

关键词 微小RNA-30a 人卵巢癌细胞 顺铂耐药性 磷酸化-磷酸酶张力蛋白同系物/磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路

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磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B信号通路在呼吸道过敏性疾病中对嗜酸性粒细胞的作用研究进展 被引量：1

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作者 戴美娜 朱新华 《上海医学》 CAS 2023年第8期567-571,共5页

近年来,呼吸道过敏性疾病已成为全球性疾病,尤其是变应性鼻炎和哮喘。嗜酸性粒细胞及其释放的炎症介质的作用是呼吸道过敏性疾病的主要发病机制。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)信号通路对细胞的存活、增殖、生... 近年来,呼吸道过敏性疾病已成为全球性疾病,尤其是变应性鼻炎和哮喘。嗜酸性粒细胞及其释放的炎症介质的作用是呼吸道过敏性疾病的主要发病机制。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)信号通路对细胞的存活、增殖、生长和代谢有多效性作用,也影响着炎症反应的进程。针对PI3K/Akt信号通路在呼吸道过敏性疾病中对嗜酸性粒细胞作用的研究,有助于明确呼吸道过敏性疾病的发病机制。本文就PI3K/Akt信号通路在呼吸道过敏性疾病中嗜酸性粒细胞的作用研究进展进行综述,以期对临床治疗呼吸道过敏性疾病提供理论参考。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B 哮喘 鼻炎 过敏性 嗜酸性粒细胞

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补阳还五汤对脑出血大鼠PI3K/AKT信号通路的影响及其神经保护作用的机制 被引量：24

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作者 吴晓光 李蒙蒙 +2 位作者 仇志富 李义学 苗光新 《国际神经病学神经外科学杂志》 北大核心 2016年第2期119-123,共5页

目的观察并探究补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号转导通路的影响及其神经保护作用的可能机制。方法 72只SD大鼠随机分为四组:假手术组、模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组,每组18只。... 目的观察并探究补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号转导通路的影响及其神经保护作用的可能机制。方法 72只SD大鼠随机分为四组:假手术组、模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组,每组18只。其中模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组采用Rosenberg法制作脑出血大鼠模型。Garcia法检测大鼠神经功能评分,电镜观察神经元线粒体超微结构,western blot法检测磷酸化蛋白激酶(p-AKT)蛋白表达,TUNEL法检测细胞凋亡变化,免疫组化法检测B细胞淋巴瘤基因-2(bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(bax)的表达,甲酰胺法检测血脑屏障(BBB)通透性,干湿重法检测脑组织含水量。结果与脑出血模型组相比,补阳还五汤治疗明显提高神经功能学评分(P<0.05),降低BBB通透性,减少脑组织水含量(P<0.05),上调p-AKT、bcl-2蛋白表达,下调bax蛋白表达,减轻线粒体损伤,抑制神经元凋亡。结论补阳还五汤抗脑出血引起脑损伤的作用机制可能与其激活PI3K/AKT信号途径,抑制神经元凋亡,降低BBB通透性,减轻脑水肿有关。 展开更多

关键词 补阳还五汤 凋亡 磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 信号通路 B细胞淋巴瘤基因-2 Bcl-2相关X蛋白 血脑屏障 大鼠

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桔梗枳壳汤加味对反流性食管炎模型大鼠PI3K/Akt信号通路及胃肠动力的影响 被引量：23

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作者 张锋利 唐凤英 +1 位作者 沈舒文 许栗晓媛 《中医药导报》 2020年第10期36-41,共6页

目的:探讨桔梗枳壳汤加味对反流性食管炎(RE)模型大鼠磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路及胃肠动力的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术(Sham)组及造模大鼠,造模成功大鼠随机分为RE组(半幽门结扎术和贲门部分... 目的:探讨桔梗枳壳汤加味对反流性食管炎(RE)模型大鼠磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路及胃肠动力的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术(Sham)组及造模大鼠,造模成功大鼠随机分为RE组(半幽门结扎术和贲门部分肌层切开术)、桔梗枳壳汤加味低剂量组(0.35 g/kg)、桔梗枳壳汤加味中剂量组(0.70 g/kg)、桔梗枳壳汤加味高剂量组(1.40 g/kg)、阳性组[莫沙必利(7.80 mg/kg)+埃索美拉唑(20.80mg/kg)],每组10只。Sham组和RE组每天灌胃给予生理盐水,其余各组均灌胃给予相应剂量药物,2次/d,共2周。苏木精-伊红染色(HE)法检测各组大鼠食管组织病理变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测食管组织中PI3K/Akt通路蛋白表达情况;酶联免疫(ELISA)试剂盒检测大鼠食管组织血管生长因子(VEGF)及血清胃肠激素胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、胆囊收缩素(CCK)含量;葡聚糖蓝标记法检测胃排空率和小肠推进率。结果:与Sham组比较,RE组大鼠可见食管下段黏膜溃烂、炎性细胞浸润、基底层增厚等病理损伤,食管组织VEGF含量、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白水平及血清CCK含量均明显升高(P<0.05),血清MTL含量、血清GAS含量、胃排空率、小肠推进率均明显下降(P<0.05)。与RE组比较,桔梗枳壳汤加味低、中、高剂量组及阳性组大鼠食管下段黏膜病理损伤减轻,食管组织VEGF含量、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白水平及血清CCK含量均明显降低(P<0.05),血清MTL含量、血清GAS含量、胃排空率、小肠推进率均明显升高(P<0.05)。与梗枳壳汤加味低剂量组比较,桔梗枳壳汤加味中、高剂量组及阳性组大鼠食管下段黏膜病理损伤减轻,食管组织VEGF含量、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白水平及血清CCK含量均明显降低(P<0.05),血清MTL含量、血清GAS含量、胃排空率、小肠推进率均明显升高(P<0.05)。结论:桔梗枳壳汤加味可能通过抑制PI3K/Akt信号通� 展开更多

关键词 桔梗枳壳汤加味 反流性食管炎 磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶通路 胃肠动力 大鼠

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麦冬皂苷D通过抑制PI3K/Akt信号通路减轻大气细颗粒物对肺泡上皮细胞的氧化损伤 被引量：11

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作者 王莹 唐兴华 +2 位作者 孙立燕 张珍珍 丁会 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期397-399,共3页

目的探究麦冬皂苷(OP)-D对大气细颗粒物(PM2. 5)诱导小鼠肺泡上皮细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法通过PM2. 5诱导小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(MLE-12)建立氧化应激模型,分别测定空白对照组、PM2. 5组及OP-D低、中、高浓度(10、20、4... 目的探究麦冬皂苷(OP)-D对大气细颗粒物(PM2. 5)诱导小鼠肺泡上皮细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法通过PM2. 5诱导小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(MLE-12)建立氧化应激模型,分别测定空白对照组、PM2. 5组及OP-D低、中、高浓度(10、20、40μmol/L)组细胞内及上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化(p)-Akt、p-核因子(NF)-κBp65和NF-κBp65蛋白水平。结果与空白对照组比较,PM2. 5组细胞SOD活性明显降低(P<0. 05); MDA含量,PI3K、p-Akt和p NF-κBp65蛋白水平均明显升高(P<0. 05)。与PM2. 5组比较,OP-D干预可使细胞SOD活性明显升高(P<0. 05); MDA含量,PI3K、p-Akt和p-p65蛋白水平均明显降低(P<0. 05);且呈浓度依赖性。结论 OP-D可抑制PM2. 5对肺泡上皮细胞的氧化损伤,该作用与抑制PI3K/Akt通路、增强抗氧化能力有关。 展开更多

关键词 麦冬皂苷D 大气细颗粒物 肺泡上皮细胞 磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶 氧化应激

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血府逐瘀胶囊预处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用 被引量：7

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作者 孔嫦娥 程欣欣 徐哲龙 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期2007-2010,共4页

目的探讨血府逐瘀胶囊预处理对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用及机制。方法Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组(I/R组)、血府逐瘀胶囊组(Xuefu组)、血府逐瘀胶囊+LY294002组(XL组)、血府逐瘀胶囊+PD98059组(XP组)。血... 目的探讨血府逐瘀胶囊预处理对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用及机制。方法Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组(I/R组)、血府逐瘀胶囊组(Xuefu组)、血府逐瘀胶囊+LY294002组(XL组)、血府逐瘀胶囊+PD98059组(XP组)。血府逐瘀胶囊预处理3 d后用全心缺血/再灌注的方式构建大鼠体外I/R模型,用TTC染色法检测心肌梗死面积,用PowerLab系统测量心脏功能,用Oxygraph-2k检测大鼠心肌线粒体呼吸功能和氧化磷酸化水平,用Western blotting技术检测大鼠心肌组织中丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化水平。结果I/R组和Xuefu组的心肌梗死面积分别为(73.57±11.33)%,(37.44±4.64)%;假手术组、I/R组和Xuefu组左心室发展压(LVDP)比值分别为(71.31±8.31)%,(20.37±3.51)%和(32.36±5.82)%;左心室内压最大上升速率(+dp/dt_(max))比值分别为(74.83±10.92)%,(15.20±4.82)%和(26.54±4.54)%;左室内压最大下降速率(-dp/dt_(max))比值分别为(74.71±12.87)%,(18.86±4.95)%和(32.22±6.71)%;线粒体复合体Ⅰ氧化磷酸化水平分别为(131.05±21.11),(34.58±9.88)和(71.64±28.99)pmol·s^(-1)·mL^(-1);线粒体复合体Ⅰ+Ⅱ氧化磷酸化水平分别为(162.71±13.77),(68.51±18.32)和(110.32±19.38)pmol·s^(-1)·mL^(-1);呼吸控制率(RCR)分别为2.36±0.30,1.43±0.22和2.05±0.20;p-Akt(Ser473)的相对表达分别为0.53±0.22,0.96±0.11和1.20±0.12;p-ERK的相对表达分别为0.55±0.18,0.80±0.18和1.16±0.11。I/R组的上述指标与Sham组和Xuefu组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Xuefu组和XL组的心肌梗死面积分别为(35.30±7.01)%和(51.21±5.87)%;Xuefu组和XP组的线粒体复合体Ⅰ氧化磷酸化水平分别为(66.04±17.97)和(34.83±8.58)pmol·s^(-1)·mL^(-1);线粒体复合体Ⅰ+Ⅱ氧化磷酸化水平分别为(104.39±18.05)和(70.23±16.22)pmol·s^(-1)·mL^(-1);RCR分别为2.08±0.23和1.63±0.24。Xuefu组的上述指标与XL组、XP组相比较,差异� 展开更多

关键词 血府逐瘀胶囊 缺血/再灌注损伤 线粒体 磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶 细胞外信号调节激酶

原文传递

氨甲酰化促红细胞生成素经PI3-K/Akt信号通路抗脑缺血损伤 被引量：7

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作者 张蓓 王林 +3 位作者 柏玉兰 石少亭 张雷 李亚军 《中风与神经疾病杂志》 北大核心 2017年第6期488-490,共3页

目的观察脑缺血后氨甲酰化促红细胞生成素(CEPO)的神经保护作用并探讨其可能机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为6组(n=10):(1)假手术组;(2)缺血组;(3)EPO组;(4)CEPO组;(5)LY(LY294002)组;(6)CEPO+LY组。应用大脑中动脉线栓法(MCAO)制作... 目的观察脑缺血后氨甲酰化促红细胞生成素(CEPO)的神经保护作用并探讨其可能机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为6组(n=10):(1)假手术组;(2)缺血组;(3)EPO组;(4)CEPO组;(5)LY(LY294002)组;(6)CEPO+LY组。应用大脑中动脉线栓法(MCAO)制作大鼠局灶性脑缺血模型,评定大鼠神经功能并计算脑梗死体积,Western blot方法检测PI3-K/Akt活性变化。结果 EPO组与CEPO组脑梗死体积均明显缩小,神经功能显著改善,磷酸化Akt(p Akt)水平明显增高,且两组之间无明显差异,但CEPO的神经保护作用及对Akt磷酸化的诱导效应均可被PI3-K抑制剂LY294002部分抵消。结论 CEPO具有与EPO相当的缺血后脑保护作用,其机制可能与PI3-K/Akt信号通路激活有关。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶 促红细胞生成素 氨甲酰化促红细胞生成素 脑缺血

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基于PI3K/Akt通路探索中医药治疗肝癌机制的研究概述 被引量：5

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作者 惠友谊 薛敬东 翟延 《环球中医药》 CAS 2022年第6期1095-1099,共5页

肝癌的发生发展是一个复杂的多步骤过程,涉及多种基因多条通路。磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinases,Akt)信号通路作为肿瘤发生过程中常见的信号通路之一,... 肝癌的发生发展是一个复杂的多步骤过程,涉及多种基因多条通路。磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinases,Akt)信号通路作为肿瘤发生过程中常见的信号通路之一,具有抑制癌细胞调亡、促进细胞增殖等作用,其与肝癌发生机制的研究已成目前研究的热点和难点。本文通过归纳与总结相关文献,发现中医药可通过抑制PI3K/Akt信号通路以抑制血管内皮的生成、阻滞细胞周期来影响肝癌细胞的增殖;增加细胞凋亡相关基因半胱氨酸蛋白酶3、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白、细胞色素C等基因蛋白的表达来诱导肝癌细胞的凋亡;增加自噬相关基因Beclin 1和微管相关蛋白1轻链3的表达来诱导肝癌细胞自噬。可见,中医药可抑制PI3K/Akt通路的激活,通过上述机制作用于肝癌细胞,降低相关疗效指标,最终影响肝癌的发展,起到治疗肝癌的目的,这为今后中医药治疗肝癌提供了新的方向与理论依据。 展开更多

关键词 肝癌 中医药 磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶标

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S-雌马酚通过ERβ调控PI3K/AKT/NF-κB信号通路改善油酸钠诱导的BRL细胞脂肪变性

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作者 张贵明 倪向敏 +3 位作者 崔涵强 白倩 朱文艺 王建 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期62-68,共7页

目的观察S-雌马酚(S-equol,S-Eq)对油酸钠(sodium oleate,NaOL)诱导的BRL细胞脂肪变性的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养BRL细胞,以不同浓度的S-Eq、NaOL、PHTPP处理48 h,通过CCK-8法检测细胞存活率、油红O染色及细胞TG检测确定诱... 目的观察S-雌马酚(S-equol,S-Eq)对油酸钠(sodium oleate,NaOL)诱导的BRL细胞脂肪变性的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养BRL细胞,以不同浓度的S-Eq、NaOL、PHTPP处理48 h,通过CCK-8法检测细胞存活率、油红O染色及细胞TG检测确定诱导BRL细胞脂肪病变模型的NaOL以及S-Eq、PHTPP干预的适宜浓度。将细胞分为对照组、模型组,模型+S-Eq低、高浓度组(10^(-6)mol/L,10^(-5)mol/L),模型+雌二醇干预组(estradiol,E210^(-7)mol/L),模型+S-Eq(10^(-5)mol/L)+PHTPP(10^(-6)mol/L)。干预48 h后检测细胞TG、TNF-α、IL-6含量,qRT-PCR检测细胞TNF-α、IL-6 mRNA表达水平,Western bloting检测细胞ERβ,PI3k,AKT,p-AKT,p-p65蛋白表达水平。结果与对照组比较,当NaOL浓度为0.48 mmol/L时BRL细胞活力无明显减低、TG含量明显增加,同时细胞出现大量脂滴聚集,确定为诱导细胞脂肪病变模型的适宜浓度;干预结束时,与模型组比较,S-Eq或E2干预可显著减少细胞TG、TNF-α及IL-6水平(P<0.05),同时ERβ、PI3k、p-AKT表达水平显著升高(P<0.05),p-p65、TNF-α、IL-6表达水平显著降低(P<0.05);PHTPP可显著抑制S-Eq对细胞脂肪变性的改善作用。结论S-Eq可有效改善NaOL诱导的BRL细胞脂肪变性,其部分机制与S-Eq通过ERβ调控PI3K/AKT/NF-κB信号通路减轻炎症反应有关。 展开更多

关键词 S-雌马酚 脂肪变性 磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶 核因子κB

原文传递

微小RNA-21-5p通过激活PI3K/Akt信号通路调控Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡减轻大鼠高氧性急性肺损伤 被引量：2

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作者 冯帮海 梅鸿 +5 位作者 刘鑫鑫 刘君亚 余琨 覃松 刘国跃 陈淼 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期140-145,共6页

目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)是否通过激活磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路调控Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡减轻高氧性急性肺损伤(HALI)。方法将72只雄性SD大鼠按随机数字表法分为常氧对照组、HALI组、P... 目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)是否通过激活磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路调控Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡减轻高氧性急性肺损伤(HALI)。方法将72只雄性SD大鼠按随机数字表法分为常氧对照组、HALI组、PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002+HALI组(LY+HALI组)、miR-21-5p过表达+LY294002+HALI组(miR-21-5p+LY+HALI组)、miR-21-5p过表达+HALI组(miR-21-5p+HALI组)及二甲基亚砜(DMSO)+HALI组,每组12只。用95%氧气制备HALI动物模型;常氧对照组动物在常氧状态下正常饲养。制模前3周经气管导管滴入200μL滴度(1×10^(12) TU/mL)的miR-21-5p腺相关病毒载体AAV6-miR-21-5p转染肺组织;DMSO及LY294002均以0.3 mg/kg于制模前1 h经尾静脉给药。制模后48 h,取颈动脉血检测氧合指数(OI)及呼吸指数(RI),采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-21-5p表达;取肺组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子〔肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-6、IL-1β)〕水平,测定肺湿/干质量(W/D)比值,苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织病理学改变并进行病理学评分。每组取6只大鼠提纯AECⅡ细胞,应用流式细胞仪检测凋亡率,采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)和PI3K/Akt信号通路蛋白的表达水平。结果与常氧对照组比较,高氧暴露后可见肺泡间隔增厚,大量炎症细胞浸润,RI、炎症因子、肺W/D比值、病理学评分,以及AECⅡ细胞早期凋亡率、PTEN蛋白表达和Akt磷酸化水平均升高,而OI及miR-21-5p表达降低,说明模型制备成功。LY294002预处理后,可进一步加重HALI大鼠肺组织病理损伤,RI、炎症因子、肺W/D比值均较HALI组进一步升高,OI进一步降低,同时可促进AECⅡ细胞凋亡,进一步上调PTEN蛋白表达,并抑制Akt磷酸化;而miR-21-5p预处理可负向调控PTEN,激活PI3K/Akt信号通路,抑制AECⅡ细� 展开更多

关键词 微小RNA-21-5p 高氧性急性肺损伤 Ⅱ型肺泡上皮细胞 磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶信号通路 凋亡

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微小RNA-153靶向磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶通路调控急性淋巴细胞白血病细胞增殖 被引量：5

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作者 顾艳 王洪伟 韩磊 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期295-297,共3页

目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-153靶向调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)通路对人急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞Jurkat的影响。方法 miR-153模拟物(miR-153模拟物组)、miR-153抑制物(miR-153抑制物组)转染Jurkat细胞... 目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-153靶向调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)通路对人急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞Jurkat的影响。方法 miR-153模拟物(miR-153模拟物组)、miR-153抑制物(miR-153抑制物组)转染Jurkat细胞后,观察细胞增殖、周期和凋亡,检测miR-153、PI3K和Akt mRNA及蛋白表达,并验证PI3K是否为miR-153的靶基因。结果 与阴性对照组比较,miR-153模拟物组miR-153表达显著升高约10倍(t=39.596,P<0.01),miR-153抑制物组miR-153表达明显降低(t=14.651,P<0.01)。miR-153模拟物组细胞活性显著下降(t=10.931,P<0.01),miR-153抑制物组细胞活性明显升高(t=7.640,P<0.01)。miR-153模拟物组中PI3K总蛋白、PI3K mRNA及p-Akt表达明显下降(t=7.161,P<0.01;t=6.684,P<0.01;t=10.769,P<0.01),而miR-153抑制物组PI3K总蛋白、PI3K mRNA及p-Akt表达显著升高(t=3.998,P<0.05;t=8.902,P<0.01;t=7.078,P<0.01)。miR-153模拟物组G0/G1期细胞比例明显增多,而S期和G2/M期细胞显著下降(t=3.786,P<0.05;t=3.012,P<0.05;t=4.948,P<0.01);miR-153抑制物组G0/G1期细胞显著下降,S期和G2/M期细胞所占比例明显增加(t=5.356,P<0.01;t=3.055,P<0.05;t=3.893,P<0.05)。miR-153模拟物组细胞凋亡率明显增加(t=4.673,P<0.05),而miR-153抑制物组凋亡率显著下降(t=5.618,P<0.01)。与空载质粒组比较,3’端非编码区(3’UTR)质粒组相对荧光素酶活性显著降低(t=7.925,P<0.01)。结论 miR-153能够直接靶向PI3K/Akt信号通路,调控Jurkat细胞增殖和凋亡。 展开更多

关键词 急性淋巴细胞白血病 微小RNA-153 磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶信号通路

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PI3K/Akt信号通路参与LPS诱导大鼠肺微血管内皮细胞表达RACK1及rac1 被引量：4

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作者 尤青海 王巾枚 +2 位作者 孙耕耘 蒋丽娟 李文妹 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第1期41-45,共5页

目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)表达活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)和ras相关C3肉毒菌毒物底物1(rac1)的影响。方法体外培养大鼠PMVEC:①LPS量效组:0、... 目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)表达活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)和ras相关C3肉毒菌毒物底物1(rac1)的影响。方法体外培养大鼠PMVEC:①LPS量效组:0、1、5、10 mg/L LPS与大鼠PMVEC孵育12 h;②LPS时效组:10 mg/L LPS与PMVEC孵育0、3、6、8、12、24 h;③IGF-1时效组:100 ng/ml IGF-1与PMVEC孵育0、3、6、8、12、24 h;④LPS+LY294002组:100 ng/ml LY294002预孵育PMVEC 1 h后加入10 mg/L LPS继续孵育12 h,设空白组、LPS组和LY294002组为对照。所有干预结束后Western blot法检测RACK1、rac1及p-Akt蛋白表达。结果①LPS量效组:RACK1、rac1及p-Akt蛋白表达量均呈浓度依赖性增加,各蛋白组组内比较差异均有统计学意义:(F=120.455,P<0.001)、(F=165.813,P<0.001)及(F=309.346,P<0.001)。②LPS时效组:RACK1和rac1蛋白表达呈时间依赖性增加,LPS刺激24 h后达最高,各蛋白组组内比较差异均有统计学意义:(F=454.034,P<0.001)和(F=423.630,P<0.001);p-Akt表达自3 h(0.460±0.089)上调,12 h达最高(2.022±0.244),24 h(1.264±0.074)仍高于0 h(0.237±0.063),组间比较差异有统计学意义(F=137.726,P<0.001)。③IGF-1时效组:IGF-1诱导PMVEC表达RACK1、rac1及p-Akt呈时间依赖性增加,各组组间比较差异有统计学意义(F=188.293,P<0.001)、(F=115.071,P<0.001)及(F=60.175,P<0.001)。④LY294002干预组:LPS+LY294002作用PMVEC后:RACK1蛋白表达量较LPS组下调[(0.732±0.137)vs(1.498±0.167),P<0.001];rac1蛋白表达量较LPS组下调[(0.758±0.084)vs(1.384±0.170),P<0.001];p-Akt蛋白表达量较LPS组下调[(0.492±0.148)vs(1.106±0.219),P<0.001]。结论 PI3K/Akt信号通路通过干预RACK1和rac1表达,参与LPS致PMVEC损伤。 展开更多

关键词 肺微血管内皮细胞 活化的蛋白激酶C受体1 ras相关C3肉毒菌毒物底物1 磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶 急性呼吸窘迫综合征

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地高辛可通过调控PI3K/Akt信号抑制成纤维细胞活化改善肺纤维化--一项体内与体外实验 被引量：3

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作者 贾利丹 杨苗 +3 位作者 田鑫荣 赵鹏 梅雪 白云苹 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1161-1166,共6页

目的通过体内实验和体外实验探讨地高辛对博莱霉素诱导肺纤维化小鼠的作用及其可能机制。方法①体内实验:将60只C57/BL6J小鼠按随机数字表法分为对照组、肺纤维化模型组(模型组)、吡非尼酮(300 mg/kg)组及地高辛1.0 mg/kg、0.2 mg/kg组... 目的通过体内实验和体外实验探讨地高辛对博莱霉素诱导肺纤维化小鼠的作用及其可能机制。方法①体内实验:将60只C57/BL6J小鼠按随机数字表法分为对照组、肺纤维化模型组(模型组)、吡非尼酮(300 mg/kg)组及地高辛1.0 mg/kg、0.2 mg/kg组,每组12只。一次性气管内滴注博莱霉素5 mg/kg制备小鼠肺纤维化模型;对照组给予等量无菌生理盐水。制模后次日起各组灌胃相应药物,每日1次,持续28 d;对照组及模型组给予等量生理盐水。处死小鼠取肺组织,检测肺系数;苏木素-伊红(HE)及Masson染色后,光镜下观察肺组织形态学和胶原变化;采用免疫组化法检测肺组织中肌成纤维细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及细胞外基质(ECM)胶原蛋白(COL-Ⅰ、COL-Ⅲ)阳性表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肺组织中ECM纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β(TGF-β)及磷酸化Smad3(p-Smad3)的蛋白表达。②体外实验:体外培养人胚肺成纤维细胞(HFL-1),当细胞密度达到70%~90%时分为空白对照组、细胞活化模型组(模型组)、吡非尼酮(2.5 mmol/L)组及地高辛100 nmol/L、50 nmol/L组。给予相应药物处理3 h后,除空白对照组外,其余各组加入诱导剂TGF-β处理48 h制备细胞活化模型。Western blotting检测细胞中α-SMA、FN、p-Smad3蛋白表达及磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)通路蛋白PI3K、Akt的磷酸化(p-PI3K、p-Akt)水平。结果①体内实验结果:与对照组比较,模型组小鼠肺泡结构破坏明显,大量炎症细胞浸润,肺间质内胶原沉积,且肺组织中ECM沉积增加,α-SMA、FN、TGF-β、p-Smad3的蛋白表达水平均显著升高,说明博莱霉素诱导小鼠肺纤维化模型制备成功。与模型组比较,地高辛可以显著抑制气道炎症、胶原纤维沉积,减少ECM沉积,降低α-SMA、FN、TGF-β、p-Smad3的蛋白表达,且效果优于吡非尼酮组,除FN外以地高辛1.0 mg/kg� 展开更多

关键词 肺纤维化 地高辛 成纤维细胞 磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶

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右美托咪定对呼吸机相关性肺损伤大鼠肺组织内质网应激的影响及PI3K/Akt 信号通路的关系 被引量：4

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作者 瞿敏 茅顺洪 +6 位作者 缴宝杰 刘香阁 杨强 史丹丹 王亚丽 马志红 李慧智 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期135-139,共5页

目的探讨右美托咪定(DEX)对大鼠呼吸机相关性肺损伤(ventilator associated lung injury,VALI)时内质网应激(ERS)诱导的细胞凋亡及磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法将80只SD大鼠采用随机数字表法... 目的探讨右美托咪定(DEX)对大鼠呼吸机相关性肺损伤(ventilator associated lung injury,VALI)时内质网应激(ERS)诱导的细胞凋亡及磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法将80只SD大鼠采用随机数字表法分为四组(n=20):对照组(C组)、机械通气组(V组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定+PI3K/Akt信号转导通路抑制剂(LY294002)组(DL组)。C组不行机械通气,自主呼吸空气;V组、D组、DL组机械通气4h,机械通气前20minD组静脉输注右美托咪定5.0μg/kg,机械通气期间以5.0μg/(kg·h)的速率静脉输注;DL组在给予右美托咪定前5min静脉输注LY2940020.3mg/kg;V组给予等容量生理盐水。机械通气4h时处死大鼠,测定肺通透指数(LPI)与肺湿/干质量(W/D)比值。采用蛋白质印迹(Westernblot)法检测Akt、磷酸化Akt(P-Akt)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)的表达水平。光镜下观察肺组织病理学结果,测定肺泡损伤率(IAR),采用原位末端标记技术(TUNEL)法观察肺组织细胞凋亡情况并计算凋亡指数(AI)。结果与C组比较,V组与DL组W/D比、LPI、IAR(%)、AI(%)明显升高,GRP78、CHOP、caspase-12表达升高(C组:0.35±0.02、0.28±0.02、0.51±0.03;V组:1.27±0.11、1.09±0.13、1.37±0.15;DL组:0.97±0.08、0.66±0.07、1.01±0.09;P<0.05),P-Akt表达降低(C组:0.81±0.04;V组:0.23±0.01;DL组:0.44±0.02;P<0.05);与V组比较,DL组与D组W/D比、LPI、IAR(%)、AI(%)明显降低,GRP78、CHOP、caspase-12表达降低(V组:1.27±0.11、1.09±0.13、1.37±0.15;DL组:0.97±0.08、0.66±0.07、1.01±0.09;D组:0.62±0.04、0.43±0.05、0.79±0.07;P<0.05),P-Akt表达升高(V组:0.23±0.01;DL组:0.44±0.02;D组:0.65±0.03;P<0.05)且肺组织病理损伤减轻;与D组比较,DL组W/D比、LPI、IAR(%)、AI(%)明显升高,GRP78、CHOP、caspase-12表达升高(D组:0.62±0.04、0.43±0.05、0.79±0.07;DL组:0.97±0.08、0.66 展开更多

关键词 右美托咪啶(DEX) 呼吸机相关性肺损伤(VALI) 内质网应激(ERS) 磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt) 细胞凋亡

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嗜酸乳杆菌胞外蛋白调控MAPK和PI3K-AKT信号途径关键蛋白活化水平 被引量：3

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作者 王泳 贾彦 +6 位作者 任效东 明珠 江岩 赵培 庞广昌 阎亚丽 陈庆森 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第3期155-163,共9页

探讨并揭示嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CICC6005分泌的相关蛋白质促进肠道健康及分子机制具有重要研究价值。本实验在确定了L.acidophilus CICC6005分泌的胞外蛋白抑制HT-29结肠癌细胞增殖的基础上,进一步探讨67 ku和37 ku... 探讨并揭示嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CICC6005分泌的相关蛋白质促进肠道健康及分子机制具有重要研究价值。本实验在确定了L.acidophilus CICC6005分泌的胞外蛋白抑制HT-29结肠癌细胞增殖的基础上,进一步探讨67 ku和37 ku的胞外蛋白通过何种途径发挥抑制结肠癌细胞增殖。研究以HT-29细胞作为靶细胞,用丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)和磷脂酰肌醇-3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B,PI3K-AKT)信号通路为考察对象,以Western Blotting为手段,分析两个通路中关键的靶点蛋白p38、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、磷酸化p38(phosphorylated p38,p-p38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)、磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated AKT,p-AKT)、PI3K的表达水平,以探讨并阐述源于L.acidophilus CICC6005胞外蛋白调控结肠癌细胞增殖状况的分子机制。结果表明,不同质量浓度的67 ku和37 ku胞外蛋白分别作用HT-29细胞一定时间后,两种胞外蛋白均具有下调两个信号通路途径中p-ERK1/2、p-p38、p-AKT、PI3K蛋白的表达,且存在浓度依赖关系;但对p-JNK、ERK1/2、p38、JNK蛋白的表达没有影响。因此,源于L.acidophilus CICC6005分泌的37 ku和67 ku胞外蛋白表现出显著的抑制HT-29细胞增殖的功能,其机制可能与调控MAPK和PI3K-AKT两个信号通路中几个关键的靶点蛋白的活化水平相关。该研究结果提示,食用嗜酸乳杆菌其分泌的胞外蛋白质将达到维护肠道健康的目标。 展开更多

关键词 嗜酸乳杆菌CICC6005 胞外蛋白 HT-29结肠癌细胞 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 磷脂酰肌醇-3激酶-丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K-AKT)

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丹参酮ⅡA在低氧诱导肺动脉高压中的保护作用 被引量：3

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作者 刘礼姣 邱庆竹 +1 位作者 郑均敏 谢利剑 《儿科药学杂志》 CAS 2021年第8期1-6,共6页

目的:通过低氧诱导肺动脉高压(PAH)小鼠及细胞模型,探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对PAH的疗效及可能的作用机制。方法:选取15只C57BL6雄性小鼠随机分为常氧组、低氧组及低氧+TanⅡA组各5只。4周后采用右心导管法检测小鼠右心室压力,行肺组织氧... 目的:通过低氧诱导肺动脉高压(PAH)小鼠及细胞模型,探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对PAH的疗效及可能的作用机制。方法:选取15只C57BL6雄性小鼠随机分为常氧组、低氧组及低氧+TanⅡA组各5只。4周后采用右心导管法检测小鼠右心室压力,行肺组织氧化苏木精伊红染色法(HE)染色,采用硫代巴比妥酸(TBA)法和WST-8法检测肺组织中丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平。取肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)随机分为常氧组、低氧组和低氧+TanⅡA组,24 h后采用蛋白免疫印迹(WB)实验检测Bax、P62、Akt及P-Akt蛋白表达水平。结果:与常氧组小鼠比较,低氧组右心室收缩压升高(P<0.05);与低氧组小鼠比较,低氧+TanⅡA组右心室收缩压降低(P<0.05)。低氧组较常氧组肺血管明显重构,与低氧组比较,低氧+TanⅡA组肺血管重构程度减轻;与常氧组比较,低氧组肺组织中SOD活性下降,MDA含量增加(P<0.05);与低氧组比较,低氧+TanⅡA组小鼠肺组织中SOD活性增加,MDA含量降低(P<0.05)。与常氧组比较,低氧组PASMCs中Bax蛋白表达降低,P62蛋白表达增加(P<0.05);与低氧组比较,低氧+TanⅡA组PASMCs中Bax蛋白表达增加,P62蛋白表达降低(P<0.05)。与常氧组比较,低氧组PASMCs中P-Akt/Akt值增加(P<0.05);与低氧组比较,低氧+TanⅡA组PASMCs中P-Akt/Akt值降低(P<0.05)。结论:TanⅡA具有保护低氧诱导PAH的作用,可能与TanⅡA可降低低氧PAH中氧化应激水平及抑制低氧PASMCs中磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路的激活,部分逆转低氧状态下PASMCs凋亡的减少,改善PAH中肺血管重构有关。 展开更多

关键词 低氧肺动脉高压 丹参酮ⅡA 细胞凋亡与自噬 磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 氧化应激

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长链非编码RNA PWRN1通过PI3K/Akt信号通路对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：2

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作者 程晓磊 王宗站 +1 位作者 朱伟 孙折玉 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2022年第8期701-707,共7页

目的探讨长链非编码RNA Prader-Willi区域非蛋白质编码RNA 1(PWRN1)是否通过磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)通路调控乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移过程。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常乳腺上皮细胞MCF-10A和... 目的探讨长链非编码RNA Prader-Willi区域非蛋白质编码RNA 1(PWRN1)是否通过磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)通路调控乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移过程。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞(BT474、BT549、T47D、MCF7、MDA-MB-453、MDA-MB-231)的PWRN1水平。选择MDA-MB-231细胞并分为空白对照组(不进行转染)、阴性对照组(转染空载体pcDNA3.1)和PWRN1过表达组(转染过表达载体pcDNA3.1-PWRN1)。细胞计数法(CCK-8)、划痕愈合实验和Transwell小室实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。Western blotting和qPCR检测Snail、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)和磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶1(p-Akt1)的水平。结果乳腺癌细胞的PWRN1水平均低于MCF-10A细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组相比,PWRN1过表达组MDA-MB-231细胞的增殖活力(48 h和72 h)减弱、划痕愈合率和穿膜细胞数较少,且Snail、MMP-9、p-Akt1和p-PI3K水平降低,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。空白对照组和阴性对照组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论PWRN1可能通过减弱PI3K/Akt信号通路活化来抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,PWRN1/PI3K/Akt轴有作为乳腺癌防治靶点的潜能。 展开更多

关键词 乳腺癌 Prader-Willi区域非蛋白质编码RNA 1 磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶通路 迁移侵袭

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Adropin对脂肪细胞自噬及磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶通路的影响 被引量：3

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作者 李凤丽 李茂山 +2 位作者 何丽 罗方 康志强 《新乡医学院学报》 CAS 2019年第11期1018-1023,1029,共7页

目的探讨Adropin对脂肪细胞自噬及磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)通路的影响。方法将小鼠胚胎成纤维前脂肪细胞3T3-L1诱导分化为成熟脂肪细胞,随机分为对照组、Adropin组、自噬激动剂组、Adropin+自噬激动剂组。对照... 目的探讨Adropin对脂肪细胞自噬及磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)通路的影响。方法将小鼠胚胎成纤维前脂肪细胞3T3-L1诱导分化为成熟脂肪细胞,随机分为对照组、Adropin组、自噬激动剂组、Adropin+自噬激动剂组。对照组细胞不予特殊处理,Adropin组细胞加入Adropin(终浓度为1000 nmol·L^-1),自噬激动剂组加入西罗莫司(终浓度为100 nmol·L^-1),Adropin+自噬激动剂组细胞加入Adropin(终浓度为1000 nmol·L^-1)和西罗莫司(终浓度为100 nmol·L^-1),继续培养2 h;采用单丹磺酰尸胺染色检测各组细胞中自噬空泡情况,细胞免疫荧光染色法检测各组细胞微管相关蛋白轻链3(LC3)表达,采用Western blot法检测各组细胞自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62及PI3K/AKT通路蛋白PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)的表达。结果与对照组比较,Adropin组细胞中自噬空泡相对含量、LC3阳性细胞比例及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),p62、p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。与对照组比较,自噬激动剂组细胞中自噬空泡相对含量、LC3阳性细胞比例及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),p62、p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。Adropin+自噬激动剂组与对照组细胞中自噬空泡相对含量、LC3阳性细胞比例及LC3-Ⅱ、Beclin-1、p62、p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。与Adropin组比较,自噬激动剂组、Adropin+自噬激动剂组细胞中自噬空泡相对含量、LC3阳性细胞比例及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),p62、p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。与自噬激动剂组比较,Adropin+自噬激动剂组细胞中自噬空泡相对含量、LC3阳性细胞比例及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),p62、p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。4组� 展开更多

关键词 Adropin 脂肪细胞 磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶通路 自噬

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