目的:从猪肺组织(去除气管)中提取分离糖胺聚糖并确定其种类和结构特点。方法:采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶联合酶解提取糖胺聚糖,利用Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱层析进行分离纯化。采用醋酸纤维素薄膜电泳分析多糖的种类,高效...目的:从猪肺组织(去除气管)中提取分离糖胺聚糖并确定其种类和结构特点。方法:采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶联合酶解提取糖胺聚糖,利用Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱层析进行分离纯化。采用醋酸纤维素薄膜电泳分析多糖的种类,高效凝胶渗透色谱与十八角激光散射仪联用法测定其绝对分子质量,采用SAX-HPLC法对酶解二糖进行细微结构分析。结果:从猪肺组织中获得透明质酸(HA)、硫酸乙酰肝素(HS)、硫酸软骨素B(CSB)和硫酸软骨素A(CSA)4种糖胺聚糖,其含量分别为690、490、480和370 mg·kg-1,绝对分子质量分别为40.7、64.3、28.6和26.5 k Da。其中,CSA组分与标准品CSA(牛气管来源)相比,4-硫酸化二糖和6-硫酸化二糖的摩尔比更大,电荷密度更高;而HS中含有结构新颖的△己糖醛酸-氨基葡萄糖(IV-H,△UA-Glc N)二糖,且其绝对分子质量(64.3 k Da)远高于标准品HS(17.3 k Da)。结论:猪肺组织中糖胺聚糖主要含有HA、HS、CSA和CSB,是糖胺聚糖开发的良好资源;其中HS含有高含量的自由氨基葡萄糖(Glc NH2),结构较为新颖,有可能开发成为一种新的药物。展开更多
文摘目的:从猪肺组织(去除气管)中提取分离糖胺聚糖并确定其种类和结构特点。方法:采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶联合酶解提取糖胺聚糖,利用Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱层析进行分离纯化。采用醋酸纤维素薄膜电泳分析多糖的种类,高效凝胶渗透色谱与十八角激光散射仪联用法测定其绝对分子质量,采用SAX-HPLC法对酶解二糖进行细微结构分析。结果:从猪肺组织中获得透明质酸(HA)、硫酸乙酰肝素(HS)、硫酸软骨素B(CSB)和硫酸软骨素A(CSA)4种糖胺聚糖,其含量分别为690、490、480和370 mg·kg-1,绝对分子质量分别为40.7、64.3、28.6和26.5 k Da。其中,CSA组分与标准品CSA(牛气管来源)相比,4-硫酸化二糖和6-硫酸化二糖的摩尔比更大,电荷密度更高;而HS中含有结构新颖的△己糖醛酸-氨基葡萄糖(IV-H,△UA-Glc N)二糖,且其绝对分子质量(64.3 k Da)远高于标准品HS(17.3 k Da)。结论:猪肺组织中糖胺聚糖主要含有HA、HS、CSA和CSB,是糖胺聚糖开发的良好资源;其中HS含有高含量的自由氨基葡萄糖(Glc NH2),结构较为新颖,有可能开发成为一种新的药物。
