β－环糊精含硫衍生物自组单分子膜修饰金电极的选择穿透性研究 被引量：6

1

作者 何品刚 方禹之 +2 位作者 铃木 嚴长 哲郎 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第6期893-895,共3页

β－环糊精含硫衍生物自组单分子膜修饰金电极的选择穿透性研究何品刚，方禹之，铃木，嚴长，哲郎（华东师范大学化学系，上海，２０００６２）（东北大学药学部，仙台９８０，日本国）关键词硫辛酰－β－环糊精衍生物，自组单分子膜，... β－环糊精含硫衍生物自组单分子膜修饰金电极的选择穿透性研究何品刚，方禹之，铃木，嚴长，哲郎（华东师范大学化学系，上海，２０００６２）（东北大学药学部，仙台９８０，日本国）关键词硫辛酰－β－环糊精衍生物，自组单分子膜，金电极近年来，为在分子水平上控制和... 展开更多

关键词 硫辛酰 环糊精 自组单分子膜 金电极

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中国汉族人依赖还原型辅酶Ⅰ/Ⅱ醌氧化还原酶基因多态性 被引量：10

2

作者 邵明 刘焯霖 +2 位作者 陈彪 陶恩祥 潘锡榜 《中山医科大学学报》 CSCD 1998年第1期23-26,共4页

目的：确定中国汉族人依赖还原型辅酶Ⅰ／Ⅱ［ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ：］醌氧化还原酶（ＮＱＯ１）基因ｃＤＮＡ的６０９位点Ｃ→Ｔ（Ｃ６０９→Ｔ）突变的频率分布。方法：利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（ＰＣＲＲＦＬＰ）技术分... 目的：确定中国汉族人依赖还原型辅酶Ⅰ／Ⅱ［ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ：］醌氧化还原酶（ＮＱＯ１）基因ｃＤＮＡ的６０９位点Ｃ→Ｔ（Ｃ６０９→Ｔ）突变的频率分布。方法：利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（ＰＣＲＲＦＬＰ）技术分析了８１名正常中国汉族人ＮＱＯ１基因ｃＤＮＡ的６０９位点的多态性。结果：中国汉族人ＮＱＯ１基因的Ｃ６０９→Ｔ的频率为０４２６；基因型Ｔ６０９／Ｔ６０９、Ｃ６０９／Ｃ６０９与Ｃ６０９／Ｔ６０９的比率分别为０１７、０３２和０５１。结论：该结果提示中国汉族人ＮＱＯ１基因的Ｃ６０９→Ｔ位点的多态性分布规律与西方人有明显的差异。 展开更多

关键词 硫辛酰胺脱氢酶 多态性 依赖还原型 辅酶Ⅰ 汉族

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靶向铜死亡相关基因治疗类风湿关节炎生物信息学分析及干预中药的预测 被引量：8

3

作者 杨会军 郭响 +4 位作者 李伟青 苏小军 田雪梅 王海东 金芳梅 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第13期4253-4265,共13页

目的探索铜死亡相关基因在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)中的表达及其作用机制,并筛选通过靶向铜死亡基因治疗RA的潜在中药。方法通过检索GEO数据库获得RA芯片数据,分析铜死亡基因在RA中表达水平;依据铜死亡基因表达情况构建... 目的探索铜死亡相关基因在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)中的表达及其作用机制,并筛选通过靶向铜死亡基因治疗RA的潜在中药。方法通过检索GEO数据库获得RA芯片数据,分析铜死亡基因在RA中表达水平;依据铜死亡基因表达情况构建高表达亚型和低表达亚型,并进行差异分析,筛选出与RA相关的铜死亡基因。按不同分组对基因表达矩阵进行免疫浸润分析,并分析免疫浸润细胞与铜死亡基因之间的相关性。利用Kobas在线工具对差异基因进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。通过Herb数据库检索靶向铜死亡基因治疗RA的潜在中药及其有效成分,使用Autodock vina软件模拟药物与铜死亡靶蛋白结合活性。通过收集临床样本验证铜死亡相关基因在RA中表达水平。结果FDX1、DLD、DLAT、LIAS、GLS、LIPT1和PDHB 7个铜死亡相关基因在RA中差异表达。免疫浸润分析结果显示,在RA中活化的记忆CD4+T细胞、静息自然杀伤(natural killer,NK)细胞和中性粒细胞与铜死亡相关。富集分析结果显示,铜死亡主要与趋化因子信号通路、Toll样受体信号通路、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、核因子-κB信号通路、p53信号通路和过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路相关。虎杖叶可能是靶向铜死亡基因治疗RA的潜在中药。分子对接结果显示,虎杖叶有效成分均有与铜死亡靶蛋白结合的可能。DLD、GLS、FDX1、DLAT在RA患者外周血单个核细胞中m RNA表达水平升高。结论铜死亡相关基因表达水平与RA病程进展相关,并预测虎杖叶是潜在靶向铜死亡基因治疗RA的药物,为RA的临床诊疗及药物开发提供了新的方向和理论基础。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 铜死亡相关基因 免疫浸润 生物信息学 虎杖叶 二氢硫辛酰胺脱氢酶 谷氨酰胺酶 铁氧还原蛋白1 二氢硫辛酸转乙酰化酶

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溶藻弧菌二氢硫辛酰胺脱氢酶基因克隆及其生物信息学分析 被引量：9

4

作者 庞欢瑛 陈立明 +4 位作者 蔡佳 汤菊芬 王蓓 吴灶和 简纪常 《广东海洋大学学报》 CAS 2014年第1期1-8,共8页

根据溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)二氢硫辛酰胺脱氢酶(dihydrolipoamide dehydrogenase,DLD)的基因序列设计1对特异性引物。PCR扩增结果显示,DLD(GenBank登录号AGK62253)全长1 428 bp,共编码475个氨基酸残基。根据推导的氨基酸序列... 根据溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)二氢硫辛酰胺脱氢酶(dihydrolipoamide dehydrogenase,DLD)的基因序列设计1对特异性引物。PCR扩增结果显示,DLD(GenBank登录号AGK62253)全长1 428 bp,共编码475个氨基酸残基。根据推导的氨基酸序列预测其分子质量约为50.998 ku,等电点为5.51。细胞定位、SignalP 4.0、TMHMM Server 2.0和SoftBerry-Psite预测结果显示,DLD位于细胞质中,在第29至30个氨基酸之间存在信号肽,不存在跨膜区,氨基酸序列含有1个Asn-糖基化位点、5个蛋白激酶C磷酸化位点、6个酪蛋白激酶II磷酸化位点等多个活性位点。系统进化树结果显示,溶藻弧菌DLD与副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)聚为一簇。用Kyte-Doolittle亲水性参数、Karplus-Schulz柔韧性参数、Emini表面可及性参数和Jameson-Wolf抗原性参数分别预测,DLD可能的B细胞抗原优势表位分别是第5~10、106~110、120~125、158~163和175~180区段。利用SWISS-MODEL软件,模拟DLD亚基三维结构模型,结果显示其与大肠杆菌(Escherichia coli)DLD蛋白有相似构型。Kegg分析发现,其涉及糖酵解和糖异生等9条信号通路。从生物信息学角度验证了DLD作为弧菌共同抗原的可行性。 展开更多

关键词 溶藻弧菌 基因克隆 二氢硫辛酰胺脱氢酶 生物信息学分析

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猪链球菌二氢硫辛酰胺脱氢酶的原核表达及其粘附相关功能初探 被引量：6

5

作者 张静 孙建和 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2012年第2期34-40,共7页

目的:克隆、表达猪链球菌2型菌株ZY05719的膜蛋白二氢硫辛酰胺脱氢酶基因(hm6),分析其重组蛋白的生物学活性。方法:基于GenBank中S.suis P1/7SSU1634蛋白的基因序列设计引物,克隆ZY05719株的二氢硫辛酰胺脱氢酶基因并进行序列分析;构建p... 目的:克隆、表达猪链球菌2型菌株ZY05719的膜蛋白二氢硫辛酰胺脱氢酶基因(hm6),分析其重组蛋白的生物学活性。方法:基于GenBank中S.suis P1/7SSU1634蛋白的基因序列设计引物,克隆ZY05719株的二氢硫辛酰胺脱氢酶基因并进行序列分析;构建pET28a-hm6原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达,重组HM6蛋白即二氢硫辛酰胺脱氢酶用His亲和层析镍柱纯化后,通过SDS蛋白电泳鉴定分析并利用新西兰大白兔制备抗血清,研究其酶活性及其在介导猪链球菌粘附HEp-2细胞中的作用。结果:克隆了1 761bp的二氢硫辛酰胺脱氢酶基因,纯化的70kD重组融合蛋白具有良好的酶活性和免疫原性,且在介导猪链球菌粘附HEp-2细胞中具有作用。结论:成功克隆、表达了ZY05719株的二氢硫辛酰胺脱氢酶基因,初步揭示了其生物学活性,为深入研究二氢硫辛酰胺脱氢酶在猪链球菌致病机制中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 猪链球菌 二氢硫辛酰胺脱氢酶 酶活性 粘附特性

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双孢蘑菇部分cDNA文库的构建及筛选 被引量：4

6

作者 王泽生 陈美元 +4 位作者 廖剑华 卢政辉 郭仲杰 李洪荣 M.P.Wach 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期63-65,共3页

构建了双孢蘑菇Agaricus bisporus菌株AA和A41的部分cDNA文库,其滴度分别为1.0?05 pfu/ml和6.0×104pfu/ml。用地高辛标记的丛生差异片段探针对文库进行筛选,分别获得5个和3个阳性克隆。

关键词 双孢蘑菇 丛生变异 阳性克隆 二氢硫辛酰胺脱氢酶 CDNA文库

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LIPT1复合杂合变异致新生儿硫辛酰基转移酶-1缺乏症1例并文献复习

7

作者 朱莹莹 翁博雯 +4 位作者 许无恨 高莉 胡豪 龚小慧 孙婧婧 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期411-416,共6页

目的探讨硫辛酰基转移酶-1缺乏症(lipoyltransferase 1 deficiency,LIPT1D)的临床表型和基因型特点。方法回顾性分析2023年5月7日上海市儿童医院新生儿科收治的1例LIPT1D患儿的临床资料。以“硫辛酰基转移酶-1缺乏症”“LIPT1”“硫辛... 目的探讨硫辛酰基转移酶-1缺乏症(lipoyltransferase 1 deficiency,LIPT1D)的临床表型和基因型特点。方法回顾性分析2023年5月7日上海市儿童医院新生儿科收治的1例LIPT1D患儿的临床资料。以“硫辛酰基转移酶-1缺乏症”“LIPT1”“硫辛酸”为关键词在中国知网、万方数据库、维普数据库和中华医学期刊全文数据库,以“Lipoyltransferase 1 deficiency”“LIPT1”“Lipoic acid”为关键词在PubMed、Embase、Web of Science数据库检索建库至2023年9月15日发表的相关文献。总结LIPT1D的临床表现、生化表型和基因型特点。采用描述性统计分析。结果(1)本例患儿:生后1.5 h出现青紫、反应差,表现为难以纠正的代谢性酸中毒(血气pH值6.9,碱剩余-27 mmol/L,碳酸氢根5.7 mmol/L)和高乳酸血症(最高24 mmol/L),病情进展快,生后9 h死亡。生后6 h取血送检家系全外显子组测序,检出患儿LIPT1基因(NM_001204830.1)存在复合杂合变异,分别为来自母亲的c.986C>A(p.Ser329*)和来自父亲的c.405_406del(p.Arg135Serfs*18),均为疑似致病变异。(2)文献复习:共检索到LIPT1基因变异所致LIPT1D病例7例,加之本例,共8例。LIPT1D患儿主要表现为严重高乳酸血症、代谢性酸中毒、神经发育迟缓以及癫痫,其中4例在新生儿期发病并死亡。结论LIPT1D患儿主要临床表现为严重高乳酸血症、代谢性酸中毒和神经系统受累,可导致新生儿早期死亡,全外显子组测序对疾病诊断具有重要意义。 展开更多

关键词 硫辛酰基转移酶-1缺乏症 LIPT1基因 硫辛酸 乳酸酸中毒

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磷化氢的毒理及害虫对磷化氢的抗性机制研究进展 被引量：1

8

作者 王争艳 张闪 +1 位作者 刘之源 常珍珍 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期422-430,共9页

近60年来,熏蒸剂磷化氢被广泛用于储藏物害虫的防治。但是,长期、不合理地使用磷化氢,导致储藏物害虫抗药性的广泛产生。了解磷化氢的毒理机制可以为磷化氢抗性机制研究提供思路。早期的研究发现,磷化氢通过干扰神经传导、抑制能量代谢... 近60年来,熏蒸剂磷化氢被广泛用于储藏物害虫的防治。但是,长期、不合理地使用磷化氢,导致储藏物害虫抗药性的广泛产生。了解磷化氢的毒理机制可以为磷化氢抗性机制研究提供思路。早期的研究发现,磷化氢通过干扰神经传导、抑制能量代谢和破坏氧化还原系统,引起害虫死亡;但近年的研究表明,磷化氢致死害虫的主要机制是抑制能量生成和通过干扰氧化还原系统来增加氧化损伤。早期的研究发现,害虫对磷化氢的抗性机制主要包括主动排斥磷化氢、保护性昏迷和增强解毒酶活性。近年来,随着基因组学、蛋白组学和代谢组学的应用,相继出现一些新的磷化氢抗性机制,如穿透抗性、磷化氢作用靶标敏感性降低、能量代谢模式调整。越来越多的研究表明,靶标二氢硫辛酰胺脱氢酶突变以及抗氧化酶和解毒酶活性增强是主要的抗性机制,而能量代谢模式调整可能是抗性形成初期抵抗磷化氢不良影响的重要机制。采用基因渐渗的方法研究害虫磷化氢抗性突变的适合度代价可以更精准地预测抗性突变的进化方向。研究害虫的磷化氢抗性机制和抗性突变的进化潜力不仅有助于理解害虫抗药性的形成和生物的进化,同时对害虫的磷化氢抗性监测和治理有重要的意义。 展开更多

关键词 磷化氢 抗药性 二氢硫辛酰胺脱氢酶 氧化还原 能量代谢

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硫辛酰胺的合成与表征 被引量：2

9

作者 胡玉梅 熊亮 +2 位作者 黄涛 刘浩文 刘惠玲 《中南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2008年第4期13-15,共3页

为开发硫辛酰胺的新合成方法，以（-硫辛酸和苯并三唑为起始原料经硫辛酰苯并三唑中间体合成硫辛酰胺，并用红外光谱、核磁共振和元素分析对产物进行了分析和表征．结果显示：在1：1四氢呋喃／乙醇混合溶剂中，硫辛酰苯并三唑与28％氨水... 为开发硫辛酰胺的新合成方法，以（-硫辛酸和苯并三唑为起始原料经硫辛酰苯并三唑中间体合成硫辛酰胺，并用红外光谱、核磁共振和元素分析对产物进行了分析和表征．结果显示：在1：1四氢呋喃／乙醇混合溶剂中，硫辛酰苯并三唑与28％氨水在25-30℃反应可以制备得到硫辛酰胺，总收率81％． 展开更多

关键词 Α-硫辛酸 苯并三唑 硫辛酰苯并三唑 硫辛酰胺

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滑液囊支原体二氢硫辛酰胺脱氢酶的诱导表达及生物学特性

10

作者 曹晓怡 胡巧 +6 位作者 张文婷 邓兰兰 郭云清 卢琴 张蓉蓉 张鹤平 罗青平 《湖北农业科学》 2024年第12期205-210,共6页

为了获得滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)二氢硫辛酰胺脱氢酶(PdhD)的蛋白表达产物,分析蛋白的免疫原性,采用DNAStar Protean软件分析PdhD的二级结构和主要抗原域。将PdhD基因的第593、731、1712、1833 nt处的A突变为G,使改造成... 为了获得滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)二氢硫辛酰胺脱氢酶(PdhD)的蛋白表达产物,分析蛋白的免疫原性,采用DNAStar Protean软件分析PdhD的二级结构和主要抗原域。将PdhD基因的第593、731、1712、1833 nt处的A突变为G,使改造成功的基因能够在大肠杆菌BL21中正确表达;经IPTG诱导后获得约70 ku的蛋白。对PdhD蛋白的622个氨基酸进行二级结构的预测,Garnier-Robson法预测出18个α螺旋中心、12个β折叠区段和17个T转角区段,Chou-Fasman法预测出24个α螺旋中心、23个β折叠区段和37个T转角区段,Karplus-Schulz法预测出42个柔性区域。PdhD的主要抗原域为Gln27-Phe36、Vla38-Val51、Ala89-Ala99、Pro137-Asp159、Gly307-Ile336、Gly369-Gly386、Gly397-Gln416、Ala433-Val447、Ieu486-Tyr504、Ala541-Asn549。免疫原性分析发现,PdhD重组蛋白能与兔源Anti-MS血清发生强烈反应,与兔源Anti-MG血清和兔源血清Blank均不发生反应。PdhD具有免疫原性,可作为候选抗原用于亚单位疫苗的研发。 展开更多

关键词 滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae MS) 二氢硫辛酰胺脱氢酶 诱导表达 免疫原性分析 生物学特性

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基于生物信息学分析靶向铜死亡相关基因治疗心源性脑卒中

11

作者 王咪 王嘉雨 +3 位作者 彭芊语 何衡花 李经博 齐瑞 《卒中与神经疾病》 2024年第2期167-176,共10页

目的基于生物信息学和机器学习探究靶向心源性脑卒中的铜死亡相关特征基因,分析特征基因与心源性脑卒中之间的潜在关系。方法通过基因表达综合数据库(Gene expression omnibus,GEO)获取心源性脑卒中患者的相关数据集,基于该数据集对铜... 目的基于生物信息学和机器学习探究靶向心源性脑卒中的铜死亡相关特征基因,分析特征基因与心源性脑卒中之间的潜在关系。方法通过基因表达综合数据库(Gene expression omnibus,GEO)获取心源性脑卒中患者的相关数据集,基于该数据集对铜死亡相关基因进行差异性分析,采用聚类分析和机器学习筛选铜死亡特征基因,通过接收者操作特征曲线验证特征基因的准确性和构建疾病预测模型以预测心源性脑卒中患病的风险;利用免疫细胞浸润分析和基因集富集分析探究疾病和铜死亡亚型与免疫微环境的关系及铜死亡特征基因与免疫细胞的相关性和生理病理学过程。结果共筛选出3个铜死亡差异特征基因分别为丙酮酸脱氢酶E1亚基alpha 1(Pyruvate dehydrogenase E1 subunit alpha 1,PDHA1)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(Dihydrolipoamide dehydrogenase,DLD)、溶质载体家族31成员1(Solute carrier family 31 member 1,SLC31A1),3个特征基因表现出良好的准确性,并且其构建的疾病预测模型对心源性脑卒中的患病风险有良好的预测性。免疫浸润分析发现,心源性脑卒中与巨噬细胞、肥大细胞具有较强的相关性,3个特征基因同样与巨噬细胞、肥大细胞有一定的相关性,并且与嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和γδT细胞有很强的相关性。基因集富集分析表明,铜死亡主要与免疫炎症反应、三羧酸循环、丙酮酸代谢和神经营养因子信号传导通路集ErbB受体酪氨酸激酶家族(ErbB receptor tyrosine kinase family,ERBB)信号通路等密切相关。结论铜死亡特征基因PDHA1、DLD、SLC31A1和心源性脑卒中与免疫微环境之间存在很强的相关性,为心源性脑卒中的病理机制提供了依据,并为靶向药物的开发提供了方向,对心源性脑卒中的认识和治疗具有重要意义。 展开更多

关键词 心源性脑卒中 铜死亡 丙酮酸脱氢酶E1亚基alpha 1 二氢硫辛酰胺脱氢酶 溶质载体家族31成员1 生物信息学

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硫辛酸修饰胰岛素与胰岛素受体的结合能力 被引量：2

12

作者 黄涛 黄开勋 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2006年第2期65-68,共4页

目的考察硫辛酸修饰胰岛素与胰岛素受体的结合能力。方法通过与125I-胰岛素对大鼠肝细胞膜胰岛素受体的竞争结合,比较硫辛酰胰岛素(B29LA-ins)和天然猪胰岛素的受体结合能力。结果B29LA-ins与胰岛素受体的结合能力为天然猪胰岛素的4.8... 目的考察硫辛酸修饰胰岛素与胰岛素受体的结合能力。方法通过与125I-胰岛素对大鼠肝细胞膜胰岛素受体的竞争结合,比较硫辛酰胰岛素(B29LA-ins)和天然猪胰岛素的受体结合能力。结果B29LA-ins与胰岛素受体的结合能力为天然猪胰岛素的4.8倍。结论硫辛酸对LysB29的修饰提高了胰岛素的受体结合能力,这可能是促使其体内作用时间延长的因素之一。 展开更多

关键词 硫辛酸 胰岛素 硫辛酰胰岛素 胰岛素受体 竞争结合

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大鼠肺一氧化氮合酶阳性神经结构 被引量：3

13

作者 李光千 王健本 彭宣林 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期21-23,共3页

以还原型尼克酰腕腺嘌呤二核苷酸磷酸硫辛酰胺脱氢酶组织化学技术研究大鼠肺一氧化氮合酶阳性神经结构。结果表明:(1):气管、支气管树系统壁内神经节部分神经细胞为一氧化氮合酶阳性神经细胞;(2)部分强阳性神经细胞的突起穿越神经节延... 以还原型尼克酰腕腺嘌呤二核苷酸磷酸硫辛酰胺脱氢酶组织化学技术研究大鼠肺一氧化氮合酶阳性神经结构。结果表明:(1):气管、支气管树系统壁内神经节部分神经细胞为一氧化氮合酶阳性神经细胞;(2)部分强阳性神经细胞的突起穿越神经节延向管壁粘膜组织或肺组织;(3)在各级肺动、静脉及肺组织内分布有不同密度的一氧化氮合酶阳性神经纤维。 展开更多

关键词 硫辛酰胺脱氢酶 一氧化氮 神经节 肺

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对称性肢端角化病皮损中脂肪酸结合蛋白5及二氢硫辛酰胺脱氢酶表达 被引量：3

14

作者 杨珮珮 彭晶 +4 位作者 于作忠 施歌 黎兆军 张国学 樊翌明 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期844-848,共5页

目的：探讨脂肪酸结合蛋白5（FABP5）及二氢硫辛酰胺脱氢酶（DLD）在对称性肢端角化病中的表达和意义。方法收集9例对称性肢端角化病患者腕部皮损及其周围皮肤活检标本，9例健康人腕部皮肤为对照，用逆转录 PCR（RT-PCR）及免疫组化法检... 目的：探讨脂肪酸结合蛋白5（FABP5）及二氢硫辛酰胺脱氢酶（DLD）在对称性肢端角化病中的表达和意义。方法收集9例对称性肢端角化病患者腕部皮损及其周围皮肤活检标本，9例健康人腕部皮肤为对照，用逆转录 PCR（RT-PCR）及免疫组化法检测 FABP5及 DLD 表达水平。结果 RT-PCR 显示，FABP5 mRNA 及 DLD mRNA 表达在对称性肢端角化病患者腕部皮损、皮损周围皮肤、健康人腕部皮肤3组间差异均无统计学意义（P 〉0.05）。免疫组化显示，对称性肢端角化病皮损中 FABP5阳性染色范围和强度增加，角质层、颗粒层、棘层均有强染色；而皮损周围皮肤中角质层、颗粒层及棘层弱阳性染色，健康对照皮肤中仅有棘层和基底层弱阳性染色。对称性肢端角化病皮损中 DLD 表达减少，仅在角质层和少数病例棘层表达；皮损周围及健康人皮肤表皮全层均有 DLD 阳性染色，胞核、胞质均呈深棕色。结论对称性肢端角化病皮损中 FABP5高表达可能参与角质形成细胞异常分化过程，而 DLD 表达下调提示存在能量代谢失衡。 展开更多

关键词 角化病 脂肪酸结合蛋白质类 二氢硫辛酰胺脱氢酶 对称性肢端角化病

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二氢硫辛酰转乙酰基酶通过乙酰化磷酸葡糖酸脱氢酶促进核酸合成 被引量：3

15

作者 孙明明 乔亚亚 +2 位作者 李垒垒 山长亮 张帅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期339-346,共8页

丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydrogenase complex,PDC)是位于线粒体内的多酶复合物,催化丙酮酸不可逆地氧化脱羧转为乙酰辅酶A,二氢硫辛酰转乙酰基酶(dihydrolipoyl acetyltransferase,DLAT)是PDC的1个亚基。PDC在细胞线粒体呼吸中... 丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydrogenase complex,PDC)是位于线粒体内的多酶复合物,催化丙酮酸不可逆地氧化脱羧转为乙酰辅酶A,二氢硫辛酰转乙酰基酶(dihydrolipoyl acetyltransferase,DLAT)是PDC的1个亚基。PDC在细胞线粒体呼吸中发挥关键作用。但是DLAT在核酸合成中的作用仍不清楚。在本研究中,首先利用GEO数据库、Oncomine数据库和人类蛋白质图谱数据库分析发现,DLAT在肺癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P=0.0002),并且高表达DLAT的病人有较短的生存期(HR=1.47,logrank P=4e-09)。因此推测,DLAT在肿瘤生长中发挥关键作用。进而本文构建了敲低DLAT的肺癌细胞系,并用免疫印迹结果验证了DLAT敲低效果。进一步的研究发现,敲低DLAT将降低戊糖磷酸途径第3个酶磷酸葡糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase,6PGD)的乙酰化水平,进而降低6PGD酶活性,从而导致核酸合成受阻(P<0.01),最终抑制肺癌细胞增殖(P<0.01)。机制研究发现,DLAT通过乙酰化6PGD而使其酶活性增强,进而提高核酸合成,从而达到促进肺癌细胞增殖的作用。综上所述,本研究为DLAT作为潜在的靶点,为药物开发和临床肺癌的治疗提供了新的思路。 展开更多

关键词 线粒体 二氢硫辛酰转乙酰基酶 磷酸葡糖酸脱氢酶 戊糖磷酸途径

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硫辛酰苯并三唑的合成及反应活性 被引量：1

16

作者 黄涛 黄开勋 《化学与生物工程》 CAS 2005年第8期25-27,共3页

采用二环己基碳二亚胺缩合法由α-硫辛酸和苯并三唑合成了硫辛酰苯并三唑,产率75%,并利用FTIR和1HNMR对产物进行了表征;通过考察硫辛酰苯并三唑对胰岛素的化学修饰作用,进一步证明了它的合成是成功的,并且对胰岛素的侧链氨基呈现较高的... 采用二环己基碳二亚胺缩合法由α-硫辛酸和苯并三唑合成了硫辛酰苯并三唑,产率75%,并利用FTIR和1HNMR对产物进行了表征;通过考察硫辛酰苯并三唑对胰岛素的化学修饰作用,进一步证明了它的合成是成功的,并且对胰岛素的侧链氨基呈现较高的修饰反应活性。 展开更多

关键词 Α-硫辛酸 苯并三唑 硫辛酰苯并三唑

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枯草芽孢杆菌胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶的纯化 被引量：2

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作者 武爱民 江正强 +1 位作者 韦赟 苏春元 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期16-19,共4页

采用弱阴离子树脂DEAE-52和蓝色琼脂糖凝胶FF层析对枯草芽孢杆菌产生的胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶的粗酶液进行2步纯化,得到电泳纯的二氢硫辛酰胺脱氢酶,纯化倍数为59.7,收率为46.9%。通过SDS-PAGE法测得其亚基分子质量为64.6 ku,Superdex... 采用弱阴离子树脂DEAE-52和蓝色琼脂糖凝胶FF层析对枯草芽孢杆菌产生的胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶的粗酶液进行2步纯化,得到电泳纯的二氢硫辛酰胺脱氢酶,纯化倍数为59.7,收率为46.9%。通过SDS-PAGE法测得其亚基分子质量为64.6 ku,Superdex 75法测得其分子质量为67.5 ku,表明枯草芽孢杆菌WY34产胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶为单亚基蛋白质。本研究采用的二氢硫辛酰胺脱氢酶的纯化方法,简便且收率较高。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 二氢硫辛酰胺脱氢酶 纯化 单亚基蛋白

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NAC抑制镉离子诱导的小鼠精子DLD酪氨酸磷酸化作用 被引量：2

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作者 文艺 杨强震 +6 位作者 李思思 陈俊 刘旭睿 刘桓 李培飞 王立蕊 李新红 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2019年第2期37-46,共10页

重金属镉是环境中广泛存在的污染物,对机体生殖系统有很强的毒性作用。镉能诱导精子细胞蛋白二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLD)发生酪氨酸磷酸化修饰,但机制尚不清楚。本研究利用蛋白免疫印迹技术探讨镉离子对小鼠生殖系统的毒性作用、镉诱导生... 重金属镉是环境中广泛存在的污染物,对机体生殖系统有很强的毒性作用。镉能诱导精子细胞蛋白二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLD)发生酪氨酸磷酸化修饰,但机制尚不清楚。本研究利用蛋白免疫印迹技术探讨镉离子对小鼠生殖系统的毒性作用、镉诱导生殖细胞蛋白发生酪氨酸磷酸化修饰的机理及抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对精子的保护作用。结果表明,镉离子能减弱生殖细胞的能量代谢水平,从而抑制睾丸的生长发育并导致产仔数下降;镉离子能特异性诱导精子DLD蛋白发生酪氨酸磷酸化修饰,且与钙离子具有协同作用。此外,NAC可在体外有效抑制DLD蛋白发生酪氨酸磷酸化从而抑制镉的生殖毒性,并恢复精子能量水平和活力参数。本研究从NAC抑制镉离子诱导特异性蛋白磷酸化修饰的角度,揭示NAC保护作用机制,旨在为镉离子生殖毒理学研究及疾病防治提供理论基础。 展开更多

关键词 镉 小鼠精子 二氢硫辛酰胺脱氢酶 磷酸化 N-乙酰-L-半胱氨酸

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新型穿心莲内酯衍生物AL-1的定性定量方法研究 被引量：1

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作者 李威 黎赛 +2 位作者 任俊兰 王玉强 于沛 《中南药学》 CAS 2010年第12期881-883,共3页

目的建立穿心莲内酯衍生物14-硫辛酰-3,19-二羟基-穿心莲内酯(AL-1)的定性定量研究方法。方法采用化学显色法和薄层色谱鉴定其理化性质,采用高效液相色谱法进行定性定量分析,色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为... 目的建立穿心莲内酯衍生物14-硫辛酰-3,19-二羟基-穿心莲内酯(AL-1)的定性定量研究方法。方法采用化学显色法和薄层色谱鉴定其理化性质,采用高效液相色谱法进行定性定量分析,色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05%磷酸二氢钾缓冲液(77∶23),流速1.0 mL.min-1,检测波长224 nm,柱温30℃。结果 AL-1的峰面积与浓度线性关系良好,回归方程为:y=18.5x-36.08,r=0.999,线性范围0.025～160μg.mL-1,平均加样回收率为97.6%,RSD为2.4%。结论本法简便、准确、可靠,可作为AL-1的定性定量方法。 展开更多

关键词 14-R-硫辛酰-3 19-二羟基-穿心莲内酯 高效液相色谱法 定性定量方法

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一例DLD基因新变异致二氢硫辛酰胺脱氢酶缺乏症患儿的临床及遗传学分析 被引量：1

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作者 毋盛楠 陈永兴 +2 位作者 陈琼 沈凌花 卫海燕 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2020年第12期1356-1359,共4页

目的对1例二氢硫辛酰胺脱氢酶(dihydrolipoamide dehydrogenase,DLD)缺乏症患儿DLD基因进行变异分析,明确其致病原因。方法应用全外显子测序及Sanger测序法对患儿DLD基因进行变异检测。结果测序结果显示患儿DLD基因存在c.704_705delTT(p... 目的对1例二氢硫辛酰胺脱氢酶(dihydrolipoamide dehydrogenase,DLD)缺乏症患儿DLD基因进行变异分析,明确其致病原因。方法应用全外显子测序及Sanger测序法对患儿DLD基因进行变异检测。结果测序结果显示患儿DLD基因存在c.704_705delTT(p.Leu235Argfs*8)和c.1058T>C(p.Ile353Thr)复合杂合变异,其表型正常的父母分别携带c.704_705delTT(p.Leu235Argfs*8)杂合变异和c.1058T>C(p.Ile353Thr)杂合变异,患儿弟弟未携带上述2个变异。其中c.1058T>C(p.Ile353Thr)变异为已报道的致病变异;c.704_705delTT(p.Leu235Argfs*8)变异为未报道过的新变异,参照美国医学遗传学与基因组学学会评级指南提示其为致病性变异(PVS1+PM2+PP4)。结论DLD基因c.704-705delTT和c.1058T>C变异为该患儿的致病原因,基因检测结果可为临床诊断、家系遗传咨询和产前诊断提供依据。 展开更多

关键词 二氢硫辛酰胺脱氢酶 DLD基因 乳酸性酸中毒 低血糖 肝损害

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