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题名农杆菌介导法将硝酸还原酶基因转入大白菜的研究
被引量：4
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作者
张艳萍
陈玉梁
张正英
肖兴国
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机构
甘肃省农业科学院生物技术研究所
中国农业大学
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出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009年第30期14597-14599,共3页
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基金
甘肃省科学事业费项目(QS022-C31-048)
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文摘
[目的]建立大白菜的硝酸还原酶基因(NR)转化体系。[方法]以大白菜北京小杂60为材料,通过农杆菌LBA4404介导,将硝酸还原酶基因(NR)转入大白菜,对获得的转NR基因苗进行PCR检测、Southern杂交检测以及硝酸盐含量测定。[结果]试验初步建立了一套大白菜的转化体系,即以预培养2d苗龄4d的大白菜不带柄半子叶为外植体,在OD600nm值约为0.6的农杆菌工程菌液中浸染8min,然后在pH值为5.8且不加抗生素的分化培养基中将子叶与菌共培养2d,其后经过诱导、抗生素筛选、生根生长等过程,获得抗性植株,转化频率为6.48%。对抗性植株采用分级筛选,获得8株转NR基因苗。[结论]试验证实,NR基因已整合进大白菜的基因组中并得到表达,植株体内的硝酸盐含量均低于对照。
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关键词
大白菜
农杆菌
硝酸还原酶基因(nr)
硝酸盐含量
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Keywords
Chinese cabbage
Agrobacterium
Nitrate reduetase （nr） gene
Nitrate content
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分类号
S634.1
[农业科学—蔬菜学]
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题名萝卜硝酸还原酶基因的克隆与表达分析
被引量：1
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作者
武悦
徐良
王娟娟
龚义勤
谢洋
柳李旺
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机构
南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺学院
全国农业技术推广服务中心
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出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期205-211,共7页
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基金
国家自然科学基金项目(31372064)
江苏省自然科学基金项目(BK20140706)
+1 种基金
江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(12)2006
CX(13)2007]
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文摘
[目的]为揭示萝卜（Raphanus sativus L.）硝酸还原酶基因（RsNR）的分子特征,降低硝酸盐含量,对萝卜RsNR基因进行分离与表达特性研究。[方法]基于本实验室转录组测序所得unigene序列分离RsNR基因cDNA,利用生物信息学方法进行序列分析,采用RT-qPCR方法对不同浓度KNO3（0、5、20、30和50mmol·L^-1）和不同时间（0、4、8、12和24h）处理的萝卜中RsNR基因表达进行检测,并测定硝酸盐含量和硝酸还原酶活性（NRA）。[结果]获得萝卜RsNR基因cDNA序列（GenBank登录号：KM272859）,开放阅读框为2742bp,编码913个氨基酸,RsNR与油菜NR基因（D38219）氨基酸序列相似性为95%。在30mmol·L^-1NO3^--N诱导下,萝卜叶片和根中RsNR基因表达量最高。在30mmol·L^-1NO3^--N诱导初期,叶片和根中RsNR表达量4h达到最大值,随后呈下降趋势;随着硝酸盐处理浓度升高,NRA、硝酸盐含量和RsNR基因表达量均呈先升后降趋势,0～4h内叶片和根中三者均上升,4～24h内NRA和RsNR基因表达下降,而硝酸盐含量呈上升趋势。[结论]NO3^--N可能在转录水平上调控萝卜RsNR基因表达,进而影响其硝酸盐含量和NRA。
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关键词
萝卜
基因表达
硝酸还原酶基因(nr)
NO3^--N处理
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Keywords
Raphanus sativus L.
gene expression
nitrate reductase gene（nr）
NO-3-N treatment
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分类号
S631.1
[农业科学—蔬菜学]
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