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高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用技术用于胁迫富硒海带硒形态研究 被引量:26
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作者 仲娜 王小如 +2 位作者 杨黄浩 曹煊 王庚 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期77-80,共4页
通过对海带胁迫富硒培养,研究了海带对硒的富集总量及硒化学形态转变.建立了反相离子对缓冲盐等3个色谱系统的高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用(RP-HPLC-ICP-MS)技术测定亚硒酸钠、硒甲基半胱氨酸(MeSeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)... 通过对海带胁迫富硒培养,研究了海带对硒的富集总量及硒化学形态转变.建立了反相离子对缓冲盐等3个色谱系统的高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用(RP-HPLC-ICP-MS)技术测定亚硒酸钠、硒甲基半胱氨酸(MeSeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)三种硒形态.采用3种提取溶剂,超声提取缩短提取时间,分离检测富硒海带的主要硒形态为亚硒酸钠、硒甲基半胱氨酸和硒代蛋氨酸. 展开更多
关键词 海带 RP—HPLC—ICP—MS SEC—HPLC—ICP—MS 总量 形态 酸钠 甲基半胱氨酸 代蛋氨酸
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气相色谱串联四极杆质谱法对富硒包菜汁中硒甲基硒半胱氨酸与硒蛋氨酸的测定 被引量:14
2
作者 吴胜芳 莫海珍 +1 位作者 王利平 刘杨岷 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1334-1337,共4页
建立了一种快速分析富硒包菜汁中硒甲基硒半胱氨酸和硒蛋氨酸含量的方法。以氯甲酸乙酯作衍生化试剂,利用串联质谱技术在多离子监测模式下对衍生物进行GC-MS/MS测定。方法的线性范围为0.01~25 mg/L,线性相关系数r≥0.9988;方法检出限... 建立了一种快速分析富硒包菜汁中硒甲基硒半胱氨酸和硒蛋氨酸含量的方法。以氯甲酸乙酯作衍生化试剂,利用串联质谱技术在多离子监测模式下对衍生物进行GC-MS/MS测定。方法的线性范围为0.01~25 mg/L,线性相关系数r≥0.9988;方法检出限分别为硒甲基硒半胱氨酸(met-Se-cys)4μg/L、硒蛋氨酸(Se-met)2μg/L;met-Se-cys的方法回收率为82%~97%,RSD小于6.3%,Se-met的方法回收率为100%~109%,RSD小于7.5%。结果表明该方法简单、快速、准确,并能有效排除基质的干扰,适合于食品中硒甲基硒半胱氨酸和硒蛋氨酸的定性定量分析。 展开更多
关键词 包菜 四极杆串联质谱 衍生化 甲基半胱氨酸 氨酸
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硒甲基硒代半胱氨酸对THP-1细胞源性泡沫细胞炎症因子表达的影响及其机制
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作者 陈丹 袁林 +4 位作者 高星星 夏燕 张宗星 李玮怡 汪莲开 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2218-2225,共8页
目的:探究硒甲基硒代半胱氨酸(L-SeMSC)抑制人单核白血病细胞THP-1源性巨噬细胞泡沫化的作用机制。方法:先用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞源性巨噬细胞,再用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞模型。CCK-8法和流式细... 目的:探究硒甲基硒代半胱氨酸(L-SeMSC)抑制人单核白血病细胞THP-1源性巨噬细胞泡沫化的作用机制。方法:先用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞源性巨噬细胞,再用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞模型。CCK-8法和流式细胞术检测不同浓度L-SeMSC对THP-1细胞活性和凋亡的影响;油红O染色观察脂滴的沉积;并通过qRT-PCR法检测白细胞介素1β(IL-1β)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、脂肪酸转位酶(FAT/CD36)、溶质载体家族27成员4(SLC27A4)和超氧化物歧化酶1(SOD1)的mRNA水平;Western blot检测IL-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶9(MMP9)及核因子κB(NF-κB)信号相关蛋白水平。结果:25~200μmol/L的L-SeMSC增加细胞活力,不同浓度的L-SeMSC对细胞凋亡没有显著影响。与ox-LDL组相比,LSeMSC组细胞脂滴沉积明显减少;CD36、SLC27A4、IL-1β和ICAM-1的mRNA水平显著降低,同时抗氧化酶SOD1的mRNA水平明显增加;IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP9及磷酸化p65(p-p65)蛋白水平均明显减少。结论:L-SeMSC可能具有抗动脉粥样硬化作用,其通过降低炎性因子的水平、抑制泡沫化的发生、减少巨噬细胞脂滴的形成,相关抗炎机制可能主要是通过调控NF-κB信号通路中的关键蛋白表达。 展开更多
关键词 甲基半胱氨酸 动脉粥样硬化 炎症因子 脂滴形成
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茶叶中硒蛋白检测与营养功能研究进展
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作者 丁颀 宁弋珍 +2 位作者 张菁 谢春生 张宝杰 《广东茶业》 2022年第3期2-5,共4页
近年来,富硒茶的研究与推广得到了快速发展,茶叶中硒蛋白检测与营养功能的研究引起了广泛重视。本文主要介绍了硒蛋白常用的检测方法,重点介绍了硒代甲基半胱氨酸(SeMeCys)、硒代半胱氨酸(SeC)、硒代蛋氨酸(SeMet)和硒蛋白P(SePP1)等的... 近年来,富硒茶的研究与推广得到了快速发展,茶叶中硒蛋白检测与营养功能的研究引起了广泛重视。本文主要介绍了硒蛋白常用的检测方法,重点介绍了硒代甲基半胱氨酸(SeMeCys)、硒代半胱氨酸(SeC)、硒代蛋氨酸(SeMet)和硒蛋白P(SePP1)等的营养功能及检测方法的研究进展。 展开更多
关键词 茶叶 蛋白 甲基半胱氨酸 半胱氨酸 蛋白P
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硒甲基硒代半胱氨酸对神经母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响 被引量:1
5
作者 刘慧纯 王从平 +2 位作者 刘群会 李文静 贾敏 《中西医结合心脑血管病杂志》 2021年第9期1508-1511,共4页
目的观察硒甲基硒代半胱氨酸(MSC)对神经母细胞瘤(NB)细胞增殖及凋亡的影响,并初探其作用机制。方法不同浓度MSC处理NB细胞株SH-SY5Y和SK-N-DZ。用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;用流式细胞仪检测各组细胞周期和凋亡情况;采用蛋白免疫印... 目的观察硒甲基硒代半胱氨酸(MSC)对神经母细胞瘤(NB)细胞增殖及凋亡的影响,并初探其作用机制。方法不同浓度MSC处理NB细胞株SH-SY5Y和SK-N-DZ。用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;用流式细胞仪检测各组细胞周期和凋亡情况;采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组凋亡相关蛋白。结果MSC作用于NB细胞(SH-SY5Y细胞和SK-N-DZ细胞)24 h后,细胞存活率明显降低;随MSC浓度升高,SH-SY5Y细胞和SK-N-DZ细胞存活率均明显下降,SH-SY5Y细胞和SK-N-DZ细胞的半抑菌浓度(IC50)分别为(47.89±1.74)μmol/L和(49.42±0.38)μmol/L,后期仅选用浓度分别为5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L MSC处理NB细胞。与空白对照组比较,25μmol/L和50μmol/L MSC干预后SK-N-DZ细胞早期凋亡率明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.001);不同浓度MSC处理后,SH-SY5Y和SK-N-DZ细胞周期G_(0)/G_(1)、S、G_(2)/M比较,差异均无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L MSC干预后SK-N-DZ细胞caspase-3和SH-SY5Y细胞caspase-9蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.001)但caspase-8蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论MSC主要通过激活内源性凋亡通路诱导细胞凋亡抑制NB细胞生长,与细胞周期无相关性。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 甲基半胱氨酸 细胞增殖 细胞凋亡 实验研究
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液相色谱串联质谱法定量检测青花菜中L-硒甲基硒代半胱氨酸 被引量:19
6
作者 张明 杜业刚 +1 位作者 林少彬 杨文婕 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期244-246,共3页
建立了液相色谱串联质谱(LC-MS-MS)法测定青花菜中L-硒甲基硒代半胱氨酸(SeMC)含量的方法。植物样品经沸水提取,以甲醇-0.1%七氟丁酸水溶液(30∶70)为流动相,滤液经Waters Symmetry C18(50 mm×3.9 mm,5μm)分离,经在线电喷雾离子源... 建立了液相色谱串联质谱(LC-MS-MS)法测定青花菜中L-硒甲基硒代半胱氨酸(SeMC)含量的方法。植物样品经沸水提取,以甲醇-0.1%七氟丁酸水溶液(30∶70)为流动相,滤液经Waters Symmetry C18(50 mm×3.9 mm,5μm)分离,经在线电喷雾离子源(ESI)正离子化后,采用多反应离子监测方式(MRM)选择m/z184.0→(167.0,94.9)测定SeMC。SeMC的线性范围为0-200 mg/L,准确度在96%-114%之间,日内日间精密度(RSD)在±10%内。检出限为0.1 mg/kg。结果表明:本方法高效、准确,特异性强,样品处理简单,可准确定量富硒青花菜中的SeMC。 展开更多
关键词 L-甲基半胱氨酸 液相色谱-串联质谱法
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L-硒甲基硒代半胱氨酸的化学合成方法代谢途径及其生物活性的研究进展 被引量:8
7
作者 姚昭 张小平 +1 位作者 邓泽元 李红艳 《农产品加工(下)》 2012年第11期122-125,135,共5页
L-硒甲基硒代半胱氨酸是硒代半胱氨酸的甲基化衍生物,其特殊的甲基化结构使其能在β-裂解酶的作用下,直接分解生成甲基化硒进入甲基硒代谢池。相对于无机硒及其他有机硒,其在人体内具有毒性低、生物利用率高、抗癌活性强等特点。主要介... L-硒甲基硒代半胱氨酸是硒代半胱氨酸的甲基化衍生物,其特殊的甲基化结构使其能在β-裂解酶的作用下,直接分解生成甲基化硒进入甲基硒代谢池。相对于无机硒及其他有机硒,其在人体内具有毒性低、生物利用率高、抗癌活性强等特点。主要介绍了L-硒甲基硒代半胱氨酸的化学合成方法及其在人体内的代谢途径和主要生物活性。 展开更多
关键词 L-甲基半胱氨酸 化学合成方法 代谢 生物活性
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不同形态硒对炎性疼痛大鼠T细胞免疫功能与Foxp3表达的调控及作用机制
8
作者 张天蔚 彭婷 +2 位作者 李永寿 李永武 王艳波 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期2698-2704,共7页
目的探究L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-SeMC)、亚硒酸钠(Na_(2)SeO_(3))对炎性疼痛大鼠免疫功能的影响,并从叉头样蛋白(Fox)p3和核转录因子(NF)-κB途径探索其作用机制。方法采用甲醛诱导大鼠建立炎性疼痛模型,实验分为空白对照组、模型组、L... 目的探究L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-SeMC)、亚硒酸钠(Na_(2)SeO_(3))对炎性疼痛大鼠免疫功能的影响,并从叉头样蛋白(Fox)p3和核转录因子(NF)-κB途径探索其作用机制。方法采用甲醛诱导大鼠建立炎性疼痛模型,实验分为空白对照组、模型组、L-SeMC组、Na_(2)SeO_(3)组,每组10只。造模24 h后,L-SeMC组灌胃10μg/(kg·d)的L-SeMC,Na_(2)SeO_(3)组灌胃10μg/(kg·d)的Na_(2)SeO_(3),空白对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,连续灌胃14 d。检测足跖肿胀率,Von-Frey针刺检测足底疼痛阈值,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10水平,分离脾脏单个核细胞并制备悬液,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD8^(+)表达,免疫荧光染色检测脊髓背角Foxp3和离子钙结合衔接分子(Iba)-1表达,Western印迹检测脊髓背角Foxp3和NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组足跖肿胀率增加,机械痛阈值降低,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量增高,IL-10含量降低,脊髓背角Iba-1、Foxp3蛋白表达上调,p-IκBα/IκBα、p-p65/p65比值均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,L-SeMC组和Na_(2)SeO_(3)组足跖肿胀率下降,机械痛阈值升高,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量降低,IL-10含量升高,脊髓背角Iba-1、Foxp3蛋白表达下调,p-IκBα/IκBα、p-p65/p65比值均下降,差异有统计学意义(P<0.01)。而4组CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞比率及CD4^(+)/CD8^(+)比值差异均无统计学意义(P>0.05)。结论L-SeMC和Na_(2)SeO_(3)对大鼠炎性疼痛具有缓解作用,能够减少炎症细胞因子释放,抑制Foxp3表达与NF-κB信号通路激活,但对淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD8^(+)表达无影响。 展开更多
关键词 炎性疼痛 L-甲基半胱氨酸 酸钠 T细胞免疫
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L-硒-甲基硒代半胱氨酸和亚硒酸钠对大肠癌Lovo细胞生长及凋亡的影响 被引量:1
9
作者 姚昭 高红英 +2 位作者 王伟业 李升 李小平 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期578-582,共5页
目的通过有机硒—L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-Se-methylselenocysteine,L-SeMSC)和无机硒—亚硒酸钠(sodium selenite,SS)对大肠癌Lovo细胞的作用,研究不同硒对Lovo细胞活力、生长及凋亡相关蛋白的影响。方法将不同硒与Lovo细胞作用24h后,... 目的通过有机硒—L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-Se-methylselenocysteine,L-SeMSC)和无机硒—亚硒酸钠(sodium selenite,SS)对大肠癌Lovo细胞的作用,研究不同硒对Lovo细胞活力、生长及凋亡相关蛋白的影响。方法将不同硒与Lovo细胞作用24h后,MTT法测定细胞活力,Western blot测定细胞生长相关蛋白CDK2、CDK4、CyclinD1及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9蛋白的表达量。结果两种硒均能抑制Lovo细胞活力,且相同浓度L-SeMSC与SS相比,对细胞活力抑制作用更强(P<0.05);两种硒均能降低CDK4及CyclinD1蛋白表达,且L-SeSMC能降低CDK2表达,但0.2mg/LSS却提高CKD2表达;两种硒均能提升Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9的表达,相同浓度(0.1mg/L与0.2mg/L)L-SeMSC与SS相比,对Caspase-3和Caspase-8提升作用更显著(P<0.05)。结论与SS相比,L-SeMSC对Lovo细胞具有更强的活性抑制作用和促凋亡作用。 展开更多
关键词 L-甲基半胱氨酸 酸钠 LOVO细胞
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L-硒甲基硒代半胱氨酸对大鼠组织硒分布及GPx-1表达的影响 被引量:1
10
作者 钟玉婷 王进 +4 位作者 张佳玉 黄洁 郭仁妹 潘斐 李建祥 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期249-254,共6页
目的观察给予L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-Se-methyl selenocysteine,MSCys)对大鼠体内组织硒分布及对谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase1,GPx-1)的影响。方法 60只成年大鼠雌雄各半分为空白对照组(Blank)、MSCys低剂量(10μg/kg&... 目的观察给予L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-Se-methyl selenocysteine,MSCys)对大鼠体内组织硒分布及对谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase1,GPx-1)的影响。方法 60只成年大鼠雌雄各半分为空白对照组(Blank)、MSCys低剂量(10μg/kg·bw)和MSCys高剂量(25μg/kg·bw)共3组,灌胃给药。空白对照组给予等体积蒸馏水。连续给药30d(T30)后停止给药,半数大鼠安乐死后取肝、肾、肌肉组织。剩余大鼠继续饲养30d(S30),取肝肾肌肉组织。实验期间每10d采集大鼠毛发和血清。原子荧光光谱法测定血清、毛发、肝、肾和肌肉中总硒含量;ELISA法测定肝、肾和肌肉组织中的GPx-1的含量。结果实验期间,各组内雌雄大鼠各指标均差异显著(P<0.05),故雌雄大鼠均分别进行统计学分析。在给药3~4 w,高剂量MSCys组大鼠的每周体重增加量显著低于低剂量MSCys组和空白对照组(均P<0.05)。在整个实验期间各给药组的毛发和血硒含量均显著高于空白对照(Blank)组(均P<0.05),并且在多数时间点高剂量组大鼠的毛发和血硒含量均显著高于低剂量组(P<0.05)。给药30d(T30)和停药30d(S30)各剂量组大鼠肝、肾和肌肉硒含量均显著高于对照组(均P<0.05),并且在T30时,高剂量组大鼠肝、肾和肌肉硒含量均显著高于低剂量组(均P<0.05),肝和肌肉组织中的这种升高仍持续到S30(均P<0.05)。同样,在T30时各剂量组大鼠肝、肾GPx-1含量均显著高于对照组(均P<0.05),高剂量组肝脏GPx-1含量显著高于低剂量组(均P<0.05)。T30时各剂量组大鼠肝脏GPx-1含量仍显著高于对照组(均P<0.05),在雌性大鼠中高低剂量组差异显著(P<0.05)。同样高剂量组肾脏GPx-1含量显著高于低剂量组(P<0.05),并且二者均高于对照组。结论长期给大鼠灌胃L-硒甲基硒代半胱氨酸能够增加大鼠体内组织的硒含量,且能够促进机体多个组织GPx-1水平。[营养学报,2020,42(3):249-254] 展开更多
关键词 L-甲基半胱氨酸 大鼠 组织分布 甘肽过氧化物酶1
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不同形态硒对结肠癌Lovo细胞粘附及迁移功能的影响 被引量:1
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作者 姚昭 吴淑琴 +1 位作者 刘阳红 李小平 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期323-326,共4页
目的探讨L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-SeMSC)和亚硒酸钠(SS)对结肠癌Lovo细胞粘附及迁移能力的影响。方法采用MTT法、划痕实验、粘附实验分别检测不同形态硒对Lovo细胞增殖、迁移、粘附能力的影响;采用Western blot检测CDC37、MMP2和MMP9蛋... 目的探讨L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-SeMSC)和亚硒酸钠(SS)对结肠癌Lovo细胞粘附及迁移能力的影响。方法采用MTT法、划痕实验、粘附实验分别检测不同形态硒对Lovo细胞增殖、迁移、粘附能力的影响;采用Western blot检测CDC37、MMP2和MMP9蛋白的表达。结果两种硒具有抑制Lovo细胞增殖作用,且随着药物浓度的增加,抑制作用增强,相同浓度下,L-SeMSC对细胞抑制作用更强(P<0.05)。两种硒均能缩短Lovo细胞的迁移距离、降低细胞粘附率,与SS相比,在中(0.1 mg/L)、高(0.2 mg/L)浓度组,L-SeMSC的抑制Lovo细胞迁移和粘附的能力更强。不同浓度L-SeMSC均能抑制CDC37和MMP2的表达,且具有浓度依赖性;高浓度(0.2 mg/L)SS能抑制CDC37、MMP2和MMP9的表达,但作用弱于相同浓度L-SeMSC。结论 L-SeMSC和SS均能通过降低CDC37、MMP2和MMP9的表达抑制结肠癌Lovo细胞的粘附和迁移能力,相同浓度L-SeMSC作用强于SS。 展开更多
关键词 L-甲基半胱氨酸 酸钠 LOVO细胞 迁移 粘附
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新型营养强化剂L-硒-甲基硒代半胱氨酸的研究进展 被引量:13
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作者 刘建群 赵元 +2 位作者 张锐 舒积成 张小平 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2011年第2期152-156,共5页
L-硒-甲基硒代半胱氨酸是一种天然含硒氨基酸,具有防治癌症、抗氧化、抗衰老、治疗心脑血管疾病、解重金属毒等作用,已于2009年被卫生部批准为新型营养强化剂。现代药理学研究表明不同形式的硒具有不同的抗癌效果,L-硒-甲基硒代半胱氨... L-硒-甲基硒代半胱氨酸是一种天然含硒氨基酸,具有防治癌症、抗氧化、抗衰老、治疗心脑血管疾病、解重金属毒等作用,已于2009年被卫生部批准为新型营养强化剂。现代药理学研究表明不同形式的硒具有不同的抗癌效果,L-硒-甲基硒代半胱氨酸被证明是有效的化学抗癌剂之一。本文对L-硒-甲基硒代半胱氨酸的来源、抗癌作用机理、测定方法及其应用进行了综述。 展开更多
关键词 L--甲基半胱氨酸 营养强化剂 抗癌作用 研究进展
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硒-甲基硒代半胱氨酸的合成与拆分研究 被引量:10
13
作者 刘建群 刘芳 +1 位作者 张小平 寇晓莉 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1498-1501,共4页
2-Acetamidoacrylic acid or methyl 2-acetamidoacrylate is reacted with solution of sodium of methylselenol to give N-acetyl-Se-methylselenocysteine.The L(and D)-Se-methylselenocysteine have been prepared in high optica... 2-Acetamidoacrylic acid or methyl 2-acetamidoacrylate is reacted with solution of sodium of methylselenol to give N-acetyl-Se-methylselenocysteine.The L(and D)-Se-methylselenocysteine have been prepared in high optical purity by treating N-acetyl-Se-methylselenocysteine in water using acylase I from porcine kidney as a catalyst.The influencing factors on the resolution reaction are discussed by orthogonal experiment,including pH value,reaction temperature,concentration of Co2+ and amount of acylase I.Under the optimizing resolution conditions,L(and D)-Se-methylselenocysteine are obtained with>96 % optical purity in about 40% yield. 展开更多
关键词 -甲基半胱氨酸 2-乙酰氨基丙烯酸 2-乙酰氨基丙烯酸甲酯 合成 拆分
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硒-甲基硒代半胱氨酸对人食管癌EC109细胞Ki-67及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响 被引量:7
14
作者 裴小娟 苏敏 田东萍 《汕头大学医学院学报》 2004年第2期65-67,F002,共4页
目的 :探讨硒 甲基硒代半胱氨酸 (MSC)对人食管癌细胞系EC10 9细胞增殖及Bcl 2 Bax蛋白表达的影响。方法 :用荧光染色、免疫组化及免疫蛋白印迹等技术 ,在MSC的不同浓度 (0、 1、 2、 4、 8、 16 μg mL)与时间 (6、 12、 2 4、 4 8h)... 目的 :探讨硒 甲基硒代半胱氨酸 (MSC)对人食管癌细胞系EC10 9细胞增殖及Bcl 2 Bax蛋白表达的影响。方法 :用荧光染色、免疫组化及免疫蛋白印迹等技术 ,在MSC的不同浓度 (0、 1、 2、 4、 8、 16 μg mL)与时间 (6、 12、 2 4、 4 8h)的作用下 ,观察其对EC10 9细胞形态的影响以及细胞核增殖抗原Ki 6 7及凋亡相关蛋白Bcl 2 Bax的表达。结果 :细胞主要表现出固缩 ,生长密度降低 ,凋亡小体形成并被吞噬等形态改变 ,未见明显细胞毒性作用。各实验组的Ki 6 7标记指数均明显低于对照组 (P <0 0 1) ,Bcl 2 Bax表达比值降低 ,并呈明显的时间和浓度依赖性。结论 :MSC有抑制EC10 9细胞系增殖及下调Bcl 2 展开更多
关键词 -甲基半胱氨酸 食管癌 EC109细胞 KI-67 BCL-2 BAX
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硒-甲基硒代半胱氨酸诱导肝癌SMMC-7721细胞株的凋亡及机制探讨 被引量:8
15
作者 王智 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1263-1266,F0003,共5页
目的研究硒-甲基硒代半胱氨酸(MSC)对肝癌SMMC-7721细胞株抑制及凋亡的作用,探讨其分子机制。方法试验分空白对照组和MSC组(细胞培养体系中加入MSC)。MTT法观察细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构的改变... 目的研究硒-甲基硒代半胱氨酸(MSC)对肝癌SMMC-7721细胞株抑制及凋亡的作用,探讨其分子机制。方法试验分空白对照组和MSC组(细胞培养体系中加入MSC)。MTT法观察细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构的改变;琼脂糖凝胶电泳法观察DNA的"梯状"条带;Western blot方法检测凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达。结果随着MSC浓度和作用时间增加,细胞抑制率上升。肝癌细胞株SMMC-7721在MSC浓度为25、50、100、200μmol/L下,24h细胞抑制率分别为(14.44±3.83)%、(21.15±0.61)%、(50.64±2.40)%、(64.25±0.87)%,48h细胞抑制率分别为(35.97±2.08)%、(57.41±2.61)%、(74.71±1.59)%、(91.68±1.33)%(P<0.05)。MSC组细胞周期出现S期阻滞,并出现凋亡峰,50、100μmol/L浓度的MSC干预48h后,肝癌SMMC-7721细胞株凋亡率分别为28.46%、50.73%。MSC组细胞呈凋亡表现,核固缩、碎裂,染色质浓缩,边集。MSC 50μmol/L或100μmol/L组培养48h后,DNA琼脂糖凝胶电泳可见典型的梯状条带;而空白对照组细胞DNA在电泳上未见梯状条带。经MSC干预后,AIF蛋白表达呈浓度依赖性增多(P<0.05)。结论 MSC对肝癌MMC-7721细胞株有抑制增殖、促进凋亡的作用。其机制可能通过调控AIF表达激活非Caspases依赖凋亡通路实现的。 展开更多
关键词 -甲基半胱氨酸 肝癌 细胞凋亡诱导因子 凋亡
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硒-甲基硒代半胱氨酸对肝癌HepG_2细胞的抑制作用 被引量:5
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作者 史传兵 卢航青 郑杰 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第3期286-291,共6页
目的:研究硒-甲基硒代半胱氨酸(Se-methyl-selenocysteine,MSC)对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,探讨其分子机制。方法:用不同浓度的MSC处理培养的HepG2细胞,镜下观察细胞的形态学变化,MTT法和流式细胞仪分别检测其对细胞生长和细胞周... 目的:研究硒-甲基硒代半胱氨酸(Se-methyl-selenocysteine,MSC)对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,探讨其分子机制。方法:用不同浓度的MSC处理培养的HepG2细胞,镜下观察细胞的形态学变化,MTT法和流式细胞仪分别检测其对细胞生长和细胞周期的影响,软琼脂生长试验观察瘤细胞恶性表型的变化,并检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA的表达和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性。结果:25μmol.L-1的MSC处理HepG2细胞24 h后,细胞生长受到明显抑制,出现S期阻滞和细胞凋亡,呈现浓度和时间依赖关系。软琼脂生长试验显示MSC抑制HepG2细胞在软琼脂上的生长能力。RT-PCR和Caspase-3的活性检测显示,25μmol.L-1MSC处理HepG2细胞244、8 h后,Cyclin D1 mRNA表达下降了38%和47%,而Caspase-3活性分别升高(39.61±6.65)%和(118.73±6.48)%;50μmol.L-1MSC处理HepG2细胞244、8 h后,Cyclin D1 mRNA表达下降了53%和82%,而Caspase-3活性分别升高(80.66±9.31)%和(152.67±7.95)%。结论:MSC抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡,瘤细胞的恶性程度减弱,这种表型变化与Cyclin D1的表达减弱和Caspase-3的活性增强有关。 展开更多
关键词 -甲基半胱氨酸 HEPG2细胞 细胞 凋亡 细胞周期 恶性表型
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柱前衍生高效液相色谱荧光检测法测定奶粉中L-硒-甲基硒代半胱氨酸 被引量:7
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作者 刘建群 赵元 +2 位作者 舒积成 张锐 张小平 《福建分析测试》 CAS 2011年第4期6-10,共5页
建立了硒营养强化奶粉中L-硒-甲基硒代半胱氨酸含量柱前衍生高效液相荧光检测测定方法。奶粉样品经乙腈沉淀蛋白,上固相萃取柱处理后,与邻苯二甲醛和3-巯基丙酸进行衍生化反应。然后采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),醋... 建立了硒营养强化奶粉中L-硒-甲基硒代半胱氨酸含量柱前衍生高效液相荧光检测测定方法。奶粉样品经乙腈沉淀蛋白,上固相萃取柱处理后,与邻苯二甲醛和3-巯基丙酸进行衍生化反应。然后采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),醋酸盐缓冲液-乙腈-甲醇为流动相,流速为1mL·min-1,柱温40℃,荧光检测波长λex=343nm,λem=454 nm,进样量20μL,以三(羟甲基)氨基甲烷为内标进行测定。在1.3-22.0μg·mL-1浓度范围内与相对峰面积呈良好的线性关系,回归方程为:A=0.045C-0.003(R=0.9995),准确度和精密度均符合生物样品分析要求。 展开更多
关键词 L--甲基半胱氨酸 奶粉 柱前衍生 高效液相色谱法 荧光检测 固相萃取
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有机硒对恶性转化人胚食管上皮永生化细胞系作用的实验研究 被引量:4
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作者 黄海花 苏敏 +2 位作者 田东萍 沈忠英 郑志超 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期371-372,共2页
关键词 有机 胚食管 上皮永生化细胞系 食管癌 酸钠 -甲基半胱氨酸
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高效液相色谱法测定硒-甲基硒代半胱氨酸 被引量:6
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作者 刘建群 刘芳 +2 位作者 张锐 张小平 寇晓莉 《萍乡高等专科学校学报》 2009年第3期59-62,共4页
建立硒-甲基硒代半胱氨酸(SeMC)测定方法,优选合成工艺,控制成品质量。采用高效液相色谱法(HPLC),测定条件为:色谱柱为HypersilC4(4.6mm×300mm,5μm),流动相为水(用磷酸调至pH2.50)-甲醇(95:5),检测波长235nm,流速1.0ml/min,柱温2... 建立硒-甲基硒代半胱氨酸(SeMC)测定方法,优选合成工艺,控制成品质量。采用高效液相色谱法(HPLC),测定条件为:色谱柱为HypersilC4(4.6mm×300mm,5μm),流动相为水(用磷酸调至pH2.50)-甲醇(95:5),检测波长235nm,流速1.0ml/min,柱温25℃。结果:硒-甲基硒代半胱氨酸的线性范围为0.08μg~2μg,r=0.9995,高、中、低三种不同浓度的平均加标回收率范围为99.97%~100.62%,RSD为0.53%~0.88%。结论:该法操作便捷,结果准确,适合合成工艺评价和成品质量控制。 展开更多
关键词 -甲基半胱氨酸 含量测定 高效液相色谱法
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硒及硒化合物对食管癌作用机制研究进展 被引量:1
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作者 向文杰 殷彩桥 +1 位作者 黄慧 陈婷 《社区医学杂志》 CAS 2022年第22期1295-1300,共6页
总结并讨论近年来硒及硒化合物在食管癌治疗机制中的研究进展,为科学及临床研究提供参考。应用PubMed、中国知网(CNKI)及万方数据库,以“食管癌、甲基硒酸、硒-甲基硒代半胱氨酸、硒蛋氨酸、硒结合蛋白1、硒蛋白S、亚硒酸钠、纳米硒”... 总结并讨论近年来硒及硒化合物在食管癌治疗机制中的研究进展,为科学及临床研究提供参考。应用PubMed、中国知网(CNKI)及万方数据库,以“食管癌、甲基硒酸、硒-甲基硒代半胱氨酸、硒蛋氨酸、硒结合蛋白1、硒蛋白S、亚硒酸钠、纳米硒”为中文关键词,以“esophageal cancer/carcinoma、methylselenic acid/MSA、se-methylselenocysteine/MSC、selenomethionine/SeMet、selenium binding protein 1/SBP1、selenoprotein S/Sel S、sodium selenite/SSE、selenium nanoparticles/SeNPs”为英文关键词,检索2017-01-01-2022-09-15相关文献,共计检索到1376篇。纳入标准:(1)硒在食管癌领域进行的研究,包括实验室、临床及流行病学研究;(2)硒蛋白及硒化合物在普遍抗癌机制上的研究;(3)纳米硒在普遍抗癌机制上的研究。排除标准:(1)食管癌研究中与硒无关的研究;(2)硒相关的研究中与食管癌相关性低的研究;(3)结果尚不明确或质量较低的研究;(4)内容相似或重复的研究。最终纳入文献39篇。结果显示,甲基硒酸(MSA)和硒-甲基硒代半胱氨酸(MSC)能显著降低食管癌细胞的增殖活力,但两者促进细胞凋亡的能力相对较低。亚硒酸钠(SSE)能抑制食管癌细胞增殖,但更擅长促进其凋亡。硒蛋氨酸(SeMet)具有逆转食管癌细胞耐药性的作用。硒结合蛋白1(SBP1)则表现出与化疗敏感性高度相关。硒蛋白S(Sel S)的研究提示食管癌的发生受到遗传和环境因素的共同影响。纳米硒(SeNPs)当前在食管癌领域的研究尚欠缺,但在其他类型的肿瘤及肿瘤药物开发的研究中已取得一定成功。提示,当前硒在食管癌的流行病学、抗癌作用及具体机制的研究已取得一定的进展,但在作用机制研究的广度和深度上尚有广阔的研究空间。 展开更多
关键词 食管癌 甲基 -甲基半胱氨酸 氨酸 结合蛋白1 蛋白S 酸钠 纳米
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