基于易错PCR技术的短小芽孢杆菌YZ02脂肪酶基因BpL的定向进化 被引量：21

1

作者 黄瑛 蔡勇 +1 位作者 杨江科 闫云君 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期445-451,共7页

利用易错PCR技术对短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)YZ02脂肪酶基因BpL进行两轮定向进化研究,分别获得最佳突变株BpL1-7和BpL2-1369,其脂肪酶活力比出发酶分别提高了2倍和6倍。序列分析表明,突变体BpL2-1369有4个碱基发生了突变:T61C/C14... 利用易错PCR技术对短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)YZ02脂肪酶基因BpL进行两轮定向进化研究,分别获得最佳突变株BpL1-7和BpL2-1369,其脂肪酶活力比出发酶分别提高了2倍和6倍。序列分析表明,突变体BpL2-1369有4个碱基发生了突变:T61C/C147T/A334G/T371A,其中有3个碱基突变导致了氨基酸的改变。通过SWISS-MODEL数据库模拟脂肪酶的结构显示,3个突变氨基酸分别位于第1个α螺旋的第3个氨基酸、第4和第5个β折叠之间的转角以及第5个β折叠的第1个氨基酸位置。将野生型脂肪酶基因BpL和进化后的基因BpL2-1369的高效表达产物经Ni-Agarose柱和Sephadex-G75纯化后,酶学性质测定表明:突变脂肪酶的比活力比野生型脂肪酶提高了1.31倍,Km值由8.24mmol/L降低至7.17mmol/L;在pH>8.0时的稳定性较野生型脂肪酶有所提高。 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 脂肪酶 定向进化 易错PCR

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棉花枯萎病拮抗短小芽胞杆菌筛选鉴定及生防研究 被引量：18

2

作者 李海薇 韩万里 +3 位作者 王梦瑶 罗明 韩剑 顾爱星 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期440-448,共9页

为获得对棉花枯萎病有较好生防效果的拮抗细菌,从健康海岛棉植株根围土壤中分离筛选棉花枯萎病拮抗细菌,探索研究拮抗菌株的抑菌作用,为其生物防治提供潜在资源菌。采用平板对峙法,以海岛棉枯萎病尖孢镰刀菌为靶标菌,从土壤中分离到的12... 为获得对棉花枯萎病有较好生防效果的拮抗细菌,从健康海岛棉植株根围土壤中分离筛选棉花枯萎病拮抗细菌,探索研究拮抗菌株的抑菌作用,为其生物防治提供潜在资源菌。采用平板对峙法,以海岛棉枯萎病尖孢镰刀菌为靶标菌,从土壤中分离到的120株细菌菌株中筛选拮抗菌株。测定拮抗细菌发酵液抑菌活性,通过促芽和盆栽试验筛选生防效果最好的菌株,同时测定该菌株对棉花枯萎病的抑菌效果和耐盐碱性。基于形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析鉴定菌株分类地位。从120株细菌中筛选到1株对棉花枯萎病拮抗作用很强的菌株,编号为KX-33。促芽分析和盆栽试验结果表明,菌株KX-33能明显缩短出芽时间,促进棉苗生长。对病原菌DD64、DD89、DD11和DD22防效分别为75.32%、72.77%、69.48%和68.81%,均显著高于对照药剂处理(P<0.05)。耐盐碱分析表明,菌株KX-33具一定的耐盐碱性。菌株KX-33镜检为革兰氏阳性菌、呈杆状、有芽胞,16S rDNA和序列与Bacillus pumilus(FJ763643.1)同源性最高。海岛棉根围土壤微生物中含有棉花枯萎病拮抗细菌,经鉴定菌株KX-33为短小芽胞杆菌Bacillus pumilus,促生和抑菌作用显著,在海岛棉枯萎病生物防治中具有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 棉花枯萎病 短小芽胞杆菌 生防 鉴定

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短小芽胞杆菌AR03对烟草炭疽病的抑制作用 被引量：14

3

作者 王静 孔凡玉 +1 位作者 陈晓红 田华 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期104-107,136,共5页

为测定短小芽胞杆菌AR03菌株对烟草炭疽病菌的室内拮抗活性和盆栽防治效果,采用平板拮抗法初步筛选菌株拮抗活性,采用抑制菌丝生长法及抑制孢子萌发法筛选该菌株菌悬液的抑菌浓度,采用喷雾法进行防治效果测定。AR03菌株对烟草炭疽病菌... 为测定短小芽胞杆菌AR03菌株对烟草炭疽病菌的室内拮抗活性和盆栽防治效果,采用平板拮抗法初步筛选菌株拮抗活性,采用抑制菌丝生长法及抑制孢子萌发法筛选该菌株菌悬液的抑菌浓度,采用喷雾法进行防治效果测定。AR03菌株对烟草炭疽病菌的拮抗活性很强,能显著抑制菌丝生长、孢子萌发和病害发生,浓度为1×107 cfu/mL的AR03发酵液能有效抑制菌丝的生长和孢子萌发,AR03菌悬液(1×108 cfu/mL)对炭疽病的盆栽防治效果为83.03%,与对照药剂25%三唑酮可湿性粉剂的防治效果相当。AR03菌株是一株优良的广谱高效生防菌株。 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 烟草 植物促生细菌 生物防治

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短小芽胞杆菌抑菌蛋白TasA基因克隆及功能分析 被引量：7

4

作者 刘通 陈云鹏 +1 位作者 李琼洁 顾振芳 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2014年第5期48-52,56,共6页

为了研究短小芽胞杆菌Bacillus pumilus DX01菌株的抑菌相关基因的功能,采用PCR方法从DX01基因组DNA中扩增出编码TasA基因的全长DNA序列,并构建原核表达载体pET2-TasA,在大肠杆菌Escherichia coli BL21中表达获得TasA基因的融合表达蛋白... 为了研究短小芽胞杆菌Bacillus pumilus DX01菌株的抑菌相关基因的功能,采用PCR方法从DX01基因组DNA中扩增出编码TasA基因的全长DNA序列,并构建原核表达载体pET2-TasA,在大肠杆菌Escherichia coli BL21中表达获得TasA基因的融合表达蛋白,分别利用悬滴法和平板打饼法检测融合蛋白对玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)分生孢子萌发和对玉米小斑病菌及水稻稻瘟病菌菌丝体生长的抑制活性,结果表明TasA融合蛋白对这2种植物病原真菌的生长有着显著的抑制作用。TasA基因包含1个780bp的完整开放阅读框(GenBank:KC692521),编码259个氨基酸残基;该序列与B.subtilis菌株PEBS2501(GenBank::FJ713581)、B.amyloliquefaciens HF-01(GenBank:JF781312)和B.subtilis菌株BWST7003(GenBank:AP012496)同源抑菌蛋白基因序列相似性达99%。原核表达产物经SDS-PAGE分析检测到约32.3kDa的融合蛋白;经Ni-NTA柱纯化后的融合蛋白对供试病原菌均有显著的抑制作用。经测定发酵液的TasA融合蛋白产率为28μg/mL,短小芽胞杆菌抑菌蛋白TasA基因具有良好的抑菌效果。 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 TasA基因 抑菌蛋白 抑菌活性

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碱性木聚糖酶产酶菌株—芽胞杆菌M-26的选育 被引量：7

5

作者 慕娟 问清江 +2 位作者 党永 吴小杰 李叶昕 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期63-67,共5页

从造纸厂的废水中采集样品,以木聚糖为唯一碳源初筛菌株,然后用刚果红透明圈平板选育,最后通过摇瓶发酵选育出碱性木聚糖酶高产菌株M-26,基础产酶活力达330 IU/mL;通过菌种形态学、培养特征和16S rDNA鉴定为短小芽胞杆菌;酶学性质研究表... 从造纸厂的废水中采集样品,以木聚糖为唯一碳源初筛菌株,然后用刚果红透明圈平板选育,最后通过摇瓶发酵选育出碱性木聚糖酶高产菌株M-26,基础产酶活力达330 IU/mL;通过菌种形态学、培养特征和16S rDNA鉴定为短小芽胞杆菌;酶学性质研究表明:最适作用温度和pH分别为55℃和8.0,且具有一定的耐碱性;通过发酵条件研究,M-26最高产酶活力可达625 IU/mL。 展开更多

关键词 碱性木聚糖酶 短小芽胞杆菌 选育

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牦牛源短小芽胞杆菌TS1的分离鉴定及其生物学特性研究

6

作者 刘银坤 李昊 +5 位作者 李子昕 李知新 张玉彦 李文财 任建军 唐姝 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期69-77,共9页

[目的]本试验旨在研究一株牦牛源短小芽孢杆菌(命名:TS1)的分离鉴定、抗逆性、对常用抗菌药物的耐药性以及对常见致病菌的抑菌活性,初步探索其作为益生菌添加剂在畜牧养殖中应用的可行性。[方法]对健康牦牛新鲜粪便进行100℃水浴处理10 ... [目的]本试验旨在研究一株牦牛源短小芽孢杆菌(命名:TS1)的分离鉴定、抗逆性、对常用抗菌药物的耐药性以及对常见致病菌的抑菌活性,初步探索其作为益生菌添加剂在畜牧养殖中应用的可行性。[方法]对健康牦牛新鲜粪便进行100℃水浴处理10 min以筛选具有抗逆性的芽胞杆菌,进行形态学、生理生化特征及16S rRNA序列分析鉴定,通过测量生长曲线、耐酸、耐胆盐试验、药敏试验及抑菌试验等方法对其生物学特性进行研究,通过全基因测序分析其可能产生抗菌物质的类型。[结果]TS1为短小芽胞杆菌且具有耐酸、耐胆盐生长特性;TS1对于12种常见的抗菌药物敏感,且对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪链球菌具有抑菌作用。测序分析显示该菌株可编码与Amylocyclicin同源性达48.90%的一种新型抗菌肽,进而发挥其抗菌活性。[结论]短小芽胞杆菌TS1有一定的抗逆性和潜在的益生能力及广谱抗菌效果,并且在畜禽肠道微生物系统中对抗生素耐药性传递的风险较低,适合作为益生菌添加剂类抗生素替代产品。 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 分离鉴定 抑菌 抗生素替代品 益生菌添加剂

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酸性半纤维素降解细菌的筛选与鉴定 被引量：6

7

作者 徐有权 顾文杰 +3 位作者 张发宝 徐培智 解开治 王立群 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期36-40,共5页

从南方酸性水稻土和腐烂秸秆中采集样品,经初筛、复筛获得4株产生明显水解圈且D/d值较大同时传代效果稳定的酸性半纤维素降解细菌。DNS法测定4株细菌半纤维素酶活力,最终结合其产酶速度及酶活大小得到菌株NB8,液体摇瓶发酵72 h其半纤维... 从南方酸性水稻土和腐烂秸秆中采集样品,经初筛、复筛获得4株产生明显水解圈且D/d值较大同时传代效果稳定的酸性半纤维素降解细菌。DNS法测定4株细菌半纤维素酶活力,最终结合其产酶速度及酶活大小得到菌株NB8,液体摇瓶发酵72 h其半纤维素酶活达85.12 U/mL。经形态学观察和生理生化指标测定,初步确定该菌为芽胞杆菌属。结合16S rDNA基因序列分析结果,可以初步鉴定NB8为短小芽胞杆菌(Ba-cillus pumilus)。 展开更多

关键词 半纤维素降解 酸性 短小芽胞杆菌 鉴定

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生防菌Y26的鉴定、发酵优化及其杀线虫活性测定

8

作者 梅凤珍 周明超 +4 位作者 杨丹 李香风 孔令安 刘建斌 史凤玉 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期424-434,共11页

为防治黄瓜根结线虫病,本实验室前期从黄瓜根际土壤分离出的一株细菌Y26,测定其发酵液对根结线虫的生物活性,经发酵液处理后的根结线虫校正死亡率为95.12%,卵孵化的相对抑制率为83.51%,故菌株Y26可作为根结线虫生防菌资源;通过形态学观... 为防治黄瓜根结线虫病,本实验室前期从黄瓜根际土壤分离出的一株细菌Y26,测定其发酵液对根结线虫的生物活性,经发酵液处理后的根结线虫校正死亡率为95.12%,卵孵化的相对抑制率为83.51%,故菌株Y26可作为根结线虫生防菌资源;通过形态学观察及分子生物学方法鉴定菌株Y26为短小芽胞杆菌Bacillus pumilus;通过Plackett-Burma法和响应面分析试验得到菌株Y26发酵优化的条件是:玉米粉2.14%,豆饼粉3%,K_(2)HPO_(4)0.57%,MgSO_(4)·7H_(2)O 0.21%,种龄12 h,pH为7.2,接种量2%,培养温度28℃,装瓶量为50 mL/250 mL,发酵优化后,菌液中芽胞浓度提高25.69%,10%发酵液对根结线虫的校正死亡率从优化前的78.03%提高到93.32%。研究结果表明,经发酵优化后的Y26菌液杀线虫活性显著提高,可作为杀线生物菌剂开发应用。 展开更多

关键词 根结线虫 短小芽胞杆菌 鉴定 发酵条件优化

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短小芽胞杆菌HLK8-1的分离鉴定及抑菌特性分析 被引量：6

9

作者 赵彩春 陈国明 张家学 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期33-38,共6页

从海南翁田镇凡纳滨对虾（Litopenaeusvannamei）养殖场筛选获得1株能抑制副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）等多种病原菌的芽胞杆菌HLK8-1。经形态特征分析、16S r DNA序列分析及Biolog微生物自动鉴定系统鉴定为短小芽胞杆菌（Bac... 从海南翁田镇凡纳滨对虾（Litopenaeusvannamei）养殖场筛选获得1株能抑制副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）等多种病原菌的芽胞杆菌HLK8-1。经形态特征分析、16S r DNA序列分析及Biolog微生物自动鉴定系统鉴定为短小芽胞杆菌（Bacillus pumilus）;菌株生长及抑菌性能研究表明该菌株抑菌物质主要产生在生长对数期及平台期;相对于盐度及初始p H等因素,该菌株的抑菌性能受温度影响较大;菌株在p H值范围为7.0-8.5,盐度范围为0-0.2%,温度为30℃等条件下表现出较高的生长水平及抑菌性能;共培养试验表明该菌能将水体中的副溶血弧菌数量控制在较低水平,培养24 h时实验组10^5cfu/mL,而对照组10^8cfu/mL。该菌抑制多种水产病原菌,对水体环境耐受能力强,具有防治水产养殖病原菌的应用潜力,且易于培养,抑菌物质分泌到胞外便于分离提取,亦具有发酵工程应用潜力。 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 副溶血弧菌 16S RDNA 抑菌活性

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短小芽胞杆菌DX01菌株Tn5转座突变株的抑菌活性筛选体系的建立 被引量：5

10

作者 胡晓璐 陈云鹏 +2 位作者 沈新迁 刘通 顾振芳 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期406-410,共5页

为建立短小芽胞杆菌Bacillus pumilus DX01菌株的Tn5转座突变株抑菌活性的高效筛选体系,采用发酵液平板抑菌法研究了各突变株发酵液对稻瘟病菌Magnaporthe grisea生长的影响,并测定了目标突变株的几丁质酶和蛋白酶活性及发酵液对稻瘟病... 为建立短小芽胞杆菌Bacillus pumilus DX01菌株的Tn5转座突变株抑菌活性的高效筛选体系,采用发酵液平板抑菌法研究了各突变株发酵液对稻瘟病菌Magnaporthe grisea生长的影响,并测定了目标突变株的几丁质酶和蛋白酶活性及发酵液对稻瘟病菌分生孢子萌发的抑制率。从2 633个突变株中筛选出6个抑菌活性较对照菌株DX01显著变化的突变株。对照DX01发酵液对真菌孢子萌发的抑制率为36%,而突变株Tn5-901和Tn5-194则分别为96%和3%,抑菌活性与对照的差异达到极显著水平。其余4个突变株的几丁质酶、蛋白酶活性多重比较结果与发酵液平板抑菌结果并不完全一致,但发酵液平板抑菌法简单、高效,适用于短小芽胞杆菌突变株的抑菌活性初筛。 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 Tn5转座 抑菌活性

原文传递

GFP标记的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)转座突变株的构建初探 被引量：5

11

作者 沈新迁 胡晓璐 +2 位作者 刘通 孙文良 陈云鹏 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2012年第4期15-20,共6页

以水稻叶面附生菌短小芽孢杆菌(B.pumilus)为研究对象,通过构建pMOD-egfp-Tetr转座复合体,采用电击转化法对短小芽孢杆菌DX01菌株进行了Tn5转座插入诱变,获得了大量的转化子。对转化子进行了遗传稳定性分析和分子鉴定,并且在荧光显微镜... 以水稻叶面附生菌短小芽孢杆菌(B.pumilus)为研究对象,通过构建pMOD-egfp-Tetr转座复合体,采用电击转化法对短小芽孢杆菌DX01菌株进行了Tn5转座插入诱变,获得了大量的转化子。对转化子进行了遗传稳定性分析和分子鉴定,并且在荧光显微镜下观察到了强烈的绿色荧光,研究结果表明外源DNA已经成功整合进细菌的基因组中,gfp基因在短小芽孢杆菌中实现了组成型表达。 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 Tn5转座 电击转化 绿色荧光蛋白

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短小芽胞杆菌产碱性木聚糖酶发酵条件的研究 被引量：5

12

作者 慕娟 问清江 +3 位作者 党永 李叶昕 张磊 张烁 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期73-78,共6页

碱性木聚糖酶在碱性条件下催化水解木聚糖,广泛应用于造纸、纺织等领域。着重对短小芽胞杆菌M-11产碱性木聚糖酶的发酵条件进行初步的探索。研究了菌株的生长曲线、确定最佳接种龄为16 h、最佳接种量为1%;确定最适碳源浓度为7%、最适单... 碱性木聚糖酶在碱性条件下催化水解木聚糖,广泛应用于造纸、纺织等领域。着重对短小芽胞杆菌M-11产碱性木聚糖酶的发酵条件进行初步的探索。研究了菌株的生长曲线、确定最佳接种龄为16 h、最佳接种量为1%;确定最适碳源浓度为7%、最适单一氮源为氯化铵、其浓度为1.0%、最适无机盐为氯化铁、其浓度为3 mmol/L;在此基础之上进行6因素3水平的正交试验,确定最适产酶培养基组成:麸皮5%,接种量3%,氯化铵1.2%,氯化铁3.5 mmol/L,硫酸镁0.03%,氯化钠5 mmol/L,磷酸氢二钾0.4%;最适培养条件:接种龄16 h,初始pH 8.0,温度37℃,300 mL摇瓶装液量50 mL,摇床转速220 r/min,发酵周期48 h。通过对发酵条件的优化使发酵液酶活达613 IU/mL。无机氮源为其最适氮源,因此短小芽胞杆菌M-11在碱性木聚糖酶的产品开发上优于短小芽胞杆菌M-26。 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 碱性木聚糖酶 酶活力 发酵条件

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短小芽胞杆菌Bacillus pumilus HR10增殖扩繁培养基组分优化 被引量：4

13

作者 林司曦 吴小芹 +1 位作者 丁晓磊 盛江梅 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第6期22-28,共7页

短小芽胞杆菌Bacillus pumilus HR10是1株优良的菌根辅助细菌(Mycorrhiza Helper Bacteria,MHB),无论单独接种或与外生菌根真菌(Ectomycorrhizal Fungi,EMF)黄色须腹菌(Rhizopogen luteous)互作,都能显著促进马尾松(Pinus massoniana)... 短小芽胞杆菌Bacillus pumilus HR10是1株优良的菌根辅助细菌(Mycorrhiza Helper Bacteria,MHB),无论单独接种或与外生菌根真菌(Ectomycorrhizal Fungi,EMF)黄色须腹菌(Rhizopogen luteous)互作,都能显著促进马尾松(Pinus massoniana)的生长。应规模应用需要,从10种碳源、8种氮源及8种无机盐中以单因素试验初步筛选出主要组分,在此基础上采用正交试验及响应面分析法优化短小芽胞杆菌HR10增殖扩繁的培养基成分。结果表明,该菌株增殖扩繁培养基最佳组分配比为黄豆粉10.332 g/L,玉米粉7.296 g/L,蛋白胨10.718 g/L,KCl 2.5 g/L,KH2PO42.5 g/L。研究结果为菌根辅助细菌短小芽胞杆菌B.pumilus HR10菌剂开发应用提供了参考依据。 展开更多

关键词 菌根辅助细菌 短小芽胞杆菌 培养基优化 响应面分析法(RSA)

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响应面法优化Vc二步发酵新菌系产2-酮基-L-古龙酸的培养基 被引量：4

14

作者 徐婷婷 高明 +3 位作者 吕淑霞 于晓丹 张忠泽 陈宏权 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期47-53,共7页

以短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)HJ-04作为维生素C二步发酵第2步中的伴生菌,促进产酸菌产维生素C(Vitamin C,Vc)前体2-酮基-L-古龙酸(2-keto-L-gulonic acid,2-KGA)的能力强于工业生产用菌株巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)B2980... 以短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)HJ-04作为维生素C二步发酵第2步中的伴生菌,促进产酸菌产维生素C(Vitamin C,Vc)前体2-酮基-L-古龙酸(2-keto-L-gulonic acid,2-KGA)的能力强于工业生产用菌株巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)B2980。采用单因素试验、Plackett-Burman(PB)试验及Box-Behnken试验对影响新菌系发酵产2-KGA的6个因素进行分析优化。结果表明,L-山梨糖、尿素、玉米浆为显著影响因子。最佳产酸条件为L-山梨糖94.95 g/L,尿素11.99 g/L,玉米浆14.13 g/L。优化后产酸量提高12.31 mg/mL,产酸周期缩短6 h。 展开更多

关键词 维生素C二步发酵 2-酮基-L-古龙酸 短小芽胞杆菌 条件优化

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几种添加物对D-核糖产量的影响 被引量：1

15

作者 乔建军 杜连祥 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第3期23-26,共4页

研究了几种物质对D -核糖产量的影响 ,研究表明 ,当发酵培养基中玉米浆的含量为 2 5g/L ,D -核糖产量达到最高 ,为 65g/L。发酵培养基中添加适量的酵母粉及山梨醇亦有利于D -核糖的积累 ,当酵母粉与山梨醇的添加量分别为 10g/L及 4 0g/L... 研究了几种物质对D -核糖产量的影响 ,研究表明 ,当发酵培养基中玉米浆的含量为 2 5g/L ,D -核糖产量达到最高 ,为 65g/L。发酵培养基中添加适量的酵母粉及山梨醇亦有利于D -核糖的积累 ,当酵母粉与山梨醇的添加量分别为 10g/L及 4 0g/L时 ,D -核糖产率分别增加 7 8%、4 7% ,而在发酵培养基中加入丙二酸可抑制D -核糖的分泌 ,在 4 0ml发酵培养基中添加 1ml丙二酸后 ,D -核糖的产率下降73 8%。甲醇也可抑制D -核糖的积累 ,当发酵培养基中的甲醇添加量为 16g/L时 ,D -核糖产率下降66 2 %。 展开更多

关键词 D-核糖 短小芽胞杆菌 发酵法 产量 添加物

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产纤溶酶海洋微生物B5815菌株的筛选及鉴定 被引量：4

16

作者 李占强 胡江春 +1 位作者 潘华奇 王书锦 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期41-44,共4页

采用酪素平板、纤维蛋白平板的初筛和摇瓶复筛的方法从205株海洋微生物中筛选得到4株纤溶酶活性较强的菌株,其中菌株B5815产纤溶酶活性最高,平均达258 IU/mL。通过对菌株B5815的形态特征、生理生化特性的测定及16S rDNA序列分析,综合鉴... 采用酪素平板、纤维蛋白平板的初筛和摇瓶复筛的方法从205株海洋微生物中筛选得到4株纤溶酶活性较强的菌株,其中菌株B5815产纤溶酶活性最高,平均达258 IU/mL。通过对菌株B5815的形态特征、生理生化特性的测定及16S rDNA序列分析,综合鉴定其为短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)。 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 纤溶酶 海洋微生物 鉴定

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一种新发生的玉米细菌性叶腐病病原菌分离鉴定

17

作者 王春明 郭成 +1 位作者 周天旺 洪流 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期256-262,共7页

为了明确一种引起玉米叶片腐烂的细菌性病害的病原菌种类,于2021年7月在甘肃省景泰县条山农场玉米种植区采集病样,经稀释分离法进行病原菌分离纯化,并通过致病性测定、形态学观察、生理生化特征观察及16S rDNA和gyrB序列分析相结合的方... 为了明确一种引起玉米叶片腐烂的细菌性病害的病原菌种类,于2021年7月在甘肃省景泰县条山农场玉米种植区采集病样,经稀释分离法进行病原菌分离纯化,并通过致病性测定、形态学观察、生理生化特征观察及16S rDNA和gyrB序列分析相结合的方法对病原菌进行鉴定。结果表明,选取的代表性菌株B1-0和B2-1均能使玉米叶片发病,为革兰氏阳性致病菌,产芽胞;该病原菌需氧性、运动性、明胶液化、接触酶试验、柠檬酸盐利用、马铃薯腐烂试验均为阳性;甲基红试验阴性;能利用D-甘露醇、麦芽糖和葡萄糖,不能利用甘油和肌醇,不能水解淀粉,在4℃、40℃和5%NaCl条件下均能生长。构建基于16S rDNA和gyrB的系统发育树,B1-0和B2-1与短小芽胞杆菌Bacillus pumilus(ATCC7061、BKS1-108、AUEC29、BP-hd-1、NMTD17和17)亲缘关系最近,聚在一个分支。因此,将该病原菌鉴定为短小芽胞杆菌B.pumilus。研究结果将为玉米细菌性叶部病害的研究和综合防治提供基础数据。 展开更多

关键词 玉米 细菌性病害 短小芽胞杆菌 分离鉴定 16S rDNA GYRB

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紫外诱变选育高产碱性木聚糖酶优良短小芽胞杆菌 被引量：4

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作者 问清江 慕娟 +3 位作者 党永 胡世浩 颜阳欣 贺聪莹 《陕西农业科学》 2014年第12期1-6,共6页

以短小芽胞杆菌M-11为研究对象,选育碱性木聚糖酶高产优良短小芽胞杆菌,并对其发酵条件进行研究.对短小芽胞杆菌M-11用紫外线（UV）诱变,用刚果红平板染色法初筛、摇瓶发酵复筛及稳定性筛选,选育出高产碱性木聚糖酶突变菌株M-11-2,研究... 以短小芽胞杆菌M-11为研究对象,选育碱性木聚糖酶高产优良短小芽胞杆菌,并对其发酵条件进行研究.对短小芽胞杆菌M-11用紫外线（UV）诱变,用刚果红平板染色法初筛、摇瓶发酵复筛及稳定性筛选,选育出高产碱性木聚糖酶突变菌株M-11-2,研究发酵条件.结果表明：突变菌株M-11-2基础产酶活力500～600 IU·mL-,是M-11酶活314.93 IU·mL-1的1.5倍;摇瓶发酵产酶活力811.28 IU·mL-1,是原始菌株M-11（613 IU·mL-1）1.3倍;发酵罐发酵产酶活力2 703.68 IU·mL-,发酵液产酶能力1600000IU·L-1（以成品酶活计）,发酵条件：发酵周期24h,温度37℃,培养基：麸皮7.0％、氯化钠7.0 mmol· L-1、硫酸锌5.0mmol·L-1、硫酸镁0.02％、酵母膏1.0％、氯化铵1.0％、磷酸氢二钾0.4％,pH调节至8.0.因此,采用紫外线诱变方法,成功选育出高产碱性木聚糖酶的短小芽胞杆菌菌株,稳定性良好,适宜发酵工程应用的优良菌株. 展开更多

关键词 短小芽胞杆菌 紫外诱变 碱性木聚糖酶

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脱毛碱性蛋白酶(DHAP)的饱和突变 被引量：3

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作者 黄蓉 冯红 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1177-1181,共5页

本实验在同源建模和氨基酸序列比对的基础上,选取脱毛碱性蛋白酶(DHAP)8个氨基酸位点进行饱和突变.通过牛奶平板和96孔板发酵筛选,获得了4个催化特性改良的突变体,测序鉴定为D248F,D248S,M233L和W214K.利用酪蛋白和合成肽(AAPL-pN)作为... 本实验在同源建模和氨基酸序列比对的基础上,选取脱毛碱性蛋白酶(DHAP)8个氨基酸位点进行饱和突变.通过牛奶平板和96孔板发酵筛选,获得了4个催化特性改良的突变体,测序鉴定为D248F,D248S,M233L和W214K.利用酪蛋白和合成肽(AAPL-pN)作为底物,对这些突变体进行了评价,结果表明D248F、D248S、W214K在常温(28℃)下的酪蛋白水解活性提高;M233L在常温、高温(50℃)的酶活以及热稳定性都有增加.同时,M233L和W214K在25℃和50℃水解AAPL-pN的酶活也分别得到了不同程度的提高. 展开更多

关键词 脱毛碱性蛋白酶 短小芽胞杆菌 饱和突变 冷适应 热稳定性 酶活性

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二噁烷降解菌D4的分离、鉴定与降解特性 被引量：3

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作者 蔡志强 杨广花 +1 位作者 李尔炀 赵希岳 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期49-52,共4页

从生产聚酯切片污水曝气池中,分离到一株能以二烷(1,4-二氧六环)为唯一碳源生长的菌株D4.经形态观察、生理生化实验、16S rDNA基因序列分析,该菌被鉴定为短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus).D4降解二烷的最适条件为pH7.0、30℃,接种量10%,... 从生产聚酯切片污水曝气池中,分离到一株能以二烷(1,4-二氧六环)为唯一碳源生长的菌株D4.经形态观察、生理生化实验、16S rDNA基因序列分析,该菌被鉴定为短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus).D4降解二烷的最适条件为pH7.0、30℃,接种量10%,在24,48h内对1000mg/L的二烷降解率分别为83.7%和85.6%,随着二烷浓度的升高,降解率下降. 展开更多

关键词 二噁烷 短小芽胞杆菌 生物降解

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