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La、hVAP-33、eIF2Bγ和HCV IRES特异性小干扰RNA抑制HCV的复制和表达
1
作者
王美霞
徐斌
+2 位作者
段瑾
傅晓晴
金铭
《中华肝脏病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期769-773,共5页
目的证实La自身抗原、33kD人类囊相关膜蛋白（hVAP-33）和真核细胞翻译起始因子第3亚单位（eIF2B7）是HCV在细胞内的协同感染因子，通过抑制Huh7细胞内这些因子的表达可抑制HCV复制和表达。方法分别设计合成3条HCV内部核糖体进入位点（I...
目的证实La自身抗原、33kD人类囊相关膜蛋白（hVAP-33）和真核细胞翻译起始因子第3亚单位（eIF2B7）是HCV在细胞内的协同感染因子，通过抑制Huh7细胞内这些因子的表达可抑制HCV复制和表达。方法分别设计合成3条HCV内部核糖体进入位点（IRES）的小干扰RNA（siRNAs），转染HuhT-HCV细胞后筛选出其中沉默效率最高的1条。以HCV假病毒感染Huh7细胞后48h，分别以上述HCVIRKSsiRNA和之前试验中已经筛选出的La、hVAP-33和eIF2BY特异性siRNAs单独或者不同组合转染Huh7-HCV细胞，利用荧光定量PCR方法检测HCV核心基因并计算△ACT值（相对定量法），比较不同siRNAs及组合对目的基因沉默的效率; 同时以Westemblot观察HCV核心蛋白表达量的差异。结果La自身抗原与IRKS特异性siRNA共转染对HCV表达的抑制效率最高，使HCV核心蛋白基因相对表达量下降了约41％；4种基因特异性siRNAs对HCV在Huh7细胞中的复制和表达均有不同程度的抑制作用，La、hVAP-33和eIF2B7特异性siRNAs分别与IRES siRNA联合均较其单独转染对目的基因的抑制效率高。结论可以认为La自身抗原、hVAP-33和eIF2BY是HCV在宿主细胞内的协同感染因子，通过对Huh7细胞内协同感染因子及HCVIRES基因沉默后可以显著减少HCV的表达。
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关键词
肝炎病毒
丙型
RNA
小分子干扰
La自身抗原
3
3
10
3
人类囊相关
膜蛋白
真核细胞
翻译
起始
因子
第
3
亚
单位
内部
核
糖体进入位点
原文传递
题名
La、hVAP-33、eIF2Bγ和HCV IRES特异性小干扰RNA抑制HCV的复制和表达
1
作者
王美霞
徐斌
段瑾
傅晓晴
金铭
机构
首都医科大学附属北京佑安医院国家药物临床试验机构办公室
首都医科大学附属北京佑安医院肝病内分泌科
浙江中医药大学附属杭州市第六人民医院重肝科
出处
《中华肝脏病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期769-773,共5页
基金
基金项目：国家自然科学基金青年基金（30500426）
文摘
目的证实La自身抗原、33kD人类囊相关膜蛋白（hVAP-33）和真核细胞翻译起始因子第3亚单位（eIF2B7）是HCV在细胞内的协同感染因子，通过抑制Huh7细胞内这些因子的表达可抑制HCV复制和表达。方法分别设计合成3条HCV内部核糖体进入位点（IRES）的小干扰RNA（siRNAs），转染HuhT-HCV细胞后筛选出其中沉默效率最高的1条。以HCV假病毒感染Huh7细胞后48h，分别以上述HCVIRKSsiRNA和之前试验中已经筛选出的La、hVAP-33和eIF2BY特异性siRNAs单独或者不同组合转染Huh7-HCV细胞，利用荧光定量PCR方法检测HCV核心基因并计算△ACT值（相对定量法），比较不同siRNAs及组合对目的基因沉默的效率; 同时以Westemblot观察HCV核心蛋白表达量的差异。结果La自身抗原与IRKS特异性siRNA共转染对HCV表达的抑制效率最高，使HCV核心蛋白基因相对表达量下降了约41％；4种基因特异性siRNAs对HCV在Huh7细胞中的复制和表达均有不同程度的抑制作用，La、hVAP-33和eIF2B7特异性siRNAs分别与IRES siRNA联合均较其单独转染对目的基因的抑制效率高。结论可以认为La自身抗原、hVAP-33和eIF2BY是HCV在宿主细胞内的协同感染因子，通过对Huh7细胞内协同感染因子及HCVIRES基因沉默后可以显著减少HCV的表达。
关键词
肝炎病毒
丙型
RNA
小分子干扰
La自身抗原
3
3
10
3
人类囊相关
膜蛋白
真核细胞
翻译
起始
因子
第
3
亚
单位
内部
核
糖体进入位点
Keywords
Hepatitis C virus
RNA, small interfering
La autoantigen
Human homologue of the
3
3
-kDa vesicle-associated membrane protein-associated protein
Subunit gamma of human eukaryotic initiation factors 2B
Internal ribosome entry site
分类号
R512.6 [医药卫生—内科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
La、hVAP-33、eIF2Bγ和HCV IRES特异性小干扰RNA抑制HCV的复制和表达
王美霞
徐斌
段瑾
傅晓晴
金铭
《中华肝脏病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
原文传递
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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