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题名弓形虫快速鉴定及国内实验动物感染调查
被引量：3
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作者
高正琴
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机构
中国食品药品检定研究院
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出处
《实验动物科学》
2018年第5期40-45,共6页
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文摘
目的建立弓形虫快速鉴定方法,进行国内实验动物感染调查,为国家标准的修订提供参考依据。方法选择2012年12月至2016年12月期间全国60个不同厂家的12 394只实验动物(包括:猴290只、小型猪425只、犬579只、兔1 234只、地鼠372只、豚鼠1 363只、大鼠987只、小鼠7 144只)作为调查对象。采用ELISA方法检测动物血清中弓形虫抗体IgG和循环抗原CAg。利用PCR技术鉴定弓形虫p30基因。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术识别弓形虫虫体。结果用ELISA从12 394份动物血清中检出4份弓形虫抗体IgG阳性。在这4份抗体IgG阳性样本中都发现了弓形虫虫体和DNA。通过PCR扩增p30基因的分子特性证明了样本中弓形虫病原体的存在。通过直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,在这些样本中发现了弓形虫速殖子。2012年12月至2016年12月期间,对12 394只实验动物调查结果显示,弓形虫感染率为0.03%(4/12 394)。结论 ELISA、PCR、直接镜检实时动态显微视屏摄录技术相结合可完成实验动物的弓形虫检验工作。国内实验动物中存在弓形虫感染。因此,建议设计合理的筛查程序用于防止动物传播的弓形虫病。有必要开发新的诊断工具,特别是快检技术用于这一重要人兽共患病的未来研究。
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关键词
弓形虫
感染
鉴定
实验动物
中国
酶联免疫吸附试验
聚合酶链反应
直接镜检实时动态显微视屏摄录技术
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Keywords
Toxoplasma gondii（T
gondii）
Infection
Identification
laboratory animals
China
Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）
Polymerase chain reaction （PCR）
Direct microscopy real-time dynamic video recording technique
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分类号
R38
[医药卫生—医学寄生虫学]
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题名隐匿管状线虫分子鉴定和国内实验动物感染调查
被引量：2
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作者
高正琴
岳秉飞
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机构
中国食品药品检定研究院
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出处
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期234-242,共9页
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基金
国家科技支撑计划(2013BAK11B03)资助项目
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文摘
目的:对无特定病原体(specific pathogen-free,SPF)和清洁级实验动物隐匿管状线虫进行分子鉴定和感染调查,为实验动物国家标准的修订提供参考依据。方法:4 649只SPF实验动物(包括小型猪25只,猴5只,兔40只,地鼠296只,豚鼠186只,大鼠438只,小鼠3 629只,鸡25只,鸭5只)和1 304只清洁级实验动物(包括兔3只,地鼠26只,豚鼠147只,大鼠229只,小鼠897只)来自全国不同的厂家。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,对实验动物的隐匿管状线虫进行筛查。应用多重聚合酶链式反应(PCR)和测序技术,鉴定分离自实验动物的隐匿管状线虫cox 1(细胞色素C过氧化物酶亚基1)、cyt b(细胞色素b)、nad 1(NADH脱氢酶亚单位1)、nad 5(NADH脱氢酶亚单位5)、rrn L(核糖体RNA大亚基)和28S r RNA(28S核糖体RNA)基因,从分子水平上确证隐匿管状线虫感染。结果:应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,从实验动物中检出数量众多隐匿管状线虫的虫卵、幼虫和成虫。根据隐匿管状线虫的卵细胞、幼虫、雌雄成虫的大小和形态来鉴定虫种。应用多重PCR测序技术,能从分离自实验动物的单个隐匿管状线虫的虫卵、幼虫和成虫中鉴定出cox 1、cyt b、nad 1、nad 5、rrn L和28S r RNA基因,与其他不同种属的寄生虫无交叉反应。在研究中,通过对确定的阳性样本测序保证了引物的特异性,探究了隐匿管状线虫分离株间核苷酸的可变性,排除了可能由于鼠管状线虫和四翼无刺线虫造成的假阳性结果。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,从4 649份SPF实验动物和1304份清洁级实验动物样本中分别检出隐匿管状线虫阳性样本96份和35份。应用多重PCR和测序技术,鉴定证明这些阳性样本中确实含有隐匿管状线虫特异性的DNA。测序结果显示,自不同SPF实验动物和清洁级实验动物分离获得的隐匿管状线虫的cox 1、cyt b、nad 1、nad 5、rrn L和28 s r R
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关键词
隐匿管状线虫
分子鉴定
感染调查
直接镜检实时动态显微视屏摄录技术
多重聚合酶链式反应
测序
无特定病原体
清洁级动物
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Keywords
Syphacia obvelata
molecular identification
infection investigation
direct microscopy real-time dynamic video recording technique
multiple polymerase chain reaction （ muhiple-PCR ）
sequencing
specific pathogen-free （ SPF ）
clean animal
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分类号
R917
[医药卫生—药物分析学]
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