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单核细胞增生李斯特菌σ~B启动子报告质粒的构建及其在应激研究中的应用 被引量:3
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作者 夏叶 辛永萍 +2 位作者 李肖梁 方维焕 江玲丽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期211-215,共5页
为探索人畜共患单核细胞增生李斯特菌的应激调控因子Sigma B(σ^B)在抗应激过程中的激活机制,本研究以pERL3为骨架,通过SOE-PCR技术构建携带3种不同σ^B依赖型启动子控制下的gfp基因的报告质粒,并利用荧光酶标仪分析携带这些报告质粒... 为探索人畜共患单核细胞增生李斯特菌的应激调控因子Sigma B(σ^B)在抗应激过程中的激活机制,本研究以pERL3为骨架,通过SOE-PCR技术构建携带3种不同σ^B依赖型启动子控制下的gfp基因的报告质粒,并利用荧光酶标仪分析携带这些报告质粒载体的单增李斯特菌在酸或盐应激条件下的σ^B活性以及不同σ^B调控子在应激条件下对σ^B激活能力的影响。结果显示:sigB自身启动子PsigB比P0880和P1602更为敏感,可以准确指示σ^B的活性;盐应激比酸应激对σ^B的激活程度高;5%的NaCl和30 min的应激时间足以对σ^B产生显著的激活效应;rsbS、rsbT和rsbV基因缺失显著降低σ^B在应激中的激活水平,而rsbX基因不介导应激诱导的σ^B激活。本研究所构建的GFP报告质粒可以准确指示单增李斯特菌的σ^B活性,可以用于应激条件下σ^B激活机制的研究。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 SIGMA B 绿色荧光蛋白 应激
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盐应激对大肠杆菌O157:H7存活和毒力基因表达的影响
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作者 余兰林 姬赛赛 +5 位作者 禹金龙 付文静 张林 李蛟龙 高峰 江芸 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第14期95-101,共7页
探讨不同盐应激水平对大肠杆菌O157:H7存活和毒力基因表达的影响,并分析两者之间的相关性,选取本实验室收集的3株产毒大肠杆菌O157:H7菌株(CICC21530、95和109),于不同NaCl添加量(0、6、12、18 g/100 mL)胰蛋白胨大豆肉汤中应激不同时间... 探讨不同盐应激水平对大肠杆菌O157:H7存活和毒力基因表达的影响,并分析两者之间的相关性,选取本实验室收集的3株产毒大肠杆菌O157:H7菌株(CICC21530、95和109),于不同NaCl添加量(0、6、12、18 g/100 mL)胰蛋白胨大豆肉汤中应激不同时间,进行细菌培养计数及实时聚合酶链反应检测毒力基因表达情况。结果显示,盐应激显著抑制了3株大肠杆菌O157:H7的存活(P<0.05),抑制效应存在菌株差异,菌株CICC21530 NaCl添加量越高抑制越明显,而菌株95和109则呈现波动性变化。大肠杆菌O157:H7毒力基因表达的变化也与菌株、NaCl添加量有关。较高NaCl添加量时,3株菌存活数显著降低的同时,毒力基因表达量却显著增加(P<0.05),其中菌株CICC21530和菌株95的18 g/100 mL NaCl处理组毒力基因表达量最高,菌株109的12 g/100 mL NaCl处理组毒力基因表达量最高。结果表明盐应激时大肠杆菌O157:H7存活与毒力基因表达的变化不完全一致,存活菌数下降的同时,毒力却会增强,提示在实际含盐食品风险评估中,不仅要关注存活菌量,还需重视残存菌的毒力水平,从而更科学全面地评估大肠杆菌O157:H7的安全风险。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 应激 存活 毒力基因表达
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Antioxidant responses and salt stress tolerance of Aloe vera irrigated by seawater with different salinity
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作者 金赞敏 Liu Zhaopu +1 位作者 Wang Changhai Gong Weijia 《High Technology Letters》 EI CAS 2007年第3期332-336,共5页
The variations of antioxidant enzyme activities including superoxide dismutase (SOD: EC 1.15.1.1), peroxidase (POD: EC 1.11.1.7) and catalase (CAT: EC 1.11.1.6), lipid peroxidation and major electrolytes in A... The variations of antioxidant enzyme activities including superoxide dismutase (SOD: EC 1.15.1.1), peroxidase (POD: EC 1.11.1.7) and catalase (CAT: EC 1.11.1.6), lipid peroxidation and major electrolytes in Aloe vera irrigated for three years with seawater having different salinity were studied. The results indicate that POD activity increased significantly at 10% seawater level, whereas decreased at higher seawater levels. The SOD activity decreased with increasing seawater concentration except for treatment with 100% seawater (denoted as T100%) under long-term salt stress. Salinity decreased CAT activity,and increased lipid peroxidation and cell membrane injury. In addition, Ca^2+ content was high in Aloe irrigated by seawater of low salinity level, but low in Aloe irrigated by seawater of high salinity level. An opposite trend was observed for the effect of seawater on Na^+ content of plants. K^+ and Mg^2+ contents remain relatively stable under various seawater levels, which benefit plant growth. 展开更多
关键词 Aloe vera antioxidant enzymes cell membrane stability inorganic cations malondi-aldehyde salt stress
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金黄色葡萄球菌耐盐生长的形态观察及机理的初步研究 被引量:7
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作者 陈俊 张惠萍 +2 位作者 朱希贵 黎琼艳 陈培富 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期517-520,534,共5页
为阐明金黄色葡萄球菌特有的耐盐生长特性的机理,试验将该菌分别培养于含低盐(1.0%NaCl)和高盐(10.0%NaCl)的LB液体培养基及卵黄琼脂培养基,观察发现高盐液体条件下该菌呈絮状生长,细菌个体形态明显增大,在高盐固体条件下菌落形态较小,... 为阐明金黄色葡萄球菌特有的耐盐生长特性的机理,试验将该菌分别培养于含低盐(1.0%NaCl)和高盐(10.0%NaCl)的LB液体培养基及卵黄琼脂培养基,观察发现高盐液体条件下该菌呈絮状生长,细菌个体形态明显增大,在高盐固体条件下菌落形态较小,菌落形成单位(CFU)数量也明显减少;对菌体裂解产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,发现金黄色葡萄球菌在高盐与低盐培养条件下的蛋白表达谱存在差异,前者比后者被诱导多表达出至少一个蛋白质条带(MW 22 ku);将相同数量的该菌接种于含0.5 IU/mL青霉素作为细胞壁合成抑制剂及不同氯化钠浓度(1.0%,2.5%,4.0%,5.5%,7.0%,8.5%和10.0%)的卵黄琼脂培养基上培养,发现随着NaCl浓度的升高,CFU数量逐渐减少。结果表明,金黄色葡萄球菌的耐盐生长特性与其细胞壁合成和盐应激蛋白表达有关,并伴随有菌落、菌体形态的变化。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 生长特性 青霉素 应激蛋白
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淡紫紫孢菌亲环蛋白PlCYP6互作蛋白的筛选 被引量:1
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作者 刘娟 朱春晓 +3 位作者 肖雪琼 莫陈汨 王高峰 肖炎农 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期137-145,共9页
以淡紫紫孢菌中参与盐胁迫响应的亲环蛋白PlCYP6为研究对象,采用免疫沉淀联合质谱分析及酵母双杂交等技术筛选淡紫紫孢菌中与PlCYP6互作的蛋白。结果显示,受PlCYP6特异钓取的482个蛋白的功能主要涉及细胞代谢。其中,乙醇脱氢酶1(alcohol... 以淡紫紫孢菌中参与盐胁迫响应的亲环蛋白PlCYP6为研究对象,采用免疫沉淀联合质谱分析及酵母双杂交等技术筛选淡紫紫孢菌中与PlCYP6互作的蛋白。结果显示,受PlCYP6特异钓取的482个蛋白的功能主要涉及细胞代谢。其中,乙醇脱氢酶1(alcohol dehydrogenase I,ADH1)与PlCYP6直接互作,且PlCYP6的WD40 repeat结构域为二者间互作的关键区域。同时,PlCYP6和ADH1均受NaCl胁迫诱导表达。上述研究结果表明,ADH1为PlCYP6的候选互作蛋白,这为进一步解析淡紫紫孢菌响应盐胁迫机制奠定了基础。 展开更多
关键词 淡紫紫孢菌 PlCYP6 胁迫应激反应 免疫沉淀联合质谱 互作蛋白
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