期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到3篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
大肠杆菌表达白喉毒素突变体CRM197高密度发酵工艺研究 被引量：1
1
作者 徐同文 薛永玲 +4 位作者 于芳 米风景 潘怀明 孙丽霞 王晶翼 《山东轻工业学院学报（自然科学版）》 CAS 2009年第4期30-33,共4页
本文对具氨苄抗性编码白喉毒素突变体CRM197基因质粒的的大肠杆菌BL-21/pET25b的发酵条件进行了研究,获得了CRM197高效表达的最佳条件。在IPTG诱导作用下,CRM197以包含体的形式存在。采用变速补料分批发酵工艺,经10 h发酵菌体收获量可达... 本文对具氨苄抗性编码白喉毒素突变体CRM197基因质粒的的大肠杆菌BL-21/pET25b的发酵条件进行了研究,获得了CRM197高效表达的最佳条件。在IPTG诱导作用下,CRM197以包含体的形式存在。采用变速补料分批发酵工艺,经10 h发酵菌体收获量可达50 g/L(湿重),目的蛋白表达量约占总蛋白的18%以上。 展开更多
关键词 白喉毒素突变体crm197 大肠杆菌 变速补料 分批培养 高密度发酵
下载PDF
柯萨奇病毒A组6型VP1与白喉毒素无毒突变体GRM197融合蛋白的原核表达及其免疫原性
2
作者 沈钱通 李思奇 +5 位作者 安彤 杨宏宏 张柯欣 陈刚 庄昉成 高孟 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1050-1054,共5页
目的原核表达柯萨奇病毒A组6型(coxsackievirus A6,CVA6)VP1蛋白与白喉毒素无毒突变体CRM197片段A的融合蛋白(CRM197A-CVA6 VP1),并评价其免疫原性。方法将经密码子优化的CRM197A基因与CVA6 VP1基因连接,克隆至原核表达载体pET-28a中,... 目的原核表达柯萨奇病毒A组6型(coxsackievirus A6,CVA6)VP1蛋白与白喉毒素无毒突变体CRM197片段A的融合蛋白(CRM197A-CVA6 VP1),并评价其免疫原性。方法将经密码子优化的CRM197A基因与CVA6 VP1基因连接,克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-CRM197A-CVA6 VP1,转化感受态E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达目的蛋白,经Ni-NTA柱层析及透析复性后获得重组蛋白CRM197A-CVA6 VP1,检测重组蛋白的粒径及电位,并进行蛋白荧光光谱检测。经沙鼠腹腔注射免疫铝佐剂吸附的重组蛋白CRM197A-CVA6VP1,20μg/(只·0.5 mL),同时设对照组(等体积的铝佐剂);1周后进行加强免疫,免疫途径及剂量同上。首次免疫后4周,经沙鼠眼眶采血,分离血清,ELISA法检测血清结合抗体,微量细胞病变法检测血清中和效价。相同方法对沙鼠进行分组及给药,于初次免疫4周后,经沙鼠腹腔接种CVA6病毒液,1×10^(4)TCID_(50)/只,观察沙鼠的存活情况。结果测序结果表明,重组表达质粒pET-28a-CRM197A-CVA6 VP1构建正确。重组蛋白CRM197A-CVA6 VP1的粒径为81.16 nm,电位为23.12 mV,280 nm激发光下检测到最大发射波长为353 nm,纯度达88.3%。试验组及对照组沙鼠血清中结合抗体效价的几何平均数分别为44565和0,中和抗体效价的几何平均数分别为30.4和0,两组间结合抗体效价和中和抗体效价的几何平均数差异均有统计学意义(P均<0.05)。对照组沙鼠于攻毒后第3天开始出现死亡,第13天全部死亡;试验组沙鼠在攻毒过程中未发现死亡,保护率达100%。结论原核表达的重组蛋白CRM197A-CVA6 VP1在沙鼠体内可产生良好的免疫原性。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组6型 外壳蛋白VP1 原核表达 白喉毒素无毒突变体crm197 免疫原性
原文传递
大肠杆菌表达CRM_(197)及其在通用流感疫苗中的应用 被引量：2
3
作者 徐璐 张竞 +1 位作者 余蓉 苏志国 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1054-1058,共5页
利用基因工程技术在大肠杆菌BL21(DE3)中表达白喉毒素无毒突变体CRM_(197),经变性条件下亲和纯化后,作为蛋白载体与流感抗原M2e经BMPH偶联,制备CRM_(197)-M2e结合物,用其免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA法测定血清中M2e特异性IgG抗体.结... 利用基因工程技术在大肠杆菌BL21(DE3)中表达白喉毒素无毒突变体CRM_(197),经变性条件下亲和纯化后,作为蛋白载体与流感抗原M2e经BMPH偶联,制备CRM_(197)-M2e结合物,用其免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA法测定血清中M2e特异性IgG抗体.结果表明,重组CRM_(197)在大肠杆菌中成功表达,优化后蛋白表达量约为250±30 mg/L,纯度达95%以上;所制CRM_(197)-M2e结合物可有效免疫BALB/c小鼠,其刺激产生的M2e特异性IgG抗体滴度分别是健康组、M2e免疫对照组、CRM_(197)免疫对照组及CRM_(197)+M2e混合组的430.5,32,181和215倍. 展开更多
关键词 白喉毒素无毒突变体crm197 变性 载体蛋白 流感抗原M2e 结合疫苗
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部