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脓毒症患儿早期血清白介素1受体1和活性蛋白C及降钙素原表达水平及其临床意义研究 被引量:10
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作者 石晓娜 徐梅先 +4 位作者 霍习敏 王晓冬 刘刚 张静 孙素真 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2018年第20期2459-2462,共4页
目的测定脓毒症患儿白介素1受体1(IL-1R1)、活性蛋白C(APC)、降钙素原(PCT)表达水平,探讨其判断脓毒症严重程度的临床价值。方法选取2015年河北省儿童医院重症监护室收治的脓毒症患儿66例,根据诊断标准,其中脓毒症38例(脓毒症组),严重... 目的测定脓毒症患儿白介素1受体1(IL-1R1)、活性蛋白C(APC)、降钙素原(PCT)表达水平,探讨其判断脓毒症严重程度的临床价值。方法选取2015年河北省儿童医院重症监护室收治的脓毒症患儿66例,根据诊断标准,其中脓毒症38例(脓毒症组),严重脓毒症28例(严重脓毒症组)。另选取同期体检健康儿童30例作为对照组。检测比较脓毒症组及严重脓毒症组入院24 h时、对照组体检时血清IL-1R1、APC、PCT表达水平;并采用受试者工作特征(ROC)曲线评价入院24 h时IL-1R1、APC、PCT判断脓毒症严重程度的价值。结果 3组入院24 h时IL-1R1、APC、PCT表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中脓毒症组IL-1R1、PCT水平高于对照组,APC水平低于对照组;严重脓毒症组IL-1R1水平高于对照组,APC水平低于对照组,高于脓毒症组,PCT水平高于对照组和脓毒症组(P<0.05)。入院24 h IL-1R1判断脓毒症患儿发生严重脓毒症的ROC曲线下面积(AUC)为0.597,与AUC=0.500比较,差异无统计学意义(P=0.198);入院24 h APC判断脓毒症患儿发生严重脓毒症的AUC为0.686,与AUC=0.500比较,差异有统计学意义(P=0.013);入院24 h PCT判断脓毒症患儿发生严重脓毒症的AUC为0.817,与AUC=0.500比较,差异有统计学意义(P<0.001)。入院24 h三者联合判断脓毒症患儿发生严重脓毒症的AUC为0.834,与AUC=0.500比较,差异有统计学意义(P<0.001)。结论脓毒症及严重脓毒症患儿血清IL-1R1、PCT、APC水平较正常儿童存在差异。PCT及三者联合判断脓毒症严重程度的价值较高,可以作为判断病情的参考指标。 展开更多
关键词 脓毒症 白介素1受体1 活性蛋白C 降钙素原 儿童
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小儿肺咳颗粒辅助治疗儿童支原体肺炎的疗效及其对血清活化蛋白C和白介素1受体1型水平的影响 被引量:29
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作者 廖震 楼凌云 《中国妇幼保健》 CAS 2018年第2期369-371,共3页
目的探讨小儿肺咳颗粒辅助治疗儿童支原体肺炎的疗效及其对血清活化蛋白C(APC)和白介素1受体1型(IL-1R1)水平的影响。方法选择2015年1月-2016年12月杭州市儿童医院收治的106例支原体肺炎患儿为肺炎组,同期106例健康体检儿童为健康组,支... 目的探讨小儿肺咳颗粒辅助治疗儿童支原体肺炎的疗效及其对血清活化蛋白C(APC)和白介素1受体1型(IL-1R1)水平的影响。方法选择2015年1月-2016年12月杭州市儿童医院收治的106例支原体肺炎患儿为肺炎组,同期106例健康体检儿童为健康组,支原体肺炎儿童根据随机数字法分为观察组(小儿肺咳颗粒+阿奇霉素治疗)和对照组(阿奇霉素治疗)。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清APC和IL-1R1水平。结果观察组患者退热时间、咳嗽消失时间、X线炎症消失时间均短于对照组(t=5.190、4.470、3.421,均P<0.001)。观察组总有效率高于对照组(χ~2=12.079,P<0.001)。肺炎组血清APC低于对照组(t=23.509,P<0.001),IL-1R1高于对照组(t=16.328,P<0.001)。治疗后,两组血清APC水平高于治疗前(t=17.412、14.018,均P<0.001);观察组血清APC水平高于对照组(t=4.826,P<0.001);两组血清IL-1R1低于治疗前(t=14.736、9.738,均P<0.001),观察组血清IL-1R1水平低于对照组(t=16.231,P<0.001)。儿童支气管肺炎患者血清APC和IL-1R1水平呈负相关(r=-0.672,P<0.001)。结论小儿肺咳颗粒辅助治疗儿童支原体肺炎的疗效显著,其可能与小儿肺咳颗粒可升高血清APC水平,降低血清IL-1R1水平有关。 展开更多
关键词 小儿肺咳颗粒 儿童 支原体肺炎 活化蛋白C 白介素1受体1型
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小儿肺咳颗粒联合阿奇霉素对MPP患儿潮气呼吸肺功能、Th1/Th2免疫平衡及血清APC、IL-1R1水平的影响 被引量:9
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作者 付亚林 陈华佳 +2 位作者 陈秋蓉 马媛媛 彭淑梅 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第17期3310-3314,共5页
目的:探讨小儿肺咳颗粒联合阿奇霉素对肺炎支原体肺炎(MPP)患儿潮气呼吸肺功能、Th1/Th2免疫平衡及血清活化蛋白C(APC)、白介素1受体1型(IL-1R1)水平的影响。方法:选取2018年7月至2020年6月期间我院收治的MPP患儿160例。根据入院奇偶顺... 目的:探讨小儿肺咳颗粒联合阿奇霉素对肺炎支原体肺炎(MPP)患儿潮气呼吸肺功能、Th1/Th2免疫平衡及血清活化蛋白C(APC)、白介素1受体1型(IL-1R1)水平的影响。方法:选取2018年7月至2020年6月期间我院收治的MPP患儿160例。根据入院奇偶顺序法将患儿分为对照组和实验组,各80例。在常规治疗的基础上,对照组给予阿奇霉素治疗,实验组在对照组基础上联合小儿肺咳颗粒治疗,对比两组疗效、症状缓解时间、潮气呼吸肺功能、Th1/Th2免疫平衡、血清APC、IL-1R1水平及不良反应发生情况。结果:治疗10 d后,实验组的临床总有效率较对照组升高(P<0.05)。实验组的发热、咳嗽、肺部啰音、气促等症状缓解时间短于对照组(P<0.05)。治疗10 d后,两组潮气量(TV)、呼气时间(TE)升高,且实验组高于对照组(P<0.05),呼气峰值流速(PEF)降低,且实验组低于对照组(P<0.05)。治疗10 d后,两组干扰素γ(IFN-γ)、白介素-5(IL-5)降低,实验组较对照组低(P<0.05);两组IFN-γ/IL-5升高,实验组较对照组高(P<0.05)。治疗10 d后,两组血清IL-1R1水平降低,且实验组低于对照组(P<0.05);两组血清APC水平升高,且实验组高于对照组(P<0.05)。对照组、实验组的不良反应发生率分别为6.25%(5/80)、8.75%(7/80),不良反应发生率两组对比无统计学差异(P>0.05)。结论:MPP患儿采用小儿肺咳颗粒联合阿奇霉素治疗,可改善临床症状和潮气呼吸肺功能,其作用机制可能与调节Th1/Th2免疫平衡及血清APC、IL-1R1水平有关。 展开更多
关键词 小儿肺咳颗粒 阿奇霉素 肺炎支原体肺炎 潮气呼吸肺功能 Th1/Th2免疫平衡 活化蛋白C 白介素1受体1型
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支气管哮喘患儿白介素1受体1基因RS1041973及RS10208293位点单核苷酸多态性观察 被引量:4
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作者 徐哲 刘亚军 +4 位作者 鄢程程 丁艺 何婷婷 张福 高清川 《山东医药》 CAS 2019年第6期72-75,共4页
目的观察支气管哮喘患儿白介素1受体1(Interleukin 1 receptor-like 1,IL1RL1)基因RS1041973、RS10208293位点的单核苷酸多态性。方法 86例哮喘患儿为哮喘组,100例健康婴幼儿为对照组,收集两组外周血,ARMS-qPCR法检测分析IL1RL1基因RS10... 目的观察支气管哮喘患儿白介素1受体1(Interleukin 1 receptor-like 1,IL1RL1)基因RS1041973、RS10208293位点的单核苷酸多态性。方法 86例哮喘患儿为哮喘组,100例健康婴幼儿为对照组,收集两组外周血,ARMS-qPCR法检测分析IL1RL1基因RS1041973、RS10208293位点的基因型和等位基因。结果哮喘组IL1RL1基因RS1041973位点基因型AA、AC、CC的分布频率分别为3. 5%(3/86)、23. 3%(20/86)、73. 2%(63/86),等位基因A、C的分布频率分别为15. 2%(26/172)、84. 8%(146/172);对照组分别为8. 0%(8/100)、26. 0%(26/100)、66. 0%(66/100)、21%(42/200)、79%(158/200);两组AC、CC基因型分布频率及等位基因A、C的分布频率差异存在统计学意义(P均<0. 05)。与RS1041973位点基因型AA基因人群比较,RS1041973位点AC、CC基因型的个体患支气管哮喘的风险性增加(校正OR=1. 769,2. 212; 95%CI:0. 47~6. 655,0. 637~7. 687);且携带C等位基因的个体患支气管哮喘的危险度是A基因的1. 506倍(95%CI:0. 726~3. 126,P <0. 05)。哮喘组IL1RL1基因RS10208293位点基因型AA、AG、GG的分布频率分别为4. 6%(4/86)、25. 6%(22/86)、69. 8%(60/86),等位基因A、G的分布频率分别为17. 4%(30/172)、82. 6%(142/172);对照组分别为7. 0%(7/100)、29. 0%(29/100)、64. 0%(64/100)、21. 5%(43/200)、78. 5%(157/200);两组AG、GG基因型分布频率及等位基因A、G的分布频率差异存在统计学意义(P均<0. 05)。与RS10208293位点基因型AA基因人群比较,RS10208293位点AG、GG基因型的个体患哮喘的风险性增加(校正OR=1. 255,1. 531; 95%CI:0. 355~-4. 442,0. 463~-5. 067);且携带G等位基因的个体患哮喘的危险度是A基因的1. 36倍(95%CI:0. 673~2. 749,P <0. 05)。结论支气管哮喘患儿IL1RL1基因RS1041973位点C等位基因、RS10208293位点G等位基因突变频率较高。IL1RL1基因RS1041973位点A/C的C等位基因、RS10208293位点A/G的G等位基因的突变可能与支气管哮喘的易感性有关。 展开更多
关键词 白介素1受体1基因 白介素1受体1 单核苷酸多态性 支气管哮喘 哮喘
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白介素1受体相关激酶1(IRAK1)和NF-κB在苯扎氯铵诱导的干眼症小鼠角膜和结膜组织中的表达 被引量:14
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作者 杜婧 李勇 +3 位作者 高金荣 刘建国 李晶 魏升升 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第3期223-228,共6页
目的探讨白介素-1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1)和NF-κB在苯扎氯铵诱导的干眼症小鼠角膜和结膜组织中的表达。方法选取6~8周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠60只。将小鼠分为对照组(15只)和干眼症模型组(4... 目的探讨白介素-1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1)和NF-κB在苯扎氯铵诱导的干眼症小鼠角膜和结膜组织中的表达。方法选取6~8周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠60只。将小鼠分为对照组(15只)和干眼症模型组(45只)。向干眼症模型组小鼠双眼各滴入5μL浓度为0.75 g·L^(-1)的苯扎氯铵溶液,每天2次,持续7 d,诱导小鼠干眼模型;对照组小鼠不做处理。酚红棉线法测定泪液分泌量,分析各组小鼠各时间泪膜破裂时间,并行角膜和结膜HE染色。qRT-PCR检测角膜和结膜组织IL-1β、IL-6、IRAK1和NF-κB mRNA表达水平。免疫荧光染色检测IRAK1和NF-κB的表达和定位。结果干眼症模型组小鼠实验造模后1周和2周时,酚红棉线湿长降低,与对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。此外,干眼症小鼠泪液分泌量在造模后1周和2周增加了1.2~1.3倍,与对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。HE染色结果显示,与对照组小鼠相比,干眼症模型组小鼠结膜上皮细胞数增加,细胞排列欠整齐,同时伴有缺损。对照组角膜上皮细胞、基质胶原纤维排列整齐。干眼症模型组小鼠结膜组织IL-6 mRNA表达水平在造模后2周高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);4周时表达量比对照组增加了1倍,差异有统计学意义(P<0.05);干眼症模型组小鼠角膜组织中IL-6 mRNA表达量在造模后2周高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。干眼症模型组小鼠结膜组织中IL-1βmRNA在造模后1周和2周均高于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);4周时下降,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);而角膜组织中IL-1βmRNA在造模后1~4周内均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。干眼症模型组小鼠角膜组织中IRAK1 mRNA的表达水平在造模后1周和2周时均高于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05),4周时降低;而结膜组织中IRAK1 mRNA表达水� 展开更多
关键词 干眼症 白介素1受体相关激酶1 NF-ΚB 结膜 角膜
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基于IL-33/ST2L通路研究黄芩苷对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用 被引量:3
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作者 孙玥 范洋溢 高旭光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1258-1263,共6页
目的:探讨黄芩苷对缺血性脑卒中大鼠的神经功能及IL-33/白介素1受体样1(ST2L)信号通路的影响。方法:将90只大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组[0.4 mg/(kg·d)]、黄芩苷低、中、高剂量组[50、100、150 mg/(kg·d)],改良L... 目的:探讨黄芩苷对缺血性脑卒中大鼠的神经功能及IL-33/白介素1受体样1(ST2L)信号通路的影响。方法:将90只大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组[0.4 mg/(kg·d)]、黄芩苷低、中、高剂量组[50、100、150 mg/(kg·d)],改良Longa线栓法构建缺血性脑卒中大鼠模型。建模24 h后,Longa评分对所有大鼠神经功能损伤进行评分;ELISA法检测大鼠血清IL-6、TNF-α水平;2,3,5-三苯基氯化四唑(TTC)染色测定大鼠脑梗死面积;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织病理学变化;免疫组化法检测大鼠脑组织小胶质细胞数目;Western blot检测大鼠脑组织中IL-33/ST2L通路蛋白表达。结果:假手术组大鼠脑组织海马区未发生水肿,组织排列层次分明,神经元细胞结构正常;模型组大鼠海马区出现严重水肿,神经元紊乱,细胞核固缩、坏死,神经元细胞大量死亡;尼莫地平组、黄芩苷低、中、高剂量组大鼠水肿程度减轻,神经元细胞、变性、死亡数量减少,随着黄芩苷剂量增加,水肿程度逐渐变轻,神经元细胞死亡数量逐渐减少。与假手术组相比,模型组大鼠Longa评分、脑梗死面积、血清IL-6、TNF-α水平、小胶质细胞数目、蛋白IL-33、ST2L表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,尼莫地平组、黄芩苷低、中、高剂量组大鼠Longa评分、脑梗死面积、血清IL-6、TNF-α水平、小胶质细胞数目、蛋白IL-33、ST2L表达显著降低,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:黄芩苷对缺血性脑卒中大鼠具有神经保护作用,可能与IL-33/ST2L通路抑制有关。 展开更多
关键词 黄芩苷 白介素-33 白介素1受体样1 缺血性脑卒中 神经保护
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射血分数保留性心力衰竭患者血清miR-146a,IRAK-1表达水平与血管内皮功能、心室重构的相关性分析 被引量:2
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作者 包秋红 贾海玉 +2 位作者 张勇 曹中朝 刘昀 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第3期109-113,127,共6页
目的探讨射血分数保留性心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)患者血清微小RNA(micro RNA,miR)-146a、白介素1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK-1)表达水平及其与血管内皮功... 目的探讨射血分数保留性心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)患者血清微小RNA(micro RNA,miR)-146a、白介素1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK-1)表达水平及其与血管内皮功能、心室重构的相关性。方法选择2021年6月~2022年3月在内蒙古医科大学附属医院收治的93例HFpEF患者为观察对象,选择同期门诊体检健康者(无心血管病史)90例为对照组,收集患者资料,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测血清mi R-146a和IRAK-1 mRNA表达,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清内皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平,化学发光法检测血清一氧化氮(nitric oxide,NO)水平,超声心动图检查左室射血分数(LVEF)、二尖瓣口舒张早期最大血流速度E峰与舒张晚期最大血流速度A峰的比值(E/A)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心房内径(LAD)和左室质量指数(LVMI)。Pearson法分析HFpEF患者血清miR-146a和IRAK-1 mRNA表达水平的相关性及miR-146a,IRAK-1与血管内皮功能、心室重构相关性指标的相关性,ROC曲线分析血清miR-146a和IRAK-1对HFpEF的诊断价值。结果与对照组比较,HFpEF组血清miR-146a(2.13±0.35 vs 1.05±0.21)表达水平升高,IRAK-1 mRNA(0.65±0.10 vs 1.03±0.12)表达水平降低,差异有统计学意义(t=25.209,23.302,均P<0.05);HFpEF患者血清miR-146a与IRAK-1 mRNA水平呈负相关(r=-0.473,P<0.001),血清miR-146a与ET-1,LVEDD,LAD,LVMI呈正相关(r=0.501,0.556,0.391,0.601,均P<0.001),与血清NO,LVEF,E/A呈负相关(r=-0.453,-0.623,-0.613,均P<0.001);IRAK-1 mRNA与血清ET-1,LVEDD,LAD,LVMI呈负相关(r=-0.369,-0.478,-0.551,-0.457,均P<0.001),与血清NO,LVEF,E/A呈正相关(r=0.447,0.605,0.567,均P<0.001)。血清miR-146a,IRAK-1联合诊断HFpEF的AUC显著高于miR-146a,IRAK-1单独诊断(Z=2.122,2.067,P=0.033,0.038)。结论HFpEF患者血清miR-146a表达水平升高,IRAK-1表达水平降低,与血管内皮功� 展开更多
关键词 射血分数保留性心力衰竭 微小核糖核酸-146a 白介素1受体相关激酶1 血管内皮功能 心室重构
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miR-146a对食管鳞癌细胞生物学行为的影响及其机制 被引量:3
8
作者 谢文英 杨升 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期912-918,共7页
目的探讨miR-146a对食管鳞癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡及细胞周期等生物学行为的影响及其机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-146a在食管鳞癌细胞株Eca109、KYSE140和KYSE150中的表达。将miR-146a模拟物转染... 目的探讨miR-146a对食管鳞癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡及细胞周期等生物学行为的影响及其机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-146a在食管鳞癌细胞株Eca109、KYSE140和KYSE150中的表达。将miR-146a模拟物转染Eca109细胞,上调miR-146a的表达,采用细胞增殖实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,划痕实验检测细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡和细胞周期。运用相关生物信息学技术预测miR-146a的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-146a与靶基因白介素1受体相关激酶1(IRAK1)3'端非翻译区(3TTR)的结合情况,RT-qPCR技术和Western blot法分别检测靶基因mRNA和蛋白的表达。结果食管鳞癌Ecal09、KYSE140和KYSE150细胞中miR-146a的相对表达量分别为0.36±0.05、0.16±0.06和0.09±0.02,均低于食管正常上皮细胞HEEC(1.00±0.05,均P 0.01)。miR-146a模拟物转染Ecal09细胞后,细胞的吸光度值、穿膜细胞数[(52±18)个]、划痕减少距离[48h为(25.29±0.77)μm,72h为(30.66±0.91)μm]均明显低于阴性对照组和空白对照组(均P 0.01),早期凋亡率[(6.13±0.91)%]高于阴性对照组[(2.50±0.68)%,P 0.01]和空白对照组[(1.70±0.20)%,P 0.01];G,期细胞百分比[(44.74±6.76)%]较阴性对照组和空白对照组减少(均P 0.05),G2/M期细胞百分比[(41.88±2.88)%]较阴性对照组和空白对照组增多(均P 0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,共转染IRAKIWT和miR-146a模拟物组的荧光素酶活性明显低于其他对照组(均P 0.01)。RT-qPCR和Western blot检测结果显示,miK-146a模拟物转染组细胞中IRAKImRNA的表达水平为1.02±0.28,蛋白的表达水平为1.00±0.05,均低于阴性对照组和空白对照组(均/0.01)。结论miR-146a在食管鳞癌细胞株中表达降低,扮演着抑癌基因的角色。miR-146a能抑制食管鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移,促进其凋亡,阻滞细胞周期于G2/M 展开更多
关键词 食管鳞癌 MIR-146A ECA109细胞 生物学行为 白介素1受体相关激酶1
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白介素1受体相关激酶1在乳腺癌紫杉醇耐受患者治疗中的作用机制 被引量:2
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作者 崔沐 《影像研究与医学应用》 2018年第11期217-218,共2页
目的:探讨白介素1受体相关激酶1在乳腺癌紫杉醇耐受患者治疗中的作用机制并作分析。方法:选取乳腺癌患者150例,其中包括Basal-like型乳腺癌、Luminal-A型乳腺癌、Luminal-B型乳腺癌、HER2过表达型乳腺癌及三阴乳腺癌各30例。获取所有参... 目的:探讨白介素1受体相关激酶1在乳腺癌紫杉醇耐受患者治疗中的作用机制并作分析。方法:选取乳腺癌患者150例,其中包括Basal-like型乳腺癌、Luminal-A型乳腺癌、Luminal-B型乳腺癌、HER2过表达型乳腺癌及三阴乳腺癌各30例。获取所有参与对象的乳腺组织、乳腺癌组织,并应用实时荧光定量检测方法进行白介素1受体相关激酶1检测,并作比较分析。结果:五类型乳腺癌(Basal-like型、Luminal-A型、Luminal-B型、HER2过表达型、三阴)有紫杉醇耐受的IRAK1 m RNA相对表达水平均高于无紫杉醇耐受的IRAK1 m RNA相对表达水平,P<0.05。结论:在乳腺癌紫杉醇耐受患者治疗中白介素1受体相关激酶1有着重要作用意义及应用价值。 展开更多
关键词 白介素1受体激酶1 乳腺癌紫杉醇耐受 作用机制
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白介素-1受体1胞外域的原核表达及鉴定
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作者 周永飞 韩顺子 +5 位作者 赵丹莹 张健锋 常军亮 刘玉林 曹玉锋 刘景会 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1443-1448,共6页
目的原核表达白介素-1受体1(interleukin-1 receptor 1,IL-1R1)胞外域,并进行鉴定。方法从A375·S2细胞中扩增IL-1R1胞外域基因片段,克隆至载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-IL-1R1,转化入感受态OverExpress(DE3),经IPTG诱导... 目的原核表达白介素-1受体1(interleukin-1 receptor 1,IL-1R1)胞外域,并进行鉴定。方法从A375·S2细胞中扩增IL-1R1胞外域基因片段,克隆至载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-IL-1R1,转化入感受态OverExpress(DE3),经IPTG诱导表达,并进行亲和层析纯化。将纯化产物与弗氏佐剂充分乳化,免疫小鼠,分离血清,ELISA法检测血清抗体效价,Western blot和间接免疫荧光法检测抗体结合活性。结果菌落PCR及测序结果证明,重组表达质粒pET-28a-IL-1R1构建正确。表达产物的相对分子质量约34000,表达量为18%,纯化后纯度达93%,且可与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性结合。免疫小鼠血清效价约达1∶100000,且可与重组IL-1R1蛋白及A375·S2细胞中受体蛋白发生特异性结合。结论成功原核表达了IL-1R1胞外域,且免疫小鼠后可产生IL-1R1特异性抗体,本实验为后续IL-1R1单克隆抗体的制备及细胞受体功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 白介素-1受体1 胞外域 原核表达 纯化 多克隆抗体
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脑胶质瘤中ST2 mRNA的表达及意义
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作者 罗霜 刘进 +1 位作者 赵强 程书文 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2018年第4期364-365,共2页
目的探讨脑胶质瘤中白介素1受体样1(ST2)mRNA表达水平及与临床病理分级的关系。方法收集脑胶质瘤手术切除标本54例,脑外伤患者手术切除样本28例作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测ST2 mRNA在脑胶质瘤和对照组中的表达变化。结... 目的探讨脑胶质瘤中白介素1受体样1(ST2)mRNA表达水平及与临床病理分级的关系。方法收集脑胶质瘤手术切除标本54例,脑外伤患者手术切除样本28例作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测ST2 mRNA在脑胶质瘤和对照组中的表达变化。结果脑胶质瘤组中ST2 mRNA表达量中位数为0.77,明显高于在对照组中的表达(中位数为0.13)(P=0.02)。Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤组织中ST2 mRNA表达中位数为1.03,明显高于Ⅰ~Ⅱ级中的表达(中位数为0.34)(P=0.02)。结论 ST2 mRNA在脑胶质瘤组织中呈高表达,与临床病理分级相关,可能参与脑胶质瘤的发生发展。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 实时荧光定量多聚酶链反应 白介素1受体样1
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miR-146b调控甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的机制研究 被引量:2
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作者 方燕 郑旭旭 李丽燕 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2022年第1期58-63,共6页
目的探讨miR-146b在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞增殖、转移和凋亡中的作用及相关机制。方法qRT-PCR检测miR-146b在PTC细胞(NPA、GLAG-66、ONCNO-DG1和B-CPAP)和正常人甲状腺细胞系HTori3中的表达水平。miR-146... 目的探讨miR-146b在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞增殖、转移和凋亡中的作用及相关机制。方法qRT-PCR检测miR-146b在PTC细胞(NPA、GLAG-66、ONCNO-DG1和B-CPAP)和正常人甲状腺细胞系HTori3中的表达水平。miR-146b抑制剂转染B-CPAP细胞后,通过qRT-PCR检测其抑制效率,利用MTT实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测miR-146b对PTC细胞增殖、侵袭能力及凋亡率的影响。SiRNA-IRAK1转染B-CPAP细胞后,利用MTT实验、细胞划痕实验和流式细胞术分别检测IRAK1对PTC细胞增殖率、转移及凋亡率的影响。利用生物信息学软件预测miR-146b的靶基因白介素1关联受体激酶1(interleukin-1 receptor-associated kinases,IRAK1),并通过双荧光素报告基因实验验证miR-146b对IRAK1的调控作用。应用SPSS 20.0软件进行分析,组间对比采用两独立样本t检验。结果qRT-PCR结果表明,与正常细胞HTori3相比,miR-146b在NPA87、KAT-5、FTC-133和B-CPAP细胞系中表达显著升高,尤以B-CPAP较高[相对表达量1 vs(1.61±0.11)、(1.92±0.21)、(1.93±0.22)、(2.43±0.31),P<0.05]。miR-146b抑制剂转染后可显著降低B-CPAP细胞中miR-146b的表达水平[相对表达量1 vs(0.41±0.12,P<0.01]。MTT结果发现,miR-146b抑制剂可抑制B-CPAP细胞的增殖能力[相对增殖率值1.00 vs(0.52±0.12)、(0.56±0.11)、(0.62±0.12),P<0.05]。流式细胞仪检测发现,miR-146b抑制剂可促进B-CPAP细胞的凋亡能力[(3.74%±0.12%)vs(7.62%±0.21%),P<0.05]。Transwell结果表明,miR-146b抑制剂可减弱B-CPAP细胞的侵袭能力[侵袭细胞数目(280.00±67.00)vs(82.00±32.00),P<0.05]。转染入siRNA-IRAK1后,B-CPAP细胞增殖率显著升高[MTT实验,相对增殖率1 vs(2.11±0.21)、(2.33±0.18)、(2.21±0.16)]、转移能力增强[细胞划痕实验,24 h相对迁移率(0.58%±0.11%)vs(0.81%±0.21%)]且细胞凋亡率显著降低[流式细胞术,相对凋亡率(6.96%±1.12%)vs(24.30±1.52%),P<0.05]。双荧光素酶报告基因结果显示,IRAK1 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 miR-146b 转移 靶基因白介素1关联受体激酶1
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丁酸钠下调IRAK1改善肠易激综合征内脏高敏感 被引量:5
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作者 李竹青 张文雪 +4 位作者 李理想 王鹏 于岩波 左秀丽 李延青 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2018年第9期23-28,共6页
目的探究丁酸钠改善肠易激综合征(IBS)内脏高敏感性机制。方法纳入27例腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者及22例对照共49例参与者,免疫组化检测肠上皮IRAK1蛋白表达量,Spearman秩和检验分析IRAK1蛋白表达与腹痛程度和频率评分相关性。2,4,6... 目的探究丁酸钠改善肠易激综合征(IBS)内脏高敏感性机制。方法纳入27例腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者及22例对照共49例参与者,免疫组化检测肠上皮IRAK1蛋白表达量,Spearman秩和检验分析IRAK1蛋白表达与腹痛程度和频率评分相关性。2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠建立IBS疾病动物模型,丁酸钠灌肠干预,结肠扩张实验观察内脏敏感性变化,ELISA检测结肠IRAK1蛋白表达水平,Spearman秩和检验分析动物结肠IRAK1表达与内脏疼痛阈值相关性。以IL-33、丁酸钠干预HT-29细胞,Western blotting观察IRAK1蛋白表达变化。结果 IBS-D患者结肠上皮IRAK1蛋白表达高于对照组,结肠上皮IRAK1表达水平与腹痛程度评分呈正相关(r=0.676,P<0.001),与腹痛频率评分呈正相关(r=0.725,P<0.001)。丁酸钠干预可降低IBS动物结肠IRAK1蛋白表达、提高内脏疼痛阈值,动物结肠IRAK1蛋白表达与内脏疼痛阈值呈负相关(r=-0.655,P<0.001)。IL-33可使细胞IRAK1蛋白表达上调,丁酸钠预处理可减弱此效应。结论丁酸钠可能通过下调IRAK1蛋白表达水平改善IBS内脏高敏感性。 展开更多
关键词 丁酸钠 白介素-1受体相关激酶1 肠易激综合征 内脏高敏感
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