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采用等温链置换扩增结合纳米金测流层析试纸条检测登革热病毒 被引量：4
1
作者 赵锦 夏海雄 +4 位作者 刘雨杰 Ravinder Pal 范安然 何志旭 曾令文 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期405-412,共8页
目的:探讨等温链置换扩增结合纳米金测流层析试纸条用于登革热病毒(DENV)快速检测的可行性。方法:采用磁珠富集法提取病毒总RNA,并逆转录为cDNA用于等温链置换扩增检测体系;等温链置换扩增用于检测DENV,琼脂糖凝胶电泳用于分析等温链置... 目的:探讨等温链置换扩增结合纳米金测流层析试纸条用于登革热病毒(DENV)快速检测的可行性。方法:采用磁珠富集法提取病毒总RNA,并逆转录为cDNA用于等温链置换扩增检测体系;等温链置换扩增用于检测DENV,琼脂糖凝胶电泳用于分析等温链置换扩增产物及其检测的敏感度;采用柠檬酸三钠还原法制备用于试纸条的纳米金颗粒;利用核酸碱基互补配对原理设计纳米金测流层析试纸条的检测线与控制线,建立DENV的检测体系。结果:等温链置换扩增的敏感度为10 fmol/L。基于等温链置换扩增的纳米金测流层析试纸条检测DENV的敏感度也为10 fmol/L,取其检测样品浓度的对数值进行线性分析,检测浓度范围为10～10^(12)fmol/L,符合线性回归方程,线性相关系数(R^2)为0. 98。基于等温链置换扩增的纳米金测流层析试纸条检测DENV的特异性较高,与其他对照组无交叉。结论:建立了基于等温链置换扩增反应的纳米金试纸条用于DENV的检测方法,检测结果肉眼可见,敏感度高,可用于DENV的快速检测。 展开更多
关键词 登革热/诊断 DNA引物 序列分析 核酸扩增技术 纳米技术 金/诊断应用 生物技术
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登革热误诊6例分析 被引量：4
2
作者 王钟杰 沈阳 《中国误诊学杂志》 CAS 2007年第7期1541-1542,共2页
关键词 登革热/诊断 误诊
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2014年广东省登革热流行期间实验室诊断评价 被引量：4
3
作者 梁丹 苏娟 +3 位作者 肖红 黎薇 柯碧霞 柯昌文 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期530-536,共7页
目的本研究旨在评估登革热NS1抗原、病毒RNA和IgM抗体检测在登革热病毒感染早期实验室诊断中的应用。方法 2014年6—11月,连续采集广东省疑似登革热患者432份血清样本,所有样本同时进行了4项商用诊断试验,包括NS1快速诊断试验(RDT)、NS... 目的本研究旨在评估登革热NS1抗原、病毒RNA和IgM抗体检测在登革热病毒感染早期实验室诊断中的应用。方法 2014年6—11月,连续采集广东省疑似登革热患者432份血清样本,所有样本同时进行了4项商用诊断试验,包括NS1快速诊断试验(RDT)、NS1酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量RT-PCR(qRT-PCR)试验和IgM/IgG ELISA试验。结果 361例(83.6%)样本被检出登革病毒NS1抗原或病毒RNA或IgM抗体阳性,其中317例(87.8%)和43例(11.9%)为原发性和继发性登革热病例。NS1抗原总阳性率最高(358份,82.9%),其次是病毒RNA(268份,74.3%)和IgM抗体(179份,49.5%)。在采集标本时,本研究观察到疾病早期NS1抗原和病毒RNA呈阳性、而IgM抗体是逐渐出现阳性的时间变化。NS1 RDT(97.0%)和NS1 ELISA试验(98.6%)对急性期和急性后期标本的敏感性均显著高于qRT-PCR(88.9%)和IgM-ELISA(59.3%)试验(P <0.01)。NS1 RDT和NS1ELISA的检测结果相似,具有较好的一致性(κ=0.363,P <0.001),qRT-PCR对急性期标本的敏感性高于IgM-ELISA(P <0.01)。结论在以原发性感染为主的非登革热疫区国家,应重视高灵敏度的NS1抗原检测。病毒RNA检测对登革热早期诊断仍有价值,而IgM抗体检测最适合作为第5天或第5天以上患者的辅助诊断方法。为了从诊断角度及时做出适当的疫情反应,迫切需要这些信息和进一步的调查。 展开更多
关键词 登革热诊断 NS1抗原检测 ELISA 侧流免疫层析 RNA QRT-PCR 抗登革热IgM抗体
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