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植物基因功能鉴定新工具——病毒诱导基因沉默技术的研究进展 被引量：18
1
作者 张增艳 姚乌兰 辛志勇 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2006年第1期100-105,共6页
病毒诱导基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术是指带一段靶基因序列的VIGS重组病毒侵染植物、引起植物同源基因沉默与表型变异,进而通过表型变异进行基因功能分析的方法,是近年发展起来的从反向遗传学方向快速鉴定植物基... 病毒诱导基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术是指带一段靶基因序列的VIGS重组病毒侵染植物、引起植物同源基因沉默与表型变异,进而通过表型变异进行基因功能分析的方法,是近年发展起来的从反向遗传学方向快速鉴定植物基因功能的技术,是转录后基因沉默机制的一种表现。①VIGS的分子机制,涉及基因沉默的起始、维持和信号放大、传播共3个阶段;②VIGS技术、载体与方法学的发展;③VIGS作为基因功能研究的优越性,如不必进行转基因、操作方法简便、获得结果快速等;④应用VIGS对植物抗病途径、代谢与发育调控中参与基因功能进行研究的概况。同时,展望了VIGS技术作为植物功能基因组学功能分析的高通量技术平台的美好前景。 展开更多
关键词 病毒诱导基因沉默 基因功能分析 病毒载体
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植物瞬间表达系统与功能基因组学研究 被引量：14
2
作者 王华忠 陈雅平 陈佩度 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期367-374,共8页
结构基因组学和功能基因组学的发展使特定植物基因组和转录组序列的获取更为方便和快捷。随之而来的是对各种基因和调控序列的功能注释,探索植物生长和发育的遗传机理。表达和调控表达是遗传物质的自身语言和动态属性,因此通过植物细胞... 结构基因组学和功能基因组学的发展使特定植物基因组和转录组序列的获取更为方便和快捷。随之而来的是对各种基因和调控序列的功能注释,探索植物生长和发育的遗传机理。表达和调控表达是遗传物质的自身语言和动态属性,因此通过植物细胞内表达来分析目标基因和序列的表达和调控行为是功能分析的主要立足点。除创造转基因植株外,近几年来植物细胞瞬间表达系统得到了广泛的使用,与基因重排、病毒诱导基因沉默和RNA干扰等新兴技术的结合使其在植物功能基因组研究中扮演了越来越重要的角色。 展开更多
关键词 瞬间表达 农杆菌渗透法 RNA干扰 病毒诱导基因沉默
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转录后基因沉默与植物抗病毒防卫机制 被引量：9
3
作者 刘征 李润植 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2001年第3期274-279,共6页
介绍了转录后基因沉默及其作为植物一种抗病毒防卫机制的最新研究进展 ,并进一步探讨了植物与病毒互作及共进化过程、基因沉默及其诱导技术在植物基因调控表达、改良植物抗病性和植物功能基因组学等研究领域的应用前景。
关键词 转录后基因沉默 植物 RNA介导 抗病性 病毒诱导基因沉默 功能基因组学
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利用VIGS技术研究马铃薯抗晚疫病基因R3a和RB的信号传导 被引量：13
4
作者 崔艳红 贾芝琪 +1 位作者 李颖 黄三文 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期997-1004,共8页
利用VIGS技术,在烟草中沉默已知的抗病信号传导关键基因SIPK、NDR1、SGT1、HSP90、NPR1、Rar1、EDS1、WRKY1,再瞬时表达马铃薯抗病基因和其相应的无毒基因RB-Avrblb1和R3a-AvR3a,根据过敏反应(Hypersensitive Response,HR)是否被阻断来... 利用VIGS技术,在烟草中沉默已知的抗病信号传导关键基因SIPK、NDR1、SGT1、HSP90、NPR1、Rar1、EDS1、WRKY1,再瞬时表达马铃薯抗病基因和其相应的无毒基因RB-Avrblb1和R3a-AvR3a,根据过敏反应(Hypersensitive Response,HR)是否被阻断来研究RB和R3a介导的抗病信号传导。结果发现SGT1和HSP90基因沉默阻断了HR反应的发生,表明SGT1和HSP90是参与RB和R3a抗病信号传导途径过程中的关键基因。该技术体系的建立,为发现新晚疫病抗病相关基因的功能验证提供了一个高效的技术平台。 展开更多
关键词 晚疫病 烟草 病毒诱导基因沉默 瞬时表达
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病毒诱导番茄的基因沉默 被引量：11
5
作者 马红珍 裴冬丽 +3 位作者 耿慧霞 王来 王文静 李成伟 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1531-1537,共7页
该实验通过RT-PCR获得了番茄八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase,PDS)基因的部分序列,双酶切PDS片段和烟草脆裂病毒载体(pTV00),构建重组载体pTV00-PDS,经农杆菌GV3101介导侵染番茄叶片并观察植株表型变化。结果显示,被侵染的番茄... 该实验通过RT-PCR获得了番茄八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase,PDS)基因的部分序列,双酶切PDS片段和烟草脆裂病毒载体(pTV00),构建重组载体pTV00-PDS,经农杆菌GV3101介导侵染番茄叶片并观察植株表型变化。结果显示,被侵染的番茄表现出明显的光漂白现象。半定量RT-PCR检测表明,PDS的mRNA被显著降解。该沉默体系的建立为下一步大规模验证番茄基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 番茄 八氢番茄红素脱氢酶 病毒诱导基因沉默 烟草脆裂病毒
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植物中病毒诱导基因沉默的研究进展 被引量：9
6
作者 傅达奇 朱本忠 +2 位作者 赵晓丹 朱鸿亮 罗云波 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B04期62-66,共5页
研究表明TGS往往与目的基因启动子的甲基化密切相关,RNA沉默则由目的基因的 mRNA特异性降解引起。植物体中诱导RNA沉默的外部因素有转基因和病毒。与传统的转基因 技术相比,病毒诱导的基因沉默(Virus-induced gene silencing VIGS)是一... 研究表明TGS往往与目的基因启动子的甲基化密切相关,RNA沉默则由目的基因的 mRNA特异性降解引起。植物体中诱导RNA沉默的外部因素有转基因和病毒。与传统的转基因 技术相比,病毒诱导的基因沉默(Virus-induced gene silencing VIGS)是一种瞬时表达体系,能在较 短的时间里取得良好的效果,目前被广泛地用来研究植物基因的功能。就VIGS的研究进展做一 个比较全面的综述。阐述了DNA和RNA病毒诱导植物基因沉默的机理,同时讨论了利用病毒诱 导的基因沉默(VIGS)鉴定植物基因功能的优缺点和将来的发展趋势。 展开更多
关键词 病毒栽体 病毒诱导基因沉默 基因沉默抑制
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白菜病毒诱导基因沉默技术体系的建立 被引量：11
7
作者 杨学东 戴薇 +3 位作者 张昌伟 王金彦 孔敏 侯喜林 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2168-2174,共7页
以白菜(Brassica campestrisssp.chinensis Makino)品种‘苏州青’为材料,利用芜菁黄化花叶病毒(Turnip yellow mosaic virus,TYMV)质粒pTY成功抑制了白菜叶片八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因的表达,验证了病毒载体pT... 以白菜(Brassica campestrisssp.chinensis Makino)品种‘苏州青’为材料,利用芜菁黄化花叶病毒(Turnip yellow mosaic virus,TYMV)质粒pTY成功抑制了白菜叶片八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因的表达,验证了病毒载体pTY在白菜上诱导基因沉默的能力,建立了白菜病毒诱导基因沉默VIGS体系。为了进一步验证病毒载体pTY在白菜上诱导基因沉默的能力,以BcNRT1为靶基因,构建pTY-BcNRT1质粒侵染白菜后,显著抑制了BcNRT1在转录水平的表达。 展开更多
关键词 白菜 芜菁黄化花叶病毒 病毒诱导基因沉默
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转录后基因沉默与植物对外界病毒的抵御 被引量：2
8
作者 吕典秋 吕文河 李辉 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第5期678-682,共5页
转录后基因沉默(Post transcriptional gene silencing,PTGS)是生物界普遍存在的现象。近年来,PTGS在植物中特别是在转基因植物中得到了广泛的研究。PTGS是植物的一种自然防御机制,通过对PTGS的研究,对病毒和植物之间的相互关系有了新... 转录后基因沉默(Post transcriptional gene silencing,PTGS)是生物界普遍存在的现象。近年来,PTGS在植物中特别是在转基因植物中得到了广泛的研究。PTGS是植物的一种自然防御机制,通过对PTGS的研究,对病毒和植物之间的相互关系有了新的认识,它是病毒和植物共进化的结果。对基因沉默的机理和方式的深入研究对于植物基因工程在基础理论和应用方面均有重要作用。文章对转录后基因沉默的机理、病毒和植物的互作关系以及PTGS在植物功能基因研究和病毒抗性方面的应用进行了综述。 展开更多
关键词 转录后基因沉默 植物病毒 病毒诱导基因沉默
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病毒诱导基因沉默——植物抗病的可能机制 被引量：3
9
作者 周晓馥 王兴智 《松辽学刊（自然科学版）》 2001年第3期5-8,16,共5页
植物抗病性是植物的一种属性 ,植物对病原体的抗性可以通过诱导产生 .本文首先介绍了几十年来植物抗病性的研究进展 ,进而从病毒诱导基因沉默 (Virus_inducedgenesilencing,VIGS)的遗传学和分子生物学角度对植物抗病性进行了探讨 ,指出... 植物抗病性是植物的一种属性 ,植物对病原体的抗性可以通过诱导产生 .本文首先介绍了几十年来植物抗病性的研究进展 ,进而从病毒诱导基因沉默 (Virus_inducedgenesilencing,VIGS)的遗传学和分子生物学角度对植物抗病性进行了探讨 ,指出病毒诱导基因沉默是植物抗病的可能机制 。 展开更多
关键词 植物抗病性 病毒诱导基因沉默 RNA介导防卫 转录后基因沉默 抑制因子 抗病机制 遗传学 分子生物学
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棉花CML基因家族成员鉴定与功能分析 被引量：5
10
作者 杨秀 许艳超 +7 位作者 杨芳芳 蔡小彦 侯宇清 王玉红 王星星 王坤波 刘方 周忠丽 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2019年第4期307-318,共12页
【目的】类钙调素(Calmodulin-like,CML)蛋白是1种重要的Ca2+传感器,在调节植物应激反应机制中起重要作用。对CML基因家族进行全基因组学分析,以便深入研究CML基因在棉花逆境胁迫下的作用。【方法】利用生物信息学的方法进行了棉花CML... 【目的】类钙调素(Calmodulin-like,CML)蛋白是1种重要的Ca2+传感器,在调节植物应激反应机制中起重要作用。对CML基因家族进行全基因组学分析,以便深入研究CML基因在棉花逆境胁迫下的作用。【方法】利用生物信息学的方法进行了棉花CML家族成员的鉴定。利用转录组数据和反转录聚合酶链式反应分析陆地棉(Gossypium hirsutum L.)CML基因在盐胁迫下的表达模式。利用病毒诱导基因沉默技术对GhCML44-2基因进行沉默并进行功能验证。【结果】在陆地棉(Gossypium hirsutum L.)、雷蒙德氏棉(G. raimondii Ulbrich)、亚洲棉(G. arboreum L.)中分别获得了154个、74个、78个CML蛋白。进化树和保守基序分析表明,GhCML蛋白分为8个亚类,都含有保守的EF-hand结构域;在盐胁迫下,107个GhCML基因在叶和根中有显著的差异表达,且在根和叶中的差异表达模式不同。启动子分析表明,这些基因启动子中存在多种不同的胁迫响应元件;利用病毒诱导基因沉默技术成功沉默GhCML44-2的棉株相较于对照更加不耐盐。【结论】该研究结果有助于了解棉花CML基因家族的进化与功能,为后续研究其功能提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 棉花 类钙调素蛋白 盐胁迫 病毒诱导基因沉默 基因功能
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VIGS诱导GS同工酶基因沉默对烤烟氮代谢的影响 被引量：1
11
作者 郭玉鸽 张路阳 +3 位作者 党伟 杨铁钊 杨惠娟 李波 《中国烟草学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期79-87,共9页
【背景和目的】谷氨酰胺合成酶(GS)是烤烟氮代谢的关键酶,为探究沉默GS同工酶基因对烤烟氮代谢的影响。【方法】采用病毒诱导基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)技术构建GS同工酶基因(NtGS1、NtGS2)瞬时沉默表达载体,测定了... 【背景和目的】谷氨酰胺合成酶(GS)是烤烟氮代谢的关键酶,为探究沉默GS同工酶基因对烤烟氮代谢的影响。【方法】采用病毒诱导基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)技术构建GS同工酶基因(NtGS1、NtGS2)瞬时沉默表达载体,测定了烤烟品种中烟100叶片经VIGS处理10 d,20 d和30 d的NtGS1-1、NtGS1-2、NtGS2相对基因表达量和谷氨酰胺合成酶(GS)、硝酸还原酶(NR)活性以及叶片可溶性蛋白、总氮、烟碱含量和烟株生物量。【结果】沉默NtGS1基因的处理对NtGS1-1沉默效率最高为50.4%,对NtGS1-2沉默效率最高为56%,沉默NtGS1和NtGS2基因的处理对NtGS2沉默效率最高为54.9%;沉默NtGS1和NtGS2的烟株叶片重、GS、NR活性、可溶性蛋白、总氮、烟碱含量都显著低于对照。【结论】本研究建立的VIGS体系有效下调了GS同工酶基因的表达,同时沉默NtGS1和NtGS2(TRV::GS1::GS2)可抑制叶片氮素同化利用,降低氮代谢关键酶活性与含氮化合物含量。 展开更多
关键词 病毒诱导基因沉默 GS同工酶 烤烟 氮代谢
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病毒诱导基因沉默技术在豆科植物中的应用 被引量：4
12
作者 魏正欣 孙虎 +3 位作者 向艳涛 蒋浩中 沙爱华 刘良军 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期497-502,共6页
病毒诱导基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)是一种基于转录后基因沉默的反向遗传学研究方法,用于快速鉴定基因功能。该技术具有实验周期短、操作简便、低成本、高效率、获得表型快以及高通量等优点,被广泛地应用于植物基因... 病毒诱导基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)是一种基于转录后基因沉默的反向遗传学研究方法,用于快速鉴定基因功能。该技术具有实验周期短、操作简便、低成本、高效率、获得表型快以及高通量等优点,被广泛地应用于植物基因功能研究。豆科植物作为人类食品中淀粉、蛋白质、油和蔬菜的重要来源之一,具有重要的经济价值。本文从VIGS的技术原理、VIGS载体的开发和改良、VIGS在豆科植物中的应用等方面进行了综述,分析了VIGS技术在豆科植物中存在的问题,并展望了其应用前景。 展开更多
关键词 豆科植物 病毒诱导基因沉默 VIGS载体
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基因功能研究工具VIGS在植物中的应用 被引量：4
13
作者 李志强 曹延婷 +1 位作者 郭晓龙 徐敏 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期915-923,共9页
病毒诱导基因沉默（virus induced gene silencing,VIGS）是一种根据植物反抗病毒入侵机制而开发的RNA沉默技术。它利用病毒载体携带目的基因片段在寄主体内产生双链RNA从而诱导目的基因沉默。该技术的应用依赖于植物体内发生的精密且... 病毒诱导基因沉默（virus induced gene silencing,VIGS）是一种根据植物反抗病毒入侵机制而开发的RNA沉默技术。它利用病毒载体携带目的基因片段在寄主体内产生双链RNA从而诱导目的基因沉默。该技术的应用依赖于植物体内发生的精密且有效的分子调控网络与合适的侵染条件。相较于其他的植物诱变技术,VIGS有着其独特的优势,目前不仅在模式植物中有所应用,而且在诸多其他的单子叶及双子叶植物中也有报道。此外,随着新的载体系统、侵染条件与检测手段等不断出现,VIGS技术越来越多的特点被大家发现,并成为基因功能研究的得力工具。 展开更多
关键词 病毒诱导基因沉默 病毒载体 诱变 基因功能研究
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辣椒病毒诱导基因沉默体系的构建 被引量：4
14
作者 张庆琛 魏理 +2 位作者 丁锦平 裴冬丽 李成伟 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期133-136,共4页
采用RT-PCR方法克隆辣椒八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因部分序列,并构建病毒诱导基因沉默(VIGS)载体pYL156-PDS,经农杆菌介导侵染辣椒叶片,采用表型观察、半定量RT-PCR方法评价构建的VIGS体系的沉默效果.结果表明,辣椒新生叶片呈现明显的... 采用RT-PCR方法克隆辣椒八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因部分序列,并构建病毒诱导基因沉默(VIGS)载体pYL156-PDS,经农杆菌介导侵染辣椒叶片,采用表型观察、半定量RT-PCR方法评价构建的VIGS体系的沉默效果.结果表明,辣椒新生叶片呈现明显的光漂白现象,且叶片内源PDS基因表达量明显低于对照.研究证明,辣椒VIGS体系已被成功构建,为规模化验证辣椒基因功能提供了技术平台. 展开更多
关键词 辣椒 八氢番茄红素脱氢酶 病毒诱导基因沉默
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陆地棉离层基因GhBOP1的克隆及其功能的初步分析 被引量：4
15
作者 常璟 晋昕 +3 位作者 庞金环 司怀军 张宁 吴家和 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期14-19,共6页
为防止棉铃脱落提高结铃性,进而提高棉花产量,从陆地棉中分离出一个参与离层分化调控的相关基因GhBOP1。通过生物信息学分析,表明GhBOP1蛋白序列含有保守性强的BTB和ANK结构域;进化树分析显示该蛋白氨基酸序列与许多植物的同源蛋白相似... 为防止棉铃脱落提高结铃性,进而提高棉花产量,从陆地棉中分离出一个参与离层分化调控的相关基因GhBOP1。通过生物信息学分析,表明GhBOP1蛋白序列含有保守性强的BTB和ANK结构域;进化树分析显示该蛋白氨基酸序列与许多植物的同源蛋白相似程度很高,说明该类蛋白进化较慢。利用qRT-PCR进行组织特异性表达分析的结果表明,GhBOP1基因在根、茎、叶和花等组织器官中均有少量表达,但在离层中为优势表达,表达量为叶片表达水平的20倍。利用病毒诱导基因沉默(VIGS)技术干涉棉花GhBOP1基因的表达,同时进行低盐胁迫处理分析,对照植株叶片出现大量地脱落,而GhBOP1基因沉默植株叶片生长正常。总之GhBOP1基因在离层中优势表达,并对离层的形成可能具有调控功能。 展开更多
关键词 棉花 离层 GhBOP1基因 病毒诱导基因沉默
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番茄对晚疫病的株龄相关抗性及Ph-3的抗性机制 被引量：4
16
作者 李涛 Sayed Rashad Ali Shah +3 位作者 刘磊 郑峥 杜永臣 李君明 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1077-1084,共8页
目前已明确番茄抗晚疫病R基因表现明显的株龄相关抗性(Age-related Resistance,ARR),但抗晚疫病QTL的抗性规律尚不明确。以携带抗晚疫病基因Ph-3的栽培种番茄(Solanum lycopersicum)‘CLN2037B’和野生种醋栗番茄(S.pimpinellifolium)‘... 目前已明确番茄抗晚疫病R基因表现明显的株龄相关抗性(Age-related Resistance,ARR),但抗晚疫病QTL的抗性规律尚不明确。以携带抗晚疫病基因Ph-3的栽培种番茄(Solanum lycopersicum)‘CLN2037B’和野生种醋栗番茄(S.pimpinellifolium)‘L3708’以及易感病材料栽培种番茄(S.lycopersicum)‘LA2818’为对照,对含有抗晚疫病QTL的多毛番茄(S.habrochaites)‘LA2099’、‘LA1033’和‘LA1777’是否也存在株龄相关抗性进行了分析。结果表明,携带抗晚疫病QTL的3个材料的6叶期和9叶期植株病情级数均比3叶期明显降低,表明QTL抗性与株龄相关。利用乙烯、水杨酸和茉莉酸素合成或缺失的突变体和病毒诱导基因沉默(Virus Induced Gene Silencing,VIGS)技术,初步明确了乙烯和水杨酸参与6叶期Ph-3基因介导的对晚疫病的抗性,而茉莉酸不参与。 展开更多
关键词 番茄 晚疫病 株龄相关抗性 QTL 突变体 病毒诱导基因沉默
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中国番茄黄化曲叶病毒利用根吸收法诱导基因沉默(VIGS)的初步研究 被引量：4
17
作者 张召军 王晓彬 +3 位作者 王慧 刘林 张心阁 何秀霞 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期143-146,共4页
以含硫黄素酶Su基因的中国番茄黄化曲叶病毒卫星DNA作为载体,通过冻融法将其转化到农杆菌中,利用根部吸收法进行农杆菌侵染,对农杆菌介导的病毒诱导基因沉默体系进行了优化,探讨对病毒诱导基因沉默效率的影响。结果显示以OD600值为1.5... 以含硫黄素酶Su基因的中国番茄黄化曲叶病毒卫星DNA作为载体,通过冻融法将其转化到农杆菌中,利用根部吸收法进行农杆菌侵染,对农杆菌介导的病毒诱导基因沉默体系进行了优化,探讨对病毒诱导基因沉默效率的影响。结果显示以OD600值为1.5的含质粒pBinPLUS-2mβ-Su,pBinPLUS-1.7A的农杆菌菌液1∶1混合进行根部吸收法侵染22-25 d的番茄幼苗,目的基因Su沉默导致番茄幼苗出现光漂白现象,半定量RT-PCR检测目的基因Su mRNA被显著降解,该体系的建立有利于对植物基因进行高通量功能分析。 展开更多
关键词 病毒诱导基因沉默 硫黄素酶Su基因 根吸收法
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TaHIPP32与TaHAK1表达及小麦缺钾胁迫耐性的关系
18
作者 李鸽子 刘金 +4 位作者 张丹丹 肖向红 王永华 郭天财 康国章 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期131-140,共10页
钾是植物生长发育必需的三大营养元素之一。高亲和性钾转运蛋白(HAK)能加强植物在缺钾胁迫时钾的吸收和转运。本课题组前期研究发现,小麦TaHAK1基因在缺钾胁迫条件下显著上调表达,并筛选得到可能调控TaHAK1基因表达的上游转录因子基因Ta... 钾是植物生长发育必需的三大营养元素之一。高亲和性钾转运蛋白(HAK)能加强植物在缺钾胁迫时钾的吸收和转运。本课题组前期研究发现,小麦TaHAK1基因在缺钾胁迫条件下显著上调表达,并筛选得到可能调控TaHAK1基因表达的上游转录因子基因TaHIPP32,但这两个基因在缺钾胁迫中的作用机制尚不清楚。本研究首先对TaHIPP32基因进行了系统发育和亚细胞定位分析,然后利用双荧光素酶验证TaHIPP32和TaHAK1基因的互作,并以河南省大面积推广的小麦品种百农207为试验材料,利用大麦条纹花叶病毒诱导基因沉默(BSMV-VIGS)技术分析缺钾胁迫处理下TaHIPP32基因沉默对小麦植株的影响。系统发育和亚细胞定位分析表明,TaHIPP32基因与水稻OsHIPP33基因的亲缘关系最近,且其编码的蛋白定位于细胞膜上。双荧光素酶试验表明,TaHIPP32蛋白能够与TaHAK1基因启动子互作。通过BSMV-VIGS技术瞬时沉默TaHIPP32基因,发现该基因沉默后,小麦植株对缺钾胁迫更为敏感,植株生长受到抑制,干重显著降低,丙二醛(MDA)含量显著提高;缺钾胁迫处理下,沉默TaHIPP32基因的植株中,TaHAK1和TaHIPP32基因的表达均被抑制,且植株体内钾元素从地下部到地上部的转移系数显著降低,说明TaHIPP32基因通过调节TaHAK1基因的表达来影响植株体内钾元素的转运。 展开更多
关键词 小麦 缺钾胁迫 钾转运蛋白 TaHIPP32基因 病毒诱导基因沉默
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辣椒花器官发育PAP3基因和PDS基因VIGS载体的构建及鉴定 被引量：4
19
作者 马宁 刘辰 +1 位作者 王茹芳 沈火林 《中国瓜菜》 CAS 2014年第1期10-12,24,共4页
以辣椒恢复系121C为材料,采用RT-PCR技术从121C花药中克隆得到控制花器官发育B类基因PAP3的部分序列,片段长379 bp,阳性对照八氢番茄红素脱氢酶基因(phytoene desaturae,PDS),片段长323 bp,然后通过酶切分别连接pTRV2质粒,获得重组载体p... 以辣椒恢复系121C为材料,采用RT-PCR技术从121C花药中克隆得到控制花器官发育B类基因PAP3的部分序列,片段长379 bp,阳性对照八氢番茄红素脱氢酶基因(phytoene desaturae,PDS),片段长323 bp,然后通过酶切分别连接pTRV2质粒,获得重组载体pTRV2-pPAP3和pTRV2-PDS。利用PCR进行初步鉴定后进行序列测定。结果表明,辣椒PAP3基因和PDS基因已插入到pTRV2载体上,VIGS载体构建成功。该研究为下一步分析基因沉默和辣椒花器官的发育提供了试验基础。 展开更多
关键词 辣椒 PAP3 病毒诱导基因沉默 花器官发育
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抗柑橘衰退病毒基因工程研究进展 被引量：3
20
作者 刘永清 周常勇 周彦 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期2848-2855,共8页
本文从选育和利用抗(耐)柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)的柑橘品种和砧木、弱毒株交叉保护、转基因诱导的CTV抗性等方面综述抗柑橘衰退病毒基因工程研究进展,并就人工miRNA(artificalmicroRNA,amiRNA)介导抗性加以展望,旨在... 本文从选育和利用抗(耐)柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)的柑橘品种和砧木、弱毒株交叉保护、转基因诱导的CTV抗性等方面综述抗柑橘衰退病毒基因工程研究进展,并就人工miRNA(artificalmicroRNA,amiRNA)介导抗性加以展望,旨在为更好地控制CTV危害提供借鉴。 展开更多
关键词 柑橘衰退病毒 柑橘固有抗性 病毒诱导基因沉默 转基因诱导抗病性 amiRNA介导抗性
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