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电激活对完全体外化牛细胞核移植的影响 被引量:20
1
作者 李雪峰 谭丽玲 +1 位作者 石德顺 谭世俭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期495-500,共6页
牛卵母细胞在体外成熟23~24h时去核,去核卵用80V/mm40μs两次电脉冲激活(Ⅰ组)或不激活(Ⅱ组),然后将体外受精、发育的8~32细胞期胚胎的单个卵裂球注入卵周隙,用80V/mm40μs两次电脉冲诱导卵裂球与... 牛卵母细胞在体外成熟23~24h时去核,去核卵用80V/mm40μs两次电脉冲激活(Ⅰ组)或不激活(Ⅱ组),然后将体外受精、发育的8~32细胞期胚胎的单个卵裂球注入卵周隙,用80V/mm40μs两次电脉冲诱导卵裂球与去核卵母细胞融合。Ⅰ组操作后存活率和融合率(88.4%和55.0%)显著低于Ⅱ组(95.9%和65.1%,P<0.05)。融合卵体外培养24h和5~8d后,Ⅰ组核移植胚胎的卵裂率和桑椹/囊胚发育率(63.0%和15.2%)与Ⅱ组(50.5%和7.8%)无显著差异,但Ⅰ组结果均好于Ⅱ组。将来自两组的25枚桑椹和囊胚移植到16头同期受体,在已检查过的8头受体中2头受体妊娠,其中1头于妊娠后4个多月流产,1头于妊娠期满后产出一雄性牛犊。研究结果表明:去核卵母细胞的电激活尽管对重组卵的存活与融合不利,但可改善核移植胚的卵裂和发育。本研究在我国首次获得牛细胞核移植的成功,证明用IVM卵母细胞和IVF胚胎进行完全体外化的牛细胞核移植是可行的。 展开更多
关键词 激活 体外成熟 体外受精 细胞核移植
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猪体外成熟卵母细胞的电激活及其激活后的体外培养 被引量:10
2
作者 吴中红 邢凤英 +4 位作者 刘国世 曾申明 朱士恩 张忠诚 伏彭辉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1537-1542,共6页
主要研究了猪体外成熟卵母细胞电激活的条件以及孤雌激活胚胎的体外培养体系。用不同场强、脉冲时程和脉冲次数激活猪体外成熟的卵母细胞。结果表明 ,在本试验条件下电激活最佳场强和脉冲时程为 130V·mm-1/ 80 μs ,其囊胚发育率为... 主要研究了猪体外成熟卵母细胞电激活的条件以及孤雌激活胚胎的体外培养体系。用不同场强、脉冲时程和脉冲次数激活猪体外成熟的卵母细胞。结果表明 ,在本试验条件下电激活最佳场强和脉冲时程为 130V·mm-1/ 80 μs ,其囊胚发育率为 (2 0 .12± 8.18) % (P >0 .0 5 )。多次脉冲并不比单次脉冲的激活效果好 (P >0 .0 5 )。孤雌激活胚胎用不同培养方式和气体环境在体外培养 7d ,发现 7d不换液与第 5天换液和第 5天换含 10 %胎牛血清的培养液其囊胚发育率 [分别为 (2 5 .30± 7.5 5 ) %、(2 6 .4 4± 8.35 ) %和 (17.6 8± 5 .39) % ]无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,后两者换液培养方式其囊胚细胞数 (15 .78± 5 .4 6、14 .5 5± 4 .81)明显低于不换液的 (18.0 1± 6 .79,P <0 .0 1)。同时发现低氧 (5 %CO2 ∶7%O2 ∶88%N2 )气体环境培养的胚胎囊胚发育率和囊胚细胞数和高氧环境 (5 %CO2 的空气 )无明显差别 ,分别为 [(2 0 .78± 8.80 ) %、17.0 0± 6 .12和 (2 5 .30± 7.5 5 ) %、18.0 1± 6 .79,P >0 .0 5 ]。表明激活后第 5天换原液和换含胎牛血清的培养液不能提高囊胚细胞数。低氧 (5 %CO2 ∶7%O2 ∶88%N2 )气体环境培养猪胚胎的效果不比高氧环境 (5 %CO2 的空气 )好。 展开更多
关键词 体外成熟卵母细胞 激活 体外培养 胚胎培养
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猪卵母细胞的电激活 被引量:9
3
作者 赵浩斌 陈乃清 魏庆信 《西北农业学报》 CAS CSCD 1999年第1期15-19,共5页
以湖北白猪体内或体外成熟卵母细胞为对象.研究不同直流脉冲条件、激活液Ca2+浓度及卵龄对输卵母细胞电激活的影响,并比较了体内与体外成熟卵的激活率与发育率。结果表明,脉冲强度、脉冲次数、脉冲时间、Ca2+浓度及卵龄均可影响激活... 以湖北白猪体内或体外成熟卵母细胞为对象.研究不同直流脉冲条件、激活液Ca2+浓度及卵龄对输卵母细胞电激活的影响,并比较了体内与体外成熟卵的激活率与发育率。结果表明,脉冲强度、脉冲次数、脉冲时间、Ca2+浓度及卵龄均可影响激活效果。1次脉冲就足以激活猪卵母细胞,脉冲时间以40~60μs为优,强度以1250V/cm(体外成熟卵)或1500V/cm(体内成熟卵)为优,激活注Ca2+浓度0.05mmol/L或0.1mmol/L均可,卵龄以42~48h为宜。体内和体外成熟卵在激活率和发育率上无显著差异(P>0.05)。 展开更多
关键词 卵母细胞 激活
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猪卵母细胞电激活参数的研究 被引量:7
4
作者 张德福 Karl Schellander 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2001年第4期254-257,共4页
以体外成熟的猪卵母细胞为对象 ,研究不同卵龄、电场强度、脉冲次数和激活液 Ca+ + ,Mg+ +对猪卵母细胞电激活效果的影响。结果表明 ,1次脉冲就足以激活猪卵母细胞 ,电场强度以 1 2 5 0~ 1 5 0 0 V/cm为优 ,含 Ca+ + ,Mg+ + 的激活液... 以体外成熟的猪卵母细胞为对象 ,研究不同卵龄、电场强度、脉冲次数和激活液 Ca+ + ,Mg+ +对猪卵母细胞电激活效果的影响。结果表明 ,1次脉冲就足以激活猪卵母细胞 ,电场强度以 1 2 5 0~ 1 5 0 0 V/cm为优 ,含 Ca+ + ,Mg+ + 的激活液激活效果显著高于非电解质液 ,卵龄以 5 4h为宜。 展开更多
关键词 卵母细胞 激活
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猪胚胎细胞核移植 被引量:3
5
作者 陈乃清 赵浩斌 +1 位作者 苟德明 樊俊华 《西北农业大学学报》 CSCD 1996年第6期1-5,共5页
选用杜洛克2~16细胞期胚胎卵裂球作核供体,湖北白猪卵母细胞作核受体,通过显微操作和电融合法构成重组胚。体外培养时,以融合前2h,1h激活及融合前不激活的卵母细胞做核受体的重组胚,发育率分别为64.6%(31/48)... 选用杜洛克2~16细胞期胚胎卵裂球作核供体,湖北白猪卵母细胞作核受体,通过显微操作和电融合法构成重组胚。体外培养时,以融合前2h,1h激活及融合前不激活的卵母细胞做核受体的重组胚,发育率分别为64.6%(31/48),55.3%(26/47)和34.5%(19/55)。61枚重组胚移入同步发情的5头受体母猪输卵管,1头于妊娠117d产下5头核移植仔猪。结果表明,激活卵母细胞作核受体优于未激活卵母细胞。 展开更多
关键词 猪胚胎 核移植 融合 激活
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猪卵母细胞体外成熟及电激活后发育能力的研究 被引量:4
6
作者 徐小明 杨春荣 +1 位作者 胡军和 窦忠英 《自然科学进展》 北大核心 2006年第3期361-364,共4页
探讨了不同的成熟培养液及外源激素对猪卵母细胞体外成熟培养及电激活后孤雌胚胎发育能力的影响.结果表明:(1)改良M199(mM199)组猪卵母细胞成熟率显著高于M199组,且这两组又较NCSU-23组能极显著提高卵母细胞的成熟率.(2)孕马血清(PMS... 探讨了不同的成熟培养液及外源激素对猪卵母细胞体外成熟培养及电激活后孤雌胚胎发育能力的影响.结果表明:(1)改良M199(mM199)组猪卵母细胞成熟率显著高于M199组,且这两组又较NCSU-23组能极显著提高卵母细胞的成熟率.(2)孕马血清(PMSG)+人绒毛膜促性腺激素(hCG)+促卵泡素(FSH)组卵母细胞成熟率略高于FSH+促黄体素(LH)组,两者卵母细胞成熟率极显著高于尿促性腺激素(hMG)组.(3)含胎牛血清(FBS),猪卵泡液(PFF),表皮生长因子 (EGF)的培养液较对照组在卵母细胞成熟率上无显著差异,但均能显著提高电激活后的卵裂率.添加EGF组桑囊率明显高于不添加组.但分别添加FBS和PFF组较对照组在桑囊率上均无显著差异.(4)卵丘细胞扩散与卵母细胞第一极体排出之间无直接相关性,但扩散程度好能提高电激活后的卵裂率. 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 激活
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猪卵母细胞电激活参数的研究 被引量:3
7
作者 张德福 Karl Schellander 《草食家畜》 2001年第S2期206-209,223,共5页
以体外成熟的猪卵母细胞为对象 ,研究不同卵龄、电场强度、脉冲次数和激活液Ca 、Mg 对猪卵母细胞电激活效果的影响。结果表明 ,1次脉冲就足以激活猪卵母细胞 ,电场强度以 1 2 50~ 1 50 0V/cm为优 ,含Ca 、Mg 的激活液激活效果显著高... 以体外成熟的猪卵母细胞为对象 ,研究不同卵龄、电场强度、脉冲次数和激活液Ca 、Mg 对猪卵母细胞电激活效果的影响。结果表明 ,1次脉冲就足以激活猪卵母细胞 ,电场强度以 1 2 50~ 1 50 0V/cm为优 ,含Ca 、Mg 的激活液激活效果显著高于非电解质液 ,卵龄以 展开更多
关键词 卵母细胞 激活
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奶牛卵母细胞化学激活与电激活比较研究 被引量:2
8
作者 马红 《中国草食动物》 2009年第3期38-39,共2页
关键词 牛卵母细胞 激活 化学激活 体细胞核移植技术 卵母细胞体外成熟 胚胎工程技术 体外培养 实验基础
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“1+1”,指向时速400公里
9
作者 张微微 《四川党的建设》 2023年第1期61-63,共3页
设备状态确认、列车上电激活、牵引制动试验、信号数据输人、确认信号开放、缓解停放制动、推动牵引手柄……随着一系列标准化的作业操作,列车缓缓驶出站台,逐级加速。1月5日,在位于西南交大犀浦校区的省部级重点实验室——国家铁路局... 设备状态确认、列车上电激活、牵引制动试验、信号数据输人、确认信号开放、缓解停放制动、推动牵引手柄……随着一系列标准化的作业操作,列车缓缓驶出站台,逐级加速。1月5日,在位于西南交大犀浦校区的省部级重点实验室——国家铁路局先进能源牵引与综合节能铁路行业重点实验室里。 展开更多
关键词 西南交大 综合节能 信号开放 设备状态 作业操作 激活 标准化
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“1+1”,指向时速400公里
10
作者 张微微 《当代党员》 2023年第2期46-48,共3页
设备状态确认、列车上电激活、牵引制动试验、信号数据输人、确认信号开放、缓解停放制动、推动牵引手柄随着一系列的标准化作业操作,列车缓缓驶出站台,逐级加速。2023年1月5日,在位于西南交通大学犀浦校区的省部级重点实验室一一国家... 设备状态确认、列车上电激活、牵引制动试验、信号数据输人、确认信号开放、缓解停放制动、推动牵引手柄随着一系列的标准化作业操作,列车缓缓驶出站台,逐级加速。2023年1月5日,在位于西南交通大学犀浦校区的省部级重点实验室一一国家铁路局先进能源牵引与综合节能铁路行业重点实验室里。 展开更多
关键词 标准化作业 西南交通大学 综合节能 省部级重点实验室 信号开放 行业重点实验室 激活 设备状态
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不同因素对小鼠卵母细胞电激活及孤雌发育的影响 被引量:3
11
作者 马利兵 王强 +1 位作者 王凤梅 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第10期66-70,共5页
 研究了卵龄、电脉冲参数、氯化锶、亚胺环己酮(CHX)对小鼠卵母细胞电激活及孤雌发育效果的影响。结果表明,卵龄为17h的小鼠卵母细胞在场强1.0kV/cm,脉冲宽度30μs,2次电脉冲,激活液中含Ca2+、Mg2+和Sr2+的条件下激活后,再于含CHX的培...  研究了卵龄、电脉冲参数、氯化锶、亚胺环己酮(CHX)对小鼠卵母细胞电激活及孤雌发育效果的影响。结果表明,卵龄为17h的小鼠卵母细胞在场强1.0kV/cm,脉冲宽度30μs,2次电脉冲,激活液中含Ca2+、Mg2+和Sr2+的条件下激活后,再于含CHX的培养液中培养,可较好地激活卵母细胞,提高体外孤雌胚的发育率,激活率及桑囊胚率分别可达83.3%和57.5%。 展开更多
关键词 小鼠 卵母细胞 激活 孤雌发育 氯化锶 亚胺环已酮
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电激活对猪卵母细胞孤雌发育的影响 被引量:1
12
作者 曹胜兰 李跃民 刘贞伟 《畜禽业》 2006年第3期33-35,共3页
以体外成熟的猪卵母细胞为对象,研究了不同的电场强度、脉冲时程和脉冲次数对猪卵母细胞电激活效果及其孤雌胚发育率的影响。结果表明,1次脉冲就足以激活猪卵母细胞,以1300V·cm-1的电场强度和80μs的脉冲时程可以获得较高的卵母细... 以体外成熟的猪卵母细胞为对象,研究了不同的电场强度、脉冲时程和脉冲次数对猪卵母细胞电激活效果及其孤雌胚发育率的影响。结果表明,1次脉冲就足以激活猪卵母细胞,以1300V·cm-1的电场强度和80μs的脉冲时程可以获得较高的卵母细胞的激活率、卵裂率和孤雌胚发育率。 展开更多
关键词 卵母细胞 激活 孤雌激活
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小鼠电激活孤雌胚胎早期体内外发育能力的比较 被引量:2
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作者 刘京威 李贺娟 +6 位作者 尹燕云 陈利平 李晓燕 刘云海 倪和民 郭勇 鲁琳 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第6期483-488,I0001,共7页
目的探讨小鼠电激活孤雌胚胎的早期体内、外发育能力。方法 利用不同电脉冲参数和激活液对小鼠卵母细胞进行活化,观察激活后的小鼠孤雌胚体外发育状况和移植后的发育能力。结果非电解质激活液优于电解质液,脉冲强度、脉冲宽度和脉冲次... 目的探讨小鼠电激活孤雌胚胎的早期体内、外发育能力。方法 利用不同电脉冲参数和激活液对小鼠卵母细胞进行活化,观察激活后的小鼠孤雌胚体外发育状况和移植后的发育能力。结果非电解质激活液优于电解质液,脉冲强度、脉冲宽度和脉冲次数3个参数各自处于某一范围内时,他们之间存在某种相关性,降低其中1个参数可通过升高另外2个参数得到补偿,经筛选较适宜的电脉冲参数为:1.0 kV/cm、40μs、2 p,或者1.5kV/cm、30/μs、2 p,分别为74.65%和71.19%,体外囊胚发育率分别为43.40%和47.62%。电激活孤雌胚体外发育时序比正常胚胎慢,但囊胚细胞数与对照组差异不显著。它们经胚胎移植后,其中的一部分能够着床,但着床率仅为3.6%,极显著低于对照组(67%,P<0.01)。结论电刺激能够较好地模拟正常受精过程激活小鼠卵母细胞,但激活后的多数小鼠孤雌胚胎着床能力较低,不能够顺利着床。 展开更多
关键词 小鼠 激活 孤雌胚胎 早期体内外发育能力
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人工肌肉 被引量:2
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作者 陈进光(编译) 《现代科技译丛(哈尔滨)》 2005年第4期25-28,共4页
几年前,约瑟夫·巴科恩向一道从事研究工作的同事们提出一项挑战:建造一个机器人,采用电激活的聚合物作肌肉,能够与他人进行角力.当时他正尝试着手研究电激活聚合物,或者叫作人工肌肉,但实际上他并没有期望在一二十年内能看到研究结果.
关键词 人工肌肉 聚合物 激活 机器人
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用乙醇激活与电激活研究猪卵母细胞孤雌激活
15
作者 肖红卫 郑新民 +6 位作者 刘西梅 乔宪凤 李莉 张立苹 华文君 毕延震 华再东 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第24期5724-5726,共3页
以猪的体外成熟卵母细胞为实验材料,研究了乙醇激活、电激活对猪成熟卵母细胞体外孤雌发育的影响。结果表明,2个1.6 kV/cm的60μs的电激活法卵裂率高(88.68%,94/106);使用8%乙醇处理10 min的卵裂率为84.21%(64/76)。2个1.6 kV/cm的60μ... 以猪的体外成熟卵母细胞为实验材料,研究了乙醇激活、电激活对猪成熟卵母细胞体外孤雌发育的影响。结果表明,2个1.6 kV/cm的60μs的电激活法卵裂率高(88.68%,94/106);使用8%乙醇处理10 min的卵裂率为84.21%(64/76)。2个1.6 kV/cm的60μs的电激活法可以获得更高的卵裂率,为下一步研究奠定基础。 展开更多
关键词 卵母细胞 孤雌激活 乙醇激活 激活
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卵龄及激活液中Ca^(2+)浓度对小鼠卵母细胞电激活效率的影响
16
作者 王炜 李跃民 俞纯方 《现代畜牧兽医》 2005年第5期5-6,共2页
采用宁波新科CRY-3细胞融合仪及其配备的镀银电融合槽(电极宽度为0.5mm)对影响电激活效率的两个因素——卵龄及激活液中Ca2+浓度进行了比较研究。结果表明:①卵母细胞的活化率随卵龄的增加明显升高,电刺激hCG后18~19h的卵母细胞可获得... 采用宁波新科CRY-3细胞融合仪及其配备的镀银电融合槽(电极宽度为0.5mm)对影响电激活效率的两个因素——卵龄及激活液中Ca2+浓度进行了比较研究。结果表明:①卵母细胞的活化率随卵龄的增加明显升高,电刺激hCG后18~19h的卵母细胞可获得较高的卵母细胞激活率(71.67%),继续增加卵龄,卵母细胞激活率、卵裂率和囊胚发育率开始下降。②使用含Ca2+的激活液可获得较高的卵母细胞激活率,但Ca2+的浓度变化对激活效果无显著影响(P>0.05)。 展开更多
关键词 CA^2+浓度 小鼠卵母细胞 激活 卵龄 囊胚发育率 激活 比较研究 细胞融合 浓度变化 融合 活化率 hCG 刺激 卵裂率
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有无透明带猪卵母细胞电激活参数的优化及体外培养方式的建立 被引量:1
17
作者 任子利 赵彦玲 +6 位作者 何若钢 卢晟盛 陆阳清 蓝海恩 潘天彪 黄敏瑞 卢克焕 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第33期14541-14544,共4页
[目的]摸索无透明带猪体外成熟卵母细胞(ZFOs)电激活的条件和无透明带孤雌激活胚胎(ZFEs)的体外培养方式,为手工克隆法生产广西巴马小型猪体细胞核移植奠定基础。[方法]用不同场强、脉冲时程和脉冲次数激活ZIOs、ZFOs,用不同培养方式(... [目的]摸索无透明带猪体外成熟卵母细胞(ZFOs)电激活的条件和无透明带孤雌激活胚胎(ZFEs)的体外培养方式,为手工克隆法生产广西巴马小型猪体细胞核移植奠定基础。[方法]用不同场强、脉冲时程和脉冲次数激活ZIOs、ZFOs,用不同培养方式(微滴法和微穴法)培养ZIEs和ZFEs,检查第7天的囊胚率及囊胚的总细胞数。[结果]有带猪体外成熟的卵母细胞电激活最佳场强和脉冲时程为125 V/(mm.80μs),微滴法培养的囊胚发育率为(30.54±11.06)%;无带猪体外成熟的卵母细胞电激活最佳场强和脉冲时程为85V/(mm.80μs),微穴法培养,其囊胚发育率为(12.77±6.98)%;单次脉冲的激活效果好于多次脉冲。[结论]对有无透明带胚胎的培养方式,微穴法培养无透明带胚胎,微滴法培养有带胚胎较合适,一次脉冲可以有效激活卵母细胞。 展开更多
关键词 有无带卵母细胞 微穴法 无透明带培养 激活
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p型ZnO∶Mn-N薄膜的制备及特性研究 被引量:1
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作者 阮海波 孔春阳 +1 位作者 秦国平 南貌 《重庆师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第3期82-85,共4页
用射频磁控溅射法在石英玻璃衬底上制备了较高结晶质量的ZnO:Mn薄膜,继而进行N离子注入和退火处理,成功实现了ZnO薄膜的Mn—N两步法共掺杂和P型转变。利用X射线衍射(XRD)、Hall测试、分光光度计、X射线光电子能谱(XPS)等测试手... 用射频磁控溅射法在石英玻璃衬底上制备了较高结晶质量的ZnO:Mn薄膜,继而进行N离子注入和退火处理,成功实现了ZnO薄膜的Mn—N两步法共掺杂和P型转变。利用X射线衍射(XRD)、Hall测试、分光光度计、X射线光电子能谱(XPS)等测试手段对其性能进行了分析。结果表明:所测样品均具有单一的c轴择优取向,薄膜在退火后没有检测到其它杂质相的生成;薄膜在650℃经10~30min退火时均可实现P型转变,空穴浓度可达10^16-10^17cm^-3,表明650℃可能为ZnO:Mn—N体系中N离子达到电激活成为有效受主的温度;XPS能谱证明了Mn^2+、N^3-离子的掺入;在热退火作用下,部分间隙位N离子达到电激活通过扩散进入O空位,形成N-Zn或N-Mn键,是样品转变为P型的依据;P型ZnO:Mn—N薄膜室温下的禁带宽度为3.16eV,相对未掺杂ZnO的禁带宽度3.29eV明显减小。 展开更多
关键词 射频测控溅射 离子注入 Mn—N共掺 退火 激活 P型ZNO
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小鼠卵母细胞的电激活 被引量:1
19
作者 王炜 李跃民 俞纯方 《动物医学进展》 CSCD 2005年第6期75-78,共4页
采用宁波新科CRY 3 细胞融合仪及其配备的镀银电融合槽(电极宽度为0. 5mm)对影响小鼠卵母细胞电激活效率的诸多因素,如直流脉冲的强度(1. 0 kV/cm、1. 5kV/cm、2.0 kV/cm、2.5 kV/cm)、脉冲宽度(40μs、80 μs、100 μs、150 μs)和脉... 采用宁波新科CRY 3 细胞融合仪及其配备的镀银电融合槽(电极宽度为0. 5mm)对影响小鼠卵母细胞电激活效率的诸多因素,如直流脉冲的强度(1. 0 kV/cm、1. 5kV/cm、2.0 kV/cm、2.5 kV/cm)、脉冲宽度(40μs、80 μs、100 μs、150 μs)和脉冲次数(1次、2次、3次)进行了比较研究,结果表明,卵母细胞激活率随电场强度的增加而升高,场强为2.0 kV/cm时,获得了较高的卵母细胞激活率和卵裂率(74.47%,77.14%),场强继续增加,卵母细胞的激活率和卵裂率反而开始下降。场强为2.0 kV/cm,脉宽为80μs时,卵母细胞的激活率最高(77.78%)。多次连续脉冲(3次,每次间隔10 min)处理卵子,可明显升高卵母细胞的激活率和囊胚发育率(89.58%,20.59%)。 展开更多
关键词 孤雌生殖 小鼠 卵母细胞 激活
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电激活参数与渗透压阶段培养法对孤雌胚胎发育能力的影响 被引量:1
20
作者 黄雷 樊俊华 +4 位作者 武海燕 李林 高青 李奎 敖红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期155-158,共4页
试验旨在摸索猪卵母细胞孤雌激活的电场强度和脉冲时间,并探索渗透压阶段培养法对孤雌胚胎后期发育的影响。猪卵母细胞成熟培养42~44h后,分别在电场强度2.1、2.3、2.5kV/mm和脉冲时间30、60、90!s的9组电激活参数下进行孤雌激活试验;... 试验旨在摸索猪卵母细胞孤雌激活的电场强度和脉冲时间,并探索渗透压阶段培养法对孤雌胚胎后期发育的影响。猪卵母细胞成熟培养42~44h后,分别在电场强度2.1、2.3、2.5kV/mm和脉冲时间30、60、90!s的9组电激活参数下进行孤雌激活试验;卵母细胞在2.1kV/mm和30!s的参数下进行孤雌激活后,分别培养于渗透压为271、280、290、302mOsm的PZM-3中,48h后移入渗透压280mOsm的PZM-3中继续培养96h;孤雌胚胎于电激活后先在含2mmol/L 6-DMAP的PZM-3中培养4~6h,然后移入不含6-DMAP的PZM-3中继续培养。试验结果表明,电场强度和脉冲时间两个参数间无显著的交互作用(P>0.05),脉冲时间相同条件下,卵裂率在不同电场强度条件下均无显著差异(P>0.05),2.1和2.5kV/mm的电场强度条件下,脉冲时间为30!s时的卵裂率显著高于60和90!s(P<0.05),而2.3kV/mm电场强度下3个脉冲时间试验组的卵裂率无显著差异(P>0.05),各试验组的囊胚率无显著差异(P>0.05);孤雌胚胎在渗透压为290~310mOsm的PZM-3中培养48h,卵裂率得到显著提高(P<0.05),渗透压对囊胚率无显著影响(P>0.05);6-DMAP对孤雌胚胎卵裂率无显著影响(P>0.05),但可以显著提高囊胚率(P<0.05)。结果提示,猪卵母细胞孤雌激活需要较高的电场强度(2.1~2.3kV/mm)而脉冲时间不宜过长(30!s);48h的高渗培养和6-DMAP的辅助激活有助于孤雌胚胎的后期发育。 展开更多
关键词 孤雌生殖 高渗 6-DMAP 激活
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