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活体红细胞内血红蛋白的电泳释放 被引量：18
1
作者 秦文斌 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2011年第8期597-607,共11页
当今的蛋白质组学研究,都是先裂解细胞放出蛋白质,然后对蛋白质溶液进行各种分析.对于红细胞来说,它的裂解产物也称"溶血液",其中主要成分有血红蛋白A1,A2,A3和碳酸酐酶(CA)等.本实验室用未裂解的完整的活体红细胞直接进行电... 当今的蛋白质组学研究,都是先裂解细胞放出蛋白质,然后对蛋白质溶液进行各种分析.对于红细胞来说,它的裂解产物也称"溶血液",其中主要成分有血红蛋白A1,A2,A3和碳酸酐酶(CA)等.本实验室用未裂解的完整的活体红细胞直接进行电泳,观察其释放出来的血红蛋白(hemoglobin,Hb),建立了淀粉-琼脂糖混合凝胶中红细胞的电泳释放实验.电泳释放可分为"初释放"(一次通电完成电泳,此时有Hb释放出来)和"再释放"(电泳过程中断电-再通电,又有Hb释放出来).本实验室在"初释放"实验中发现了"HbA2现象",并通过Hb交叉电泳发现了HbA2与HbA1的相互作用;利用初释放型双向对角线电泳发现红细胞内HbA2与HbA1结合存在;对电泳释放出来的"HbA2现象"成分做SDS-PAGE及质谱分析,发现Prx-2(Peroxiredoxin-2)可能参与"HbA2现象"的形成;在研究"再释放"实验中发现了"Hb多带再释放现象",在此基础上创建等渗再释放、低渗再释放、等低渗全程再释放及再释放型双向对角线电泳;两种红细胞(全血中的红细胞和由它分离出来的游离红细胞)再释放的比较研究;血浆成分对红细胞再释放的影响等.以上研究方法的建立为活体细胞内蛋白质存在状态的研究提供了基础,并开辟了新的研究途径和领域. 展开更多
关键词 淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳 红细胞 血红蛋白 电泳释放 初释放 再释放 HbA_2现象
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红细胞血红蛋白释放实验与免疫共沉淀联用分析人红细胞内血红蛋白与其他蛋白的相互作用 被引量：3
2
作者 安亮 李晓晶 +4 位作者 魏春华 解彩霞 杜晓红 李嘉欣 苏燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期838-842,共5页
目的:通过红细胞血红蛋白电泳释放实验(ERT)与免疫共沉淀,寻找红细胞内与血红蛋白(hemoglobin,Hb)相互作用的蛋白。方法:首先将正常成人新鲜抗凝全血制备成红细胞悬液和溶血液,通过电泳释放实验分别分离并得到红细胞Hb A(RA)和溶血液Hb ... 目的:通过红细胞血红蛋白电泳释放实验(ERT)与免疫共沉淀,寻找红细胞内与血红蛋白(hemoglobin,Hb)相互作用的蛋白。方法:首先将正常成人新鲜抗凝全血制备成红细胞悬液和溶血液,通过电泳释放实验分别分离并得到红细胞Hb A(RA)和溶血液Hb A(HA),将此区带从凝胶中分别切出,经过反复冻融后,将上清吸出并进行浓缩,然后用hemoglobinβantibody(37-8)AC通过免疫共沉淀的方法,分别从红细胞裂解液、RA和HA中捕获血红蛋白复合物,然后利用5%-12%的SDS-PAGE分离上述复合物,并用Q-TOF质谱对目的区带进行鉴定。结果:Hb A成分经hemoglobinβantibody(37-8)AC免疫共沉淀捕获的复合物包含有16、20、22、28、50 k D 5条明显的区带,经质谱鉴定分别为血红蛋白、Band 3蛋白、硫氧还蛋白过氧化物酶2(Prx2)、Band 3蛋白和β-actin蛋白、Band 3蛋白。结论:在人红细胞内,血红蛋白Hb A可能与Prx-2、Band 3蛋白、β-actin蛋白之间存在相互作用,并形成复合体。 展开更多
关键词 免疫共沉淀 红细胞 血红蛋白 电泳释放实验
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小鼠肝切除使红细胞内血红蛋白的电泳释放增强 被引量：1
3
作者 韩丽红 闫斌 +3 位作者 高丽君 苏燕 杨文杰 秦文斌 《世界复合医学》 2017年第4期21-23,共3页
目的红细胞内血红蛋白的电泳释放在人类肝脏疾病已经有所发现,推测肝切除时血红蛋白释放试验,故利用小鼠来研究肝切除时血红蛋白的释放情况。方法取2016年12月—2017年4月于包头医学院生物化学与分子生物学实验室行小鼠肝切除术后0~7、... 目的红细胞内血红蛋白的电泳释放在人类肝脏疾病已经有所发现,推测肝切除时血红蛋白释放试验,故利用小鼠来研究肝切除时血红蛋白的释放情况。方法取2016年12月—2017年4月于包头医学院生物化学与分子生物学实验室行小鼠肝切除术后0~7、14d的血红细胞做血红蛋白释放电泳,与未做手术小鼠及假手术组的小鼠的血红蛋白释放试验进行对比,观察其多带释放情况。结果未做手术和做过假手术的标本再释放强度较低,肝切除后0~7d、14d标本的再释放强度几乎都明显提高。结论肝切除影响到红细胞内血红蛋白电泳释放。 展开更多
关键词 小鼠 肝切除 血红蛋白电泳释放
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