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毕赤酵母GS115表达HSA-GCSF^m的诱导工艺研究 被引量:2
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作者 李清亮 周月涵 +3 位作者 丁健 段作营 金坚 李华钟 《工业微生物》 CAS CSCD 2016年第2期8-13,共6页
本文探讨了甲醇流加控制、添加胰蛋白胨和甲醇/山梨醇共混诱导对重组毕赤酵母GS115/p PIC9K-HSA-GCSF^m表达HSA-GCSF^m的影响。结果显示:甲醇供应充足条件下HSAGCSF^m表达水平仅为37 mg·L^(-1),而甲醇添加受限条件下HSA-GCSF^m表... 本文探讨了甲醇流加控制、添加胰蛋白胨和甲醇/山梨醇共混诱导对重组毕赤酵母GS115/p PIC9K-HSA-GCSF^m表达HSA-GCSF^m的影响。结果显示:甲醇供应充足条件下HSAGCSF^m表达水平仅为37 mg·L^(-1),而甲醇添加受限条件下HSA-GCSF^m表达水平可达到239mg·L^(-1);甲醇添加受限并添加胰蛋白胨条件下,HSA-GCSF^m表达水平可以提高到266 mg·L^(-1);在此基础上,流加山梨醇作为辅助碳源,表达水平可大幅提高至424 mg·L^(-1)。通过对各诱导条件下OUR、胞外蛋白酶及碳流分配进行分析后发现,将甲醇限制在低浓度同时添加胰蛋白胨与山梨醇,可以改善细胞代谢活性,增加细胞用于HSA-GCSF^m合成的碳流分配量,降低胞外蛋白酶活性,从而提高了HSA-GCSF^m的表达水平并缓解了HSA-GCSF^m的降解。因此,该诱导工艺适于毕赤酵母高效表达HSA-GCSF^m。 展开更多
关键词 毕赤酵母 HSA-GCSFm 甲醇策略 胰蛋白胨 山梨醇
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甲醇流加策略对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子的影响 被引量:2
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作者 平续斌 李志敏 +2 位作者 叶勤 黄秀东 曹之舫 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期816-819,854,共5页
考察了5L发酵罐中三种甲醇流加策略(恒溶氧、恒比生长速率和恒甲醇浓度)对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子(hALR)的影响。控制恒定甲醇浓度为10g/L诱导时,甲醇比消耗速率和hALR表达速率显著高于其它两种流加策略,最终hALR表达水平为36... 考察了5L发酵罐中三种甲醇流加策略(恒溶氧、恒比生长速率和恒甲醇浓度)对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子(hALR)的影响。控制恒定甲醇浓度为10g/L诱导时,甲醇比消耗速率和hALR表达速率显著高于其它两种流加策略,最终hALR表达水平为360mg/L。 展开更多
关键词 毕赤酵母 人肝再生增强因子 甲醇策略 高密度发酵
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