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题名三疣梭子蟹心激肽基因克隆及在低盐适应中的功能验证
被引量：1
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作者
孙东方
吕建建
高保全
环朋朋
蔡影
刘萍
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机构
中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室
青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室
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出处
《中国水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期261-270,共10页
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基金
国家自然科学基金面上项目(41576147
41776160)
+4 种基金
国家虾产业技术体系(CARS-48)
山东省泰山领军人才工程高效生态农业创新类计划(LJNY2015002)
中国水产科学研究院黄海水产研究所基本科研业务费资助(20603022018027)
山东省重点研发计划(2018GSF121030
2016GSF115028)
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文摘
采用RACE技术克隆获得三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)心激肽(CCAP)基因。该基因全长606 bp, 5￠端非编码区72bp,3￠端非编码区108bp,开放阅读框426bp,编码141个氨基酸,预测分子量15.6kD,理论等电点9.55。同源性分析表明,三疣梭子蟹CCAP与拟穴青蟹(Scylla paramamosain)和蓝蟹(Callinectes sapidus)的CCAP同源性较高,分别为85%和82%。系统进化树分析显示,三疣梭子蟹与蓝蟹首先聚为一支,之后再与拟穴青蟹相聚。组织表达分析发现, CCAP基因在胸神经节中的相对表达量最高,其次是脑和眼柄组织。通过分析CCAP基因在低盐胁迫过程中的表达规律发现,低盐可显著改变CCAP在胸神经节中的表达模式,在24 h, 48 h和72 h实验组的表达量显著高于对照组(P<0.05),分别为对照组的1.73, 2.16和2.19倍。体外注射CCAP多肽可降低三疣梭子蟹在低盐条件下的死亡率,并诱发钠钾ATP酶(Na^+/K^+-ATPase)和V型ATP酶(V-ATPase)酶活力显著提高。本实验结果暗示CCAP通过调控Na^+/K^+-ATPase和V-ATPase活力以达到盐度适应的作用。
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关键词
三疣梭子蟹
甲壳动物心激肽
基因克隆
盐度胁迫
多肽注射
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Keywords
Portunus trituberculatus
crustacean cardioactive peptide
gene cloning
salinity stress
polypeptide injection
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分类号
S917.4
[农业科学—水产科学]
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