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散发性乳腺癌中BRCAl基因甲基化状况及其与蛋白表达的关系 被引量:2
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作者 冯景 陶建蜀 +4 位作者 汤显兵 刘涛 赵伦华 周有利 张吉才 《检验医学》 CAS 北大核心 2006年第6期642-646,共5页
目的探讨散发性乳腺癌中BRCA l基因异常甲基化状况及其与蛋白表达的关系,进而研究散发性乳腺癌中BRCA l基因异常的表遗传学作用。方法用甲基特异性聚合酶链反应(PCR)和免疫组织化学(SP)法研究乳腺癌组织、癌旁正常组织中BRCA l基因启动... 目的探讨散发性乳腺癌中BRCA l基因异常甲基化状况及其与蛋白表达的关系,进而研究散发性乳腺癌中BRCA l基因异常的表遗传学作用。方法用甲基特异性聚合酶链反应(PCR)和免疫组织化学(SP)法研究乳腺癌组织、癌旁正常组织中BRCA l基因启动子甲基化状况及蛋白表达情况。结果在52例散发性乳腺癌中,BRCA l甲基化率为29%,BRCA l蛋白表达下降率为33%;15例BRCA l发生甲基化的癌组织标本中BRCA l的表达下降率为87%,而37例BRCA l未发生甲基化的癌组织中BRCA l蛋白表达下降率11%。在肿瘤分级中,T3分级患者的肿瘤组织中BRCA l甲基化率(45%)及表达下降率(60%)均分别高于T1+T2分级患者肿瘤组织的BRCA l甲基化率(19%)和表达下降率(16%);有淋巴结转移患者的肿瘤组织中BRCA l甲基化率(46%)及蛋白表达下降率(50%)均分别高于无淋巴结转移的甲基化率(14%)和表达下降率(18%)。结论BRCA l基因表遗传学改变是其蛋白表达下降乃至失活的重要原因,并且与散发性乳腺癌的恶性进程和淋巴结转移密切相关。 展开更多
关键词 BRCA1基因 DNA甲基 聚合酶链反应 甲基特异性 散发性乳腺癌
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改变退火温度对甲基特异性PCR检验指标有效性的影响
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作者 王楠楠 李智 +2 位作者 于永春 赵敏 段建敏 《检验医学》 CAS 北大核心 2006年第6期629-632,共4页
目的探讨政变退火温度对甲基特异性聚合酶链反应PCR检验指标有效性的影响。方法将经测序证实的RASSF1A甲基化标本分别作为完全甲基化(100%M)和完全末甲基化的标本(0%M),按1:3体积比例混合,作梯度PCR扩增,摸索适当的退火温度... 目的探讨政变退火温度对甲基特异性聚合酶链反应PCR检验指标有效性的影响。方法将经测序证实的RASSF1A甲基化标本分别作为完全甲基化(100%M)和完全末甲基化的标本(0%M),按1:3体积比例混合,作梯度PCR扩增,摸索适当的退火温度。选取单一电泳条带的温度为优化的退火温度,并以这些温度检测70例标本[35对,以同一患者的肿瘤组织(K)、癌旁组织(N)为1对],比较其在各温度情况时的扩增效果。结果以上指标依年龄(70岁以L/70岁以下)不同出现不同的变化趋热;似然比分析数值均介于0.1—10之间;70岁以下组阳性预测值大多〉70岁以上组;若定义64℃以上温度为高温段,63.3℃以下温度为低温段,则低温段70岁以下组阴性预测值〉70岁以上组,高温段70岁以卜组〉70岁以下组。结论与普通PCR类似,甲基特异性PCR可以通过调接退火温度来改变其俭测效能,但温度变化间隔最好不要〈1℃;应用甲基特异性PCR检测RASSF1A甲基化可以作为膀胱肿瘤早期诊断的辅助方法,在较低年龄组的应用价值高于高年龄组,尤其是在排除肿瘤方面。 展开更多
关键词 DNA甲基 聚合酶链反应 甲基特异性 预测值 似然比
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口腔鳞状细胞癌中凋亡蛋白酶活化因子甲基化的研究 被引量:4
3
作者 李春艳 高文信 +4 位作者 周延民 张茹慧 赵静辉 李秋实 李艳秋 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期279-281,共3页
目的:探讨凋亡蛋白酶活化因子1(APAF1)基因的启动子区甲基化状态与口腔鳞状细胞癌(OSCC)的关系。方法:采用甲基特异性PCR的方法分别检测23例正常口腔黏膜组织和53例OSCC组织中APAF1基因的启动子区甲基化情况。结果:23例正常口腔黏膜组... 目的:探讨凋亡蛋白酶活化因子1(APAF1)基因的启动子区甲基化状态与口腔鳞状细胞癌(OSCC)的关系。方法:采用甲基特异性PCR的方法分别检测23例正常口腔黏膜组织和53例OSCC组织中APAF1基因的启动子区甲基化情况。结果:23例正常口腔黏膜组织中无1例检测到APAF1基因启动子区的甲基化,53例OSCC组织中有41例(77.36%)APAF1基因启动子区完全甲基化,5例(9.43%)APAF1基因部分甲基化,总甲基化率为86.79%(46/53),与正常口腔黏膜组织甲基化率比较差异有显著性(P<0.01)。APAF1基因的甲基化与病理分级、年龄、性别无关。结论:APAF1基因启动子区的甲基化是该基因在OSCC组织中表达降低的机制之一,基因甲基化引起的基因功能静默可能与OSCC的发生有关。 展开更多
关键词 凋亡蛋白酶活化因子1 口腔鳞状细胞癌 基因甲基 甲基特异性PCR
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口腔鳞状细胞癌组织中死亡相关蛋白激酶的甲基化及其蛋白的表达 被引量:2
4
作者 李春艳 高文信 +3 位作者 周延民 张茹慧 赵静辉 李艳秋 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期341-344,398,共5页
目的:探讨死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因的表达、甲基化状态及与口腔鳞状细胞癌(OSCC)的关系,为研究DAPK基因在OSCC组织中表达改变的机制及肿瘤基因治疗方法打下基础。方法:采用甲基特异性PCR和免疫组织化学方法分别检测23例正常口腔黏膜... 目的:探讨死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因的表达、甲基化状态及与口腔鳞状细胞癌(OSCC)的关系,为研究DAPK基因在OSCC组织中表达改变的机制及肿瘤基因治疗方法打下基础。方法:采用甲基特异性PCR和免疫组织化学方法分别检测23例正常口腔黏膜组织和53例OSCC组织中DAPK基因甲基化率、DAPK蛋白表达率。结果:23例正常口腔黏膜组织中无一例检测到DAPK基因启动子区甲基化,53例OSCC患者30例(56.60%)口腔黏膜组织中DAPK基因启动子区完全甲基化,8例(15.09%)DAPK基因部分甲基化,总甲基化率为71.69%(38/53),与正常口腔黏膜组织甲基化率比较差异有显著性(P<0.01)。在23例(100%)正常口腔黏膜组织中DAPK蛋白表达均呈阳性,53例OSCC患者中36例(67.92%)口腔黏膜组织中DAPK蛋白表达下调,二者比较差异具有显著性(P<0.01);OSCC患者口腔黏膜组织中DAPK蛋白低表达组DAPK基因甲基化率(32/36,88.89%)高于正常表达组(6/17,35.29%)(P<0.01)。结论:DAPK基因启动子区甲基化是该基因在OSCC组织中表达降低的机制之一,DAPK基因甲基化引起的基因功能静默可能与OSCC的发生有关。 展开更多
关键词 死亡相关蛋白激酶 肿瘤 鳞状细胞 基因甲基 甲基特异性PCR
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食管鳞癌细胞株金属硫蛋白3基因CpG岛超甲基化的临床意义 被引量:3
5
作者 苗毅 李保庆 +3 位作者 刘晖 马玉泉 贾涛 田子强 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第38期17-20,共4页
目的探讨金属硫蛋白3(MT-3)基因CpG岛超甲基化与食管鳞状细胞癌的关系。方法选取TE-1、TE-13、TTN和ECA-109四种食管鳞癌细胞株,用甲基化特异性聚合酶链反应和逆转录聚合酶链反应技术,在5-氮2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后,对各细胞株... 目的探讨金属硫蛋白3(MT-3)基因CpG岛超甲基化与食管鳞状细胞癌的关系。方法选取TE-1、TE-13、TTN和ECA-109四种食管鳞癌细胞株,用甲基化特异性聚合酶链反应和逆转录聚合酶链反应技术,在5-氮2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后,对各细胞株的MT3基因CpG岛超甲基化及mRNA表达进行比较。结果四种食管鳞状细胞癌细胞株的MT3基因均存在不同程度的CpG岛超甲基化。5-aza-CdR处理后超甲基化状态解除,mRNA表达明显提高(P均<0.05)。结论食管鳞状细胞癌细胞株中MT3基因CpG岛超甲基化可抑制其mR-NA表达;超甲基化解除后MT3基因的mRNA表达相应升高。 展开更多
关键词 食管肿瘤 细胞株 金属硫蛋白3基因 甲基特异性聚合酶链反应 逆转录聚合酶链反应
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膀胱肿瘤RASSF2A及NORE1A启动子甲基化状况研究 被引量:2
6
作者 王楠楠 李智 +1 位作者 于永春 段建敏 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2006年第5期34-36,共3页
目的研究膀胱癌中,RASSF2A、NORE1A基因启动子甲基化状态在肿瘤发生发展中的作用。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)技术检测54例膀胱癌组织及其相应癌周正常组织RASSF2A、NORE1A基因启动子甲基化状态。结果(1)RA... 目的研究膀胱癌中,RASSF2A、NORE1A基因启动子甲基化状态在肿瘤发生发展中的作用。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)技术检测54例膀胱癌组织及其相应癌周正常组织RASSF2A、NORE1A基因启动子甲基化状态。结果(1)RASSF2A检出率仅为2/54,NORE1A仅为0/54;(2)相应癌周正常组织和3例正常膀胱组织均未发现该基因高甲基化改变;(3)甲基化状态与膀胱癌临床病理参数无明显相关性。结论RASSF2A、NORE1A在膀胱肿瘤中的甲基化率较低,并不适合进行临床筛查。 展开更多
关键词 RASSF2A NORE1A 膀胱肿瘤 甲基特异性PCR
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散发性乳腺癌中BRCA1基因甲基化状态与其mRNA表达水平的相关研究 被引量:8
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作者 吴琍 曹伟红 +2 位作者 陈庆峰 郑玲莉 吴艳艳 《外科理论与实践》 2011年第6期576-580,共5页
目的:探讨山东半岛地区散发性乳腺癌中BRCA1基因异常甲基化状态及其与mRNA表达的关系,进而研究其BRCA1基因异常的表观遗传学作用。方法:用甲基化特异性PCR和RT-PCR等方法研究乳腺癌组织、癌旁正常组织及乳腺良性肿瘤中BRCA1基因启动子... 目的:探讨山东半岛地区散发性乳腺癌中BRCA1基因异常甲基化状态及其与mRNA表达的关系,进而研究其BRCA1基因异常的表观遗传学作用。方法:用甲基化特异性PCR和RT-PCR等方法研究乳腺癌组织、癌旁正常组织及乳腺良性肿瘤中BRCA1基因启动子甲基化状态及其mRNA表达水平。结果:在30例散发性乳腺癌中,BRCA1基因甲基化率为43%,BRCA1 mRNA表达下降率为33%。在13例BRCA1发生甲基化的癌组织标本中,BRCA1 mRNA的表达下降率为55%,而在17例BRCA1未发生甲基化的癌组织中,BRCA1 mRNA的表达下降率为18%。在肿瘤分级中,T3分级病人的肿瘤组织中BRCA1甲基化率(74%)和mRNA表达下降率(54%),均分别高于T1+T2分级病人肿瘤组织的BRCA1甲基化率(26%)和mRNA表达下降率(30%);有淋巴结转移病人的肿瘤组织中,BRCA1甲基化率(61%)和mRNA表达下降率(46%),均分别高于无淋巴结转移的甲基化率(17%)和mRNA表达下降率(16%)。结论:BRCA1基因表观遗传学改变是其mRNA表达下降乃至失活的重要原因,且与散发性乳腺癌的恶性程度及淋巴结转移的发生密切相关。 展开更多
关键词 BRCA1基因 DNA甲基 逆转录-聚合酶链反应 甲基特异性 散发性乳腺癌
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SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测DNA甲基化方法的建立 被引量:4
8
作者 杨晓菲 邱耕 +4 位作者 叶松山 丁肖华 欧志英 王伟毅 何蕴韶 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期433-434,共2页
近期,表观遗传学与肿瘤发生关系的研究日益增多。DNA甲基化是表观遗传学的重要组成部分,并已成为肿瘤早期诊断的研究热点。甲基化特异性PCR(MSP)是检测DNA甲基化的常用方法之一,该方法灵敏度和特异度高,但操作繁琐,难以自动化。T... 近期,表观遗传学与肿瘤发生关系的研究日益增多。DNA甲基化是表观遗传学的重要组成部分,并已成为肿瘤早期诊断的研究热点。甲基化特异性PCR(MSP)是检测DNA甲基化的常用方法之一,该方法灵敏度和特异度高,但操作繁琐,难以自动化。TaqMan荧光定量PCR法,即Methylight在MSP的基础上设计1条TaqMan探针,该方法的准确性和检测的灵敏度都很高。然而,因需要设计合成特异的探针而使其的应用受限,而且TaqMan探针昂贵。本研究建立SYBRGreenⅠ荧光定量PCR(FQ—PCR)检测DNA甲基化的方法,通过临床标本检测和对比试验,以证明其与Methylight的检测效能,以便为DNA甲基化检测的临床应用提供工具。 展开更多
关键词 荧光定量PCR检测 DNA甲基 Green TaqMan探针 SYBR 荧光定量PCR法 肿瘤早期诊断 甲基特异性
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人胃癌细胞肿瘤相关基因的表达与甲基化调控 被引量:2
9
作者 杨丽 朱红音 +3 位作者 程中华 陆嵘 陈萦晅 房静远 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第13期1493-1498,共6页
目的:旨在阐明胃癌的发生中多种抑癌基因和癌基因的甲基化情况,以期为进一步深入探索通过改变抑癌基因的甲基化而为胃癌治疗提供新方法. 方法:培养人胃癌细胞株MKN-45和HGC-27两种细胞,在MTT确定去甲基化制剂5-氮脱氧胞苷(5-aza- 2’-de... 目的:旨在阐明胃癌的发生中多种抑癌基因和癌基因的甲基化情况,以期为进一步深入探索通过改变抑癌基因的甲基化而为胃癌治疗提供新方法. 方法:培养人胃癌细胞株MKN-45和HGC-27两种细胞,在MTT确定去甲基化制剂5-氮脱氧胞苷(5-aza- 2’-deoxycytidine,5-aza-dC)浓度和时间对细胞生长活力没有影响后,分别以2,5,和10μmol/L,浓度分别干预24和72 h,然后提取其DNA和RNA,用RT-PCR的方法检测p16INK4A,p21WAF1,p53,c-Ha-ras和c- myc等多种基因的表达情况;同时以流式细胞仪分析药物干预后的MKN-45和HGC-27的细胞周期变化; DNA分析则通过亚硫酸氢盐修饰和测序和甲基化特异性PCR(MSP)的方法检测p16INK4A基因及c-myc启动子区甲基化的情况. 结果:我们所采用的5-aza-dC的浓度和时间对细胞的生长无显著性影响.5-aza-dC干预前,MKN-45和HGC-27两种胃癌细胞系中均有p16INK4A表达,5-aza- dC干预后在MKN-45和HGC-27两种胃癌细胞系中p16INK4A的表达增强,且不同的胃癌细胞株表达增强最明显时的时间与浓度不同.-p53,p21WAF1,c-myc,c-Ha-ras 等多种基因在干预前后均有表达,且在干预前后无明显变化.在5-aza-dC干预后,HGC-27细胞周期阻滞在G1期,而MKN-45细胞的周期无明显改变.p16INK4A启动子区存在甲基化使得该基因的表达减少,在去甲基化试剂处理后使其表达增强. 结论:人胃癌细胞系MKN-45和HGC-27中,p16INK4A 启动子甲基化是其在表达减弱的主要原因,其去甲基化程度取决于5-aza-dC干预的时间和浓度. 展开更多
关键词 肿瘤相关基因 5-AZA-DC P16^INK4A基因 P21^WAF1 C-HA-RAS HGC-27 癌细胞株MKN-45 P16^INK4A MKN-45细胞 c-myc 5-氮脱氧胞苷 启动子区甲基 流式细胞仪分析 调控 甲基化制剂 细胞生长活力 RT-PCR 甲基特异性 表达增强
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PCDH10基因在前列腺癌组织中的甲基化测定及临床意义 被引量:3
10
作者 刘绍祖 佟明 +5 位作者 张骞 张莲 徐奔 李自智 黄伟超 金艳阳 《解放军医学院学报》 CAS 2014年第4期379-382,共4页
目的检测PCDH10基因在前列腺癌组织中的甲基化状态,并分析其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术检测PCDH10基因在3株前列腺癌细胞系、1株前列腺上皮细胞、13例前列腺增生组织和40例前列腺癌组织样本... 目的检测PCDH10基因在前列腺癌组织中的甲基化状态,并分析其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术检测PCDH10基因在3株前列腺癌细胞系、1株前列腺上皮细胞、13例前列腺增生组织和40例前列腺癌组织样本中的甲基化情况,同时分析40例前列腺癌患者的临床资料。结果 3株前列腺癌细胞系中有2株检出PCDH10基因甲基化;40例前列腺癌样本中24例(60%)检出PCDH10基因甲基化,13例前列腺增生组织中未检出PCDH10基因甲基化。PCDH10基因出现甲基化患者与未出现甲基化患者相比,在年龄、前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)和临床分期等指标的差异无统计学意义(P>0.05),但在Gleason评分的差异存在统计学意义(P<0.05)。结论 PCDH10基因在前列腺癌组织中甲基化程度较高,高Gleason评分的前列腺癌可能具有更高的PCDH10基因甲基化率,提示PCDH10基因甲基化可能与前列腺癌的发生发展有关。 展开更多
关键词 甲基 PCDH10基因 前列腺癌 甲基特异性 聚合酶链式反应
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阵发性睡眠性血红蛋白尿症及再生障碍性贫血患者WT1基因启动子区甲基化状态的研究 被引量:2
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作者 王树叶 杨喜晶 +1 位作者 曹峰林 周晋 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期273-274,共2页
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者常有反复的血红蛋白尿和持久的贫血,究竟是什么原因导致PNH克隆优势造血呢?研究表明,WT1基因启动子区DNA甲基化状态是使PNH克隆大量扩增的机制之一.我们采用甲基化特异性PCR(MSP)法研究PNH患者... 阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者常有反复的血红蛋白尿和持久的贫血,究竟是什么原因导致PNH克隆优势造血呢?研究表明,WT1基因启动子区DNA甲基化状态是使PNH克隆大量扩增的机制之一.我们采用甲基化特异性PCR(MSP)法研究PNH患者、再生障碍性贫血(AA)患者WTI基因启动子区域DNA甲基化模式的改变,初步探讨表观遗传学调控方式在PNH和AA发病机制中的作用. 展开更多
关键词 阵发性睡眠性血红蛋白尿症 再生障碍性贫血患者 基因启动子区域 甲基化状态 WT1 甲基特异性 甲基化模式 表观遗传学
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微流控芯片电泳技术检测肿瘤患者血浆中p16基因甲基化的应用 被引量:2
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作者 周小棉 邵淑娟 许冠中 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期524-525,共2页
关键词 P16基因甲基 脱落肿瘤细胞 微流控芯片 患者血浆 技术检测 电泳技术 P16基因异常甲基 聚合酶链反应法 甲基特异性 临床应用价值
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BMP3B基因在广西肺鳞状细胞癌中甲基化研究 被引量:1
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作者 冯旭 覃家锦 +2 位作者 周华富 何巍 廖寿合 《广西医科大学学报》 CAS 2010年第6期864-865,共2页
目的:通过研究BMP3B基因在广西肺鳞状细胞癌患者中甲基化发生频率,为临床早期诊断广西肺鳞状细胞癌提供理论依据。方法:采用甲基化特异性PCR(Methylation specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测40例经病理确诊为肺鳞状细胞... 目的:通过研究BMP3B基因在广西肺鳞状细胞癌患者中甲基化发生频率,为临床早期诊断广西肺鳞状细胞癌提供理论依据。方法:采用甲基化特异性PCR(Methylation specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测40例经病理确诊为肺鳞状细胞癌患者和30例经病理确诊为肺腺癌患者及20例良性肺部疾病患者BMP3B基因甲基化的状态,并进行对比分析。结果:40例肺鳞状细胞癌患者BMP3B基因甲基化率为80%(32/40);30例肺腺癌患者BMP3B基因甲基化率为26.7%(8/30);20例良性肺部疾病患者BMP3B基因均为去甲基化。结论:肺鳞状细胞癌BMP3B基因甲基化状态的检测能诊断肺鳞状细胞癌,对此基因甲基化作更深入的研究有望成为肺鳞状细胞癌诊断的新方法。 展开更多
关键词 基因甲基化率 广西 肺鳞状细胞癌 癌患者 POLYMERASE chain reaction 疾病患者 病理确诊 临床早期诊断 甲基特异性 新方法 甲基化状态 甲基 良性 理论依据 检测 肺部 发生频率 对比分析 癌诊断 结果
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肝癌细胞中HLA I类重链基因表达与启动子区域甲基化的相关性 被引量:2
14
作者 杨晋 张建琼 +5 位作者 沈宇清 缪凤琴 夏梅 叶覃 许联红 谢维 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期582-584,共3页
目的:研究肝癌细胞株中DNA甲基化与HLAI类分子异常表达的相关性。方法:应用MSP技术对相关细胞系的HLA I类分子重链A、B、C位点启动子区域CpG岛的甲基化状态进行分析,Real-time PCR检测HLAI类分子重链mRNA水平的表达情况,Western blot检... 目的:研究肝癌细胞株中DNA甲基化与HLAI类分子异常表达的相关性。方法:应用MSP技术对相关细胞系的HLA I类分子重链A、B、C位点启动子区域CpG岛的甲基化状态进行分析,Real-time PCR检测HLAI类分子重链mRNA水平的表达情况,Western blot检测RNA干扰后HLAI类分子重链表达情况。结果:在8株肝癌细胞系中HLA I类分子重链A、C位点启动子区域CpG岛存在甲基化;将启动子区域的DNA甲基化与相关基因表达数据相比较显示二者没有关联性;在RNA干扰DNA甲基化转移酶3a或3b的肝癌细胞系SMMC7721中,比较基因干扰前后HLA I类分子重链蛋白表达无显著变化。结论:在研究的肝癌细胞系中DNA甲基化没有参与调控肝癌中HLA I类分子的异常表达。 展开更多
关键词 肝癌 HLA Ⅰ类分子 DNA甲基 甲基特异性
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鼻咽癌组织中P14ARF和P15INK4B基因异常甲基化的研究
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作者 倪海峰 李勇 +1 位作者 黄光武 施紫光 《浙江医学》 CAS 2009年第10期-,共4页
目的 通过检测P14肝和P15INK4B基因启动子区甲基化情况,分析其与鼻咽癌发生、发展及临床病理特征的关系,探讨其可能在鼻咽癌临床早期分子生物学诊断和治疗中的作用.方法 运用甲基化特异性聚合酶链式扩增对54例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽... 目的 通过检测P14肝和P15INK4B基因启动子区甲基化情况,分析其与鼻咽癌发生、发展及临床病理特征的关系,探讨其可能在鼻咽癌临床早期分子生物学诊断和治疗中的作用.方法 运用甲基化特异性聚合酶链式扩增对54例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽上皮组织的P14ARF和P15INK4B基因启动子区甲基化状态进行检测,比较两者的差异,并分析鼻咽癌组织中两种基因甲基化与患者临床病理特征的关系,以及两种基因甲基化的相关性.结果 鼻咽癌组织中P14ARF和P15INK4B基因启动子区甲基化阳性率分别为20.4%(11/54)和22.2%(12/54),两者总检出率为27.8%(15/54);而正常鼻咽上皮组织中未检测到P14ARF和P15INK4B基因启动子区甲基化;两组间P14ARF和P15INK4B基因启动子区甲基化阳性率差异有统计学意义(P<0.01).15例甲基化的癌组织同时两种基因同时甲基化为8例,非甲基化39例.P14ARF和P15INK4B基因甲基化与鼻咽癌的临床病理特征均无明显相关性(均P>0.05).结论 P14ARF和P15INK4B基因启动子区甲基化在鼻咽癌的发生、发展中可能存在协同作用,作为鼻咽癌发生的早期事件,有望成为分子生物学早期诊断的标志物,将来还可能作为去甲基化基因治疗的靶点. 展开更多
关键词 鼻咽癌组织 P14ARF P15INK4B基因 异常甲基 NASOPHARYNGEAL carcinoma 启动子区甲基 临床病理特征 基因甲基 分子生物学 上皮组织 阳性率 检测 甲基特异性 癌发生 诊断和治疗 统计学意义 甲基化状态 早期诊断 早期事件 协同作用
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甲基化特异性PCR过程中的影响因素分析
16
作者 余红 赵娇 刘岚 《现代医药卫生》 2008年第12期1843-1844,共2页
DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一。它是指在DNA甲基转移酶的作用下,将甲基添加在DNA分子中的碱基上,常见的DNA甲基化发生在DNA链上的胞嘧啶第五位碳原子和甲基闯的共价结合,即形成5甲基胞嘧啶(5mC),哺乳动物基因组中约70... DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一。它是指在DNA甲基转移酶的作用下,将甲基添加在DNA分子中的碱基上,常见的DNA甲基化发生在DNA链上的胞嘧啶第五位碳原子和甲基闯的共价结合,即形成5甲基胞嘧啶(5mC),哺乳动物基因组中约70%的5mC存在于CpG二联核苷。DNA甲基化影响着基因的转录表达.因此它在基因的表达调控、细胞增殖、分化发育等方面起着重要作用, 展开更多
关键词 甲基特异性 PCR过程 DNA甲基 DNA甲基转移酶 甲基胞嘧啶 表观遗传学 DNA分子 基因组
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急性白血病中LRP15基因甲基化状态的研究 被引量:1
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作者 窦立萍 于力 +3 位作者 吕青 徐周敏 刘海川 楼方定 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期92-94,共3页
目的 探讨LRP15基因的甲基化在急性白血病(AL)发生、发展过程中的作用及临床意义。方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测COS7、K562、HL60细胞系、9例正常人及73例AL患者骨髓LRP15基因的甲基化状况。结果 (1)细胞系、正常人及白血... 目的 探讨LRP15基因的甲基化在急性白血病(AL)发生、发展过程中的作用及临床意义。方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测COS7、K562、HL60细胞系、9例正常人及73例AL患者骨髓LRP15基因的甲基化状况。结果 (1)细胞系、正常人及白血病标本中均未检测到LRP15基因的缺失。(2)LRP15基因在COS7中无甲基化,在K562、HL60中完全甲基化。(3)LRP15基因在AL(712%)中甲基化阳性率明显高于正常人(0%),差异有统计学意义(P<005)。(4)AL中LRP15甲基化阳性率难治复发组(833%)高于初治组(571%),两者差异有统计学意义(P<005)。结论 LRP15甲基化与白血病发生发展关系密切,可能是抑癌基因。 展开更多
关键词 LRP15基因 急性白血病 甲基化状态 HL60细胞系 甲基特异性 COS7 K562 甲基化状况 正常人 临床意义 发展关系 抑癌基因 阳性率 统计学 检测
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胃癌手术前后血浆中p16基因的异常甲基化检测 被引量:1
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作者 刘亚航 张连海 +5 位作者 任晖 张桂国 秦斐 孔广忠 邓国仁 季加孚 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期257-260,共4页
目的:研究胃癌患者手术前后外周血浆、对应原发肿瘤以及癌旁组织中p16基因启动子区异常甲基化的检出状况,探讨其在胃癌疗效评估中的应用.方法:采用甲基化特异性PGR方法,扩增84例胃癌患者的原发肿瘤、癌旁组织、手术前血浆中pl6基因启动... 目的:研究胃癌患者手术前后外周血浆、对应原发肿瘤以及癌旁组织中p16基因启动子区异常甲基化的检出状况,探讨其在胃癌疗效评估中的应用.方法:采用甲基化特异性PGR方法,扩增84例胃癌患者的原发肿瘤、癌旁组织、手术前血浆中pl6基因启动子区,以及上述患者中30例行胃癌根治性手术患者术后14~21天血浆中p16基因启动子区,以15例健康人血浆作为正常对照.采用凝胶电泳-溴乙锭显色以及高效液相色谱两种方法检测产物.结果:84例患者样品中,原发肿瘤中存在pl6基因异常甲基化26例(31.0%),癌旁组织中阳性2例(0.02%),术前血浆中阳性12例(14.3%),15例健康人血浆检测均为阴性.患者血浆阳性者同时也存在对应肿瘤组织阳性.30例同时有手术前后血浆标本的胃癌根治手术患者中,原发肿瘤组织中p16异常甲基化14例,其中6例术前血浆阳性,术后5例转阴.在检测样本中,高效液相色谱的检测结果与凝胶电泳-溴乙锭显色结果一致.结论:胃癌患者外周血浆中可以检测到与原发肿瘤一致的p16异常甲基化,手术后血浆中p16甲基化状态的变化与手术治疗有关,高效液相色谱作为一种便捷的技术可以应用于PCR产物的检测. 展开更多
关键词 手术前后 P16基因启动子区 P16基因异常甲基 高效液相色谱 原发肿瘤 胃癌患者 癌旁组织 甲基特异性 外周血浆 手术患者 凝胶电泳 肿瘤组织 PCR方法 健康人血浆 人血浆检测 甲基化状态 PCR产物 疗效评估 正常对照 患者血浆
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脑胶质瘤MGMT启动区甲基化PCR检测方法的对比分析 被引量:2
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作者 李杰飞 孙彦辉 +3 位作者 刘福生 金贵善 柴奇 张红波 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期576-580,共5页
异常的甲基化和各种基因的失活在恶性肿瘤中很常见。甲基化的检测方法有很多种,近些年临床上常用的检测方法是甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法。
关键词 PCR检测方法 甲基特异性 MGMT 脑胶质瘤 启动区 恶性肿瘤
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WIF-1基因甲基化及Wnt-5a蛋白在软骨肉瘤病人中表达的临床意义 被引量:2
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作者 张修龙 郁玮玮 +2 位作者 邵雨卉 杨新苗 李萍 《内蒙古医科大学学报》 2014年第5期393-397,共5页
目的:研究WIF-1基因甲基化及Wnt-5a蛋白在软骨肉瘤病人中的表达情况,探讨二者在软骨肉瘤病人中的临床意义。方法:选取我院病理科2008-06~2012-06收治的软骨肉瘤病人43例,另选取软骨瘤病人43例作为对照。收集病人的病历资料及临床病理表... 目的:研究WIF-1基因甲基化及Wnt-5a蛋白在软骨肉瘤病人中的表达情况,探讨二者在软骨肉瘤病人中的临床意义。方法:选取我院病理科2008-06~2012-06收治的软骨肉瘤病人43例,另选取软骨瘤病人43例作为对照。收集病人的病历资料及临床病理表现,通过甲基化特异性PCR检测法及免疫组织化学方法,监测两组病人WIF-1基因和Wnt-5a蛋白表达情况。结果:软骨肉瘤WIF-1基因甲基化阳性率高于软骨瘤,比较差异具有统计学意义(χ2=5.658,#P=0.003);软骨肉瘤Wnt-5a蛋白表达阳性率高于软骨瘤,比较差异具有统计学意义(χ2=4.656,*P=0.006)。黏液型软骨肉瘤Wnt-5a蛋白表达阳性率明显高于普通型软骨肉瘤,差异具有统计学意义(χ2=4.941,#P=0.002)。发生浸润转移的软骨肉瘤病人Wnt-5a蛋白表达阳性率高于未发生浸润转移的病人(χ2=4.681,P=0.003)。结论:WIF-l基因的甲基化可能导致Wif-l蛋白表达下降,在软骨肉瘤早期作用;Wnt-5a蛋白表达可能使肿瘤更具有侵袭性,二者可能存在协同作用。 展开更多
关键词 软骨肉瘤 WIF-1 WNT-5A 甲基特异性 PCR 免疫组织化学方法
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