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心康冲剂含药血清调控GAS5-miR21对心肌成纤维细胞增殖的影响
1
作者 刘蓉芳 郭冰 +2 位作者 余意 李园 王敏 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第9期102-109,共8页
目的 观察心康冲剂含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响,基于GAS5-miR-21探讨其抑制CFs增殖的作用机制。方法 取SD乳鼠心肌,差速贴壁法分离CFs,采用血管紧张素Ⅱ诱导CFs增殖,在转染微小RNA-21(miR-21)过表达慢... 目的 观察心康冲剂含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响,基于GAS5-miR-21探讨其抑制CFs增殖的作用机制。方法 取SD乳鼠心肌,差速贴壁法分离CFs,采用血管紧张素Ⅱ诱导CFs增殖,在转染微小RNA-21(miR-21)过表达慢病毒、生长阻滞特异性转录本5(GAS5)沉默慢病毒后,分别用心康冲剂含药血清干预24 h。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,RT-qPCR检测GAS5、miR-2l、磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)mRNA表达,Western blot检测PTEN、Akt、周期蛋白D1(Cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组CFs细胞活力增强,G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,α-SMA阳性表达升高,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达降低,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,心康冲剂组CFs细胞活力减弱,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,α-SMA阳性表达降低,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达升高,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达降低;mi R-21过表达组和GAS5沉默组CFs细胞活力增强,G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,α-SMA阳性表达升高,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达降低,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-21过表达组、GAS5沉默组比较,miR-21过表达+心康冲剂组、GAS5沉默+心康冲剂组CFs细胞活力减弱,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,α-SMA阳性表达降低,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达升高,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 心康冲剂含药血清可抑制沉默GAS5所致miR-21、Akt表达升高,对抗过表达miR-21所致GAS5和PTEN表达降低,抑制CFs增殖周期,促进GAS5发挥“分子海绵”作用,改善血管紧张素Ⅱ诱导的CFs过度� 展开更多
关键词 心肌纤维化 细胞周期 心康冲剂 生长阻滞特异性转录本5 微小RNA-21 心肌成纤维细胞
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lncRNA MALAT1及GAS5的多态性与肝细胞癌遗传易感性的关联
2
作者 卫美蓉 王笑峰 罗兵 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期587-592,共6页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)人肺腺癌转移相关的转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALATl)及生长阻滞特异性转录本5(growth arrest specific transcript 5,GAS5)基因多态性与肝... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)人肺腺癌转移相关的转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALATl)及生长阻滞特异性转录本5(growth arrest specific transcript 5,GAS5)基因多态性与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)易感性的关联。方法收集225例HCC患者的癌组织及220例健康体检者外周静脉血标本,提取癌组织及血标本的DNA分别当作本病例对照研究的病例组与对照组。同时利用TaqMan MGB等位基因分型试剂盒对两组病例MALAT1 rs11227209及GAS5 rs55829688位点的单核苷酸多态性(single nucleotide olymorphism,SNP)进行检测,采用SPSS 17.0软件分析实验结果。结果MALAT1 rs11227209位点基因型频率(CC、CG、GG)在病例组中分布为:46.2%、42.7%、11.1%,在对照组中分布为:50.0%、42.7%、7.3%。分别进行纯合突变基因型CC与显性模型CG+GG基因型组比较,以及纯合野生基因型GG与隐性模型CG+CC基因型组的比较,发现两组基因型分布差异无统计学意义(χ^(2)=0.636,P=0.425;χ^(2)=1.933,P=0.164)。GAS5 rs55829688基因型频率(TT、TC、CC)在病例组中的分布为:45.3%、43.6%、11.1%,在对照组中的分布为:57.7%、38.2%、4.1%。病例组CC基因型人群分布高于对照组(OR=3.459,95%CI:1.546~7.738,P=0.003)。病例组C等位基因携带频率也高于对照组(OR=1.624,95%CI:1.208~2.184,P=0.001);C等位基因为风险基因,个体携带C等位基因可以增加罹患HCC的风险(OR=1.647,95%CI:1.132~2.395,P=0.009)。遗传易感性分层分析结果显示,女性患者携带GAS5 rs55829688 CT+TT基因型可降低HCC的发病风险(OR=0.161,95%CI:0.045~0.580,P=0.005),且≥50岁人群分组中若携带该位点CT+TT基因型,则HCC发病风险也降低(OR=0.232,95%CI:0.074~0.728,P=0.012)。结论GAS5 rs55829688位点SNP与HCC的发病风险相关,携带CC基因型个体HCC的发病风险增高。同时年龄及性别和GAS5 rs55829688位点的SNP可能会共同影响HCC的发病风险。而MALAT1 rs11227209 展开更多
关键词 肝细胞癌 长链非编码RNA 人肺腺癌转移相关的转录本1 生长阻滞特异性转录本5 单核苷酸多态性 易感性
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长链非编码RNA GAS5在肿瘤中的作用及其机制 被引量：4
3
作者 杨雨叶 朱月春 《生命的化学》 CAS CSCD 2017年第6期1049-1055,共7页
长链非编码RNA(lnc RNA)在细胞生理活动中发挥着重要的调节性作用,其异常表达与肿瘤的发生发展关系密切。生长阻滞特异性转录本5(GAS5)是一个全长651个核苷酸的lnc RNA,在多种肿瘤中低表达,且其表达水平与肿瘤的临床病理特征及患者预后... 长链非编码RNA(lnc RNA)在细胞生理活动中发挥着重要的调节性作用,其异常表达与肿瘤的发生发展关系密切。生长阻滞特异性转录本5(GAS5)是一个全长651个核苷酸的lnc RNA,在多种肿瘤中低表达,且其表达水平与肿瘤的临床病理特征及患者预后关系密切。近年来的研究逐步揭示了GAS5发挥肿瘤抑制功能的部分分子机制,这些发现将有助于开发新的肿瘤诊断标记物,并有可能为肿瘤的治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 生长阻滞特异性转录本5 肿瘤
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基于GAS5/miR-21介导的细胞增殖探讨心康冲剂抗心力衰竭大鼠心肌纤维化的作用机制
4
作者 刘蓉芳 郭冰 +2 位作者 余意 李园 王敏 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第11期114-119,共6页
目的基于GAS5/miR-21探讨心康冲剂抗心力衰竭大鼠心肌纤维化的作用机制。方法46只SD大鼠选取6只作为正常组,剩余40只通过腹腔注射阿霉素(2 mg/mL)诱导慢性心力衰竭并分为模型组、缬沙坦组及心康冲剂组。心康冲剂组予心康冲剂0.5g/kg灌胃... 目的基于GAS5/miR-21探讨心康冲剂抗心力衰竭大鼠心肌纤维化的作用机制。方法46只SD大鼠选取6只作为正常组,剩余40只通过腹腔注射阿霉素(2 mg/mL)诱导慢性心力衰竭并分为模型组、缬沙坦组及心康冲剂组。心康冲剂组予心康冲剂0.5g/kg灌胃,缬沙坦组予缬沙坦0.03g/kg灌胃,正常组和模型组予等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续4周。心脏彩超检测大鼠心功能,ELISA检测血清Ⅰ型胶原(ColⅠ)和基质金属蛋白酶9(MMP9)含量,HE和Masson染色观察左心室病理变化,免疫荧光染色检测左心室α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,qRT-PCR检测磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、生长阻滞特异性转录本5(GAS5)、miR-21基因表达,Westernblot检测PTEN、Akt、周期蛋白D1(CyclinD1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)表达。结果与正常组比较,模型组大鼠左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)降低(P<0.05),血清MMP9、ColⅠ含量增加(P<0.05),心肌细胞肿胀变性、胞浆溶解,细胞排列紊乱,可见大量蓝色胶原纤维,胶原容积分数增加(P<0.05),左心室α-SMA表达升高(P<0.05),PTEN、GAS5基因表达降低(P<0.05),miR-21表达升高(P<0.05),Akt、CDK4、CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05),PTEN蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,心康冲剂组和缬沙坦组大鼠LVEF、LVFS升高(P<0.05),血清MMP9、ColⅠ含量减少(P<0.05),心肌细胞肿胀、胞浆溶解程度相对较轻,蓝色胶原纤维较少,胶原容积分数减少(P<0.05),左心室α-SMA表达降低(P<0.05),PTEN、GAS5基因表达升高(P<0.05),miR-21表达降低(P<0.05),Akt、CDK4、CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05),PTEN蛋白表达升高(P<0.05)。结论心康冲剂可能通过调节GAS5/miR-21、PTEN/Akt及细胞周期相关蛋白表达抑制细胞增殖,降低心力衰竭大鼠心肌纤维化程度。 展开更多
关键词 心力衰竭 心肌纤维化 心康冲剂 生长阻滞特异性转录本5 MIR-21 细胞增殖 大鼠
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长链非编码RNA GAS5在肿瘤中的研究进展 被引量：3
5
作者 李明凯 詹浩炼 吴灵飞 《世界华人消化杂志》 CAS 2019年第3期175-182,共8页
生长阻滞特异性转录因子5(growth arrest-special transcript 5, GAS5)属于长链非编码RNA,位于人类基因组1号染色体上,在细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物过程中起重要调控作用.新近研究表明, GAS5在大多数肿瘤组织中低表达,其与肿瘤... 生长阻滞特异性转录因子5(growth arrest-special transcript 5, GAS5)属于长链非编码RNA,位于人类基因组1号染色体上,在细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物过程中起重要调控作用.新近研究表明, GAS5在大多数肿瘤组织中低表达,其与肿瘤发生、发展及预后密切相关.探讨GAS5在肿瘤中的作用机制,有望为我们提供肿瘤诊治的新思路.本文就GAS5在肿瘤中的研究进展作一简述. 展开更多
关键词 长链非编码RNA 生长阻滞特异性转录本5 肿瘤
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长链非编码RNA GAS5与冠心病相关病变的研究进展 被引量：3
6
作者 董星明 张锦 《医学综述》 CAS 2021年第10期1914-1919,共6页
长链非编码RNA(lncRNA)是一类不具有编码蛋白质能力的RNA,可以在多个层面参与基因的表达调控。生长阻滞特异性转录本5(GAS5)属于lncRNA家族,在人类多种组织中广泛表达,与多种疾病(肿瘤、心脑血管病等)密切相关。GAS5可能是一种潜在的生... 长链非编码RNA(lncRNA)是一类不具有编码蛋白质能力的RNA,可以在多个层面参与基因的表达调控。生长阻滞特异性转录本5(GAS5)属于lncRNA家族,在人类多种组织中广泛表达,与多种疾病(肿瘤、心脑血管病等)密切相关。GAS5可能是一种潜在的生物标志物,对冠心病的诊断、治疗及预后评估具有重要意义,在动脉粥样硬化、心肌梗死、缺血再灌注损伤等冠心病相关病变中起非常重要的作用。因此,深入研究GAS5在冠心病相关病变中的作用机制,可以为冠心病的诊疗提供新思路。 展开更多
关键词 冠心病 长链非编码RNA 生长阻滞特异性转录本5 动脉粥样硬化 生物标志物
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LncRNA GAS5通过吸附miR-21促进ADAMTS-1介导的肺成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原降解 被引量：2
7
作者 刘理静 钱红 +3 位作者 王乐 贺兼斌 胡柯 田玉梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1449-1455,共7页
目的观察生长阻滞特异性转录本5(growth arrest-specific transcript 5,GAS5)对肺成纤维细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)表达的影响,并探讨其机制。方法培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,用GAS5慢病毒过表达载体(LV-GAS5)处理,荧光实时... 目的观察生长阻滞特异性转录本5(growth arrest-specific transcript 5,GAS5)对肺成纤维细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)表达的影响,并探讨其机制。方法培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,用GAS5慢病毒过表达载体(LV-GAS5)处理,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测GAS5、miR-21水平,qRT-PCR和Western blot测定I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-1(ADAMTS-1)、ColⅠ、ColⅢ表达。生物信息学、双荧光素酶报告基因分析GAS5、ADAMTS-1 3′-非翻译区与miR-21的靶向结合情况。以miR-21模拟物(mimic)或ADAMTS-1 siRNA转染MRC-5细胞48 h,再用LV-GAS5处理细胞相同时间,qRT-PCR和Western blot检测ADAMTS-1、ColⅠ、ColⅢ表达。结果过表达GAS5降低miR-21水平,抑制ColⅠ、ColⅢ蛋白表达,增加ADAMTS-1 mR NA与蛋白水平(P <0.01)。GAS5、miR-21、ADAMTS-1之间存在竞争性内源RNA (ceR NA)作用模式。miR-21 mimic或ADAMTS-1 siR NA预处理几乎完全逆转过表达GAS5对ColⅠ、ColⅢ降解的促进作用(P <0.01)。结论 GAS5作为ceR NA竞争性结合miR-21,上调ADAMTS-1表达,从而促进MRC-5细胞ColⅠ、ColⅢ降解。 展开更多
关键词 生长阻滞特异性转录本5 MIR-21 ADAMTS-1 竞争性内源RNA Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
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过表达lncRNA GAS5对甲状腺乳头状癌侵袭和迁移能力的影响及机制研究 被引量：2
8
作者 刘颖 《标记免疫分析与临床》 CAS 2020年第10期1761-1766,1776,共7页
目的研究长链非编码RNA生长阻滞特异性转录本5(long non-coding RNA growth arrest-specific transcript 5,LncRNA GAS5)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞侵袭和迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法qRT-PCR检测Lnc... 目的研究长链非编码RNA生长阻滞特异性转录本5(long non-coding RNA growth arrest-specific transcript 5,LncRNA GAS5)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞侵袭和迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法qRT-PCR检测LncRNA GAS5在PTC细胞系和正常甲状腺细胞系中的表达;选择低表达GAS5的PTC细胞进行过表达lncRNA GAS5慢病毒载体的转染,分为LV-NC组和LV-GAS5组。转染48 h后,Boyden实验检测各组细胞的侵袭能力,划痕实验检测各组细胞的迁移能力,Western-blot检测各组细胞中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达;EMT诱导剂TGF-β处理细胞进行回复实验,分为LV-NC组、LV-GAS5组和LV-GAS5+TGF-β组,Boyden和划痕实验检测各组细胞侵袭和迁移能力变化。结果qRT-PCR结果显示LncRNA GAS5在PTC细胞系中的表达均低于在正常甲状腺细胞中的表达,B-CPAP细胞中GAS5的表达相对较低(P<0.05);转染过表达lncRNA GAS5慢病毒载体后,B-CPAP细胞侵袭和迁移能力降低(P<0.05),细胞中EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin表达降低和E-cadherin表达增加(P<0.05)。EMT诱导剂TGF-β处理后,与LV-NC组相比,LV-GAS5组和LV-GAS5+TGF-β组细胞侵袭和迁移能力降低,与LV-GAS5组相比,LV-GAS5+TGF-β组细胞侵袭和迁移能力增加(P<0.05)。结论GAS5在PTC细胞系中高表达,GAS5可能通过调控EMT抑制PTC的侵袭和转移能力。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 生长阻滞特异性转录本5 侵袭 迁移
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lncRNAGAS5调控 Notch通路对炎症环境下牙髓干细胞成骨分化的影响 被引量：4
9
作者 何龙 云蔓 +2 位作者 吴薇薇 翁海勇 王琼超 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期730-736,共7页
目的:探究长链非编码RNA生长阻滞特异性转录本5(lncRNA GAS5)对炎症环境下牙髓干细胞(DPSCs)成骨分化的影响及潜在机制。方法:体外培养人牙髓干细胞(hDPSCs),分为正常对照组(NC)、成骨诱导组(OI)、脂多糖组(LPS)、NC+LPS组、GAS5过表达... 目的:探究长链非编码RNA生长阻滞特异性转录本5(lncRNA GAS5)对炎症环境下牙髓干细胞(DPSCs)成骨分化的影响及潜在机制。方法:体外培养人牙髓干细胞(hDPSCs),分为正常对照组(NC)、成骨诱导组(OI)、脂多糖组(LPS)、NC+LPS组、GAS5过表达组、Jagged-1组、GAS5过表达+Jagged-1组。Western blot检测hDPSCs中Notch通路和成骨相关蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,在诱导分化后,成骨诱导组细胞的增殖活性、lncRNA GAS5水平、ALP活性、钙化结节的数量和面积、细胞中RUNX2、OCN蛋白表达升高,NICD、Hes1、Hey1蛋白表达降低(P<0.05)。结论:lncRNA GAS5在hDPSCs成骨分化中上调,过表达lncRNA GAS5可增强炎症环境下hDPSCs成骨分化能力,其作用机制可能与抑制Notch信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA生长阻滞特异性转录本5 牙髓干细胞 成骨分化 NOTCH信号通路 炎症
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