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东北梅花鹿Galectin-1基因RNAi载体的构建 被引量：1
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作者 秦欣欣 孙红梅 +4 位作者 褚文辉 王大涛 郭倩倩 章秀婷 李春义 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期57-62,F0002,共7页
构建东北梅花鹿galectin-1基因特异小分子干扰RNA(shRNAs)真核干扰载体,并获得稳定感染生茸区骨膜细胞系。设计2对galectin-1 mRNA特异性shRNAs,两端分别带有ClaⅠ/MluⅠ酶切位点和一个9 nt发夹结构,通过基因克隆技术将其插入真核表达质... 构建东北梅花鹿galectin-1基因特异小分子干扰RNA(shRNAs)真核干扰载体,并获得稳定感染生茸区骨膜细胞系。设计2对galectin-1 mRNA特异性shRNAs,两端分别带有ClaⅠ/MluⅠ酶切位点和一个9 nt发夹结构,通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pLVTHM中,构建galectin-1 shRNA表达载体,利用PCR和测序筛选出阳性质粒。将重组质粒与PPAX及pMD2.G共转染到293 t细胞中,在倒置显微镜下观察转染效果并收集、浓缩病毒质粒,感染生茸区骨膜细胞。结果表明,成功构建东北梅花鹿galectin-1基因RNAi载体,获得稳定传代被感染生茸区骨膜细胞系,为进一步研究galectin-1基因在鹿茸再生中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 鹿茸再生 galectin-1基因 RNAI 生茸骨膜细胞
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梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液抗血清的制备
2
作者 鲁晓萍 褚文辉 +4 位作者 孙红梅 王大涛 刘琳玲 赵海平 李春义 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第6期153-155,共3页
为了制备高质量的兔抗梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液血清,用于免疫学筛选cDNA表达文库,试验采用淋巴结注射和背部皮下注射的方法制备了兔抗梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液血清。结果表明:制备的抗血清效价是1∶128,质量较高。
关键词 血清 生茸区骨膜细胞 裂解液
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