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成骨细胞Cbfa1和Osterix基因在体外构建组织工程骨膜中的表达 被引量：7
1
作者 祁洁 杨志明 罗静聪 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期666-669,共4页
目的体外构建组织工程骨膜,研究生物衍生羊膜(humanacellularamnioticmembrane,HAAM)对成骨细胞分化的影响。方法采用人胚骨膜来源的成骨细胞与HAAM体外复合培养构建组织工程骨膜(n=60)。于培养后2、4、6、8和10d,分别提取总RNA,经过逆... 目的体外构建组织工程骨膜,研究生物衍生羊膜(humanacellularamnioticmembrane,HAAM)对成骨细胞分化的影响。方法采用人胚骨膜来源的成骨细胞与HAAM体外复合培养构建组织工程骨膜(n=60)。于培养后2、4、6、8和10d,分别提取总RNA,经过逆转录成cDNA,行实时定量PCR,分别扩增成骨细胞特异转录因子(Cbfa1)和成骨细胞特异基因(Osterix),读取扩增循环数(cyclethreshold,Ct)。以单纯培养的成骨细胞作为对照组(n=20)。结果实验组Cbfa1表达以培养后2d和10d最高,且培养后2d与4、6、8d比较,以及培养后10d与4、8d比较,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组Osterix表达随培养时间延长逐渐升高,培养后8d达最高,与其余各时间点比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组Cbfa1和Osterix表达均随培养时间延长逐渐降低。组间各时间点两基因表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论成骨细胞与HAAM结合后,Cbfa1和Osterix可持续正常表达。HAAM作为支架材料,可诱导并促进成骨细胞分化。成骨细胞与HAAM构建的组织工程骨膜在分子水平已具有产生骨组织的基础。 展开更多
关键词 组织工程骨膜 成骨细胞 生物衍生羊膜 基因表达
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不同来源成骨细胞构建组织工程骨膜的特异性基因表达 被引量：2
2
作者 祁洁 凌鸣 +1 位作者 刘宗智 弓立群 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第20期3882-3885,共4页
背景:不同来源的种子细胞在体外黏附、增殖、分化的能力不同,保持生物学性状的能力不同,因而构建的组织工程产品生物活性也有所差异。目的:尝试在分子水平了解骨膜来源之成骨细胞和盖骨来源之成骨细胞在构建组织工程骨膜中的分化能力。... 背景:不同来源的种子细胞在体外黏附、增殖、分化的能力不同,保持生物学性状的能力不同,因而构建的组织工程产品生物活性也有所差异。目的:尝试在分子水平了解骨膜来源之成骨细胞和盖骨来源之成骨细胞在构建组织工程骨膜中的分化能力。设计、时间及地点:对比观察,于2007-07/2008-07在陕西省人民医院中心实验室完成。材料:取健康、剖腹产的人羊膜(已取得产妇及家属的同意),按照文献方法制备脱细胞生物衍生羊膜。方法:分别选用人胚骨膜成骨细胞和颅骨成骨细胞为种子细胞,接种于脱细胞生物衍生羊膜上,经过4,6,8d的体外培养,提取总RNA,经过反转录成cDNA,采用实时定量聚合酶链反应对目的基因成骨细胞特异转录因子,成骨细胞特异基因(osterix)以及骨钙素读取扩增循环数(cyclethreshold,Ct)。主要观察指标:①成骨细胞特异转录因子的表达。②成骨细胞特异基因Osterix的表达。③成骨细胞骨钙素Osteocalcin的表达。结果:在组织工程骨膜中,骨膜成骨细胞对转录因子的表达普遍低于颅骨成骨细胞(P<0.05)。随培养时间的延长,骨膜成骨细胞和颅骨成骨细胞对Osterix的表达均出现缓慢增加,但二者之间没有明显差异。各时间段检测结果均显示颅骨成骨细胞对骨钙素的表达高于骨膜成骨细胞,其中在4,6d差异有显著性意义(P<0.05)。结论:骨膜成骨细胞与颅骨成骨细胞在与生物衍生材料接触后,仍可保持终末的分化性状。就分化能力而言,颅骨成骨细胞优于骨膜成骨细胞。生物衍生羊膜有助于骨膜成骨细胞保持分化方向。由此可见,不同来源的成骨细胞分化能力有所不同。 展开更多
关键词 细胞来源 成骨细胞 生物衍生羊膜 组织工程骨膜 基因表达
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