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表小檗碱体外抑制黄嘌呤氧化酶活性作用研究 被引量:3
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作者 岳亮 梁思成 +2 位作者 邱文乔 曾静 吴建明 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期79-84,共6页
目的:研究表小檗碱(EBB)对黄嘌呤氧化酶活性的体外抑制作用并确证其结合性能。方法:以黄嘌呤为底物建立黄嘌呤氧化酶体外孵育模型,加入不同浓度的表小檗碱与底物共孵育后,采用高效液相色谱法同时检测底物黄嘌呤及产物尿酸含量,进而计算... 目的:研究表小檗碱(EBB)对黄嘌呤氧化酶活性的体外抑制作用并确证其结合性能。方法:以黄嘌呤为底物建立黄嘌呤氧化酶体外孵育模型,加入不同浓度的表小檗碱与底物共孵育后,采用高效液相色谱法同时检测底物黄嘌呤及产物尿酸含量,进而计算表小檗碱对黄嘌呤氧化酶的IC50值并绘制抑制动力学,再通过分子对接技术与生物膜干涉技术确证表小檗碱与黄嘌呤氧化酶的结合性能。结果:与空白对照组相比,表小檗碱能显著抑制黄嘌呤氧化酶活性(P<0.01),IC50值为0.41μmol/L。抑制动力学结果表明表小檗碱对黄嘌呤氧化酶的抑制作用属于竞争-非竞争混合型抑制,抑制常数Ki为0.22μmol/L,Kis为0.10μmol/L。此外,分子对接结果显示表小檗碱与黄嘌呤氧化酶有良好的结合性能,对接分数值为5.6,二者主要形成氢键,范德华力等作用。生物膜干涉研究结果表明表小檗碱与黄嘌呤氧化酶蛋白有直接且可逆的相互作用。结论:表小檗碱能在体外较强地抑制黄嘌呤氧化酶活性,可将其作为降尿酸候选药物。 展开更多
关键词 表小檗碱 黄嘌呤氧化酶 抑制作用 分子对接 生物膜干涉
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单克隆抗体与Fc受体结合力检测的生物膜层干涉方法
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作者 陈玉茹 罗明 +3 位作者 陈涛 张甲 颜娟 李兰英 《上海计量测试》 2024年第3期2-6,10,共6页
采用生物膜层干涉技术建立了一种准确评估单克隆抗体与Fc受体结合力的方法。通过优化关键参数,包括配体固化浓度、高度、结合时间和分析物浓度,确定了最佳的实验条件:配体固化浓度为10μg/mL,固化高度控制低于0.5 nm,单克隆抗体与Fc受... 采用生物膜层干涉技术建立了一种准确评估单克隆抗体与Fc受体结合力的方法。通过优化关键参数,包括配体固化浓度、高度、结合时间和分析物浓度,确定了最佳的实验条件:配体固化浓度为10μg/mL,固化高度控制低于0.5 nm,单克隆抗体与Fc受体结合时间为90 s,检测分析物浓度低于100 nmol/L。实验结果显示,该方法能形成良好的结合解离曲线,不同浓度范围内呈现明显的跨度,并且具有良好的实验重复性。这种无需标记的单克隆抗体与Fc受体结合力检测方法,对于研究蛋白相互作用以及复杂生物样品的检测具有重要意义。 展开更多
关键词 单克隆抗体 生物膜干涉 结合力 传感器
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