尿D-氨基酸氧化酶的ELISA检测和临床应用

1

作者 许迅辉 包林平 +2 位作者 吴兆龙 阮国芬 李秀兰 《中国实验诊断学》 2000年第4期156-157,共2页

目的为探索尿Ｄ－氨基酸测定的临床意义。方法　采用多克隆的ＩｇＧ片段和生物素－链霉亲和素－过氧化物酶系统测定尿Ｄ－氨基酸的含量。检测了２１例正常人和４４例各种肾脏疾病患者尿ＤＡＯ浓度，同时测定尿Ｎ－乙酸－β－Ｄ－氨基葡... 目的为探索尿Ｄ－氨基酸测定的临床意义。方法　采用多克隆的ＩｇＧ片段和生物素－链霉亲和素－过氧化物酶系统测定尿Ｄ－氨基酸的含量。检测了２１例正常人和４４例各种肾脏疾病患者尿ＤＡＯ浓度，同时测定尿Ｎ－乙酸－β－Ｄ－氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）和α１－微球蛋白（ＡＭＧ）。结果尿ＤＡＯ在各种肾脏疾病患者中均有不同程度的增高，并显示尿ＤＡＯ与ＮＡＧ和ＡＭＧ有高度相关性（ｒ＝０．７２９，Ｐ＜０．０１，ｒ＝０．６４３，Ｐ＜０．０１）。结论提示尿 ＤＡＯ检测可作为临床判断肾功能不良的监测指标之一。 展开更多

关键词 D-氨基酸氧化酶 生物素-链霉亲和素酶免疫 尿监测 肾脏疾病

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生物素-链霉亲和素酶免疫法PSA测定的评价

2

作者 卓广超 汪子伟 《江西医学检验》 2003年第6期419-420,439,共3页

目的评价生物素-链霉亲和素酶免疫分析法(BSA-ELISA)测定前列腺特异性抗原(PSA)并与化学发光法(CLIA)进行比较。方法根据EP9-A文件要求采集数据,并以相应软件分析这两种方法的相关性;同时对BSA-ELISA的测定范围,变异系数(CV),最小检测... 目的评价生物素-链霉亲和素酶免疫分析法(BSA-ELISA)测定前列腺特异性抗原(PSA)并与化学发光法(CLIA)进行比较。方法根据EP9-A文件要求采集数据,并以相应软件分析这两种方法的相关性;同时对BSA-ELISA的测定范围,变异系数(CV),最小检测限进行测定。结果两种方法测定的结果具有较好的相关性,回归方程У=0.985Х-0.131,相关系数(r)=0.997。PSA的批内平均CV为2.21%,批间平均CV为3.08%。测定范围为1.50～85.00μg/L。最小检测限为0.30μg/L。结论采用全自动酶免疫分析仪的BSA-ELISA与CLIA自动分析仪测定PSA的相关性好,结果稳定,偏差小,可以在临床上常规应用。 展开更多

关键词 生物素-链霉亲和素酶免疫法 PSA 测定 前列腺特异性抗原 化学发光法

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新生血管抑制剂VEGFR2-Fc的检测方法建立与方法学验证 被引量：1

3

作者 晏启明 金家贵 《四川医学》 CAS 2013年第6期748-750,共3页

目的建立重组人血管内皮生长因子受体Fc融合蛋白(VEGFR2-Fc)血药浓度的检测方法并进行验证,为该药物的动力学研究提供方法学。方法以羊抗人IgG-Fc作为捕获抗体,以生物素标记羊抗人VEGF R2为检测抗体,建立双抗夹心的BA-ELISA检测方法,并... 目的建立重组人血管内皮生长因子受体Fc融合蛋白(VEGFR2-Fc)血药浓度的检测方法并进行验证,为该药物的动力学研究提供方法学。方法以羊抗人IgG-Fc作为捕获抗体,以生物素标记羊抗人VEGF R2为检测抗体,建立双抗夹心的BA-ELISA检测方法,并开展方法学试验。结果标准品的线性范围为28～0.4375ng/ml,相关系数达到0.999;质控浓度(20ng/ml、10ng/ml和5ng/ml)的回收率分别为103.159%、116.092%和102.528%,板内和板间精密度分别是8.87%、3.27%、15.41%和12.38%、7.97%、16.74%;灵敏度为0.25ng/ml。结论建立的BA-ELISA检测VEGFR2-Fc方法符合生物技术药物的方法学标准,可以用于体内药代动力学研究的分析方法。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子受体Fc融合蛋白 生物素-链亲和素酶联免疫吸附分析 方法学评价

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生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定双酚A 被引量：31

4

作者 魏孔吉 赵美萍 +1 位作者 李元宗 常文保 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1122-1124,共3页

建立了可用于快速、灵敏地检测双酚A的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法,测得最佳实验条件为包被抗原浓度为13.8 mg/L、抗体稀释为2.4×105倍,生物素化二抗和酶标亲和素的最佳稀释倍数分别为2000倍和500倍.在优化条件下,方法的... 建立了可用于快速、灵敏地检测双酚A的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法,测得最佳实验条件为包被抗原浓度为13.8 mg/L、抗体稀释为2.4×105倍,生物素化二抗和酶标亲和素的最佳稀释倍数分别为2000倍和500倍.在优化条件下,方法的线性范围0.2～1000 μg/L;最低检出限0.05 μg/L.所建立的方法用于食品和唾液中双酚A含量的测定,样品处理简单,结果满意. 展开更多

关键词 生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法 含量测定 双酚A 食品 唾液

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生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定二乙基磷酸酯类有机磷农药 被引量：12

5

作者 王磊 张丽杰 +3 位作者 吕伟 韩世鹤 张付凯 潘家荣 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第3期346-350,共5页

基于生物素和亲和素之间发生特异性反应,形成多酶系统,建立了二乙基磷酸酯类有机磷农药的竞争酶联免疫分析技术和生物素-亲和素放大酶联免疫分析技术。在优化条件下,二乙基磷酸酯类有机磷农药浓度在1×10-1～1×104mg/L范围内... 基于生物素和亲和素之间发生特异性反应,形成多酶系统,建立了二乙基磷酸酯类有机磷农药的竞争酶联免疫分析技术和生物素-亲和素放大酶联免疫分析技术。在优化条件下,二乙基磷酸酯类有机磷农药浓度在1×10-1～1×104mg/L范围内与抑制率线性关系良好,其线性回归方程为y=0.1168x+0.6259(r=0.9889),半抑制浓度和检出限分别为34 mg/L和0.0248 mg/L,与间接竞争酶联免疫分析方法相比,在交叉反应率基本不变的情况下,检测灵敏度和检测范围都得到显著提高,实际样品的加标回收率为70.1%～117.8%,基本满足痕量物质分析的要求。 展开更多

关键词 农药 二乙基磷酸酯类有机磷 生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法

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人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立 被引量：6

6

作者 杨静 曾昭伟 +3 位作者 王学谦 赵倩 孙辉 李会强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期871-873,875,共4页

目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-... 目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)。对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行鉴定,并和常规ELISA、放射免疫检测以及化学发光法相比较检测了临床标本中的CEA浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50)U/mL,检测结果表明,体系稳定性良好;灵敏度为0.42 U/mL,批内、批间差异均小于10.0%。该研究建立的方法与常规ELISA对比差异有统计学意义,与放射免疫检测对比差别无统计学意义。与化学发光法相比较,回归方程为:y=0.04825+0.99674x,r=0.994,差异无统计学意义。结论:建立的CEA的BA-ELISA检测方法易于操作、灵敏度高、价格低廉,适合应用于临床检测。 展开更多

关键词 癌胚抗原 乳腺癌 生物素-亲和素酶联免疫吸附法 生物素 亲和素

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基于己烯雌酚-生物素双功能配体的己烯雌酚化学发光酶联免疫吸附检测技术研究 被引量：4

7

作者 陈宗粉 王新阳 +1 位作者 宁保安 邵长利 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第6期1826-1833,共8页

目的基于己烯雌酚-生物素双功能配体和生物素-亲和素信号放大系统建立生物素-亲和素化学发光酶联免疫吸附试验(biotin-avidin-amplified chemiluminescent immunosorbent assay,BA-CLIA)法检测牛奶中的己烯雌酚的方法。方法采用1-乙基-... 目的基于己烯雌酚-生物素双功能配体和生物素-亲和素信号放大系统建立生物素-亲和素化学发光酶联免疫吸附试验(biotin-avidin-amplified chemiluminescent immunosorbent assay,BA-CLIA)法检测牛奶中的己烯雌酚的方法。方法采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐/N-羟基琥珀酰亚胺法[N-(3-dimethylaminopropyl)-N′-ethylcarbodiimide hydrochloride/N-hydroxysuccinimide,EDC/NHS]制备己烯雌酚-生物素双功能配体;棋盘滴定法优化己烯雌酚-生物素双功能配体与抗己烯雌酚单克隆抗体的最佳稀释比例;对有机溶剂、离子强度、pH等影响因素进行优化后建立基于直接竞争化学发光免疫吸附试验检测己烯雌酚的标准曲线;通过特异性试验测定该方法与己烯雌酚结构类似物的交叉反应率;最后选取牛奶进行加标回收试验验证该方法在实际样品中检测的可行性。结果BA-CLIA法对己烯雌酚的半数抑制浓度为3.45 ng/mL,检出限为0.020 ng/mL,与传统竞争酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法比较,检测灵敏度提高了6.22倍;BA-CLIA法与己烯雌酚类似物(双烯雌酚、雌二醇、雌三醇和双酚A)的交叉反应性较低,显示了较好的特异性;采用该方法检测牛奶中的己烯雌酚,平均加标回收率为92.80%~95.74%,变异系数小于等于8.05%。结论该方法灵敏度高、特异性好,适用于牛奶中的己烯雌酚的测定。 展开更多

关键词 双功能配体 生物素-亲和素化学发光酶联免疫吸附试验 己烯雌酚检测 化学发光免疫分析

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CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测方法的建立 被引量：3

8

作者 曾昭伟 王学谦 李会强 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第9期1675-1678,共4页

目的:建立CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法,进行方法学评价。方法:纯化卵巢癌患者腹水得到CA125抗原,制备生物素化CA125抗体,酶标板包被生物素化BSA,建立BA-ELISA反应系统。观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定... 目的:建立CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法,进行方法学评价。方法:纯化卵巢癌患者腹水得到CA125抗原,制备生物素化CA125抗体,酶标板包被生物素化BSA,建立BA-ELISA反应系统。观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定性等指标。测定卵巢癌患者以及卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,与化学发光免疫检测结果对比。结果:BA-ELISA方法灵敏度为3.18U/L,与CEA、PSA等交叉反应率低;高低浓度样品平均回收率分别为107.11%、99.96%,批内和批间变异分别为7.97%、8.04%,稳定性好。本研究与化学发光免疫检测检出结果差异无统计学意义,检测卵巢癌患者血清CA125水平,回归方程为y=-6.830+1.014x,r=0.993。检测卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,回归方程为y=1.936+0.937x,r=0.986。结论:BA-ELISA检测方法的建立在诊断卵巢癌等方面灵敏度高、特异性强,操作简便,无需昂贵仪器,适合广泛应用。 展开更多

关键词 CA-125抗原 生物素-亲和素酶联免疫法 卵巢癌 化学发光

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生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定牛奶中雌三醇 被引量：3

9

作者 梁祖培 冯观萍 +3 位作者 吴民富 孙魁魁 张燕 刘辉 《广东化工》 CAS 2018年第11期72-75,共4页

建立了检测牛奶中雌三醇的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA),实验最佳工作条件为,包被原浓度为125 ng/m L,生物化抗体的稀释倍数为1∶16000,缓冲体系为pH=7.4的0.01 mol/L的PBS缓冲溶液,体系中甲醇浓度低于5%,生物素化抗... 建立了检测牛奶中雌三醇的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA),实验最佳工作条件为,包被原浓度为125 ng/m L,生物化抗体的稀释倍数为1∶16000,缓冲体系为pH=7.4的0.01 mol/L的PBS缓冲溶液,体系中甲醇浓度低于5%,生物素化抗体孵育时间和亲和素-HRP孵育时间均为30 min。在此最佳条件下,方法的检测范围(IC20~IC80)为0.149~3.27 ng/m L,灵敏度IC50=0.689 ng/m L。建立了液-液提取样品前处理方法,前处理净化后稀释10倍可消除基质效应,雌三醇牛奶样品加标回收率为94.9%~115.2%,CV<15%。与ELISA法相比,BA-ELISA具有更高的灵敏度,适于低浓度雌三醇的检测。 展开更多

关键词 雌三醇 单克隆抗体 生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法 液-液提取法

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酸性成纤维细胞生长因子阳离子脂质体在大鼠体内的药动学 被引量：1

10

作者 王倩 项琪 黄亚东 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1024-1028,共5页

采用pH梯度法制备了酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)阳离子脂质体,建立了生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定(BA-ELISA)法检测大鼠血清中的药物浓度。结果显示,血清中的aFGF浓度在31.2~500 pg/ml范围内线性关系良好,回收率大于97%,日内、... 采用pH梯度法制备了酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)阳离子脂质体,建立了生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定(BA-ELISA)法检测大鼠血清中的药物浓度。结果显示,血清中的aFGF浓度在31.2~500 pg/ml范围内线性关系良好,回收率大于97%,日内、日间RSD<10%。大鼠分别尾静脉注射不同剂量(20、50和100μg/kg)的aFGF阳离子脂质体和aFGF溶液,用以考察制品在大鼠体内的药动学行为。结果显示,低、中、高浓度的aFGF阳离子脂质体与aFGF溶液相比,阳离子脂质体组的消除半衰期(t1/2)和平均滞留时间(MRT)均显著延长(P<0.05);阳离子脂质体组的药-时曲线下面积(AUC)呈现出剂量依赖性增长,并且高剂量组的AUC与高浓度aFGF溶液组相比有极显著差异(P<0.01)。本研究结果表明,aFGF阳离子脂质体延长了aFGF的体内存在时间,有效提高了aFGF的生物利用度。 展开更多

关键词 酸性成纤维细胞生长因子 阳离子脂质体 药动学 生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定(BA-ELISA)

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BA-ELISA法对食品中克百威残留的高效测定

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作者 朱文博 赵凌燕 +1 位作者 王敏思 宋洋 《天津师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2022年第4期59-63,共5页

为了简单、快速、准确地检测水果及其制品中的克百威农药残留,基于单克隆抗体,建立了间接竞争生物素/亲和素酶联免疫分析方法(BA-ELISA).以苹果、苹果汁、橙子、橙汁为样品原材料,采用乙腈提取、旋蒸、甲醇复溶等简单前处理,用0.5%的FG-... 为了简单、快速、准确地检测水果及其制品中的克百威农药残留,基于单克隆抗体,建立了间接竞争生物素/亲和素酶联免疫分析方法(BA-ELISA).以苹果、苹果汁、橙子、橙汁为样品原材料,采用乙腈提取、旋蒸、甲醇复溶等简单前处理,用0.5%的FG-PBS稀释20倍以基本消除基质影响,用BA-ELISA法测定样品中的克百威含量,同时优化检测条件并对该方法进行评价.结果表明,BA-ELISA检测方法的标准曲线检测限为(0.082±0.002)μg/L,灵敏度为(0.265±0.010)μg/L. 4种水果及其制品中的克百威在3种不同加标浓度水平下的添加回收率为90.20%~99.83%,变异系数为1.8%~6.3%,检测时间缩短至1 h.以气相色谱法作为对照,BA-ELISA法对克百威含量的测定较为准确,可作为水果中检测克百威残留的技术手段. 展开更多

关键词 水果 克百威 快速检测 生物素/亲和素酶联免疫(BA-ELISA)

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检测烟曲霉菌GM抗原生物素-亲和素-夹心酶联免疫吸附试验法的建立 被引量：1

12

作者 车小燕 徐华 +3 位作者 丘立文 潘玉先 邱庆林 郝卫 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期303-303,共1页

关键词 烟曲霉菌 GM抗原 生物素-亲和素-夹心酶联免疫 微生物检验

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