新型食物不耐受sIgG定量检测方法的构建 被引量：3

1

作者 相平 孙静 +3 位作者 周宇捷 任杰 刘堂喻哼 李会强 《天津医药》 CAS 北大核心 2013年第11期1041-1044,共4页

目的 以检测鸡蛋特异性免疫球蛋白G（sIgG）为例，探讨新型食物不耐受的定量检测方法。方法 选择行食物过敏原sIgG检测的患者173例，另择健康体检者78例为阴性对照。制备生物素化牛血清白蛋白-链酶亲和素酶标反应板，同时加入生物素化... 目的 以检测鸡蛋特异性免疫球蛋白G（sIgG）为例，探讨新型食物不耐受的定量检测方法。方法 选择行食物过敏原sIgG检测的患者173例，另择健康体检者78例为阴性对照。制备生物素化牛血清白蛋白-链酶亲和素酶标反应板，同时加入生物素化鸡蛋抗原和待检血清，洗涤后再加入酶标记抗人IgG，建立一种抗原间接包被-液相反应模式的酶联免疫方法；优化生物素化过敏原和酶标记抗体的浓度，确定反应条件。应用此方法检测血清标本中的sIgG。结果 选用生物素化蛋清作为抗原，其最适稀释比例是1∶2 000，酶标抗体的最适稀释比例是1∶12 000。此方法批内及批间变异系数分别为4.83%~8.55%,4.88%~7.93%；与蟹、牛奶、羊奶等的交叉反应率均〈10%；与临床现用食物不耐受sIgG检测法有较好的相关性（Y=0.977X＋8.45，r=0.961, P 〈 0.05）。结论 本检测方法可用于检测鸡蛋不耐受患者血清sIgG，操作简便，具有较高的准确性和特异度，重复性好，并显示较好灵活性潜能，为今后研制“个性化”随机组合食物品种的检测试剂盒奠定基础。 展开更多

关键词 食物不耐受 特异性IGG 酶联免疫吸附测定 生物素-链酶亲和素 鸡蛋

下载PDF 职称材料

缺氧缺血性脑病新生儿血细胞因子表达的意义 被引量：15

2

作者 王健 陆勤 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期341-342,354,共3页

目的观察缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血CD25、CD25mRNA和IL-1β表达水平,探讨其临床意义。方法Ficoll常规分离外周血单个核细胞,用生物素-链霉亲和素、Real-time PCR和ELISA法分别检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿生后d1、3、7植物凝集... 目的观察缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血CD25、CD25mRNA和IL-1β表达水平,探讨其临床意义。方法Ficoll常规分离外周血单个核细胞,用生物素-链霉亲和素、Real-time PCR和ELISA法分别检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿生后d1、3、7植物凝集素(PHA)诱导前后CD25、CD25mRNA及IL-1β水平,以CD25cDNA与磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)比值为CD25mRNA最终相对表达量。结果HIE患儿生后d1静息期和诱导期CD25表达水平分别为(3.6±1.1)%、(20.9±4.8)%,IL-1β为(17.7±8.2)ng/L,与正常对照相比,差异有显著性(P<0.01,0.05)。生后d3 CD25表达水平分别为(3.9±1.2)%、(22.8±5.1)%,IL-1β为(15.9±4.9)ng/L,与正常对照相比,静息期差异有显著性(P<0.01,0.05)。生后d7静息期和诱导期CD25表达水平分别为(4.1±1.2)%(、23.8±5.2)%,与正常对照相比,静息期差异有显著性(P<0.05),IL-1β为(15.0±3.8)ng/L,差异有显著性(P<0.01)。HIE患儿CD25mRNA与对照组相比,无显著差异(P>0.05)。结论HIE患儿存在明显炎症反应;新生儿免疫细胞表面CD25表达水平偏低,但其mRNA水平稳定,具有一定免疫调节能力,可参与HIE脑损伤的修复。 展开更多

关键词 婴儿 新生 缺氧缺血 脑 CD25 CD25mRNA 白细胞介素-1Β 生物素-链霉亲和素

下载PDF 职称材料

新生儿缺氧缺血性脑病外周血T细胞亚群和膜白介素-2受体表达及临床意义 被引量：8

3

作者 王健 陆勤 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期608-610,共3页

目的观察新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血T细胞亚群和膜白介素-2受体(mIL-2R)表达,探讨其临床意义。方法安徽省淮南市妇幼保健院新生儿科2002年5月至2003年10月收治HIE患儿32例。以Ficoll-Hypaque常规分离外周血单个核细胞(PBMC),... 目的观察新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血T细胞亚群和膜白介素-2受体(mIL-2R)表达,探讨其临床意义。方法安徽省淮南市妇幼保健院新生儿科2002年5月至2003年10月收治HIE患儿32例。以Ficoll-Hypaque常规分离外周血单个核细胞(PBMC),用生物素-链霉亲和素(BSA)系统检测新生儿HIE及足月正常新生儿生后第1、3、7日CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+阳性率,及PHA诱导前后mIL-2R表达水平。结果新生儿HIE患儿生后第1日CD3+、CD4+、CD8+阳性率及CD4+/CD8+、静息期和诱导期mIL-2R表达水平与正常对照组相比,差异有显著性(P<0.01或P<0.05);生后第3日与正常对照组相比,差异有显著性(P<0.05);生后第7日CD3+、CD4+、CD8+与正常对照组相比,差异有显著性(P<0.05),CD4+/CD8+与正常对照组相比,差异无显著性(P>0.05)。在不同程度HIE患儿中,以重度HIE患儿细胞免疫功能异常最明显。结论新生儿免疫细胞幼稚、未分化成熟、表达水平偏低,HIE病理过程有细胞免疫的改变及参与,HIE患儿存在一定程度的细胞免疫功能紊乱。 展开更多

关键词 新生儿 缺氧缺血性脑病 T细胞亚群 膜白介素-2受体 生物素-链霉亲和素

原文传递

LHRHa靶向微泡造影剂的制备及体外寻靶实验 被引量：7

4

作者 郭娟 常淑芳 +3 位作者 孙江川 严宇 廖永玲 王志刚 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2011年第3期466-469,共4页

目的制备人卵巢癌靶向超声造影剂,观察其体外寻靶能力。方法采用生物素-链霉亲和素法制备促黄体生成素释放激素类似物(LHRHa)靶向脂质微泡,以免疫荧光染色验证LHRHa与脂质微泡的结合情况,并以普通脂质微泡作为对照,在倒置显微镜下观察LH... 目的制备人卵巢癌靶向超声造影剂,观察其体外寻靶能力。方法采用生物素-链霉亲和素法制备促黄体生成素释放激素类似物(LHRHa)靶向脂质微泡,以免疫荧光染色验证LHRHa与脂质微泡的结合情况,并以普通脂质微泡作为对照,在倒置显微镜下观察LHRHa靶向脂质微泡对人卵巢癌A2780/DDP的体外寻靶能力。结果 LHRHa靶向脂质微泡免疫荧光阳性;体外寻靶实验显示LHRHa靶向脂质微泡能够与表面存在LHRH受体的A2780/DDP细胞特异性结合,而普通脂质微泡则不能结合。结论利用生物素-链霉亲和素方法可成功制备LHRHa靶向脂质微泡造影剂,该靶向造影剂具有体外寻靶能力。 展开更多

关键词 微泡 生物素-链霉亲和素复合体 促性腺激素释放激素 卵巢肿瘤

下载PDF 职称材料

新生儿缺氧缺血性脑病细胞免疫功能的变化及其临床意义 被引量：6

5

作者 陆勤 王健 +1 位作者 王薇 孙素梅 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2005年第6期499-502,共4页

目的观察新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血T细胞亚群和膜白介素-2受体(mIL-2R),血清IL-1β,IL-6,IL-10表达水平,探讨免疫学变化在HIE发病中的意义.方法用生物素-链霉亲和素(BSA)系统检测新生儿HIE及足月正常新生儿生后第1,3,7天CD3+... 目的观察新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血T细胞亚群和膜白介素-2受体(mIL-2R),血清IL-1β,IL-6,IL-10表达水平,探讨免疫学变化在HIE发病中的意义.方法用生物素-链霉亲和素(BSA)系统检测新生儿HIE及足月正常新生儿生后第1,3,7天CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+阳性百分率,及植物血凝素(PHA)诱导前后mIL-2R表达水平.用ELISA法动态检测新生儿及足月正常新生儿出生第1,3,7天血清IL-1β,IL-6,IL-10水平.结果新生儿HIE患儿生后第1天CD3+,CD4+,CD8+分别为(37.4±6.7)%、(29.4±6.9)%、(16.7±3.3)%,CD4+/CD8+为1.8±0.5,静息期和诱导期mIL-2R表达水平分别为(3.6±1.1)%、(20.9±4.8)%,与正常组相比,差异有显著性(P＜0.01～P＜0.05).生后第3天CD3+,CD4+,CD8+分别为(41.0±7.4)%,(35.8±6.9)%,(22.6±4.5)%,CD4+/CD8+为1.7±0.5,静息期mIL-2R表达水平(3.9±1.2)%,与正常组相比,差异有显著性(P＜0.05).生后第7天CD3+,CD4+,CD8+分别为(41.8±6.1)%、(36.4±5.1)%、(25.6±4.3)%,与正常组相比,差异有显著性(P＜0.05).CD4+/CD8+比值为1.5±0.3,诱导期mIL-2R表达水平(23.8±5.2)%,与正常组相比,差异无显著性(P＞0.05).HIE患儿血清IL-1β,IL-6,IL-10水平均显著高于正常组(P＜0.05～P＜0.01).结论HIE患儿存在一定程度的细胞免疫功能紊乱,与疾病的严重程度密切相关,其表达水平可作为HIE早期诊断、评价脑损伤程度及预后的参考指标. 展开更多

关键词 缺氧缺血性脑病 T细胞亚群 膜白介素-2受体 IL-1Β IL-6 IL-10 外周血单个核细胞 生物素-链霉亲和素 婴儿 新生

下载PDF 职称材料

超声微泡连接特异性抗体的制备方法及靶向化处理因素对超声微泡物理性质的影响 被引量：5

6

作者 王朝清 马方 刘波 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2012年第4期617-620,共4页

目的探讨超声微泡连接特异性抗体的制备方法及靶向化处理因素对超声微泡物理性质的影响。方法应用生物素-链霉亲和素连接系统,使注射用六氟化硫微泡(SonoVue)与特异性抗血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)抗体相连接,用间接免疫荧光法检测抗体... 目的探讨超声微泡连接特异性抗体的制备方法及靶向化处理因素对超声微泡物理性质的影响。方法应用生物素-链霉亲和素连接系统,使注射用六氟化硫微泡(SonoVue)与特异性抗血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)抗体相连接,用间接免疫荧光法检测抗体与微泡的连接,用马尔文激光粒径分析仪分别测定生物素化处理前后微泡的粒径,采用超声诊断仪评价微泡靶向化构建前后的显像效果。结果 SonoVue与特异性抗体成功连接,间接免疫荧光检测呈阳性。生物素修饰后的微泡粒径分布变窄,与普通微泡的超声显像效果略有差异。结论通过生物素-链霉亲和素系统可以成功靶向化构建超声微泡,靶向化处理因素对微泡的粒径有一定影响,对微泡的超声显影效果略有影响。 展开更多

关键词 造影剂 微泡 生物素-链霉亲和素 血管细胞间黏附分子-1 靶向化构建

下载PDF 职称材料

利用生物素-链霉亲和素进行骨髓间充质干细胞的表面标记 被引量：4

7

作者 杨林 罗富里 +2 位作者 李赟 文君 徐洋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第10期1382-1388,共7页

背景:目前尚缺乏高效、无创的方式将干细胞植入靶器官,探索引导干细胞到达靶器官或组织的途径以及提高干细胞归巢效率是现今干细胞研究的重点领域之一。目的:利用生物素-链霉亲和素反应体系建立一种简单可行的细胞表面化学修饰方法,并... 背景:目前尚缺乏高效、无创的方式将干细胞植入靶器官,探索引导干细胞到达靶器官或组织的途径以及提高干细胞归巢效率是现今干细胞研究的重点领域之一。目的:利用生物素-链霉亲和素反应体系建立一种简单可行的细胞表面化学修饰方法,并评价此方法进行骨髓间充质干细胞表面标记的效率及其对细胞生物学功能的影响。方法:全骨髓培养法得到第3代骨髓间充质干细胞,采用流式细胞仪鉴定;以磺化生物素-N-羟基琥珀酰亚胺、生物素、链霉亲和素将黏附分子配体唾液酸化的路易斯抗原装备到骨髓间充质干细胞表面;通过荧光显微镜评估骨髓间充质干细胞表面标记的效率,锥虫蓝染色法检测骨髓间充质干细胞的活性,CCK-8比色法检测骨髓间充质干细胞的增殖功能;成脂、成骨诱导检测骨髓间充质干细胞多分化功能。结果与结论:(1)全骨髓培养法培养2周,可得到第3代骨髓间充质干细胞,细胞表达CD90,CD29,不表达CD34和CD45。(2)以生物素及链霉亲和素成功将黏附分子配体唾液酸Lewis X(Sle X)装备到骨髓间充质干细胞表面,且对细胞活性、增殖、分化功能影响不大。(3)运用这种方法对细胞进行表型修饰,操作技术简单,修改效率可达88%,有望提高骨髓间充质干细胞的归巢率,未来会有广泛和重要的应用价值。 展开更多

关键词 干细胞 骨髓干细胞 生物素-链霉亲和素 骨髓间充质干细胞 磺化生物素-N-羟基琥珀酰亚胺 唾液酸化的路易斯抗原 国家自然科学基金

下载PDF 职称材料

脂质纳米粒递送DNA细胞内转运过程

8

作者 罗成枝 彭保卫 《广东化工》 CAS 2024年第20期89-91,共3页

通过PCR和免疫荧光技术实现生物素-链霉亲和素-异硫氰酸荧光素标记核酸,同时用0.1%(摩尔百分比)ATTO 647 DOPE标记LNP(SM-102∶DSPC∶Cholesterol∶PEG2000-DMG=50∶10∶38.5∶1.5,摩尔百分比),对制成的LNP-DNA制剂的理化性质及包封进... 通过PCR和免疫荧光技术实现生物素-链霉亲和素-异硫氰酸荧光素标记核酸,同时用0.1%(摩尔百分比)ATTO 647 DOPE标记LNP(SM-102∶DSPC∶Cholesterol∶PEG2000-DMG=50∶10∶38.5∶1.5,摩尔百分比),对制成的LNP-DNA制剂的理化性质及包封进行考察,并进行了体外细胞(Hela)实验,使用特异性抗体标记内涵体/溶酶体等内吞途径中相关囊泡,在倒置荧光显微镜或高内涵显微镜下考察LNP内吞过程及其在细胞内的转运情况。以GFP表达质粒作为递送货物,考察转染后绿色荧光蛋白表达效率。结果表明,祼DNA在被细胞内吞后,在细胞外周和表面形成内涵体颗粒且不会被进一步转运到细胞内。转染时间是影响LNP-DNA转染效率的主要因素之一,LNP-DNA通过内吞途径进入细胞,大部分被早期内涵体摄取形成LNP-DNA内涵体,随后转运至细胞核周围,部分转运至溶酶体,转运过程实现DNA的逃逸。 展开更多

关键词 脂质纳米颗粒 细胞内吞 生物素-链霉亲和素 LNP追踪 内涵体逃逸

下载PDF 职称材料

应用生物素-链霉亲和素的时间分辨荧光免疫分析检测玉米赤霉烯酮 被引量：3

9

作者 马智鸿 黄飚 +3 位作者 屠蔷 高蕾 张珏 王柯 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期905-909,共5页

采用基于生物素（Biotin）-链霉亲和素（Strepavidin）的时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立了快速灵敏的玉米赤霉烯酮（ZEN）检测方法。以strepavidin包被板条，加入生物素化的ZEN—BSA，结合在板条上的ZEN—BSA与标准／样本中的游... 采用基于生物素（Biotin）-链霉亲和素（Strepavidin）的时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立了快速灵敏的玉米赤霉烯酮（ZEN）检测方法。以strepavidin包被板条，加入生物素化的ZEN—BSA，结合在板条上的ZEN—BSA与标准／样本中的游离ZEN共同竞争限量的抗ZEN单克隆抗体，用稀土离子Eu“标记的羊抗鼠IgG进行示踪，建立了间接竞争的ZEN-TRFIA。该方法的检测灵敏度为0．2ng／ml，测量范围是0．2～200．0ng／ml，批内、批间变异系数分别为5．7％和8．3％，平均回收率为91．1％。与玉米赤霉醇的平均交叉反应是12．3％，与赭曲霉素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉素B1无交叉反应，说明该方法的特异性较好。相关试剂在4℃放6个月后各检测参数基本无变化，说明该方法稳定。样品同时用ZEN—TRFIA和商品ELISA试剂盒测定样品ZEN含量，两者的相关系数为0．9664，说明该方法测量准确。ZEN—TRFIA具有测量准确、检测灵敏度高、检测范围宽、操作简便、标记物稳定等优点，适合于ZEN大量筛查的应用。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮(ZEN) 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 生物素-链霉亲和素 真菌毒素

下载PDF 职称材料

隐孢子虫感染与患者免疫功能表达 被引量：3

10

作者 王健 李朝品 +2 位作者 蔡菇 许礼发 朱玉霞 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期98-99,共2页

目的 :探讨隐孢子虫感染与细胞免疫功能的关系。方法 :采用生物素 -链霉亲和素 ( BSA)和EL ISA法对卵囊阳性患者分别进行 T细胞亚群、膜白细胞介素 - 2受体 ( m IL - 2 R)和血清特异性 Ig G、Ig M检测。结果 :隐孢子虫卵囊阳性者 CD+3、... 目的 :探讨隐孢子虫感染与细胞免疫功能的关系。方法 :采用生物素 -链霉亲和素 ( BSA)和EL ISA法对卵囊阳性患者分别进行 T细胞亚群、膜白细胞介素 - 2受体 ( m IL - 2 R)和血清特异性 Ig G、Ig M检测。结果 :隐孢子虫卵囊阳性者 CD+3、CD+4、CD+8和 CD+4/ CD+8阳性百分率分别为 ( 6 5 .83± 6 .5 5 ) %、( 4 3.5 5± 6 .10 ) %、( 2 8.4 3± 4 .32 ) %和 1.5 8± 0 .32 ) % ,静息期与诱导期 m IL- 2 R表达水平分别为 ( 2 .92±1.0 6 ) %和 ( 33.4 5± 2 .31) % ;隐孢子虫卵囊阴性者 CD+3、CD+4、CD+8和 CD+4/ CD+8阳性百分率分别为( 5 5 .87± 7.2 3) %、( 39.2 6± 6 .4 3) %、( 30 .0 4± 5 .6 7) %和 ( 1.36± 0 .4 1) % ,静息期与诱导期 m IL- 2 R表达水平分别为 ( 4 .31± 1.4 7) %和 ( 35 .4 1± 3.12 ) % ,两者相比 ,差异有显著性 ( P<0 .0 5～ P<0 .0 1)。隐孢子虫特异性抗体 Ig G、Ig M、Ig G + Ig M阳性率分别为 6 3.4 1% ( 2 6 / 4 1)、17.0 7% ( 7/ 4 1)、19.5 1% ( 8/ 4 1) ,隐孢子虫感染后的体液免疫以 Ig G为最多见。结论 :隐孢子虫感染以细胞免疫为主 ,体液免疫在隐孢子虫感染中具有一定的局限性。隐孢子虫感染者体内存在一定程度细胞免疫功能紊乱。 展开更多

关键词 隐孢子虫感染 免疫功能 生物素-链霉亲和素 ELISA法 细胞免疫 体液免疫

下载PDF 职称材料

生物素链霉亲和素联合免疫层析用于快速检测NT-proBNP 被引量：3

11

作者 孙宏浩 梁玉芬 +2 位作者 赵晓双 黄玲 廖天作 《中南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2018年第2期6-9,15,共5页

为提高常规免疫层析技术的检测灵敏度,引入生物素-链霉亲和素系统,以荧光微球作为标记物,建立了一种新型快速定量检测NT-pro BNP的方法.试验结果表明:新型试剂盒在0.02~30μg·L^(-1)范围能对NT-proBNP实现快速检测.在全血检测中,... 为提高常规免疫层析技术的检测灵敏度,引入生物素-链霉亲和素系统,以荧光微球作为标记物,建立了一种新型快速定量检测NT-pro BNP的方法.试验结果表明:新型试剂盒在0.02~30μg·L^(-1)范围能对NT-proBNP实现快速检测.在全血检测中,新型试纸条所测NT-pro BNP浓度与雷度快速免疫分析仪定量检测结果具有很好的一致性.新型免疫层析试纸条大大提高了快速检测的准确性,可广泛用于床旁检验(POCTs)等临床诊断阶段. 展开更多

关键词 生物素-链霉亲和素 荧光免疫层析 N末端脑钠肽前体 即时检验

下载PDF 职称材料

基于ssDNA适配子的慢性粒细胞白血病K562细胞检测方法的建立 被引量：3

12

作者 查成喜 韩跃武 +3 位作者 张雪燕 杨浩 夏艳 郭鹏 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第7期845-848,共4页

目的建立基于ssDNA适配子的慢性粒细胞性白血病K562细胞的检测方法。方法利用Cell-SELEX(Sys-tematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术获得针对K562细胞的高特异性ssDNA适配子,以双位点结合模式试验原理,结合生物... 目的建立基于ssDNA适配子的慢性粒细胞性白血病K562细胞的检测方法。方法利用Cell-SELEX(Sys-tematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术获得针对K562细胞的高特异性ssDNA适配子,以双位点结合模式试验原理,结合生物素链霉亲和素磁珠技术,建立K562细胞的特异性检测方法,并验证其特异性及灵敏度。结果利用建立的方法分别检测K562细胞、HL-60细胞及空白对照细胞,K562组与HL-60组和空白对照组荧光强度值差异有统计学意义(P<0.01),HL-60组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05),表明该方法特异性强;该方法能检测出数量小于100个的K562细胞,检测阈值低,灵敏度高。结论已成功建立了基于ssDNA适配子的检测K562细胞的新方法,为慢性粒细胞性白血病的分子诊断提供了一种新方法,也为分离K562细胞表面物质提供了新的思路。 展开更多

关键词 K562细胞 适配子 双位点结合试验 生物素-链霉亲和素磁珠 分子诊断技术

原文传递

斑点免疫金渗滤试验、生物素-链霉亲和素一步法与培养法检测淋球菌抗原的对比 被引量：3

13

作者 董玉娥 沈建根 +1 位作者 潘卫利 程东庆 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2003年第5期341-342,共2页

目的　探讨斑点免疫金渗滤试验 (DIGFA)、生物素 链霉亲和素一步法及培养法检测淋球菌抗原的优缺点。方法　同时用DIGFA、生物素 链霉亲和素一步法及培养法检测临床疑诊淋病患者 110例泌尿生殖道标本中的淋球菌抗原 ,并相互比较。结果... 目的　探讨斑点免疫金渗滤试验 (DIGFA)、生物素 链霉亲和素一步法及培养法检测淋球菌抗原的优缺点。方法　同时用DIGFA、生物素 链霉亲和素一步法及培养法检测临床疑诊淋病患者 110例泌尿生殖道标本中的淋球菌抗原 ,并相互比较。结果　DIGFA和生物素 链霉亲和素一步法的敏感性、特异性分别为 97.53 %、92 .85%和 96.2 9%、89.2 8%。配对计数资料 χ2 检验 ,两法分别与培养法比较差异均无显著性 (P >0 .0 5)。结论　检测淋球菌抗原的DIG FA、生物素 链霉亲和素一步法是一种简易、快速、敏感。 展开更多

关键词 斑点免疫金渗滤试验 生物素-链霉亲和素一步法 培养法 检测 淋球菌 抗原 淋病

下载PDF 职称材料

基于SiC@Ag基底和银-生物素-链霉亲和素纳米聚集体双重SERS放大的miRNA-106a检测 被引量：2

14

作者 梁照恒 王哲 +2 位作者 彭乐 王福艳 周骏 《光子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期171-179,共9页

基于SiC@Ag基底与Ag纳米颗粒的表面增强拉曼散射效应,提出了利用银-生物素-链霉亲和素纳米聚集体二次表面增强拉曼散射放大的超灵敏miRNA-106a检测方案.首先,将地高辛修饰的捕获DNA与固定在SiC@Ag基底上的抗地高辛链接,制备SiC@Ag@anti-... 基于SiC@Ag基底与Ag纳米颗粒的表面增强拉曼散射效应,提出了利用银-生物素-链霉亲和素纳米聚集体二次表面增强拉曼散射放大的超灵敏miRNA-106a检测方案.首先,将地高辛修饰的捕获DNA与固定在SiC@Ag基底上的抗地高辛链接,制备SiC@Ag@anti-digoxin/digoxin-DNA基底;将4-巯基苯甲酸(4MBA)标记的银纳米颗粒与修饰有氨基和生物素的探针DNA链接,制备Ag@4MBA@DNA-biotin探针.然后将制备的基底、探针与待测miRNA-106a组成“三明治”结构,获得表面增强拉曼散射信号放大.最后,依次加入链霉亲和素和制备的探针,形成银-生物素-链霉亲和素纳米聚集体,实现检测信号的二次放大.实验结果表明,利用SiC@Ag基底和银-生物素-链霉亲和素纳米聚集体双重表面增强拉曼散射放大,可以实现miRNA-106a的超灵敏检测,检测极限达到0.579fmol/L,对于肿瘤的早期诊断具有应用潜力. 展开更多

关键词 表面增强拉曼散射 银纳米颗粒 生物素-链霉亲和素 核酸检测 miRNA-106a

下载PDF 职称材料

新生儿缺氧缺血性脑病患儿外周血CD25表达 被引量：1

15

作者 孙琳 陆勤 王健 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期392-393,共2页

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血CD25表达。方法应用生物素-链霉亲和素(BSA)法检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、7天外周血CD25水平。结果HIE患儿生后第1天静息期和诱导期CD25水平分别为(3.7±1.2)%和(22.... 目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血CD25表达。方法应用生物素-链霉亲和素(BSA)法检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、7天外周血CD25水平。结果HIE患儿生后第1天静息期和诱导期CD25水平分别为(3.7±1.2)%和(22.4±6.5)%,与正常对照组相比,差异有显著性(P<0.05);随着通气、换气等综合性治疗时间的延长,患儿缺氧缺血症状逐步改善,生后第7天静息期和诱导期CD25水平分别为(4.1±1.5)%和(25.3±7.2)%,与正常对照组相比,差异无显著性(P>0.05)。其中HIE(重度)患儿静息期和诱导期CD25水平均较低,与正常对照组相比,差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。结论HIE患儿存在一定程度的细胞免疫功能紊乱,主要表现为外周血CD25水平降低,并与HIE严重程度有关。 展开更多

关键词 缺氧缺血性脑病 新生儿 生物素-链霉亲和素 CD25

下载PDF 职称材料

链霉亲和素修饰的量子点联合生物素标记的叶酸在卵巢癌SKOV3细胞体外成像中的应用 被引量：2

16

作者 孙平风 李福来 +1 位作者 许恒毅 傅芬 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期952-960,共9页

目的 :探讨链霉亲和素(streptavidin,SA)修饰的量子点(quantum dots,QDs)联合生物素标记的叶酸(folic acid,FA)在卵巢癌SKOV3细胞体外成像中的应用价值。方法 :采用活泼酯法合成SA-QDs复合物,并用同样的方法以聚酰胺-胺(polyamidoamine,... 目的 :探讨链霉亲和素(streptavidin,SA)修饰的量子点(quantum dots,QDs)联合生物素标记的叶酸(folic acid,FA)在卵巢癌SKOV3细胞体外成像中的应用价值。方法 :采用活泼酯法合成SA-QDs复合物,并用同样的方法以聚酰胺-胺(polyamidoamine,PAMAM)树状分子为载体合成生物素化FA-PAMAM。采用生物素化FA-PAMAM联合SA-QDs荧光探针标记叶酸受体(folate receptor,FR)高表达的SKOV3细胞,同时以采用游离FA预处理的SKOV3细胞和FR低表达的肺腺癌A549细胞为对照,验证该荧光探针靶向SKOV3细胞的特异性。随后,以未用PAMAM为载体[生物素化FA-聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)联合SA-QDs荧光探针]或无生物素-链霉亲和素放大系统的荧光探针(FA-PAMAM-QDs)为对照,验证该探针的荧光信号双重放大效应。结果 :FR高表达的SKOV3细胞可被生物素化FA-PAMAM联合SA-QDs的荧光探针特异性识别,平均荧光强度高达114.92±2.87,显著高于FA预处理后再用该探针进行检测的SKOV3细胞(57.86±7.59)和FR低表达的肺腺癌A549细胞(14.94±0.83)(P值均<0.000 1)。在双重放大效应的验证实验中,生物素化FA-PAMAM联合SA-QDs荧光探针标记的SKOV3细胞的平均荧光强度为120.89±3.80,其荧光强度明显高于生物素化FA-PEG联合SA-QDs荧光探针标记的SKOV3细胞的77.50±2.43和FA-PAMAMQDs荧光探针标记的SKOV3细胞的47.81±1.35(P值均<0.000 1)。结论 :构建获得了一种特异性靶向卵巢癌SKOV3细胞的生物素化FAPAMAM联合SA-QDs荧光探针,该探针在卵巢癌早期诊断方面具有潜在应用价值。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 量子点 生物素-链霉亲和素系统 体外成像

原文传递

新生儿缺氧缺血性脑病患儿外周单个核细胞CD25 mRNA表达 被引量：2

17

作者 孙琳 陆勤 王健 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第1期104-106,共3页

目的:探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD25 mRNA表达。方法:以管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为参照,应用Real-time PCR法检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、7天外周血CD25 mRNA水平,以lg c... 目的:探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD25 mRNA表达。方法:以管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为参照,应用Real-time PCR法检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、7天外周血CD25 mRNA水平,以lg cDNA/lg GAPDH比值代表其最终mRNA水平。结果:HIE患儿生后第1天静息期和诱导期CD25 mRNA水平分别为0.72±0.19和1.12±0.23,与正常对照组相比,差异有显著性(P<0.05);随着通气、换气等综合性治疗时间的延长,患儿缺氧缺血症状逐步改善,生后第7天静息期和诱导期CD25 mRNA水平分别为1.02±0.22和2.02±0.32,与正常对照组相比,差异无显著性(P>0.05)。其中HIE(重度)患儿静息期和诱导期CD25 mR-NA水平均较低,与正常对照组相比,差异有显著性(P<0.05)。结论:HIE患儿存在一定程度的细胞免疫功能紊乱,主要表现为外周血CD25 mRNA水平降低,并与HIE严重程度有关。 展开更多

关键词 缺氧缺血性脑病(HIE) 新生儿 生物素-链霉亲和素(BSA) CD25 mRNA 外周血单个核细胞(PBMC)

下载PDF 职称材料

生物素-链霉亲和素介导受体靶向卵巢癌SKOV3细胞量子点体外成像的研究 被引量：1

18

作者 聂丽菊 许恒毅 +3 位作者 叶称连 黄小林 刘雯婷 傅芬 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期1254-1258,共5页

目的:研制一种生物素-亲和素系统(BAS)介导叶酸受体(FR)靶向量子点(QD)荧光探针,初步验证其靶向性及信号放大效应。方法:采用活泼酯法,将链霉亲和素(SA)与QD共价偶联制备QD-SA并对其物理特性进行验证;采用活泼酯法以牛血清蛋白为载体合... 目的:研制一种生物素-亲和素系统(BAS)介导叶酸受体(FR)靶向量子点(QD)荧光探针,初步验证其靶向性及信号放大效应。方法:采用活泼酯法,将链霉亲和素(SA)与QD共价偶联制备QD-SA并对其物理特性进行验证;采用活泼酯法以牛血清蛋白为载体合成生物素化叶酸(FA)。通过生物素化FA与QD-SA结合制备BAS介导叶酸受体(FR)靶向QD探针,比较该探针对卵巢癌SKOV3细胞及FR表达阴性的肺癌A549细胞的识别情况,并验证其靶向特异性;对比该探针在生物素化FA孵育1、4 h时成像的效果;比较该探针与未经BAS介导的QD-FA探针在不同孵育时间对卵巢癌SKOV3细胞成像的差异。结果:BAS介导FR靶向QD探针可特异性识别FR表达阳性的卵巢癌SKOV3细胞,且孵育4 h较1 h荧光信号明显增强,同等条件下其产生的荧光强度较未经BAS介导的QD-FA探针明显增强。结论:制备了一种特异性好、灵敏度高的BAS介导FR靶向QD探针,该探针在卵巢癌早期诊断方面具有潜在应用价值。 展开更多

关键词 生物素-链霉亲和素 叶酸量子点 卵巢癌细胞 体外成像

下载PDF 职称材料

生物素化DNA与链霉亲和素绑定初步研究 被引量：1

19

作者 杨秋萍 何珊珊 王志民 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2016年第6期9-13,20,共6页

将生物素标记的DNA与链霉亲和素(streptavidin,STV)按4∶1摩尔比连接,用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)对混合物表征,观察到所有可能的几种DNA-STV复合物。并按照不同摩尔浓度比和孵育时间配制DNA与STV混合液,探讨了影响结... 将生物素标记的DNA与链霉亲和素(streptavidin,STV)按4∶1摩尔比连接,用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)对混合物表征,观察到所有可能的几种DNA-STV复合物。并按照不同摩尔浓度比和孵育时间配制DNA与STV混合液,探讨了影响结合效率的因素,初步得到用生物素-链霉亲和素系统批量制备1STV-1DNA单分子复合物的最佳制备条件,为未来单分子DNA的大规模快速制备奠定了基础。 展开更多

关键词 生物素-链霉亲和素系统 DNA-STV复合物 AFM 1STV-1DNA单分子复合物

下载PDF 职称材料

磁珠纳米探针结合免疫层析法联级信号放大快速检测奶制品中的两种致病菌

20

作者 卢菲 郝润霞 +2 位作者 祝晨辰 周帆 肖有玉 《微生物前沿》 2023年第2期94-102,共9页

阪崎氏肠杆菌和金黄色葡萄球菌是乳制品中致病率较高且常见的检测项目,本研究首先通过免疫磁分离技术实现目标菌的有效富集,然后通过新型的纳米荧光材料量子点及生物素–链霉亲和素体系结合免疫层析法实现阪崎氏肠杆菌和金黄色葡萄球菌... 阪崎氏肠杆菌和金黄色葡萄球菌是乳制品中致病率较高且常见的检测项目,本研究首先通过免疫磁分离技术实现目标菌的有效富集,然后通过新型的纳米荧光材料量子点及生物素–链霉亲和素体系结合免疫层析法实现阪崎氏肠杆菌和金黄色葡萄球菌联级信号放大和超灵敏联合检测。通过对研究整体的相关优化,两种菌检测灵敏度均可达到2 × 103 CFU/mL,相比传统的免疫层析法检测灵敏度提高了近2000倍。可实现同时超灵敏检测食源性致病菌的,为食品安全快速高灵敏准确检测大分子目标物提供了新的思路。 展开更多

关键词 免疫磁珠 量子点 免疫层析 生物素–链霉亲和素体系 联级信号放大 联合检测

下载PDF 职称材料