生物素化壳聚糖微球的体外抗癌活性 被引量：32

1

作者 方华丰 周宜开 任恕 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期385-388,共4页

目的　研究一套有预定位及肿瘤导向作用的药物载体系统。方法　以生物素化无唾液酸胎球蛋白为分子识别系统 ,与肝癌细胞特异性结合 ,将包封有 5 Fu的壳聚糖微球生物素化 ,作为药物载体 ,通过生物素 亲和素系统将二者桥连 ,用“三步法... 目的　研究一套有预定位及肿瘤导向作用的药物载体系统。方法　以生物素化无唾液酸胎球蛋白为分子识别系统 ,与肝癌细胞特异性结合 ,将包封有 5 Fu的壳聚糖微球生物素化 ,作为药物载体 ,通过生物素 亲和素系统将二者桥连 ,用“三步法”研究微球体外抗肿瘤作用。结果　亲和素 生物素化受体介导的生物素化壳聚糖微球能与体外培养的肝癌细胞特异结合并有显著的抗癌作用。结论　生物素化微球 亲和素 生物素化受体 (或单克隆抗体 )系统可望在体内有预定位及肿瘤靶向作用 ,有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 生物素-亲和素系统 壳聚糖 微球 靶向治疗 肿瘤

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EV71抗原BA-ELISA检测方法的建立及应用 被引量：19

2

作者 龙润乡 谢忠平 +5 位作者 杨蓉 李华 白惠株 董承红 刘龙丁 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第12期1230-1232,共3页

目的建立EV71抗原生物素-亲和素酶联免疫(BA-ELISA)检测方法,并进行验证及初步应用。方法以抗EV71抗体为包被抗体,利用生物素-亲和素系统建立双抗体夹心ELISA法,并对其灵敏度、特异性、准确性及精密性进行验证。采用该方法检测组织培养... 目的建立EV71抗原生物素-亲和素酶联免疫(BA-ELISA)检测方法,并进行验证及初步应用。方法以抗EV71抗体为包被抗体,利用生物素-亲和素系统建立双抗体夹心ELISA法,并对其灵敏度、特异性、准确性及精密性进行验证。采用该方法检测组织培养及临床样品中EV71抗原的含量。结果所建立的BA-ELISA法在EV71蛋白含量625～156.25ng/ml之间线性关系最佳,R2达0.9976,灵敏度为78.125～156.25ng;与包括CoxA16在内的42种肠道病毒及相关病毒均无交叉反应;检测10份EV71阳性样品和10份阴性样品,结果符合率均为100%;检测EV71原液和高、中浓度样品的变异系数分别为3.09%、6.69%和6.43%;可检出约103～104CCID50的活病毒及手足口病患者的大便悬液和部分咽拭子悬液中的病毒。结论用生物素标记EV71抗体与亲和素系统建立的双抗体夹心ELISA法具有较高的特异性、灵敏度、准确性和精密性,为临床检验及抗原分析提供了参考。 展开更多

关键词 手足口病 EV71抗原 酶联免疫检测法 生物素-亲和素系统

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生物素化壳聚糖微球用于体外肿瘤靶向治疗 被引量：6

3

作者 方华丰 周宜开 任恕 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第4期301-303,共3页

生物素 -亲和素介导的肿瘤靶向治疗是近几年来肿瘤早期诊断、治疗研究的热点。将包封有 TNFα的壳聚糖微球生物素化 ,以生物素化无唾液酸胎球蛋白为导向系统 ,采用“三步法”研究了微球体外抗肿瘤毒性实验。结果表明 :生物素化壳聚糖微... 生物素 -亲和素介导的肿瘤靶向治疗是近几年来肿瘤早期诊断、治疗研究的热点。将包封有 TNFα的壳聚糖微球生物素化 ,以生物素化无唾液酸胎球蛋白为导向系统 ,采用“三步法”研究了微球体外抗肿瘤毒性实验。结果表明 :生物素化壳聚糖微球对体外培养的肝癌细胞 SMMC- 772 1有显著的抑制作用 (抑制率为 6 0 .8% ,P<0 .0 1)。 展开更多

关键词 靶向治疗 壳聚糖微球 生物素-亲和素系统 肿瘤

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生物素-亲和素系统在压电免疫传感器中质量放大作用研究 被引量：2

4

作者 裴仁军 胡继明 +2 位作者 刘栗加 胡毅 曾云鹗 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第6期879-880,共2页

生物素－亲和素系统（ＢｉｏｔｉｎＡｖｉｄｉｎＳｙｓｔｅｍ，ＢＡＳ）是７０年代后期迅速发展起来的一种新型生物放大系统，具有高灵敏度、高特异性以及简便、经济、快速等优点，在现代生物免疫学领域中已得到广泛的应用［１］．我们... 生物素－亲和素系统（ＢｉｏｔｉｎＡｖｉｄｉｎＳｙｓｔｅｍ，ＢＡＳ）是７０年代后期迅速发展起来的一种新型生物放大系统，具有高灵敏度、高特异性以及简便、经济、快速等优点，在现代生物免疫学领域中已得到广泛的应用［１］．我们首次将生物素－亲和素系统用于压电免... 展开更多

关键词 压电免疫传感器 生物素-亲和素系统 质量放大免疫检测 检测信号放大

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应用SPR生物传感器检测酸菜发酵液中大肠杆菌 被引量：8

5

作者 张文浩 郑先哲 初国超 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期117-121,共5页

应用SPR传感器可以快速检测酸菜发酵液中的大肠杆菌,以便检测和控制酸菜发酵液中的亚硝酸盐含量,保证发酵食品安全。采用生物素-亲和素系统增大SPR传感器折射信号,获得了传感器的折射率与大肠杆菌浓度的回归方程,实现了对酸菜发酵液中... 应用SPR传感器可以快速检测酸菜发酵液中的大肠杆菌,以便检测和控制酸菜发酵液中的亚硝酸盐含量,保证发酵食品安全。采用生物素-亲和素系统增大SPR传感器折射信号,获得了传感器的折射率与大肠杆菌浓度的回归方程,实现了对酸菜发酵液中大肠杆菌浓度快速,精确检测,提高大肠杆菌检测限到104cfu·mL-1。 展开更多

关键词 等离子共振生物传感器 酸菜发酵液 大肠杆菌 生物素-亲和素系统 检测限

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二步法预定位技术对荷人肝癌裸鼠模型的MR免疫成像研究 被引量：6

6

作者 许乙凯 刘岘 叶靖 《中华放射学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期357-361,共5页

目的利用生物素亲和素系统(biotin avidinsystem,BAS)的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子免疫成像的敏感性。方法制备生物素化抗人肝癌细胞单克隆抗体HAb18并测定其生物素化程度及抗原结合活性。20只荷人肝细胞癌裸鼠分为3组,二... 目的利用生物素亲和素系统(biotin avidinsystem,BAS)的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子免疫成像的敏感性。方法制备生物素化抗人肝癌细胞单克隆抗体HAb18并测定其生物素化程度及抗原结合活性。20只荷人肝细胞癌裸鼠分为3组,二步法预定位组8只,先静脉注射生物素化单克隆抗体600μg,24h后再给予钆喷替酸葡甲胺链霉亲和素(Gd DTPA streptavidin,Gd DTPA SA);HAb18单克隆抗体Gd DTPA组6只,经尾静脉注射Gd DTPA HAb18;Gd DTPA对照组6只,静脉注射Gd DTPA。对实验动物行MR扫描,测量SET1WI平扫及增强后10、30、60min及3、6、12、24、48h图像内肿瘤的信号强度,绘制信号强度时间曲线,并计算肿瘤强化率及对比度噪声比(contrast to noiseratio,CNR)。结果HAb18单克隆抗体经生物素化后,每个抗体分子平均可结合20个分子生物素,其抗原结合活性约为91%。二步法预定位组内,肿瘤信号强度缓慢升高,增强后第6小时,肿瘤的强化率、CNR达到最大值,与其他两组相比较差异有统计学意义。48h后,肿瘤的强化仍肉眼可辨。单克隆抗体组内,肿瘤表现为缓慢轻度强化,增强后24h的强化率达13.5%,肿瘤信号强度、CNR与平扫比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Gd DTPA对照组内,肿瘤表现为快进快出特点的强化特点。结论二步法预定位技? 展开更多

关键词 预定位技术 二步法 成像研究 裸鼠模型 生物素-亲和素系统 单克隆抗体 HAB18 抗原结合活性 钆喷替酸葡甲胺 强度-时间曲线 DTPA 生物素化 system 信号强度 对比度噪声比 人肝癌细胞 人肝细胞癌 链霉亲和素 尾静脉注射 分子生物素

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钛种植体表面固定生物素的实验研究 被引量：7

7

作者 杜明亮 钱海燕 +1 位作者 吴明月 李全利 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期463-466,共4页

目的利用生物素-亲和素系统,将生物素共价键合在钛基材表面,为钛种植体表面接枝生物活性分子提供新的实验方法。方法使用3-氨丙基膦酸(APP)对钛基材表面进行酸蚀处理并使其获得游离氨基,由碳二亚胺(EDC)介导,通过与羧基反应形成酰胺键... 目的利用生物素-亲和素系统,将生物素共价键合在钛基材表面,为钛种植体表面接枝生物活性分子提供新的实验方法。方法使用3-氨丙基膦酸(APP)对钛基材表面进行酸蚀处理并使其获得游离氨基,由碳二亚胺(EDC)介导,通过与羧基反应形成酰胺键以实现生物素-亲和素系统在钛种植体表面的固定。结果通过环境扫描电镜、傅立叶变换红外光谱、X射线光电子能谱、免疫荧光等检测方法对样品进行表征,证实钛基材表面已成功接枝生物素。结论采用生物素-亲和素系统,可以在氨基化的钛基材表面成功接枝生物素,为钛种植体表面生物化修饰的研究提供新的方法和思路。 展开更多

关键词 钛种植体 3-氨丙基膦酸 生物素-亲和素系统 共价键合

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基于纳米颗粒的赭曲霉毒素A高灵敏酶联免疫检测方法的建立及应用 被引量：7

8

作者 章先 何珂 +4 位作者 黄志伟 单颖 曹统 谢珲 宋厚辉 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期599-609,共11页

赭曲霉毒素(ochratoxins)主要是由青霉菌Penicillium和曲霉菌Aspergillus产生的有毒次级代谢产物,常见于发霉或发酵的农产品中,其中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)毒性最强且最为普遍。OTA是粮食作物和饲料的重要污染物,在加工、储存或... 赭曲霉毒素(ochratoxins)主要是由青霉菌Penicillium和曲霉菌Aspergillus产生的有毒次级代谢产物,常见于发霉或发酵的农产品中,其中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)毒性最强且最为普遍。OTA是粮食作物和饲料的重要污染物,在加工、储存或运输过程中均可产生,具有肾毒性和免疫毒性,可通过蓄积作用发挥毒性效应,对人类和动物健康造成严重威胁。本研究通过将OTA单克隆抗体包被于纳米磁珠(magnetic nanoparticles,MNPs)表面,获得具有免疫活性的磁珠抗体复合物(MNPs-Anti OTA),并制备生物素标记的偶联抗原OTA-BSA-Bio,后续采用链酶亲和素标记的纳米金颗粒(Strep-HRP-AuNPs)催化底物进行信号检测,最终建立了OTA高灵敏检测方法(MNPs-bs-AuNPs-ELISA)。在最优条件下,经计算该方法检测下限(IC10)为0.01ng/mL,检测区间(IC20-IC80)为0.02-0.73ng/mL,半数抑制率(IC50)为0.13ng/mL。与OTA类似物OTB、OTC交叉反应性为4.3%和8.1%,对其他常见真菌毒素AFB1、ZEN、FB1、DON、CIT和PAT均无交叉反应。玉米、面粉和大豆样本中的加标回收率可达85.6%-115.7%,对天然样本中OTA含量的检测结果表明,该方法与LC-MS/MS相关性良好。本研究建立的MNPs-bs-AuNPs-ELISA可满足谷物及饲料样本中OTA的快速、高灵敏度定量检测,成本较低,具有很好的应用前景。 展开更多

关键词 赭曲霉毒素A 纳米磁珠 纳米金 生物素-亲和素系统 定量检测

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量子点标记链霉亲和素荧光免疫分析测定雌三醇 被引量：6

9

作者 钱建瑞 赵艳伟 +2 位作者 梁艳 李立华 王术皓 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期104-107,共4页

以生物素化羊抗兔免疫球蛋白和量子点标记链霉亲和素为荧光探针，采用竞争免疫分析模式，建立了一种灵敏度高、选择性好的检测雌三醇的荧光免疫分析方法。对几种测量参数如温育时间和温度、缓冲溶液pH、试剂浓度等进行了优化；方法的线... 以生物素化羊抗兔免疫球蛋白和量子点标记链霉亲和素为荧光探针，采用竞争免疫分析模式，建立了一种灵敏度高、选择性好的检测雌三醇的荧光免疫分析方法。对几种测量参数如温育时间和温度、缓冲溶液pH、试剂浓度等进行了优化；方法的线性范围为0．01～1000ng/mL，检出限0．0029ng／mL，血清样品加标回收率在91％-117％之间。 展开更多

关键词 量子点 荧光免疫分析 雌三醇 生物素-亲和素系统

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外源性生物素对基于生物素-链霉亲和素化学发光技术干扰的研究进展 被引量：4

10

作者 刘栋 仝慧 +3 位作者 陈斌 张宁 胡健 王晓琴 《现代检验医学杂志》 CAS 2021年第3期161-164,共4页

基于生物素-链霉亲和素系统的化学发光技术被广泛应用,但外源性生物素会对其产生干扰,这种干扰与多种因素相关,如反应模式、检测平台、检测项目和反应体系中的相关要素等。这些因素任何一种发生改变都将对干扰产生不同程度的影响。及时... 基于生物素-链霉亲和素系统的化学发光技术被广泛应用,但外源性生物素会对其产生干扰,这种干扰与多种因素相关,如反应模式、检测平台、检测项目和反应体系中的相关要素等。这些因素任何一种发生改变都将对干扰产生不同程度的影响。及时准确的识别干扰有助于减少临床误诊和漏诊。该文对国内外所报道的影响干扰的因素进行综述,为临床实验室人员提供借鉴。 展开更多

关键词 生物素 生物素-亲和素系统 化学发光免疫分析技术 干扰

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两种甲型肝炎病毒抗原快速检测方法的建立 被引量：4

11

作者 龙润乡 杨蓉 +4 位作者 李华 杨婷 罗芳宇 王俊 谢忠平 《微生物学免疫学进展》 2013年第1期39-41,共3页

目的建立两种甲型肝炎病毒抗原(HAV-Ag)检测试剂盒,并对其检测效果进行评价。方法生物素标记甲型肝炎病毒抗体(HAV-Ab)与辣根过氧化物酶标记亲和素联合应用建立甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法;同时使用辣根过氧化物酶标记HAV-Ab作放大... 目的建立两种甲型肝炎病毒抗原(HAV-Ag)检测试剂盒,并对其检测效果进行评价。方法生物素标记甲型肝炎病毒抗体(HAV-Ab)与辣根过氧化物酶标记亲和素联合应用建立甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法;同时使用辣根过氧化物酶标记HAV-Ab作放大系统建立双抗体夹心甲型肝炎病毒抗原ELISA检测试剂,对比两种检测方法的特异性、灵敏度及实际应用效果。结果用生物素标记甲型肝炎病毒抗体-辣根过氧化物酶标记亲和素作放大系统建立的甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法,较双抗体夹心ELISA检测方法灵敏度高1～2个稀释度;两种检测法均对10余种病毒无交叉,P/N值BA-ELISA检测法较高。结论甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法是一种灵敏度高,特异性好,方便快捷的检测方法,可广泛应用于甲型肝炎病毒研究及临床检测中。而甲型肝炎病毒抗原双抗体夹心ELISA检测法,检测灵敏度适中,操作简单,更适用于甲肝疫苗生产检定。 展开更多

关键词 甲型肝炎病毒 酶联免疫检测 生物素-亲和素系统

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静电吸附法与生物素-亲和素桥联法制备PSMA抗体靶向纳米微泡的对比实验研究 被引量：4

12

作者 李浪 郭燕丽 +2 位作者 张淼 范校周 童海鹏 《临床超声医学杂志》 2013年第12期809-812,共4页

目的比较静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体靶向纳米微泡的物理特性和靶向黏附率。方法分别应用静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备PSMA抗体靶向的纳米微泡,检测其物理性状;光镜下观察两种微泡与前列... 目的比较静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体靶向纳米微泡的物理特性和靶向黏附率。方法分别应用静电吸附法和生物素-亲和素桥联法制备PSMA抗体靶向的纳米微泡,检测其物理性状;光镜下观察两种微泡与前列腺癌细胞LNCaP和C4-2的靶向能力,并与胃癌细胞MKN45对照;对比分析两种靶向纳米微泡的粒径、浓度及与前列腺癌细胞结合能力。结果两种靶向纳米微泡均呈圆形,表面光滑,大小均匀,分散度好,无聚集,粒径均<1000 nm。静电吸附法制备的靶向纳米微泡平均粒径为(702.96±66.65)nm,平均浓度为(3.46±0.30)×108/ml,与前列腺癌细胞LNCaP黏附率(77.2±3.19)%,与C4-2细胞黏附率(61.00±4.47)%;生物素-亲和素桥联法制备的靶向纳米微泡平均粒径为(609.90±37.40)nm,平均浓度约(4.52±0.19)×108/ml,与前列腺癌细胞LNCaP黏附率(96.60±1.14)%,与C4-2细胞黏附率(94.00±1.58)%。两种靶向纳米微泡的粒径、浓度及与前列腺癌细胞黏附率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);与胃癌细胞MKN45均无黏附。结论生物素-亲和素桥联法是一种高效、灵敏、稳定、特异性强的PSMA抗体靶向微泡制备方法,较静电吸附法具有更大的优势。 展开更多

关键词 靶向微泡 前列腺特异性膜抗原 静电吸附法 生物素-亲和素系统

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氯霉素的BAS-时间分辨荧光免疫分析 被引量：3

13

作者 张艺 黄飚 +3 位作者 王柯 张珏 王雪 金坚 《食品科技》 CAS 北大核心 2009年第12期311-314,共4页

采用基于生物素-亲和素系统(BAS)的时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)建立高灵敏的氯霉素(CAP)全自动检测方法。以亲和素包被板,生物素-CAP-OVA与游离CAP竞争限量抗CAP多克隆抗体,用铕标记的羊抗兔IgG示踪。该方法的灵敏度为0.018ng/mL,效... 采用基于生物素-亲和素系统(BAS)的时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)建立高灵敏的氯霉素(CAP)全自动检测方法。以亲和素包被板,生物素-CAP-OVA与游离CAP竞争限量抗CAP多克隆抗体,用铕标记的羊抗兔IgG示踪。该方法的灵敏度为0.018ng/mL,效应点ED20、ED50、ED80分别为0.092、1.339、39.275ng/mL,与甲砜氯霉素、青霉素、诺氟沙星的交叉反应率均小于0.1%,批内和批间的变异系数分别为4.4%和11.8%。向蜂蜜和鸡蛋样品添加0.1～10ng/mL浓度的CAP,平均回收率分别为110.3%和92.8%。检测结果与ELISA试剂盒有良好的相关性。结果表明,CAPBAS-TRFIA法灵敏度高、特异性好、操作简便,适于大样本筛查,有良好的应用前景。 展开更多

关键词 氯霉素 时间分辨荧光免疫分析法 生物素-亲和素系统

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肿瘤导向治疗研究进展 被引量：1

14

作者 孔丽君 王清明 陈惠鹏 《生物技术通讯》 CAS 2002年第6期459-461,465,共4页

特异性地杀伤肿瘤细胞并降低对正常细胞的毒副作用是各种导向治疗方法的共同目标。本文综述了前体药物疗法、免疫毒素、基因疗法、以肿瘤增殖转移过程中的关键分子为靶的导向治疗、生物素-亲和素系统等导向治疗的研究进展。

关键词 肿瘤 导向治疗 研究进展 前体药物 抗体 生物素-亲和素系统 基因治疗 免疫毒素

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生物素-亲和素偶联探针蛋白芯片检测技术 被引量：1

15

作者 于晓波 赵天明 +3 位作者 孙志丹 袁宏坤 何为 许丹科 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期515-520,共6页

自行制备一种新型生物素-亲和素偶联探针分子并用于反相蛋白芯片的检测。首先,将生物素-羊抗鼠IgG与亲和素按照不同比例混合后与鼠IgG蛋白芯片反应,观察荧光信号的放大情况;然后以鼠IgG-羊抗鼠IgG体系为研究模式,对反相蛋白芯片的制备... 自行制备一种新型生物素-亲和素偶联探针分子并用于反相蛋白芯片的检测。首先,将生物素-羊抗鼠IgG与亲和素按照不同比例混合后与鼠IgG蛋白芯片反应,观察荧光信号的放大情况;然后以鼠IgG-羊抗鼠IgG体系为研究模式,对反相蛋白芯片的制备条件进行了考察和优化,包括荧光分子的非特异性吸附、点样缓冲液的选择以及蛋白的活性等。最后,采用此偶联探针对反相蛋白芯片进行了检测。结果表明,BSA缓冲液制备的反相蛋白芯片可以防止非特异性吸附,并有利于保持固定蛋白活性和提高检测限;另外,与传统的与生物素-亲和素检测技术相比,采用生物素-亲和素偶联探针对反相芯片的检测限可以提高4倍左右。表明亲和素-生物素偶联探针成本低、易于合成、并可以与其它的信号放大技术联用进一步提高检测的灵敏度,有望用于蛋白质芯片的检测。 展开更多

关键词 生物素-亲和素系统 信号放大 反相蛋白芯片

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人巨核细胞Mpl受体再分布<英文> 被引量：1

16

作者 张晓泉 杨耀明 +2 位作者 史惠琳 王申五 王德炳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期159-160,共2页

血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是血小板生成的生理性调节因子,其受体Mpl的表达仅限于巨核细胞和血小板系统。从巨核细胞到血小板,二者在形态和功能上发生了非常大的变化。已经证明,巨核细胞生成血小板过程中发生了膜的再分布(membra... 血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是血小板生成的生理性调节因子,其受体Mpl的表达仅限于巨核细胞和血小板系统。从巨核细胞到血小板,二者在形态和功能上发生了非常大的变化。已经证明,巨核细胞生成血小板过程中发生了膜的再分布(membrane redistribution),因此在产生血小板过程中,Mpl数量和分布的变化势必影响TPO在巨核细胞生成中的作用和代谢。为此,我们对正常人巨核细胞Mpl的分布做了系统观察。 展开更多

关键词 血小板生成素 MPL 巨核细胞造血 生物素-亲和素系统

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应用生物素标记和蛋白质组学方法分离鉴定柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi)的表面蛋白 被引量：2

17

作者 赵唯希 王林玲 +2 位作者 刘泽锋 周泽扬 李治 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期669-676,共8页

建立灵敏、特异、稳定的柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi)表面蛋白分离鉴定技术,对研究其侵染机制和早期检测技术非常重要。采用生物素Sulfo-NHS-SS-biotin能特异性标记柞蚕微孢子虫的表面蛋白;经生物素标记后的微孢子虫用0.01 mol/L NaOH和... 建立灵敏、特异、稳定的柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi)表面蛋白分离鉴定技术,对研究其侵染机制和早期检测技术非常重要。采用生物素Sulfo-NHS-SS-biotin能特异性标记柞蚕微孢子虫的表面蛋白;经生物素标记后的微孢子虫用0.01 mol/L NaOH和2%SDS的混合液裂解结合超声波破碎的方法能提取到更多的微孢子虫总蛋白质;用30%乙腈和70%甲酸配合沸水浴处理可有效洗脱微孢子虫表面蛋白。对得到的柞蚕微孢子虫表面蛋白检测样品进行LC-MS/MS质谱鉴定,共获得了8个假定的表面蛋白,其中分子质量为26.6 k D(Np SWP12)、25.7 k D(Np SWP26)、32.0 kD(Np SWP30)的3个假定蛋白经间接免疫荧光分析确证为定位在孢子表面的蛋白质。序列分析显示,NpSWP12、NpSWP26、NpSWP30与家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)孢壁蛋白NbSWP12、NbSWP26、NbSWP30的氨基酸序列相似度分别为100%、93%、79%,其中Np SWP26无N-糖基化位点和O-糖基化位点,但C端具有介导孢子粘附宿主细胞的肝素结合基序。分离鉴定的3个表面蛋白可以作为柞蚕微孢子虫侵染机制研究和早期检测的靶标蛋白。 展开更多

关键词 柞蚕微孢子虫 表面蛋白 生物素-亲和素系统 液相色谱-二级质谱连用 间接免疫荧光定位

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生物素衍生化环孢素A的合成及其与人亲环素A的相互作用研究 被引量：1

18

作者 江辉 麻锦彪 +3 位作者 朱向明 惠永正 吴厚铭 陈海宝 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1745-1750,共6页

通过ε-氨基己酸二聚体的乙酯与生物素缩合将其羧端延伸14个原子,然后与氨基衍生化的环孢素A缩合合成了生物素衍生化的环孢素A.经过药物免疫印迹和表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance)测定表明生物素衍生化的环孢素A还保留了... 通过ε-氨基己酸二聚体的乙酯与生物素缩合将其羧端延伸14个原子,然后与氨基衍生化的环孢素A缩合合成了生物素衍生化的环孢素A.经过药物免疫印迹和表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance)测定表明生物素衍生化的环孢素A还保留了与人亲环素A结合的活力. 展开更多

关键词 环孢素A 生物素-亲和素系统 人亲环素A 药物免疫印迹 表面等离子体共振 相互作用 免疫抑制剂

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生物素-亲和素系统在MR靶向成像中的应用 被引量：1

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作者 刘岘 许乙凯 叶靖 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第10期1130-1132,共3页

目的探讨利用生物素-亲和素系统的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子成像的敏感性。方法制备生物素化HAb18单克隆抗体并测定其生物素化程度及抗原结合活性。将8只荷人肝细胞癌裸鼠静脉注射生物素化单克隆抗体600 μg,24 h后腹腔注... 目的探讨利用生物素-亲和素系统的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子成像的敏感性。方法制备生物素化HAb18单克隆抗体并测定其生物素化程度及抗原结合活性。将8只荷人肝细胞癌裸鼠静脉注射生物素化单克隆抗体600 μg,24 h后腹腔注射80 μg 亲和素,30 min后再静脉给予Gd-DTPA-链霉亲和素。对实验动物行MR扫描,测量SE T1WI平扫及增强后10、30 min及2、6、12、24 h图像内肿瘤、肝脏、肌肉的信号强度,绘制信号强度-时间曲线,并计算其强化率及对比度噪声比。结果HAb18单克隆抗体经生物素化后,每个抗体分子平均可结合20个分子生物素,其抗原结合活性约为91%。增强后肿瘤信号强度缓慢升高,在注射对比剂后第6小时,肿瘤的强化率、比度噪声比达到最大值,与其他各时间点有显著性差异。肝脏在注射对比剂后第6小时的信号强度达到最高,而后信号强度下降,增强后12 h的信号强度与平扫相似。肌肉表现为轻度强化,增强后各时间点的信号强度与平扫相比无明显差异。结论利用生物素-亲和素技术对肿瘤进行MR靶向成像,具有特异性强化作用并能延长肿瘤的强化时间,但Gd-DTPA-SA的血池效应也造成了肝脏的持续强化。 展开更多

关键词 生物素-亲和素系统 链霉亲和素 磁共振成像 单克隆抗体

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促甲状腺激素生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法的建立 被引量：1

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作者 李丽波 刘一兵 +4 位作者 官国英 姚焱 刘中瑞 侯惠仁 梁瑞鹏 《标记免疫分析与临床》 CAS 2013年第1期31-35,共5页

目的建立一种低成本、高灵敏度的检测血清促甲状腺激素(TSH)的生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法。方法引入生物素-亲和素放大系统,一株抗TSH的单克隆抗体包被微孔板,另一株标记生物素,辣根过氧化物酶标记链亲和素,鲁米诺作为发光... 目的建立一种低成本、高灵敏度的检测血清促甲状腺激素(TSH)的生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法。方法引入生物素-亲和素放大系统,一株抗TSH的单克隆抗体包被微孔板,另一株标记生物素,辣根过氧化物酶标记链亲和素,鲁米诺作为发光底物,采用夹心法,建立TSH酶促化学发光免疫分析方法。结果方法分析灵敏度为0.01mIU/L,批内变异系数为2.01%～5.40%,批间变异系数为2.96%～17.9%,回收率为90.6%～114.4%,高值促甲状腺激素血清样品经系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性关系,相关系数大于0.99,与原子高科TSH免疫放射分析方法和罗氏电化学发光分析法的测定值具有良好的相关性。结论生物素-亲和素TSH酶促化学发光免疫分析方法具有成本低、灵敏度高、特异性高和稳定性好的特点,具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 促甲状腺激素 链亲和素化酶 生物素-亲和素系统 鲁米诺 酶促化学发光免疫分析

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