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泡球蚴持续感染对小鼠肝脏纤维化的影响 被引量:8
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作者 高海军 庞华胜 +5 位作者 孙旭冬 张颋 景涛 王晓玲 莫筱瑾 胡薇 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期54-61,共8页
目的评价泡球蚴持续感染对小鼠肝脏纤维化的影响,为研究泡型棘球蚴病肝纤维化进展及其治疗方法提供参考。方法以泡球蚴感染长爪沙鼠血清(25、50、100μL)和泡球蚴及其生发层细胞、原头节分别对肝星状HSC-T6和LX-2细胞进行体外刺激48 h,... 目的评价泡球蚴持续感染对小鼠肝脏纤维化的影响,为研究泡型棘球蚴病肝纤维化进展及其治疗方法提供参考。方法以泡球蚴感染长爪沙鼠血清(25、50、100μL)和泡球蚴及其生发层细胞、原头节分别对肝星状HSC-T6和LX-2细胞进行体外刺激48 h,采用CCK-8法检测细胞增殖,应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测HSC-T6细胞培养上清中Ⅰ型胶原蛋白(collagen 1,Col1)和α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达量。收集泡球蚴感染1、2、4、6、8个月小鼠血清和肝脏,分别采用ELISA法检测血清中Col1和α-SMA含量,采用天狼猩红染色法动态观察肝脏胶原纤维沉积情况。结果泡球蚴感染沙鼠血清体外可诱导HSC-T6和LX-2细胞增殖,不同血清剂量组细胞增殖率差异均有统计学意义(FHSC-T6=126.50、FLX-2=201.50,P均<0.05);其中100μL血清对HSC-T6和LX-2细胞促增殖率最高,HSC-T6和LX-2细胞增殖率分别为(573.36±206.34)%和(940.38±61.65)%。泡球蚴感染沙鼠血清体外刺激后,HSC-T6细胞培养上清中Col1和α-SMA蛋白含量均上升;且以100μL血清刺激后Col1和α-SMA含量最高,分别为(20.99±2.01)ng/m L和(305.52±16.67)pg/mL。泡球蚴及其生发层细胞、原头节均可体外诱导HSC-T6和LX-2细胞增殖,增殖率分别为(142.65±9.17)%和(189.99±7.75)%、(118.55±8.96)%和(122.54±0.21)%、(156.34±17.45)%和(160.59±31.41)%,不同刺激组细胞增殖率差异均有统计学意义(FHSC-T6=11.24、FLX-2=47.72,P均<0.05);泡球蚴及其生发层细胞、原头节刺激后,HSC-T6细胞培养上清中Col1和α-SMA含量均增高;且以泡球蚴作用最为明显,Col1和α-SMA含量分别为(4.43±2.23)ng/mL和(285.20±90.67)pg/mL。泡球蚴感染后1~8个月,小鼠肝脏中胶原纤维沉积持续增加;小鼠血清中Col1水平在感染后6个月达最高,为(280.26±23.04)ng/mL;α-SMA水平在感染后8个月达最高,为(33.68±4.45)ng/mL。结论泡球蚴持续感染可促进肝� 展开更多
关键词 泡球蚴 肝星状细胞 胶原纤维 原头节 生发细胞
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细粒棘球蚴生发层细胞的体外培养 被引量:8
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作者 刘金明 王爱华 +1 位作者 顾惠明 陈燕军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期36-38,共3页
将分散的绵羊源细粒棘球蚴生发层细胞在5%CO2、37℃恒温箱中进行连续传代培养,细胞培养液为RPMI1640完全培养基,细胞支持物在1~14代时交替为24孔细胞培养板和用胶原蛋白包被的24孔细胞培养板,14代后仅为2... 将分散的绵羊源细粒棘球蚴生发层细胞在5%CO2、37℃恒温箱中进行连续传代培养,细胞培养液为RPMI1640完全培养基,细胞支持物在1~14代时交替为24孔细胞培养板和用胶原蛋白包被的24孔细胞培养板,14代后仅为24孔细胞培养板。细胞经40~45d传代培养(8代)后增殖缓慢。12代开始至25代止,各孔细胞又逐步转变成快速增殖细胞,第26代细胞在对数增长期内的倍增时间约为24h。这一细胞增殖速率持续至34代后约有减缓。传代增殖细胞呈小点形、圆形和椭圆形,大部分行悬浮生长。行贴壁生长的细胞经长期培养后融合成合胞体。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 生发细胞 体外培养
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棘球蚴细胞系(株)的培育及其在免疫预防中的应用研究 Ⅰ.人源细粒棘球蚴细胞的培养 被引量:4
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作者 陆家海 郭中敏 +5 位作者 李德昌 郭固 张守竹 冯德元 程维新 陈启军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期473-474,共2页
用外科方法从临床确诊的细粒棘球蚴病人肝脏取出包囊,以生发层为培养材料,采用RPMI1640、199、改良伊格水解乳蛋白培养基,用胶原蛋白包被和不包被两种培养瓶,对细粒棘球蚴生发层细胞进行初培养,并进行了对比观察。结果... 用外科方法从临床确诊的细粒棘球蚴病人肝脏取出包囊,以生发层为培养材料,采用RPMI1640、199、改良伊格水解乳蛋白培养基,用胶原蛋白包被和不包被两种培养瓶,对细粒棘球蚴生发层细胞进行初培养,并进行了对比观察。结果显示,以胶原蛋白作为支撑条件,应用改良伊格水解乳蛋白培养基培养生发层细胞的效果优于其他,并已传7代,原代培养时间需要28~45d才能传代,3代以内细胞为多形态性。 展开更多
关键词 棘球蚴 人源细粒棘球蚴 生发细胞 细胞培养
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土荆皮乙酸的抗多房棘球蚴作用及其机制研究
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作者 陈青 达哇卓玛 +1 位作者 刘川川 樊海宁 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2024年第6期695-705,共11页
目的探讨土荆皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)体外对原头节细胞凋亡的影响,以及体内对病灶-宿主微环境组织中血管生成和细胞凋亡的调节作用及其可能机制,为临床开发多房棘球蚴病新型替代药物提供依据。方法体外实验:原头节、囊泡、生发... 目的探讨土荆皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)体外对原头节细胞凋亡的影响,以及体内对病灶-宿主微环境组织中血管生成和细胞凋亡的调节作用及其可能机制,为临床开发多房棘球蚴病新型替代药物提供依据。方法体外实验:原头节、囊泡、生发层细胞、人包皮成纤维细胞(human foreskin fibroblasts,HFFs)和正常人肝细胞经不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、80、160和320μmol/L)的PAB分别处理7、5、5、5、5 d后,评价原头节存活率、囊泡磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)释放水平、生发层细胞活力及HFFs和正常人肝细胞活力;原头节和囊泡经2.5%戊二醛固定后用于扫描电镜和透射电镜观察。动物实验:从保种沙鼠腹腔病灶中分离原头节,然后腹腔注射感染18只C57BL/6J小鼠建立模型,随机分为3组,每组6只:模型组(Model组)每日给予0.3 mL PBS缓冲液灌胃;阿苯达唑(albendazole,ABZ)组每日给予0.3 mL ABZ(100 mg/kg)灌胃;PAB组每日予以0.3 mL PAB(40 mg/kg)灌胃。连续灌胃6周后,取病灶-宿主微环境组织,采用ELISA法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)和半胱氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase3,caspase3)的表达水平,采用生化检测试剂盒检测一氧化氮(nitric oxide,NO)的表达水平,采用Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(BCL2-associated X protein、Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl2)、caspase3、活化caspase3(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase3,cleaved-caspase3)、VEGF、血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、磷脂肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、磷酸化PI3K(phosphorylated phosphatidylinositol 3 kinase,p-PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)及磷酸化AKT(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)蛋白的表达水平。结果体外实验:体外� 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 土荆皮乙酸 原头节 囊泡 生发细胞 细胞凋亡 血管生成 磷脂肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路
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他克林体外抗细粒棘球蚴作用研究 被引量:3
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作者 刘丛珊 尹建海 +3 位作者 姚嘉青 薛剑 陶奕 张皓冰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期608-612,共5页
目的研究乙酰胆碱酯酶抑制剂他克林体外抗细粒棘球蚴的作用效果。方法体外分离和培养细粒棘球蚴原头节和生发层细胞,经浓度为4、8、10、20和40μg/mL的他克林作用3d后经0.1%亚甲基蓝染色观察,记录死活原头节的数目以计算原头节死亡率,... 目的研究乙酰胆碱酯酶抑制剂他克林体外抗细粒棘球蚴的作用效果。方法体外分离和培养细粒棘球蚴原头节和生发层细胞,经浓度为4、8、10、20和40μg/mL的他克林作用3d后经0.1%亚甲基蓝染色观察,记录死活原头节的数目以计算原头节死亡率,另外用CCK-8试剂盒检测药物对生发层细胞活性的影响并计算细胞活性抑制率。同时用透射电镜和扫描电镜分别观察药物对细粒棘球蚴原头节和生发层细胞超微结构造成的影响。结果经20μg/mL和40μg/mL的他克林体外作用3d后,原头节的死亡率高达100%,其中死亡原头节的体壁出现轻微肿胀且伴随着外部轮廓的消失,同时超微结构亦发生明显改变,原头节体壁组织中出现了大量的空泡和脂肪滴。当他克林浓度为40μg/mL时,可造成生发层细胞全部死亡。细粒棘球蚴生发层细胞粘附于培养介质的基质消失、细胞发生聚集且数目减少。扫描电镜可观察到他克林作用3d后的细胞出现塌陷或者萎缩。结论他克林可直接影响体外培养的细粒棘球蚴原头节和生发层细胞的活性,是潜在的包虫病治疗药物。 展开更多
关键词 他克林 细粒棘球蚴 原头节 生发细胞
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兔胫骨骨膜下注射转化生长因子(TGF)β1和β2促进骨膜生发层细胞增殖的研究 被引量:2
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作者 荆立忠 胡跃林 +1 位作者 郭秦炜 张继英 《中国微创外科杂志》 CSCD 2012年第9期848-851,共4页
目的研究向胫骨骨膜下单次注射转化生长因子(TGF)β1和β2后成年大白兔骨膜生发层细胞组织学的变化,探讨生长因子促进骨膜生发层细胞增殖的效果。方法 4月龄新西兰大白兔22只,分为3组,分别向两侧胫骨近端内侧骨膜下注射Tris溶液(对照组... 目的研究向胫骨骨膜下单次注射转化生长因子(TGF)β1和β2后成年大白兔骨膜生发层细胞组织学的变化,探讨生长因子促进骨膜生发层细胞增殖的效果。方法 4月龄新西兰大白兔22只,分为3组,分别向两侧胫骨近端内侧骨膜下注射Tris溶液(对照组)(6只)、40 ng TGFβ1(8只)、40 ng TGFβ2(8只),2个实验组均于2个相距5 mm的部位分别注射20 ng。于术后第3、5、7及10天取材。标本均进行HE染色,对生发层厚度以及细胞密度进行观察测量及统计学分析。结果各组不同时间点生发层厚度比较,对照组注射后各时间点差异无显著性(P>0.05);注射后第5天,TGFβ1组生发层厚度(73±10)μm和TGFβ2组生发层厚度(112±13)μm较第3天明显增加;两实验组最大厚度(117±26)μm、(130±19)μm均出现在注射后第7天(P<0.05),注射后第10天与第3天差异无显著性(P>0.05)。同时间点3组间生发层厚度比较,注射后第3天、第10天差异无显著性(P>0.05);注射后第5天、第7天TGFβ1和TGFβ2组均明显高于对照组,且注射后第5天TGFβ2组厚度(112±13)μm明显大于TGFβ1组(73±10)μm(P=0.017)。细胞密度比较,3组注射后不同时间点以及3组间差异均无显著性(P>0.05)。结论单次骨膜下注射TGFβ1和TGFβ2均能一过性促进成年新西兰大白兔骨膜生发层细胞增殖。相比于TGFβ1,TGFβ2促进成年兔骨膜生发层细胞增殖效应较强。 展开更多
关键词 骨膜 生发细胞 转化生长因子 组织学
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氨基醇咔唑化合物BTB3体外抗细粒棘球蚴效果的评价 被引量:1
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作者 刘丛珊 张皓冰 +2 位作者 薛剑 陶奕 胡薇 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期245-248,254,共5页
目的观察氨基醇咔唑化合物BTB3体外抗细粒棘球蚴的效果。方法体外培养羊源细粒棘球蚴原头节和继发感染小鼠来源的生发层细胞,用浓度为1、2、4、8、10和20μg/ml的BTB3作用3 d后,分别采用美兰染色法和CCK-8法检测原头节和生发层细胞的活... 目的观察氨基醇咔唑化合物BTB3体外抗细粒棘球蚴的效果。方法体外培养羊源细粒棘球蚴原头节和继发感染小鼠来源的生发层细胞,用浓度为1、2、4、8、10和20μg/ml的BTB3作用3 d后,分别采用美兰染色法和CCK-8法检测原头节和生发层细胞的活性。用扫描电镜观察10μg/ml BTB3对生发层细胞造成的损伤。体外培养细粒棘球蚴囊,用浓度为1、5和10μg/ml的BTB3作用2周后,观察其对囊的影响,并用扫描电镜观察囊内部结构的变化。结果 10μg/ml和20μg/ml BTB3组原头节的死亡率分别为(100.0±0.0)%和(85.2±7.2)%。但当浓度降低后,原头节死亡率均低于10%。生发层细胞经8、10和20μg/ml BTB3作用后,其细胞活性抑制率均达100%,其余低浓度BTB3组的抑制率随浓度的降低而降低。扫描电镜观察发现,BTB3可使生发层细胞发生脱落、皱缩以及空腔化。10μg/ml BTB3作用于棘球蚴囊14 d后,全部囊均出现塌陷。其超微结构显示,BTB3作用后棘球蚴内囊中出现了细胞脱落和不均匀的现象。结论 BTB3对体外培养的细粒棘球蚴原头节、生发层细胞和棘球蚴囊均有较强的作用,是一种潜在的抗棘球蚴药物。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 原头节 生发细胞 棘球蚴囊 氨基醇咔唑化合物
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中药验方APD-10治疗包虫病的临床观察
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作者 李永祥 王月琴 +3 位作者 尹铁飞 张辉 刘振中 潘晓玲 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期178-180,共3页
目的 探讨中药验方APD 10治疗包虫病的疗效及机理。方法 对确诊的 12 0例包虫病患者经口服APD 10煎剂后 ,对治疗前后的各项临床指标与术后病理检查结果进行对比。结果 服药后症状、体征减轻 ,62例服药 90d临床治愈 ,42例服药 12 0 15... 目的 探讨中药验方APD 10治疗包虫病的疗效及机理。方法 对确诊的 12 0例包虫病患者经口服APD 10煎剂后 ,对治疗前后的各项临床指标与术后病理检查结果进行对比。结果 服药后症状、体征减轻 ,62例服药 90d临床治愈 ,42例服药 12 0 15 0d临床治愈 ,16例有效。治疗后B超、肺部X线片及病理检查均显示囊壁变性皱缩 ,囊壁纤维层断裂 ,角质层厚薄不均 ,生发层细胞浊肿明显 ,囊腔内有大量坏死物质。结论 用APD 展开更多
关键词 中药验方 临床观察 临床治愈 包虫病患者 肺部X线片 生发细胞 检查结果 术后病理 临床指标 治疗前后 病理检查 服药后 治疗后 纤维 囊壁
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素质教育题型的设计
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作者 陈邦强 《中学生物教学》 1997年第2期44-45,共2页
素质教育题型的设计贵州绥阳儒溪中学(563305)陈邦强本人已从事素质教育一年有余,在大胆探索教学方法的基础上,进一步探讨了素质教育的题型设计,下面就是1套我校初二生物中期考试的素质教育题型,现介绍给同行供参考。一、... 素质教育题型的设计贵州绥阳儒溪中学(563305)陈邦强本人已从事素质教育一年有余,在大胆探索教学方法的基础上,进一步探讨了素质教育的题型设计,下面就是1套我校初二生物中期考试的素质教育题型,现介绍给同行供参考。一、选择题:(注:括号内为参考答案)1... 展开更多
关键词 素质教 骨骼肌 贵州绥阳 电刺激 动脉血管 人体皮肤 教学方法 胸锁乳突肌 生发细胞 次结构
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