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琼胶寡糖鉴定方法的研究进展 被引量:6
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作者 张伟宾 刘丹 +2 位作者 许竞男 于文功 路新枝 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2017年第6期96-102,共7页
琼胶的主要成分琼脂糖,是由β-D-半乳吡喃糖和3,6-内醚-α-L-半乳吡喃糖通过α(1→3)和β(1→4)糖苷键交替形成的线性多糖。琼胶寡糖是琼胶多糖的降解产物,分为琼寡糖和新琼寡糖,其中琼寡糖是α-琼胶酶或酸水解形成的以3,6-内醚-α-L-... 琼胶的主要成分琼脂糖,是由β-D-半乳吡喃糖和3,6-内醚-α-L-半乳吡喃糖通过α(1→3)和β(1→4)糖苷键交替形成的线性多糖。琼胶寡糖是琼胶多糖的降解产物,分为琼寡糖和新琼寡糖,其中琼寡糖是α-琼胶酶或酸水解形成的以3,6-内醚-α-L-半乳吡喃糖为还原端、β-D-半乳吡喃糖为非还原端的寡糖产物,而β-琼胶酶降解琼胶的产物是以β-D-半乳吡喃糖为还原端的新琼寡糖。对琼胶寡糖类型的判断是琼胶酶分类鉴定的主要依据之一,本文综述了利用核磁、质谱、薄层层析和生物降解鉴定琼胶寡糖的方法和依据,为后续研究琼胶酶的分类提供了技术支持与理论依据。 展开更多
关键词 寡糖 寡糖 核磁 质谱 薄层层析
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不同聚合度琼寡糖对肝细胞内外抗氧化活性的影响 被引量:6
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作者 陈海敏 马红辉 +2 位作者 郑立 林伟 严小军 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期253-258,共6页
通过研究不同聚合度琼寡糖对肝细胞的内外抗氧化活性的影响,对琼寡糖聚合度与活性间的关系进行了评价。利用二苯基苦味酰肼自由基(DPPH·)检测方法研究了琼寡糖的细胞外抗氧化活性,结果表明,琼六糖具较高的淬灭自由基活性的能力。... 通过研究不同聚合度琼寡糖对肝细胞的内外抗氧化活性的影响,对琼寡糖聚合度与活性间的关系进行了评价。利用二苯基苦味酰肼自由基(DPPH·)检测方法研究了琼寡糖的细胞外抗氧化活性,结果表明,琼六糖具较高的淬灭自由基活性的能力。采用二氯荧光素检测方法(DCF)细胞内的活性,结果与细胞外的活性结果相吻合,并抑制H2O2所造成的细胞氧化损伤及死亡。通过选用五种聚合度的琼胶寡糖,研究了其抗氧化活性,从细胞内、外两个水平说明琼六糖均有良好的清除自由基活性的能力,进一步证实琼寡糖的抗氧化作用较强。 展开更多
关键词 寡糖 抗氧化 DPPH DCF 肝细胞
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琼寡糖的制备及其体内抗氧化活性的研究 被引量:4
3
作者 陈海敏 朱鹏 严小军 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2005年第3期29-32,共4页
目的探讨琼寡糖的制备方法以及它们在体内的抗氧化作用。方法采用活性炭柱对琼寡糖进行纯化,并观察其对四氯化碳诱导大鼠的氧化损伤的抵抗作用。结果5%和8%乙醇洗脱组分含高纯度的琼二糖,10%和15%洗脱组分中含大量的琼四糖和琼六糖,而... 目的探讨琼寡糖的制备方法以及它们在体内的抗氧化作用。方法采用活性炭柱对琼寡糖进行纯化,并观察其对四氯化碳诱导大鼠的氧化损伤的抵抗作用。结果5%和8%乙醇洗脱组分含高纯度的琼二糖,10%和15%洗脱组分中含大量的琼四糖和琼六糖,而高聚合度的琼寡糖主要出现在25%的洗脱组分中。体内实验发现,琼寡糖能够显著提高SOD,GSHPx活性,并降低MDA,GPT,GOT水平。在腹腔注射琼寡糖400mg·kg-1时,肝和心脏中的MDA含量显著降低,肝和血清中的SOD和GSHPx活性达到最高。结论本文利用活性炭对不同聚合度寡糖的吸附能力不同、分离容量大等特点对琼寡糖进行纯化,使各种聚合度寡糖的纯度得到很大提高,并通过动物实验证实了琼寡糖的体内抗氧化活性。 展开更多
关键词 寡糖 抗氧化 活性炭 四氯化碳
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小鼠粪便中短链脂肪酸提取与检测方法的建立及应用 被引量:13
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作者 王彩 高培鑫 +2 位作者 许竞男 于文功 路新枝 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第6期1012-1015,1032,共5页
目的:建立小鼠粪便中三种短链脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸)的检测方法及其应用。方法:使用水提法和乙醚萃取法提取小鼠粪便中的短链脂肪酸(SCFA)通过高效液相色谱(HPLC)评价两种方法的提取效果,并建立短链脂肪酸的HPLC定量检测方法并进行... 目的:建立小鼠粪便中三种短链脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸)的检测方法及其应用。方法:使用水提法和乙醚萃取法提取小鼠粪便中的短链脂肪酸(SCFA)通过高效液相色谱(HPLC)评价两种方法的提取效果,并建立短链脂肪酸的HPLC定量检测方法并进行方法学考察,利用上述建立的体系评价新琼寡糖对小鼠短链脂肪酸合成的影响。结果:确定了SCFA的乙醚萃取方法和基于HPLC的定量检测方法,被测组分浓度与其峰面积呈良好线性关系,各组分测定的相对标准偏差在1.31%~2.61%之间,平均加标回收率为86.6%~105.8%之间;对喂饲新琼寡糖小鼠粪便中的SCFA检测显示,较对照组乙酸和丙酸含量提高了1倍,丁酸含量提高了0.45倍。结论:建立了小鼠粪便中SCFA的提取和定量检测方法,并利用该方法证明了新琼寡糖能促进小鼠短链脂肪酸的合成。 展开更多
关键词 短链脂肪酸 高效液相色谱法 液-液萃取 寡糖
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新琼寡糖对小鼠B16细胞黑色素合成的影响 被引量:9
5
作者 吴倩倩 傅晓妍 +1 位作者 路新枝 于文功 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第11期2010-2012,共3页
目的:通过测定新琼寡糖对小鼠B16细胞黑色素合成的影响,研究新琼寡糖是否具有美白性能。方法:以小鼠B16黑素细胞作为受试细胞。选择曲酸和熊果苷为阳性对照物,测定不同聚合度的A、B系列新琼寡糖对细胞增殖、细胞内酪氨酸酶活性以及细胞... 目的:通过测定新琼寡糖对小鼠B16细胞黑色素合成的影响,研究新琼寡糖是否具有美白性能。方法:以小鼠B16黑素细胞作为受试细胞。选择曲酸和熊果苷为阳性对照物,测定不同聚合度的A、B系列新琼寡糖对细胞增殖、细胞内酪氨酸酶活性以及细胞内黑色素合成的影响,对不同聚合度的A、B系列新琼寡糖美白性能进行了初步评价。结果:A、B系列新琼寡糖对B16黑素细胞具有低毒性,半数抑制浓度IC50约为3000μg/L。低聚合度的A系列新琼寡糖对细胞内酪氨酸酶的抑制作用较为平稳,抑制率大约为20%,低于曲酸但与熊果苷接近;高聚合度的B系列新琼寡糖对酪氨酸酶抑制作用不明显。在低浓度下B系列新琼寡糖对黑色素合成的抑制作用高于A系列新琼寡糖,与熊果苷接近。结论:提示了A、B系列新琼寡糖可直接作用于黑素细胞,具有抑制黑色素生成的功效,具有较好的应用和开发前景。 展开更多
关键词 寡糖 小鼠B16黑素细胞 酪氨酸酶活性 黑色素合成
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海洋紫色杆菌β-琼胶酶的分离纯化及性质 被引量:8
6
作者 时岩玲 于文功 路新枝 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期497-502,共6页
从青岛近海海水中分离得到一株高产琼胶酶的海洋紫色杆菌SY12.紫色杆菌SY12的发酵液上清经硫酸铵沉淀,凝胶过滤层析,离子交换层析和凝胶过滤层析等蛋白纯化步骤,得到纯化的野生琼胶酶AgaY.琼胶酶纯化了133.63倍,酶比活力为320.7 U/mg;... 从青岛近海海水中分离得到一株高产琼胶酶的海洋紫色杆菌SY12.紫色杆菌SY12的发酵液上清经硫酸铵沉淀,凝胶过滤层析,离子交换层析和凝胶过滤层析等蛋白纯化步骤,得到纯化的野生琼胶酶AgaY.琼胶酶纯化了133.63倍,酶比活力为320.7 U/mg;纯化的琼胶酶经SDS-PAGE检测,显示为单一条带,其相对分子质量约为50×103.研究结果表明琼胶酶AgaY降解琼脂糖的β-1,4-糖苷键,其主要产物为新琼四糖和新琼二糖.对AgaY进行酶学性质研究,发现其最适反应pH为7.0,最适反应温度为40℃;Hg2+,Ag+,Zn2+,Cu2+和Pb2+等金属离子可以显著的抑制琼胶酶AgaY的活力.研究发现,AgaY的催化活性不依赖于离子的存在,AgaY对EDTA不敏感. 展开更多
关键词 紫色杆菌 Β-胶酶 分离纯化 寡糖
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新琼寡糖对保加利亚乳杆菌的促生长作用研究 被引量:6
7
作者 陈虹 梅建凤 应国清 《食品科技》 CAS 北大核心 2014年第12期24-27,共4页
用来源于类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)的β-琼胶酶水解琼胶制备寡糖,经过活性炭脱盐和去杂后,寡糖的主要组分为新琼四糖和新琼六糖。新琼寡糖对保加利亚乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)的生长有显著的促进作用,MR... 用来源于类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)的β-琼胶酶水解琼胶制备寡糖,经过活性炭脱盐和去杂后,寡糖的主要组分为新琼四糖和新琼六糖。新琼寡糖对保加利亚乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)的生长有显著的促进作用,MRS培养基中添加浓度为10 g/L的新琼寡糖,与对照相比,保加利亚乳杆菌的生长量提高了77.6%,即使新琼寡糖浓度高达100 g/L时,也不会对保加利亚乳杆菌的生长产生抑制;体外实验表明,新琼寡糖不会被人体唾液淀粉酶消化。新琼寡糖的这些特性表明其具有作为益生元在食品工业中的应用价值。 展开更多
关键词 Β-胶酶 寡糖 益生元 保加利亚乳杆菌
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新琼寡糖作为免疫增强剂在鲍鱼养殖中的应用 被引量:6
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作者 刘春娇 蔡俊鹏 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2012年第11期1508-1511,1522,共5页
采用一种活性新琼寡糖作为免疫增强剂,通过在饲料中添加不同含量的新琼寡糖(分别为饲料重量的0.1%,0.5%,1%,1.5%和30%),以血清溶菌酶活力、血清补体活性及白细胞总数和白细胞吞噬率为判断依据,确定新琼寡糖对于鲍鱼非... 采用一种活性新琼寡糖作为免疫增强剂,通过在饲料中添加不同含量的新琼寡糖(分别为饲料重量的0.1%,0.5%,1%,1.5%和30%),以血清溶菌酶活力、血清补体活性及白细胞总数和白细胞吞噬率为判断依据,确定新琼寡糖对于鲍鱼非特异性免疫力的影响;同时用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)对各组鲍鱼进行细菌感染试验,测定鲍鱼存活率,以确定新琼寡糖对鲍鱼抗病力的影响。结果表明:投喂新琼寡糖组的鲍鱼的血清溶菌酶活力、血清补体活性及血液白细胞总数和吞噬率均明显高于对照组,且新琼寡糖的最佳投喂量为饲料重量的0.5%~1%。细菌感染试验结果显示,在细菌感染72h后,对照组鲍鱼的存活率最低,仅为42%,而新琼寡糖投喂细鲍鱼的存活率均达到58%以上,且最高可达到79%。 展开更多
关键词 寡糖 九孔鲍 免疫增强剂 非特异性免疫
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一株转化琼胶为新琼寡糖菌株的筛选及鉴定 被引量:3
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作者 韩军萍 黄雅燕 +1 位作者 叶静 肖美添 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1126-1132,共7页
【目的】筛选一株可以将琼胶转化为新琼寡糖的菌株,并对该菌株进行鉴定。【方法】从紫菜生长区域采集紫菜和该区域海水,用含1‰琼胶的培养基富集培养,逐级稀释涂布、平板划线进行初筛,液体培养进行复筛,DNS法测定琼胶降解产物中还原糖... 【目的】筛选一株可以将琼胶转化为新琼寡糖的菌株,并对该菌株进行鉴定。【方法】从紫菜生长区域采集紫菜和该区域海水,用含1‰琼胶的培养基富集培养,逐级稀释涂布、平板划线进行初筛,液体培养进行复筛,DNS法测定琼胶降解产物中还原糖的含量。通过16S r DNA序列分析,结合菌体形态、菌落特征及生理生化特性,确立该菌的系统发育学地位。【结果】从紫菜振荡液中筛选出一株可以产琼胶酶的菌株HJPHYXJ-1,该菌属于革兰氏阴性菌,16S r DNA序列同源性与需钠弧菌(Vibrio natriegens)的达到了99%,结合形态特征和生理生化实验结果鉴定该菌为需钠弧菌。HPLC法测定酶解产物为新琼寡糖。【结论】HJPHYXJ-1被筛选用于转化琼胶,酶解产物的聚合度在2-12之间,是以二糖为单位的新琼寡糖,该菌产生的酶为β-琼胶酶。 展开更多
关键词 寡糖 酶解 需钠弧菌
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新琼寡糖对多头切花月季“爱丽丝”保鲜效果的影响 被引量:1
10
作者 万艳玲 温超 +2 位作者 龚林锋 曾翰庭 王成鹏 《安徽农业科学》 CAS 2023年第17期154-157,共4页
为探究新琼寡糖对多头月季切花的保鲜效应,以蒸馏水和10 g/L蔗糖为对照,添加100 mg/L新琼寡糖为处理液,对多头切花月季“爱丽丝”进行瓶插保鲜处理,并测定瓶插期间的花径、鲜重、水分平衡和瓶插寿命等指标。结果表明,与对照相比,100 mg/... 为探究新琼寡糖对多头月季切花的保鲜效应,以蒸馏水和10 g/L蔗糖为对照,添加100 mg/L新琼寡糖为处理液,对多头切花月季“爱丽丝”进行瓶插保鲜处理,并测定瓶插期间的花径、鲜重、水分平衡和瓶插寿命等指标。结果表明,与对照相比,100 mg/L新琼寡糖处理对切花月季“爱丽丝”花径增大效果最明显,其花径最大值为3.96 cm,瓶插寿命最长且为14.33 d,当达到呼吸高峰时的鲜重变化率为108.10%,在维持水分平衡方面最佳。100 mg/L新琼寡糖处理可以用于多头月季切花保鲜,提高了月季切花品质和保鲜效果。研究结果可为不同类型月季切花保鲜剂的使用和保鲜效应的研究提供理论基础。 展开更多
关键词 多头月季 鲜切花 寡糖 保鲜剂 保鲜效果
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新琼寡糖对唾液淀粉酶活性的影响 被引量:1
11
作者 陈建澍 郑兰娟 +3 位作者 梅建凤 易喻 王琦 应国清 《食品科技》 CAS 北大核心 2013年第8期71-74,共4页
为了研究新琼寡糖对唾液淀粉酶活性的影响,采用酶解法制备新琼寡糖,研究新琼寡糖对唾液淀粉酶的酶活、pH稳定性、高温耐受性的影响,以及与唾液淀粉酶的激活剂-Cl-在酶促效果上的协同作用。结果显示,浓度为100μg/mL的新琼寡糖,可使唾液... 为了研究新琼寡糖对唾液淀粉酶活性的影响,采用酶解法制备新琼寡糖,研究新琼寡糖对唾液淀粉酶的酶活、pH稳定性、高温耐受性的影响,以及与唾液淀粉酶的激活剂-Cl-在酶促效果上的协同作用。结果显示,浓度为100μg/mL的新琼寡糖,可使唾液淀粉酶的酶活提高1.21倍;在55℃保温2h,新琼寡糖中的唾液淀粉酶仍保持较好的活性,而对照组的酶活在保温1h时就几乎完全丧失;新琼寡糖中的唾液淀粉酶有更好的pH稳定性,其在pH6~8范围内的酶活均能维持28U/mL,而对照组在pH6~8范围内酶活下降了38%;新琼寡糖与Cl-可以协同增强唾液淀粉酶的酶活,使酶活提高1.98倍。因此,新琼寡糖可作为唾液淀粉酶活性激活剂和稳定剂,可能对胃肠道的保健及消化不良类疾病的治疗有一定的意义。 展开更多
关键词 寡糖 唾液淀粉酶 激活剂 稳定剂
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荧光标记糖电泳在新琼寡糖定性和定量分析中的应用
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作者 马怡茗 路新枝 +1 位作者 李京宝 于文功 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第11期1725-1727,共3页
目的:建立荧光辅助糖电泳(FACE)对系列新琼寡糖进行定性、定量分析的方法。方法:将系列新琼寡糖用7-氨基-1,3-萘胺二磺酸钾(AGA)氨化还原衍生后,在浓度梯度为18%-25%的聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离,于波长264nm直接检测寡糖衍生物,得到聚... 目的:建立荧光辅助糖电泳(FACE)对系列新琼寡糖进行定性、定量分析的方法。方法:将系列新琼寡糖用7-氨基-1,3-萘胺二磺酸钾(AGA)氨化还原衍生后,在浓度梯度为18%-25%的聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离,于波长264nm直接检测寡糖衍生物,得到聚合度为4-14的新琼寡糖衍生物电泳分析图谱。结果:寡糖衍生物的相对电迁移率与其分子量的负三分之二次方成线性关系;运用图像分析软件对电泳图谱进行数字化转换,发现寡糖衍生物的灰度积分面积与样品浓度呈线形关系。结论:建立了快速、精确的新琼寡糖微量定性、定量分析的方法,为新琼寡糖的质量分析提供了技术支撑。 展开更多
关键词 寡糖 荧光标记糖电泳 定性分析 定量分析
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