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基于LAMP的中药材川贝母真伪鉴别方法的建立 被引量：9
1
作者 兰青阔 赵新 +8 位作者 陈锐 刘征辉 朱珠 王成 沈晓玲 刘娜 王燕 陈利智 王永 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期551-556,共6页
目的:基于荧光-环状等温扩增技术,建立川贝母快速检测方法,实现中药材川贝母的荧光可视化快速鉴定。方法:依据川贝母物种特异性序列设计5套LAMP引物,并测试方法特异性和灵敏度。结果:引物Set1扩增效率最高;使用该引物建立的川贝母LAMP... 目的:基于荧光-环状等温扩增技术,建立川贝母快速检测方法,实现中药材川贝母的荧光可视化快速鉴定。方法:依据川贝母物种特异性序列设计5套LAMP引物,并测试方法特异性和灵敏度。结果:引物Set1扩增效率最高;使用该引物建立的川贝母LAMP检测方法仅能够在6种川贝母基源药材中扩增出扩增曲线和荧光变化,在伊贝母、浙贝母、平贝母等7种常见混淆品中无扩增产物,方法特异性良好;方法检测灵敏度为0.1%。结论:本研究建立的基于LAMP的川贝母鉴定方法具有较好的特异性和灵敏度,其快速、操作简单、易观察的优点,填补了中药材川贝母真伪快速筛查的技术空白。 展开更多
关键词 川贝母 环状等温扩增技术 真伪鉴定 检测方法 分子检测
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饲料中牛、羊源性成分现场可视化检测方法的建立 被引量：4
2
作者 朱珠 兰青阔 +3 位作者 赵新 陈锐 郭永泽 王永 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期95-98,共4页
根据牛、羊线粒体中物种特异性序列设计引物,应用可视化环状等温扩增技术(visual loop-mediate isothermal amplification,vLAMP)对牛、羊源性成分进行快速扩增及可视化判断,同时建立牛、羊源成分人工污染的饲料模型,考察vLAMP检测方法... 根据牛、羊线粒体中物种特异性序列设计引物,应用可视化环状等温扩增技术(visual loop-mediate isothermal amplification,vLAMP)对牛、羊源性成分进行快速扩增及可视化判断,同时建立牛、羊源成分人工污染的饲料模型,考察vLAMP检测方法的灵敏度。结果表明,牛源性引物和羊源性引物仅分别对牛、羊源性成分产生特异性扩增,灵敏度高达0.001%。本试验所建立的牛、羊源性成分现场可视化筛查方法具有较高的特异性与灵敏度,操作简单、快速,可用于饲料中牛、羊源性成分污染和食品掺伪的现场可视化检测。 展开更多
关键词 牛、羊源性成分 环状等温扩增技术 现场可视化检测
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转基因大豆GTS40-3-2成分现场可视化检测方法的建立 被引量：4
3
作者 王永 兰青阔 +4 位作者 朱珠 赵新 陈锐 郭永泽 程奕 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期570-573,共4页
转基因大豆GTS40-3-2转化体是种植面积最广的转基因大豆品种,根据GTS40-3-2转化体特异性序列设计引物,应用可视化环介导等温扩增技术,对其进行快速扩增及可视化判断;同时建立转基因成分人工污染的食品模型,比较了LAMP法与定性PCR方法检... 转基因大豆GTS40-3-2转化体是种植面积最广的转基因大豆品种,根据GTS40-3-2转化体特异性序列设计引物,应用可视化环介导等温扩增技术,对其进行快速扩增及可视化判断;同时建立转基因成分人工污染的食品模型,比较了LAMP法与定性PCR方法检测的敏感性。结果表明:该方法仅对GTS40-3-2转化体产生特异性扩增,灵敏度高达0.001%。所建立的GTS40-3-2转化体特异性现场可视化筛查方法具有较高的特异性与灵敏性,操作简单、快速,可用于转基因大豆GTS40-3-2成分污染的现场可视化检测。 展开更多
关键词 转基因大豆GTS40-3-2 转化体特异性 环状等温扩增技术 现场可视化检测
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环状等温扩增技术快速检测转基因玉米MON863的研究 被引量：8
4
作者 兰青阔 王永 +2 位作者 赵新 朱珠 程奕 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期31-34,共4页
采用环状等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP),针对转基因玉米品系MON863中玉米基因组与外源基因结合处设计4条特异性引物,建立MON863的快速检测技术体系,并对时间、温度等反应条件及体系灵敏度、特异性等进行... 采用环状等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP),针对转基因玉米品系MON863中玉米基因组与外源基因结合处设计4条特异性引物,建立MON863的快速检测技术体系,并对时间、温度等反应条件及体系灵敏度、特异性等进行探索。结果表明:该检测体系最适反应温度为63℃,反应时间60 min,灵敏度是常规定性PCR的10倍。该检测方法具有高度的特异性和稳定性,操作方便、简单、省时。 展开更多
关键词 转基因玉米 MON863 环状等温扩增技术(LAMP) 快速检测
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抗虫转CpTI基因成分现场可视化检测方法的建立 被引量：1
5
作者 王永 兰青阔 +6 位作者 朱珠 赵新 陈锐 刘娜 李欧静 郭永泽 程奕 《湖南农业科学》 2014年第2期22-24,共3页
豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因是目前仅次于Bt基因的广谱性抗虫基因,常用于转基因水稻和转基因棉花的基因工程研究中。根据CpTI基因特异性碱基序列设计引物,应用可视化环介导等温扩增技术,对转基因水稻科丰6号进行扩增,同时建立转基因... 豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因是目前仅次于Bt基因的广谱性抗虫基因,常用于转基因水稻和转基因棉花的基因工程研究中。根据CpTI基因特异性碱基序列设计引物,应用可视化环介导等温扩增技术,对转基因水稻科丰6号进行扩增,同时建立转基因成分人工污染的食品模型,比较了LAMP法与定性PCR方法检测的敏感性。结果表明:该方法仅对CpTI基因产生特异性扩增,灵敏度达0.005%;所建立的CpTI基因现场可视化筛查方法具有较高的特异性与灵敏性,操作简单、快速,可用于含有CpTI基因转基因成分污染的快速检测。 展开更多
关键词 CPTI基因 环状等温扩增技术(LAMP) 现场可视化
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小麦内源基因GAG56D的快速检测技术体系
6
作者 程阳 胡珅 栾凤侠 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1100-1104,共5页
为了满足转基因小麦检测中对内源参照基因的检测要求,以小麦属特异的内源基因γ-醇溶蛋白基因(GAG56D)作为目的基因,采用环状等温扩增技术(LAMP)建立了小麦内源基因GAG56D的快速检测技术体系。针对小麦内源基因GAG56D特异靶序列的6个区... 为了满足转基因小麦检测中对内源参照基因的检测要求,以小麦属特异的内源基因γ-醇溶蛋白基因(GAG56D)作为目的基因,采用环状等温扩增技术(LAMP)建立了小麦内源基因GAG56D的快速检测技术体系。针对小麦内源基因GAG56D特异靶序列的6个区域设计4条特异性引物,通过显色法进行LAMP检测,并对时间、温度等反应条件及反应灵敏度、特异性、稳定性进行探索。结果表明,该检测体系最适反应温度为63℃,反应时间60min,定性检测低限达到0.5%(w/w)。该检测方法具有高度的特异性、灵敏度和稳定性,操作简单、快速。 展开更多
关键词 小麦内源基因 GAG56D 环状等温扩增技术(LAMP) 快速检测
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