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农杆菌介导玉米胚性愈伤的遗传转化研究 被引量：10
1
作者 杨爱国 刘爽 +3 位作者 赵琦 赵玉锦 张世煌 潘光堂 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第4期104-108,121,共6页
利用3种不同类型的农杆菌菌株C58、LBA4404和EHA105携带外源GUS基因分别侵染玉米自交系齐319和18(红)胚性愈伤。结果显示,不同的菌株和自交系间的搭配,其遗传转化效率差异很大,GUS瞬时表达率呈极显著差异(F=24.92**),抗性愈伤率也呈极... 利用3种不同类型的农杆菌菌株C58、LBA4404和EHA105携带外源GUS基因分别侵染玉米自交系齐319和18(红)胚性愈伤。结果显示,不同的菌株和自交系间的搭配,其遗传转化效率差异很大,GUS瞬时表达率呈极显著差异(F=24.92**),抗性愈伤率也呈极显著差异(F=19.43**)。其中,EHA105-齐319组合遗传转化效率最高,其GUS瞬时表达率平均为55.5%,最高可达71.1%;其抗性愈伤率平均为14.4%,最高可达20%;对22株转基因T0代抗性植株进行PCR检测,其中PCR呈阳性植株有11株,阳性率为50%。进一步对此22株T0代抗性植株进行叶片组织化学染色分析,结果显示,PCR呈阳性的植株中均有GUS基因表达。从而证明,外源GUS基因在转基因玉米T0代植株中得到稳定表达,而且验证了PCR检测结果和GUS表达分析结果的一致性。 展开更多
关键词 农杆菌菌株 基因型 玉米愈伤 转化率
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农杆菌介导转化愈伤组织获得抗除草剂转基因玉米植株 被引量：5
2
作者 朱友银 冯怡 赵德刚 《山地农业生物学报》 2008年第5期382-388,共7页
对4个玉米基因型Q31×Z31、Q31×Z3、Z3、B73胚性愈伤组织进行农杆菌介导基因转化，根据Gus基因表达水平，研究了影响农杆菌介导遗传转化玉米愈伤组织的因素。结果表明，在选用的玉米基因型中，不同基因型转化效率存在显著差异... 对4个玉米基因型Q31×Z31、Q31×Z3、Z3、B73胚性愈伤组织进行农杆菌介导基因转化，根据Gus基因表达水平，研究了影响农杆菌介导遗传转化玉米愈伤组织的因素。结果表明，在选用的玉米基因型中，不同基因型转化效率存在显著差异，其中Q31×Z31、Q31×Z3、B73转化效率较高，Z3较低。农杆菌菌液浓度（OD600）为0．4～0．6、侵染时间为10min、23℃暗培养3d是较佳转化条件。通过农杆菌介导遗传转化，获得再生玉米植株，并对再生植株离体叶片进行除草剂抗性检测，发现转基因再生植株叶片可以抵抗200mg／L Basra。 展开更多
关键词 玉米愈伤组织 农杆菌 遗传转化 GUS基因 Pat基因
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玉米愈伤组织对除草剂的敏感性
3
作者 王红涛 徐红 李艳臣 《通化师范学院学报》 2014年第2期48-49,共2页
以玉米自交系H99的胚性愈伤组织为材料,通过愈伤组织对Basta的敏感性实验,确定愈伤组织适宜的筛选浓度为8mg/L,结果表明低浓度除草剂对愈伤组织增长有促进作用,高浓度有抑制作用.
关键词 玉米愈伤组织 筛选 敏感性
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虾青素合成关键酶基因bkt植物表达载体的构建及对玉米的遗传转化 被引量：1
4
作者 徐静 曲延英 +4 位作者 杨庆利 禹山林 檀琮萍 侯艳华 秦松 《中国农学通报》 CSCD 2006年第8期69-73,共5页
虾青素是一种具有极强抗氧化活性的类胡萝卜素,具有广泛的应用价值。β-胡萝卜素酮化酶(Bkt)是由玉米黄素合成虾青素生物合成途径中的关键酶。采用LaTaqDNA聚合酶用PCR的方法从pET-28a(+)bkt中扩增得到bkt基因,用bkt基因替换pBI221中的... 虾青素是一种具有极强抗氧化活性的类胡萝卜素,具有广泛的应用价值。β-胡萝卜素酮化酶(Bkt)是由玉米黄素合成虾青素生物合成途径中的关键酶。采用LaTaqDNA聚合酶用PCR的方法从pET-28a(+)bkt中扩增得到bkt基因,用bkt基因替换pBI221中的GUS基因形成含有CaMV35S启动子和NOS终止子的bkt基因表达盒,然后插入植物表达载体pCAMBIA1301的多克隆位点,最终获得带有选择标记和报告基因的植物表达载体pCAMBIA1301-bkt。通过农杆菌LBA4404介导将其转化进入玉米自交系齐319,转化后的愈伤经GUS组织化学染色分析表明bkt基因已经转入玉米胚性愈伤组织。 展开更多
关键词 虾青素 bkt基因 载体构建 玉米胚性愈伤 转化
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