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猪IL-15与PRRS病毒GP5基因核酸疫苗免疫效力
被引量：
16
1
作者
石娜
尹杰超
+2 位作者
Dante Zarlenga
李广兴
任晓峰
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期97-102,共6页
通过分子克隆技术构建了表达猪白细胞介素(IL)-15及猪繁殖呼吸综合症(PRRSV)病毒GP5基因重组核酸疫苗。以小鼠为试验模型,利用猪IL-15作为分子佐剂并检测其对表达PRRS病毒GP5基因核酸疫苗的免疫增强作用。结果表明,猪IL-15与GP5试验组...
通过分子克隆技术构建了表达猪白细胞介素(IL)-15及猪繁殖呼吸综合症(PRRSV)病毒GP5基因重组核酸疫苗。以小鼠为试验模型,利用猪IL-15作为分子佐剂并检测其对表达PRRS病毒GP5基因核酸疫苗的免疫增强作用。结果表明,猪IL-15与GP5试验组小鼠抗体水平和T淋巴细胞亚群数量均高于PBS对照组及GP5基因单独免疫组,表明猪IL-15对核酸疫苗可有效增强PRRS病毒GP5基因的免疫效果,证实了其佐剂效应。
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关键词
猪
il
-
15
PRRSV
GP5基因
疫苗
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职称材料
猪IL-15 cDNA真核表达载体的构建、表达及其免疫佐剂效应
被引量：
2
2
作者
何谦
陈钜豪
+6 位作者
房红莹
卢俊鹏
张欣
崔敏
曾小娜
刘健
罗满林
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期1147-1151,共5页
参考GenBank发表猪IL-15mRNA序列设计引物,用RT-PCR方法扩增猪IL-15cDNA,并克隆到pMD18-T载体中,通过PCR、酶切和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcD-NA-pIL-15。在脂质体介导下,重组质粒pcDNA-pIL...
参考GenBank发表猪IL-15mRNA序列设计引物,用RT-PCR方法扩增猪IL-15cDNA,并克隆到pMD18-T载体中,通过PCR、酶切和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcD-NA-pIL-15。在脂质体介导下,重组质粒pcDNA-pIL-15转染AD-293细胞。以鼠抗猪IL-15为一抗,用间接免疫荧光分析表明猪IL-15基因均在AD-293细胞中成功进行了瞬时表达。小鼠免疫试验表明,pcDNA-pIL-15作为免疫佐剂,能够有效提高小鼠的脾T细胞增殖,加强pcDNA-ORF2(PCV2)质粒免疫过程中的特异性中和抗体的产生,为进一步研制猪IL-15基因佐剂疫苗及进行临床实验奠定基础。
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关键词
猪
il
-
15
真核表达
瞬时表达
佐剂疫苗
中和抗体水平
原文传递
猪IL-15多克隆抗体的制备及其生物活性的检测
被引量：
1
3
作者
邹雨妃
王衡
+1 位作者
远立国
李守军
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第9期26-29,共4页
猪IL-15与人IL-15具有较高的相似率,为进一步研究其生物活性,本研究将去除信号肽的猪IL-15克隆至原核表达载体pET-30a,并成功获得其重组蛋白。将纯化的重组蛋白用于多克隆抗体的制备,并利用琼脂扩散方法、ELISA方法、Western blotting...
猪IL-15与人IL-15具有较高的相似率,为进一步研究其生物活性,本研究将去除信号肽的猪IL-15克隆至原核表达载体pET-30a,并成功获得其重组蛋白。将纯化的重组蛋白用于多克隆抗体的制备,并利用琼脂扩散方法、ELISA方法、Western blotting试验及免疫荧光试验对其抗体效价、特异性、灵敏度等生物活性进行了检测。结果表明,该抗体具有较高的抗体效价和很好的特异性,可以作为IL-15特异性抗体用于今后的试验研究。
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关键词
猪
il
-
15
多克隆抗体
生物活性
下载PDF
职称材料
猪白细胞介素-15基因的克隆及生物信息学分析
被引量：
2
4
作者
骆爱芳
郭万柱
+1 位作者
宋振辉
韩国全
《中国畜牧兽医》
CAS
2007年第10期37-40,共4页
参照GenBank登录的猪白细胞介素-15(IL-15)基因序列自行设计1对特异性引物,运用RT-PCR技术从由刀豆蛋白A(ConA)诱导培养的荣昌猪外周血淋巴细胞扩增出猪IL-15基因的完整CDS序列,全长489 bp。同源比对结果表明,荣昌猪IL-15基因与已公布的...
参照GenBank登录的猪白细胞介素-15(IL-15)基因序列自行设计1对特异性引物,运用RT-PCR技术从由刀豆蛋白A(ConA)诱导培养的荣昌猪外周血淋巴细胞扩增出猪IL-15基因的完整CDS序列,全长489 bp。同源比对结果表明,荣昌猪IL-15基因与已公布的2个猪种IL-15基因核苷酸同源性均为99.4%,与哺乳动物的同源性较高,与鸡的同源性较低。密码子偏爱性分析显示,荣昌猪IL-15基因在密码子使用上存在一定的偏爱性;分子进化分析结果表明其与人及哺乳动物IL-15基因的进化关系较近,而与禽类鸡的IL-15基因进化距离较远;结构域预测分析显示其与人的IL-15存在很大的相似性,可能在功能上有相似性。
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关键词
荣昌
猪
猪
il
-
15
基因
克隆
生物信息学分析
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职称材料
题名
猪IL-15与PRRS病毒GP5基因核酸疫苗免疫效力
被引量：
16
1
作者
石娜
尹杰超
Dante Zarlenga
李广兴
任晓峰
机构
东北农业大学动物医学学院
东北农业大学生命科学学院
美国农业部农业研究所中心牛功能基因组和动物寄生虫病实验室
出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期97-102,共6页
基金
国家自然科学基金(30700590
30972937)
黑龙江省自然科学基金重点项目(ZJN0702-01)
文摘
通过分子克隆技术构建了表达猪白细胞介素(IL)-15及猪繁殖呼吸综合症(PRRSV)病毒GP5基因重组核酸疫苗。以小鼠为试验模型,利用猪IL-15作为分子佐剂并检测其对表达PRRS病毒GP5基因核酸疫苗的免疫增强作用。结果表明,猪IL-15与GP5试验组小鼠抗体水平和T淋巴细胞亚群数量均高于PBS对照组及GP5基因单独免疫组,表明猪IL-15对核酸疫苗可有效增强PRRS病毒GP5基因的免疫效果,证实了其佐剂效应。
关键词
猪
il
-
15
PRRSV
GP5基因
疫苗
Keywords
porcine
il
-
15
PRRSV
GP5 gene
vaccine
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
Q786 [农业科学—畜牧兽医]
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职称材料
题名
猪IL-15 cDNA真核表达载体的构建、表达及其免疫佐剂效应
被引量：
2
2
作者
何谦
陈钜豪
房红莹
卢俊鹏
张欣
崔敏
曾小娜
刘健
罗满林
机构
暨南大学生命与健康工程研究院
广州市工商行政管理局白云分局
华南农业大学兽医学院动物传染病实验室
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期1147-1151,共5页
文摘
参考GenBank发表猪IL-15mRNA序列设计引物,用RT-PCR方法扩增猪IL-15cDNA,并克隆到pMD18-T载体中,通过PCR、酶切和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcD-NA-pIL-15。在脂质体介导下,重组质粒pcDNA-pIL-15转染AD-293细胞。以鼠抗猪IL-15为一抗,用间接免疫荧光分析表明猪IL-15基因均在AD-293细胞中成功进行了瞬时表达。小鼠免疫试验表明,pcDNA-pIL-15作为免疫佐剂,能够有效提高小鼠的脾T细胞增殖,加强pcDNA-ORF2(PCV2)质粒免疫过程中的特异性中和抗体的产生,为进一步研制猪IL-15基因佐剂疫苗及进行临床实验奠定基础。
关键词
猪
il
-
15
真核表达
瞬时表达
佐剂疫苗
中和抗体水平
Keywords
porcine Interleukin-
15
eukaryotic expression
transient expression
adjuvant vaccine
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
原文传递
题名
猪IL-15多克隆抗体的制备及其生物活性的检测
被引量：
1
3
作者
邹雨妃
王衡
远立国
李守军
机构
华南农业大学兽医学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第9期26-29,共4页
基金
"大连三仪-华南农大科研基金"资助项目
高等学校博士点学科专项科研基金(20114404120010)
文摘
猪IL-15与人IL-15具有较高的相似率,为进一步研究其生物活性,本研究将去除信号肽的猪IL-15克隆至原核表达载体pET-30a,并成功获得其重组蛋白。将纯化的重组蛋白用于多克隆抗体的制备,并利用琼脂扩散方法、ELISA方法、Western blotting试验及免疫荧光试验对其抗体效价、特异性、灵敏度等生物活性进行了检测。结果表明,该抗体具有较高的抗体效价和很好的特异性,可以作为IL-15特异性抗体用于今后的试验研究。
关键词
猪
il
-
15
多克隆抗体
生物活性
Keywords
porcine
il
-
15
polyclonal antibody
biological activity
分类号
Q511 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
猪白细胞介素-15基因的克隆及生物信息学分析
被引量：
2
4
作者
骆爱芳
郭万柱
宋振辉
韩国全
机构
四川农业大学动物生物技术中心
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
2007年第10期37-40,共4页
基金
国家"973"项目(2004CCA011800)
教育部长江学者和创新团队发展计划资助(IRT0555)
文摘
参照GenBank登录的猪白细胞介素-15(IL-15)基因序列自行设计1对特异性引物,运用RT-PCR技术从由刀豆蛋白A(ConA)诱导培养的荣昌猪外周血淋巴细胞扩增出猪IL-15基因的完整CDS序列,全长489 bp。同源比对结果表明,荣昌猪IL-15基因与已公布的2个猪种IL-15基因核苷酸同源性均为99.4%,与哺乳动物的同源性较高,与鸡的同源性较低。密码子偏爱性分析显示,荣昌猪IL-15基因在密码子使用上存在一定的偏爱性;分子进化分析结果表明其与人及哺乳动物IL-15基因的进化关系较近,而与禽类鸡的IL-15基因进化距离较远;结构域预测分析显示其与人的IL-15存在很大的相似性,可能在功能上有相似性。
关键词
荣昌
猪
猪
il
-
15
基因
克隆
生物信息学分析
Keywords
rongchang pig
pig
il
-
15
cloning
bioinformatics analysis
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪IL-15与PRRS病毒GP5基因核酸疫苗免疫效力
石娜
尹杰超
Dante Zarlenga
李广兴
任晓峰
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
16
下载PDF
职称材料
2
猪IL-15 cDNA真核表达载体的构建、表达及其免疫佐剂效应
何谦
陈钜豪
房红莹
卢俊鹏
张欣
崔敏
曾小娜
刘健
罗满林
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
原文传递
3
猪IL-15多克隆抗体的制备及其生物活性的检测
邹雨妃
王衡
远立国
李守军
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012
1
下载PDF
职称材料
4
猪白细胞介素-15基因的克隆及生物信息学分析
骆爱芳
郭万柱
宋振辉
韩国全
《中国畜牧兽医》
CAS
2007
2
下载PDF
职称材料
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