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国产伊维菌素(Ivermectin)驱除犬钩虫、巴西日圆线虫、鼠蛲虫的效果 被引量：10
1
作者 闻礼永 夏昭华 +1 位作者 姚善滢 任苏平 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第1期27-29,共3页
目的观察国产伊维菌素对犬钩虫、巴西日圆线虫、鼠蛲虫的驱虫效果。方法采用犬钩虫—狗、巴西日圆线虫—大鼠及鼠蛲虫—大鼠动物模型进行研究。结果单次口服０．０２５ｍｇ／ｋｇ伊维菌素对犬钩虫的虫卵减少率、驱虫率和治愈率高达１０... 目的观察国产伊维菌素对犬钩虫、巴西日圆线虫、鼠蛲虫的驱虫效果。方法采用犬钩虫—狗、巴西日圆线虫—大鼠及鼠蛲虫—大鼠动物模型进行研究。结果单次口服０．０２５ｍｇ／ｋｇ伊维菌素对犬钩虫的虫卵减少率、驱虫率和治愈率高达１００％，服药后４８ｈ内排出９７％虫体；单次灌胃０．６２ｍｇ／ｋｇ对巴西日圆线虫的驱虫率达９９．１％，完全治愈剂量为１．１１ｍｇ／ｋｇ；单次灌胃２．０ｍｇ／ｋｇ对鼠蛲虫的驱虫率和治愈率均达１００％。结论国产伊维菌素具有剂量小、疗效高、作用快、副反应轻等特点。 展开更多
关键词 伊维菌素 犬钩虫 巴西日圆线虫 鼠蛲虫
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宠物犬犬钩虫的调查及生活史各期形态观察 被引量：8
2
作者 韦华 杨玉荣 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期789-791,共3页
目的犬钩虫(Ancylostoma canium)幼虫可以感染人体,但不能发育为成虫,仅引起皮肤幼虫移行症。方法采用饱和盐水漂浮法和涂片法检查钩虫卵;用"T"滤纸条培养犬钩蚴;皮肤感染和灌喂人工感染实验狗。感染后不同时间解剖狗,从狗小... 目的犬钩虫(Ancylostoma canium)幼虫可以感染人体,但不能发育为成虫,仅引起皮肤幼虫移行症。方法采用饱和盐水漂浮法和涂片法检查钩虫卵;用"T"滤纸条培养犬钩蚴;皮肤感染和灌喂人工感染实验狗。感染后不同时间解剖狗,从狗小肠获取钩虫,镜下观察和拍照。结果厦门市30只宠物犬样本犬钩虫感染率为3.33%(1/30),蛔虫感染率为10.00%(3/30)。对犬钩虫生活史各期的形态进行观察。结论厦门市存在宠物犬犬钩虫感染,特别是农家狗的犬钩虫感染为多。 展开更多
关键词 犬钩虫 调查 生活史 形态
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我国犬钩虫ITS及5.8S rDNA的克隆与序列分析 被引量：5
3
作者 宋慧群 李宾 +1 位作者 林瑞庆 朱兴全 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期756-759,共4页
以从我国广东湛江犬小肠中采集的2条犬钩虫作为研究对象,用保守引物NC5及NC2扩增犬钩虫rDNA的ITS-1、5.8S及ITS-2片段,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR和酶切鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序... 以从我国广东湛江犬小肠中采集的2条犬钩虫作为研究对象,用保守引物NC5及NC2扩增犬钩虫rDNA的ITS-1、5.8S及ITS-2片段,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR和酶切鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析。结果显示,来自湛江的2条犬钩虫ITS及5.8S rDNA序列总长均为738 bp,其中ITS-1序列长为364 bp,5.8S序列长为153 bp,ITS-2序列长为221 bp;2个不同样品之间ITS序列存在多态性,ITS-1序列存在5个碱基的差异,ITS-2序列存在1个碱基的差异,5.8S rDNA序列无差异。研究结果为犬钩虫进一步的分类、鉴定和遗传变异研究奠定了基础。 展开更多
关键词 犬钩虫 内转录间隔区(ITS) 5.8S RDNA PCR 序列分析
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毛皮动物常见寄生虫病(4) 被引量：4
4
作者 钱国成 《特种经济动植物》 2010年第2期16-17,共2页
11狐钩虫病 钩虫病是人、兽共患的寄生虫病，犬钩虫与狐钩虫相似。钩虫也是狐的主要寄生虫之一。
关键词 寄生虫病 毛皮动物 钩虫病 犬钩虫 狐
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米尔贝肟片治疗犬弓蛔虫病与钩虫病的疗效观察 被引量：4
5
作者 于晓蕾 李继昌 +2 位作者 张耀腾 曲明丽 向文胜 《中国兽药杂志》 2011年第4期56-58,共3页
为了观察米尔贝肟片对犬弓蛔虫和钩虫驱虫效果,采用人工感染方式,对犬弓蛔虫和钩虫的动物模型进行疗效研究。结果表明,单次口服0.5 mg/kg米尔贝肟片对犬弓蛔虫和犬钩虫的虫卵减少率、驱虫有效率和治愈率均可达到100%。说明米尔贝肟片在... 为了观察米尔贝肟片对犬弓蛔虫和钩虫驱虫效果,采用人工感染方式,对犬弓蛔虫和钩虫的动物模型进行疗效研究。结果表明,单次口服0.5 mg/kg米尔贝肟片对犬弓蛔虫和犬钩虫的虫卵减少率、驱虫有效率和治愈率均可达到100%。说明米尔贝肟片在治疗犬弓蛔虫和钩虫时具有剂量小、疗效高、作用快、副反应轻等特点,在临床治疗方面有十分广阔的应用前景。 展开更多
关键词 米尔贝肟(片) 犬弓蛔虫 犬钩虫 疗效观察
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伊维菌素驱除犬钩虫和人钩虫感染的效果观察 被引量：2
6
作者 严晓岚 闻礼永 +1 位作者 杨明瑾 漏磊君 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2007年第1期12-15,共4页
为观察伊维菌素驱治犬钩虫和人钩虫感染的效果,采用伊维菌素6.25、12.5和25μg/kg灌服治疗犬钩虫感染犬,同时用10.6mg/kg阿苯哒唑作对照;采用伊维菌素0.2mg/kg顿服治疗人钩虫感染者,并用400mg/次阿苯哒唑作对照。结果6.25、12.5和25μg... 为观察伊维菌素驱治犬钩虫和人钩虫感染的效果,采用伊维菌素6.25、12.5和25μg/kg灌服治疗犬钩虫感染犬,同时用10.6mg/kg阿苯哒唑作对照;采用伊维菌素0.2mg/kg顿服治疗人钩虫感染者,并用400mg/次阿苯哒唑作对照。结果6.25、12.5和25μg/kg伊维菌素对犬钩虫治愈率分别为20%(1/5)、60%(3/5)和100.0%(5/5);而对照组阿苯哒唑对犬钩虫治愈率为0(0/5)。伊维菌素与阿苯哒唑对人钩虫感染者的治愈率分别为20.5%(9/44)和76.5%(26/34),对十二指肠钩虫较美洲钩虫敏感。因此,伊维菌素治疗犬钩虫感染疗效优于阿苯哒唑,治疗人钩虫感染疗效不及阿苯哒唑。 展开更多
关键词 伊维菌素 犬钩虫 十二指肠钩虫 美洲钩虫 疗效
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南京地区流浪犬钩虫感染情况调查 被引量：4
7
作者 董文阳 蒋静雅 +4 位作者 陆浩 宋小凯 徐立新 严若峰 李祥瑞 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第5期77-79,共3页
犬钩虫病是一种常见的危害较大的犬类寄生虫病。本试验采集南京某流浪犬收容基地的71份犬粪便,用饱和食盐水法专项检测犬钩虫虫卵,对其感染情况进行统计。结果显示,在采集的71份样品中,39份样品钩虫检验呈阳性,犬钩虫感染率为54.93%,平... 犬钩虫病是一种常见的危害较大的犬类寄生虫病。本试验采集南京某流浪犬收容基地的71份犬粪便,用饱和食盐水法专项检测犬钩虫虫卵,对其感染情况进行统计。结果显示,在采集的71份样品中,39份样品钩虫检验呈阳性,犬钩虫感染率为54.93%,平均感染强度(EPG)为2.63×103。本次试验结果有助于了解南京地区流浪犬钩虫病感染情况,也为进一步研究犬钩虫病的发生、感染、传播与防治提供了理论依据。 展开更多
关键词 流浪犬 犬钩虫 感染情况调查
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发展钩虫疫苗的实验之路
8
作者 王勇 《热带病与寄生虫学》 2000年第2期121-122,125-126,共4页
在欠发达的热带地区,钩虫难以控制和消灭的原因很多,其中之一是再感染,甚至可发生在已感染钩虫的情况下。例如,WHO资助的一项研究表明,在高度流行的地区,再感染可发生在接受抗虫治疗4～12个月后。因此,在缺少有效的卫生支持和其它控制... 在欠发达的热带地区,钩虫难以控制和消灭的原因很多,其中之一是再感染,甚至可发生在已感染钩虫的情况下。例如,WHO资助的一项研究表明,在高度流行的地区,再感染可发生在接受抗虫治疗4～12个月后。因此,在缺少有效的卫生支持和其它控制措施以保证人粪的安全处理下。 展开更多
关键词 三期幼虫 十二指肠钩虫 犬钩虫 钩虫抗原 美洲钩虫 疫苗 钩虫感染 热带地区 再感染 发育成熟
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伊维菌素驱治钩虫感染的实验室和现场效果观察 被引量：1
9
作者 严晓岚 闻礼永 +1 位作者 杨明瑾 漏磊君 《浙江省医学科学院学报》 2007年第3期12-15,共4页
目的为观察伊维菌素驱治犬钩虫和人钩虫感染的效果。方法采用伊维菌素6．25μg/kg、12．5μg／kg和25μg／kg灌服治疗犬钩虫感染犬。同时用10．6mg／kg阿苯哒唑作对照；采用伊维菌素0．2mg／kg顿服治疗人钩虫感染者，并用400ms／次阿苯... 目的为观察伊维菌素驱治犬钩虫和人钩虫感染的效果。方法采用伊维菌素6．25μg/kg、12．5μg／kg和25μg／kg灌服治疗犬钩虫感染犬。同时用10．6mg／kg阿苯哒唑作对照；采用伊维菌素0．2mg／kg顿服治疗人钩虫感染者，并用400ms／次阿苯哒唑作对照。结果6．25、12．5和25μg／kg组伊维菌素对犬钩虫治愈率分别为1/5、3/5和5／5；而对照组阿苯哒唑对犬钩虫治愈率为0/5。伊维菌素与阿苯哒唑对人钩虫感染者的治愈率分别为20．5％（9／44）和76．5％（26／34），对十二指肠钩虫较美洲钩虫敏感。结论伊维菌素治疗犬钩虫感染疗效优于阿苯哒唑，治疗人钩虫感染疗效不及阿苯哒唑。 展开更多
关键词 伊维菌素 犬钩虫 十二指肠钩虫 美洲钩虫 疗效
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犬钩虫抗凝肽AcaNAP8的原核表达及其抗凝活性 被引量：2
10
作者 殷环 邓莉 +2 位作者 王会兰 吴亚敏 彭礼飞 《中国热带医学》 CAS 2010年第7期812-813,816,共3页
目的在大肠杆菌中重组表达犬钩虫抗凝肽AcaNAP8基因,并检测表达产物抗凝活性。方法设计引物,将AcaNAP8成熟肽编码序列克隆、连接到原核表达载体pET32a,构建重组表达质粒;成功构建的重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达... 目的在大肠杆菌中重组表达犬钩虫抗凝肽AcaNAP8基因,并检测表达产物抗凝活性。方法设计引物,将AcaNAP8成熟肽编码序列克隆、连接到原核表达载体pET32a,构建重组表达质粒;成功构建的重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达情况;诱导表达的重组蛋白用Ni亲和层析进行纯化;用凝血酶原时间(PT)和活化的部分凝血活酶时间(aPTT)检测重组产物体外抗凝活性。结果成功构建了pET32a/AcaNAP8原核表达重组质粒,在大肠杆菌中成功表达并获得了重组AcaNAP8,表达产物能明显延长PT及aPTT。结论在大肠杆菌中成功表达了AcaNAP8融合蛋白,表达产物具有显著抗凝活性。该实验为进一步探讨AcaNAP8的作用机制及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 犬钩虫 抗凝肽 表达 活性
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犬钩虫(Ancylostoma caninum)天冬氨酸蛋白酶基因的克隆和在大肠杆菌中的表达 被引量：2
11
作者 杨玉荣 韦华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1222-1225,共4页
目的对犬钩虫(Ancylostomacaninum)天冬氨酸蛋白酶Asp基因进行了克隆,鉴定,并在原核系统中进行表达。方法以犬钩虫总RNA为模板,用RT-PCR法对犬钩虫天冬氨酸蛋白酶Asp基因进行扩增,获得的AspcDNA产物克隆进pMD-18T载体,用PCR筛选阳性克... 目的对犬钩虫(Ancylostomacaninum)天冬氨酸蛋白酶Asp基因进行了克隆,鉴定,并在原核系统中进行表达。方法以犬钩虫总RNA为模板,用RT-PCR法对犬钩虫天冬氨酸蛋白酶Asp基因进行扩增,获得的AspcDNA产物克隆进pMD-18T载体,用PCR筛选阳性克隆。碱裂解法进行质粒提取,单、双酶切进行鉴定并测序。将测序正确的阳性克隆进行双酶切,构建到表达载体pET-32a中,将此重组质粒先转化到E.coliDH5a内,提取质粒,酶切鉴定阳性,再转化入表达宿主E.coliBL21(DE3)菌株内,对转化菌株用IPTG进行诱导培养。收集培养液,破菌、离心,上清进行SDS-PAGE,通过电转移将胶中蛋白转到硝酸纤维素膜上后进行免疫印迹分析。结果电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白,所表达蛋白相对分子量为40kDa,抗体检测有特异条带大小为40kDa。结论成功进行了犬钩虫天冬氨酸蛋白酶Asp基因的克隆表达。 展开更多
关键词 犬钩虫 天冬氨酸蛋白酶 克隆 表达
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米尔贝肟对犬钩虫的体外作用 被引量：2
12
作者 徐倩倩 李继昌 +1 位作者 郭时金 沈志强 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期861-864,共4页
为了评价犬钩虫对米尔贝肟的体外敏感性,试验设空白对照组,米尔贝肟高、中、低剂量组及伊维菌素对照组,考察了药物对犬钩蚴三期幼虫形态和活力的影响及对其移行能力的影响。结果显示,未添加药物的钩蚴大部分保持笔直,而几乎没有弯曲或... 为了评价犬钩虫对米尔贝肟的体外敏感性,试验设空白对照组,米尔贝肟高、中、低剂量组及伊维菌素对照组,考察了药物对犬钩蚴三期幼虫形态和活力的影响及对其移行能力的影响。结果显示,未添加药物的钩蚴大部分保持笔直,而几乎没有弯曲或者卷曲,而在药物添加组,部分钩蚴出现大于45°角的弯曲,弯曲程度远远大于未添加药物的正常虫体;米尔贝肟用药量在1×10-5 g/mL时,8h杀虫率达100%,米尔贝肟用药量为1×10-6 g/mL时杀灭犬钩虫幼虫的显效时间及杀虫效果与伊维菌素组差异不显著(P>0.05);米尔贝肟和伊维菌素对犬钩蚴的移行有显著的抑制作用。结果表明,犬钩虫对米尔贝肟在体外具有一定的敏感性。 展开更多
关键词 犬钩虫 米尔贝肟 体外敏感性
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犬钩虫第三期钩蚴免疫裸鼠再感染AcL3的组织病理学观察
13
作者 郭俭 吴嘉彤 +3 位作者 杨元清 薛剑 强慧琴 肖树华 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2009年第1期26-29,共4页
目的观察裸鼠经犬钩虫第三期钩蚴（AcL3）免疫后，其皮肤和肺内AcL3的形态变化及宿主的组织细胞反应，评价其作为疫苗筛选动物模型的可能性。方法取BALB／c-nu／nu小鼠，每两周由皮下免疫接种活的AcL3 500条，共3次，并于末次免疫后1周... 目的观察裸鼠经犬钩虫第三期钩蚴（AcL3）免疫后，其皮肤和肺内AcL3的形态变化及宿主的组织细胞反应，评价其作为疫苗筛选动物模型的可能性。方法取BALB／c-nu／nu小鼠，每两周由皮下免疫接种活的AcL3 500条，共3次，并于末次免疫后1周由皮肤攻击感染AcL3 500条。用未免疫的感染AcL3裸鼠作对照，攻击感染后不同时间取感染部位皮肤和肺脏，观察宿主皮肤和肺内AcL3的组织病理学变化。结果攻击感染后6、24、72h及7d，皮肤内的绝大部分虫体切面形态和组织结构与感染对照裸鼠皮肤内的相似，仅0．5％～2．2％的虫体切面示有变性、死亡，偶见有死虫肉芽肿，而肺组织内的AcL3及其周围的炎细胞反应与对照组相比较，无明显差异。结论用活的AcL3免疫裸鼠后，仅见对攻击感染的AcL3有弱的免疫效应，裸鼠不适宜作为钩虫疫苗筛选的动物模型。 展开更多
关键词 犬钩虫 小鼠 裸 犬钩虫第三期幼虫 免疫接种 组织病理学
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犬钩虫核糖体蛋白L36及S4A全长cDNA克隆与蛋白特性分析 被引量：2
14
作者 彭礼飞 邓莉 +3 位作者 吴亚敏 胡晶晶 杨陈 甘伟琼 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第5期353-356,共4页
目的克隆犬钩虫Ancylostoma caninum核糖体蛋白L36(AcaRPL36)及S4A(AcaRPS4A)全长cDNA序列,并对编码的蛋白特性进行分析,探讨它们在研究系统发育中的应用。方法运用3′RACE技术并结合RT-PCR技术先后分别从犬钩虫中克隆核糖体蛋白L36及S4... 目的克隆犬钩虫Ancylostoma caninum核糖体蛋白L36(AcaRPL36)及S4A(AcaRPS4A)全长cDNA序列,并对编码的蛋白特性进行分析,探讨它们在研究系统发育中的应用。方法运用3′RACE技术并结合RT-PCR技术先后分别从犬钩虫中克隆核糖体蛋白L36及S4A的部分序列,经拼接后获得全长cDNA序列。用BlastP搜索相似性序列及保守结构域,所获序列在GenBank中登记,并用Neighbor-Joining(NJ)法构建基于RPL36及RPS4氨基酸序列的系统发育树。结果AcaRPL36全长cDNA序列(GenBank登录号为EF490128)为390 bp,开放阅读框为315 bp,编码104个氨基酸组成的蛋白;AcaRPS4A全长cDNA序列(GenBank登录号为EF490129)为880 bp,开放阅读框为786bp,编码261个氨基酸组成的蛋白。RPL36及RPS4序列较保守,与Caenorhabditis elegans等的亲缘关系较近的生物,在系统发育树中的遗传距离也较近。结论首次获得犬钩虫RPL36及RPS4A,RPL36和RPS4可能作为分子指标应用于研究生物系统发育。 展开更多
关键词 犬钩虫 核糖体蛋白L36(RPL36) 核糖体蛋白S4A(RPS4A) 特性分析
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钩虫虫苗及低温保存的研究
15
作者 沈树满 沈静德 《医学研究杂志》 1994年第4期32-33,共2页
钩虫感染遍及全球,我国广大农村常有流行。虽经集体化疗和粪管,但仍易反复感染。随着钩虫病防治研究工作的深入,常需要大量活的且保持其原有生物学特性的钩虫,以作为钩虫病免疫预防的虫苗,和免疫诊断的抗原。在钩虫虫苗的研究方面,Vina... 钩虫感染遍及全球,我国广大农村常有流行。虽经集体化疗和粪管,但仍易反复感染。随着钩虫病防治研究工作的深入,常需要大量活的且保持其原有生物学特性的钩虫,以作为钩虫病免疫预防的虫苗,和免疫诊断的抗原。在钩虫虫苗的研究方面,Vinayak等(1981)证实用X线照射犬钩虫(Ancylostoma canjnum)第3期活幼虫。 展开更多
关键词 低温保存 犬钩虫 免疫诊断 免疫预防 遍及全球 比用 童虫 研究工作 保护性免疫 钩虫感染
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Studies on Immunological Reaction of Ancylostoma canimum Recombinant Protein Ac—rAsp
16
作者 WenLi－yong HotezPJ 《浙江省医学科学院学报》 2001年第2期5-9,共5页
目的 分析犬钩虫基因重组蛋白Ac-rAsp，以了解该候选疫苗蛋白的免疫反应性。方法 采用SDS－PAGE和ELIB技术。结果 重组Ac-rAsp－I蛋白组分为45kDa，其免疫血清能识别Ac-L3抗原和Ac-rAsp－1蛋白，不与Ad-A、Ad-L3、Na-A、Ac-A、Nb-A... 目的 分析犬钩虫基因重组蛋白Ac-rAsp，以了解该候选疫苗蛋白的免疫反应性。方法 采用SDS－PAGE和ELIB技术。结果 重组Ac-rAsp－I蛋白组分为45kDa，其免疫血清能识别Ac-L3抗原和Ac-rAsp－1蛋白，不与Ad-A、Ad-L3、Na-A、Ac-A、Nb-A抗原和Ac-rAsp－2蛋白起反应；重组Ac-rAsp－2蛋白组分为24kDa，其免疫血清能识别Ad-A、Ad-L3、Na-A、Ac-A、Ac-L3抗原和Ac-rAsp－2蛋白，不与Nb-A抗原和Ac-rAsp－1蛋白起反应。结论 该结果为钩虫免疫学和疫苗研究提供基础资料。 展开更多
关键词 犬钩虫 重组Ac-rAsp蛋白 免疫反应性 钩虫 免疫学
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液氮冻存犬钩虫卵的研究
17
作者 沈静德 沈树满 《医学研究杂志》 1990年第10期30-31,共2页
寄生虫的低温保存,目前国内外多应用于原虫和蠕虫幼虫的冻存,蠕虫虫卵的低温保存比较少见。本文对犬钩虫卵进行了液氮冻存的研究。材料和方法取犬钩虫阳性犬小肠内容物,水洗沉淀后,获得大量含4～8个卵细胞的犬钩虫卵。采用7.5％乙二醇(... 寄生虫的低温保存,目前国内外多应用于原虫和蠕虫幼虫的冻存,蠕虫虫卵的低温保存比较少见。本文对犬钩虫卵进行了液氮冻存的研究。材料和方法取犬钩虫阳性犬小肠内容物,水洗沉淀后,获得大量含4～8个卵细胞的犬钩虫卵。采用7.5％乙二醇(EG)和14％聚乙烯吡咯酮(PVP)两种低温保护剂,各分为两组:即一组在保护剂中加一滴吐温-80(tween-80);一组则不加。冷冻步骤为两步冷冻法,即先在-20℃冰箱中预冷30分钟后,快速浸入液氮(-196℃)中冻存。 展开更多
关键词 犬钩虫 低温保存 聚乙烯吡咯酮 两步冷冻法 小肠内容物 蠕虫卵 保护剂 吐温 钩虫卵 微丝
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重庆荣昌犬钩虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析 被引量：1
18
作者 黄丽 周荣琼 +3 位作者 林洁 谭燕财 马光旭 敖冯虎 《西南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期95-100,共6页
利用聚合酶链式反应(PCR)扩增犬钩虫rDNA的ITS及5.8S序列,然后将PCR扩增产物回收纯化后连接到pMDTM19-T载体上进行克隆.重组质粒通过菌落PCR鉴定,将阳性重组质粒进行序列测定并且进行序列分析.结果显示,5株犬钩虫荣昌分离株ITS序列的总... 利用聚合酶链式反应(PCR)扩增犬钩虫rDNA的ITS及5.8S序列,然后将PCR扩增产物回收纯化后连接到pMDTM19-T载体上进行克隆.重组质粒通过菌落PCR鉴定,将阳性重组质粒进行序列测定并且进行序列分析.结果显示,5株犬钩虫荣昌分离株ITS序列的总长为833 bp^834 bp.ITS-1序列总长无差异,但存在个别碱基的差异;5.8S序列总长与序列均无差异;ITS-2序列总长存在差异(221 bp^222 bp).通过与GeneBank上报道的其他钩虫的ITS序列进行相似性分析,发现犬钩虫荣昌分离株(RCF)与犬钩虫广州分离株相似性最高,为99.9%,与美国北海狮弯口属钩口线虫ITS序列的相似性最低,为86.1%.表明ITS可作为分子标记用于犬钩虫种属以及种间的鉴定.该研究结果旨在为今后犬钩虫的分类鉴定、种群遗传关系、分子流行病学调查以及对该病的防治等方面的更深入研究奠定基础. 展开更多
关键词 犬钩虫 内转录间隔区(ITS) PCR 序列分析
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犬钩虫C型凝集素AcaCTL-1基因的克隆及表达 被引量：1
19
作者 邓莉 金娴 +3 位作者 何庆丰 许琴英 吴亚敏 彭礼飞 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第12期918-921,共4页
目的分离鉴定犬钩虫C型凝集素AcaCTL-1基因,并在大肠埃希菌中表达。方法根据EST序列设计引物,用RT-PCR及3′(RACE技术扩增获得AcaCTL-1全长cDNA序列,并对其进行初步生物信息学分析;将AcaCTL-1成熟肽编码序列克隆、连接到表达载体pET32a... 目的分离鉴定犬钩虫C型凝集素AcaCTL-1基因,并在大肠埃希菌中表达。方法根据EST序列设计引物,用RT-PCR及3′(RACE技术扩增获得AcaCTL-1全长cDNA序列,并对其进行初步生物信息学分析;将AcaCTL-1成熟肽编码序列克隆、连接到表达载体pET32a,构建重组质粒pET32a/AcaCTL-1;在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE分析表达情况,Ni亲和层析纯化可溶性蛋白。结果成功克隆了AcaCTL-1全长cDNA序列,其最大开放阅读框由525 bp组成,预测编码174个氨基酸残基组成的蛋白,含17个氨基酸组成的信号肽,为C型凝集素家族蛋白成员;构建pET32a/AcaCTL-1重组质粒,并在大肠埃希菌中高效表达。表达产物多以包涵体形式存在,小部分为可溶性蛋白。结论成功克隆并表达了犬钩虫C型凝集素AcaCTL-1基因,为进一步了解AcaCTL-1的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 犬钩虫 C型凝集素 克隆 表达
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3种线虫rDNA-ITS2-RFLP分析 被引量：1
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作者 任芳 杨玉荣 韦华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期661-664,共4页
目的爪哇根结线虫(Meloidogynejavanica)、鼠蛲虫(Enterobiussp·)和犬钩虫(Ancylostomacaninum)是来自不同种属的3种线虫,利用rDNA-ITS2-RFLP方法分析3种不同线虫种间多态性,为将来进一步发展以rDNA-ITS-RFLP分析为基础的土源性线... 目的爪哇根结线虫(Meloidogynejavanica)、鼠蛲虫(Enterobiussp·)和犬钩虫(Ancylostomacaninum)是来自不同种属的3种线虫,利用rDNA-ITS2-RFLP方法分析3种不同线虫种间多态性,为将来进一步发展以rDNA-ITS-RFLP分析为基础的土源性线虫的分子诊断方法建立基础。方法应用种间具有较为保守性的遗传区域-内转录间隔区,包括部分的5·8S序列、ITS2和28S的序列,以爪哇根结线虫、鼠蛲虫、犬钩虫3种不同种类线虫的基因组DNA为模板,设计特定引物用PCR扩增rDNA-ITS2+片段,用限制性内切酶HindⅢ、EcoRⅠ、EcoRⅤ、PstⅠ、KpnⅠ和SalⅠ酶切PCR扩增产物进行RFLP分析。结果PCR扩增爪哇根结线虫、鼠蛲虫、犬钩虫得到的ITS2+片段大小分别为1000bp、1800bp、1800bp,用6种限制性内切酶酶切PCR扩增产物,共产生12条酶切片段。用限制性内切酶HindⅢ/EcoRⅠ,PstⅠ/EcoRⅠ,HindⅢ/PstⅠ双酶切爪哇根结线虫、鼠蛲虫和犬钩虫的rDNA-ITS2+的PCR扩增产物,除爪哇根结线虫外,鼠蛲虫和犬钩虫均可得到2条以上的RFLP片段。结论爪哇根结线虫、鼠蛲虫、犬钩虫rDNA-ITS-RFLP分析显示这3种不同线虫rDNA-ITS2+存在着种间多样性,其中爪哇根结线虫为植物寄生性线虫,而鼠蛲虫和犬钩虫均为动物寄生性线虫,说明rDNA-ITS2+-RFLP方法可用来作为判断线虫种间多样性以及诊断和区分不同线虫的有用依据。 展开更多
关键词 爪哇根结线虫 鼠蛲虫 犬钩虫 rDNA-ITS-RFLP
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