紫杉醇诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡和细胞ROS及SOD失衡的研究 被引量：5

1

作者 徐永伟 李华涛 +5 位作者 李响 张蓉蓉 任晓丽 刘云 冯新畅 唐大木 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期606-610,共5页

为研究紫杉醇诱导犬乳腺肿瘤细胞(CHMm)凋亡及对氧化还原平衡的影响,本实验以不同浓度的紫杉醇处理细胞,采用台盼蓝排斥试验和MTT法检测细胞活性,并进行丫啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双荧光染色以及在透射电镜下观察CHMm细胞凋亡和形态学变化... 为研究紫杉醇诱导犬乳腺肿瘤细胞(CHMm)凋亡及对氧化还原平衡的影响,本实验以不同浓度的紫杉醇处理细胞,采用台盼蓝排斥试验和MTT法检测细胞活性,并进行丫啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双荧光染色以及在透射电镜下观察CHMm细胞凋亡和形态学变化,并检测细胞内活性氧(ROS)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)等反映细胞内氧化还原功能的指标。结果显示:在紫杉醇的作用下,CHMm生长受到不同程度的抑制,引起细胞凋亡,出现典型的凋亡形态;ROS和MDA含量增加,SOD和CAT酶活性降低,细胞内出现氧化还原失衡。表明紫杉醇能够抑制CHMm细胞生长,打破氧化还原平衡,诱导细胞凋亡并呈浓度和时间依赖性。 展开更多

关键词 紫杉醇 犬乳腺肿瘤细胞 细胞凋亡 氧化还原失衡

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常山酮和盐霉素协同抑制犬乳腺肿瘤细胞的增殖、迁移和克隆形成

2

作者 胡诗恒 宋昕昊 +8 位作者 林梦娟 郑玉玲 王俊棋 游凤 吕英军 高修歌 张军忍 江善祥 郭大伟 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第2期31-36,共6页

旨在以犬乳腺肿瘤组织上分离所得的细胞CMT-N7为体外模型,评估常山酮和盐霉素联用对犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移和克隆形成的影响。采用常山酮、盐霉素单独以及两药联合处理,评估对犬乳腺肿瘤细胞的抑制作用,使用Chou-Talalay方法计算联... 旨在以犬乳腺肿瘤组织上分离所得的细胞CMT-N7为体外模型,评估常山酮和盐霉素联用对犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移和克隆形成的影响。采用常山酮、盐霉素单独以及两药联合处理,评估对犬乳腺肿瘤细胞的抑制作用,使用Chou-Talalay方法计算联合指数,确定最佳协同比例,进一步使用划痕试验和克隆形成试验评估两药在协同比例下联用对犬乳腺肿瘤细胞迁移和克隆形成能力的影响。结果显示:常山酮和盐霉素呈浓度依赖性地抑制CMT-N7细胞的增殖,且两药联用具有协同抑制作用,最佳协同比例为1∶1,该比例下两药联用对犬乳腺肿瘤细胞的迁移和克隆形成的抑制作用比单药更显著(P<0.01)。因此,常山酮和盐霉素联用能够协同抑制犬乳腺肿瘤细胞的增殖、迁移和克隆形成。本研究为兽医临床抗肿瘤药物的联合应用提供了依据。 展开更多

关键词 常山酮 盐霉素 协同抑制 犬乳腺肿瘤细胞

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紫杉醇对CHMm细胞G_2/M期的阻滞及对周期相关因子的影响 被引量：2

3

作者 李情 姚微 +3 位作者 杨超 卢婷 张立国 刘云 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1306-1312,共7页

为探讨紫杉醇对犬乳腺肿瘤细胞的周期阻滞及周期相关因子的表达影响,采用不同浓度紫杉醇以不同作用时间处理细胞,通过倒置显微镜、流式细胞仪(FCM)、SYBR染料法实时荧光定量PCR,研究细胞的形态学变化、G2/M期阻滞以及对抑癌基因p27、p5... 为探讨紫杉醇对犬乳腺肿瘤细胞的周期阻滞及周期相关因子的表达影响,采用不同浓度紫杉醇以不同作用时间处理细胞,通过倒置显微镜、流式细胞仪(FCM)、SYBR染料法实时荧光定量PCR,研究细胞的形态学变化、G2/M期阻滞以及对抑癌基因p27、p53和原癌基因bcl-2表达的影响。结果显示,0.1μmol/L紫杉醇作用72h,犬乳腺肿瘤细胞(CHMm)生长状况极差,细胞大量凋亡。同时,0.1μmol/L紫杉醇作用48h,G2/M期阻滞明显,比例高达78.69%。紫杉醇对周期相关因子的影响,具有时间-剂量关系,p27、p53的表达均呈上升趋势,bcl-2的表达呈下降趋势。结果表明,紫杉醇能抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡;促使细胞G2/M期阻滞和抑制细胞有丝分裂;并有促进p27、p53表达、抑制bcl-2表达的作用。 展开更多

关键词 紫杉醇 犬乳腺肿瘤细胞 抑癌基因 原癌基因 流式细胞仪 实时定量PCR

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顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞凋亡影响 被引量：2

4

作者 孙思超 孙东东 +2 位作者 王英雪 常宏建 刘云 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期7-9,I0001,共4页

为研究顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞CHMp凋亡影响,本试验采用不同浓度的顺铂以不同作用时间处理细胞,用MTT法检测细胞活性,通过透射电镜观察CHMp细胞形态学变化,用流式细胞仪研究CHMp细胞凋亡和周期。结果显示,CHMp细胞生长受浓度和时间... 为研究顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞CHMp凋亡影响,本试验采用不同浓度的顺铂以不同作用时间处理细胞,用MTT法检测细胞活性,通过透射电镜观察CHMp细胞形态学变化,用流式细胞仪研究CHMp细胞凋亡和周期。结果显示,CHMp细胞生长受浓度和时间双重依赖,浓度越高,时间越长,抑制越明显,在电镜下观察细胞出现明显的凋亡形态,同时5μmol/L顺铂作用24 h后细胞阻滞于G1/S期,比例高达75.12%。结果表明,顺铂能抑制CHMp增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞G1/S期。 展开更多

关键词 顺铂 犬乳腺肿瘤细胞 细胞凋亡

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伊维菌素上调自噬水平抑制犬乳腺肿瘤细胞的增殖 被引量：2

5

作者 刁洪秀 程楠 +1 位作者 张迪 林德贵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第2期13-16,共4页

为了探讨伊维菌素对犬乳腺肿瘤细胞的作用及可能机制,本研究采用CCK-8检测不同浓度伊维菌素对犬乳腺肿瘤细胞(CMT 7364,CIPp)增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色检测伊维菌素对细胞凋亡的影响;转染pEGFP-LC3质粒,荧光显微镜下观察伊维... 为了探讨伊维菌素对犬乳腺肿瘤细胞的作用及可能机制,本研究采用CCK-8检测不同浓度伊维菌素对犬乳腺肿瘤细胞(CMT 7364,CIPp)增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色检测伊维菌素对细胞凋亡的影响;转染pEGFP-LC3质粒,荧光显微镜下观察伊维菌素对自噬小体形成的影响;Western Blot检测伊维菌素处理后细胞中自噬标志分子LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的表达水平。结果发现:伊维菌素可抑制犬乳腺肿瘤细胞的增殖,并呈现时间与剂量依赖性关系,CMT 7364和CIPp细胞24 h的IC50值分别为10.2μmol/L和10.76μmol/L;伊维菌素对细胞凋亡水平影响轻微,12μmol/L处理24 h和48 h后凋亡细胞比例均小于3%,各处理间无统计学差异(P>0.05);伊维菌素可诱导细胞浆内自噬小体的形成,促进LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转化,诱导细胞自噬。表明伊维菌素通过诱导犬乳腺肿瘤细胞自噬发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 伊维菌素 犬乳腺肿瘤细胞 自噬

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紫杉醇对犬乳腺肿瘤细胞bcl-2和p53的mRNA表达的影响 被引量：2

6

作者 张力国 李情 +4 位作者 陈萌 杨超 卢婷 姚微 刘云 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期538-541,共4页

为研究紫杉醇对犬乳腺肿瘤细胞(CHMm)周期相关因子bcl-2、p53 mRNA表达的影响,本研究以不同浓度的紫杉醇在不同作用时间处理CHMm,通过SYBR荧光定量PCR检测bcl-2、p53的mRNA表达的变化。结果显示:紫杉醇作用后,CHMm细胞生长受到不同程度... 为研究紫杉醇对犬乳腺肿瘤细胞(CHMm)周期相关因子bcl-2、p53 mRNA表达的影响,本研究以不同浓度的紫杉醇在不同作用时间处理CHMm,通过SYBR荧光定量PCR检测bcl-2、p53的mRNA表达的变化。结果显示:紫杉醇作用后,CHMm细胞生长受到不同程度抑制,并引起细胞凋亡。在紫杉醇诱导CHMm产生细胞毒性导致细胞死亡率不高的情况下,1μmol/L作用12 h^24 h bcl-2 mRNA降低明显。1μmol/L紫杉醇作用24 h高于0.01μmol/L作用48 h时p53 mRNA升高的比值,差异显著(p<0.01)。表明1μmol/L紫杉醇对抑制原癌基因bcl-2、促进抑癌基因p53的表达效果最好,并具有诱导细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 紫杉醇 犬乳腺肿瘤细胞 BCL-2 P53

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PDT对犬乳腺肿瘤细胞株CHMm的体外杀伤效应的研究 被引量：1

7

作者 马兴乾 金鹏 +2 位作者 任晓丽 张蓉蓉 刘云 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期81-82,共2页

目的:探讨光动力疗法(PDT)对体外培养犬乳腺肿瘤细胞株CHMm的杀伤效应。方法:用不同浓度的血卟啉单甲醚(HMME)和不同剂量的氦氖激光,连续照射犬乳腺瘤细胞株CHMm后,用MTT法测定其OD490值,确定光敏感剂和光照的最佳剂量。HMME-PDT后不同... 目的:探讨光动力疗法(PDT)对体外培养犬乳腺肿瘤细胞株CHMm的杀伤效应。方法:用不同浓度的血卟啉单甲醚(HMME)和不同剂量的氦氖激光,连续照射犬乳腺瘤细胞株CHMm后,用MTT法测定其OD490值,确定光敏感剂和光照的最佳剂量。HMME-PDT后不同时间点检测细胞SOD、GSH-PX活性和MDA含量的变化。结果:在相同剂量的激光照射下,HMME浓度为20μg/mL杀伤作用最明显;在相同的HMME浓度下,激光剂量大于2.8J/cm2时OD490值抵达平台。PDT后随时间延长MDA含量增加,SOD、GSH-PX活性降低。结论:PDT对体外培养的犬乳腺肿瘤细胞株CHMm有明确的杀伤效应,且HMME浓度20μg/ml、激光剂量2.8J/cm2是本实验PDT的最佳作用参数,PDT对犬乳腺肿瘤细胞株CHMm的杀伤效应可能是由于细胞MDA增加和SOD、GSH-PX降低而引起的。 展开更多

关键词 光动力学疗法 血卟啉单甲醚 犬乳腺肿瘤细胞 凋亡

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miR-502调控犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移和EMT的作用机制

8

作者 任晓丽 范玉营 +4 位作者 皇甫和平 王军 靳双星 刘云 石冬梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4379-4388,共10页

旨在探讨微小RNA-502(microRNA-502/miR-502)靶向RNA结合基序单链相互作用蛋白1(RNA-binding motif,single-stranded-interacting protein 1,RBMS1)对犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)... 旨在探讨微小RNA-502(microRNA-502/miR-502)靶向RNA结合基序单链相互作用蛋白1(RNA-binding motif,single-stranded-interacting protein 1,RBMS1)对犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其作用机制。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测犬乳腺肿瘤细胞(CHMp和CHMm)和正常乳腺组织中miR-502和RBMS1的转录水平;利用脂质体转染法将miR-502模拟物(mimic)、抑制剂(inhibitor)、阴性对照(negative control,NC)分别转染至犬乳腺肿瘤CHMm和CHMp细胞,用qRT-PCR方法检测细胞中miR-502的表达水平,以MTT法和Transwell试验分别检测细胞的增殖和迁移能力;通过qRT-PCR和Western blot方法检测转染miR-502后对上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、间质细胞标志物波形蛋白(vimentin)、细胞迁移标志物基质金属蛋白酶(MMP2)、增殖标志物增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA和蛋白表达水平;利用qRT-PCR和双荧光素酶报告试验验证miR-502与RBMS1基因的靶向关系。结果显示:与正常乳腺组织组相比,miR-502在犬乳腺肿瘤细胞中表达显著上调,RBMS1在犬乳腺肿瘤细胞中转录下调;转染miR-502 mimic后miR-502的转录水平显著高于miR-NC组,反之转染miR-502 inhibitor后miR-502的转录水平显著下调;与miR-NC组相比,转染miR-502 mimic显著促进犬乳腺肿瘤细胞的增殖和迁移,抑制E-cadherin mRNA和蛋白的表达,促进vimentin、MMP2、PCNA mRNA和蛋白表达水平升高;反之,转染miR-502 inhibitor可显著抑制犬乳腺肿瘤细胞的增殖和迁移,促进E-cadherin mRNA和蛋白表达升高,降低vimentin、MMP2、PCNA mRNA和蛋白表达水平;qRT-PCR和荧光素酶报告试验显示,miR-502通过靶向RBMS13′-UTR抑制RBMS1 mRNA的表达。上述结果提示,miR-502在犬乳腺肿瘤细胞中高表达,干扰miR-502的表达可以影响犬乳腺肿瘤CHMm细胞的增殖、迁移及EMT,且miR-502靶向调控RBMS1 mRNA的表达。 展开更多

关键词 miR-502 RBMS1 犬乳腺肿瘤细胞 增殖/迁移 上皮-间质转化

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犬乳腺肿瘤裸鼠模型建立及其生长特性

9

作者 刘镇 饶家榕 +4 位作者 吕俊瑾 芶思 李惠珍 林辉 远立国 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期861-869,共9页

为研究犬乳腺肿瘤发展的生物学特性及动态演变过程,建立犬乳腺肿瘤裸鼠模型,探讨其发生及发展规律。将绿色荧光蛋白(GFP)导入到犬乳腺肿瘤CHMm系和CHMp系细胞,将细胞悬液注射种植至裸鼠右侧第二对乳头处,建立裸鼠模型。通过活体成像技... 为研究犬乳腺肿瘤发展的生物学特性及动态演变过程,建立犬乳腺肿瘤裸鼠模型,探讨其发生及发展规律。将绿色荧光蛋白(GFP)导入到犬乳腺肿瘤CHMm系和CHMp系细胞,将细胞悬液注射种植至裸鼠右侧第二对乳头处,建立裸鼠模型。通过活体成像技术与病理学检测技术,研究不同时间段裸鼠体内肿瘤的动态变化。结果显示:倒置荧光显微镜下可观察到GFP标记的CHMm-GFP和CHMp-GFP细胞均发出稳定的绿色荧光信号,种植后第6天出现肉眼可见肿瘤。通过对接种后第25、35、45和60天荧光信号进行检测和病理检查,绘制肿瘤生长曲线和体重变化曲线;且在接种后第25天裸鼠活体成像时,CHMm-GFP系裸鼠体内荧光信号最强,而CHMp-GFP系则在第35天时,裸鼠体内荧光信号最强。在接种后第25天的离体脏器成像检测时,发现两组裸鼠各有1只淋巴结开始显现荧光信号;第35天3只裸鼠淋巴结内均显示荧光信号,其他脏器无荧光信号。第25天病理组织切片检测,两种细胞系分别有1只裸鼠的肿瘤转移至淋巴结内;在第35、45和60天时解剖裸鼠,发现肿瘤均已转移到淋巴结。建立了两个细胞系犬乳腺肿瘤裸鼠模型,两个细胞系在裸鼠体内不同时段呈现不同的生长特性,且均可转移,为深入研究乳腺肿瘤发生和发展规律提供参考。 展开更多

关键词 犬乳腺肿瘤细胞 成瘤模型 裸鼠 生长特性

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光动力学作用对犬乳腺肿瘤细胞IL-6和IL-2影响的试验

10

作者 马兴乾 金鹏 +3 位作者 冯新畅 李华涛 唐大木 刘云 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第2期9-11,共3页

用HMME-PDT作用于犬乳腺肿瘤细胞株CHMm后,台盼蓝染色绘制各组细胞的生长曲线,放射免疫法检测PDT后不同时间点检测细胞IL-6、IL-2含量的变化。台盼蓝染色PDT组与对照组比较细胞死亡率明显上升,PDT后随时间延长IL-2含量增加,IL-6含量降... 用HMME-PDT作用于犬乳腺肿瘤细胞株CHMm后,台盼蓝染色绘制各组细胞的生长曲线,放射免疫法检测PDT后不同时间点检测细胞IL-6、IL-2含量的变化。台盼蓝染色PDT组与对照组比较细胞死亡率明显上升,PDT后随时间延长IL-2含量增加,IL-6含量降低。说明PDT对犬乳腺肿瘤细胞株CHMm的杀伤效应可能是由于细胞IL-6、IL-2含量的变化而引起的。 展开更多

关键词 光动力学疗法 血卟啉单甲醚 犬乳腺肿瘤细胞 凋亡

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RNAi沉默接触蛋白-1对犬乳腺肿细胞系CHMm增殖及迁移的影响

11

作者 刘佳 杨超 +6 位作者 王英雪 童津津 赵冰冰 肖敏 常宏建 任晓丽 刘云 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期90-93,共4页

为探究接触蛋白-1(CNTN1)对体外培养的犬乳腺肿瘤细胞CHMm增殖及迁移能力的影响,本研究利用RNAi技术沉默CNNT1基因在犬乳腺肿瘤CHMm细胞中的表达,采用CCK8法检测CHMm细胞增殖能力、细胞划痕法检测CHMm细胞迁移能力,western blot检测CHM... 为探究接触蛋白-1(CNTN1)对体外培养的犬乳腺肿瘤细胞CHMm增殖及迁移能力的影响,本研究利用RNAi技术沉默CNNT1基因在犬乳腺肿瘤CHMm细胞中的表达,采用CCK8法检测CHMm细胞增殖能力、细胞划痕法检测CHMm细胞迁移能力,western blot检测CHMm细胞中E-cadherin蛋白含量。结果显示CNTN1沉默后,对犬乳腺肿瘤细胞CHMm增殖无明显影响,但能够导致使细胞迁移能力显著减弱,细胞中E-cadherin蛋白含量明显增加。研究表明CNTN1对犬乳腺肿瘤CHMm增殖调节无明显作用,对犬乳腺肿瘤细胞CHMm作用主要是通过降低E-cadherin蛋白的表达增强体外培养的肿瘤细胞迁移力,为犬乳腺肿瘤的治疗提供新的靶点。 展开更多

关键词 犬乳腺肿瘤细胞 CNTN1 增殖 迁移 E-cadherin

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