目的建立超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(ultra performance liquid chromatography quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)结合多元统计分析技术的分析方法,比较不同品种牛膝的化学成分差异。方...目的建立超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(ultra performance liquid chromatography quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)结合多元统计分析技术的分析方法,比较不同品种牛膝的化学成分差异。方法基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对怀牛膝Achyranthes bidentata、川牛膝Cyathula officinalis、红牛膝Cyathula capitata和土牛膝Achyranthes aspera的化学成分进行分析与鉴别,并运用多元统计分析筛选不同品种牛膝的差异性成分。结果共初步指认出230种化学成分,其中皂苷类81种、生物碱类26种、甾酮类12种、有机酸类75种、木脂素类19种和黄酮类17种。根据变量重要性投影(variable importance in projection,VIP)值>1,t检验(P<0.05)从4种牛膝中共筛选出25个化学标志物。其中,竹节参皂苷、牛膝皂苷在怀牛膝中占比居多;竹节参皂苷IVa在红牛膝中的占比最高;甾醇、黄酮醇、有机酸和糖苷类成分在川牛膝中的占比最高;齐墩果烷型皂苷和酪胺类生物碱类成分则在安徽土牛膝中占比最多。结论该方法快速、全面地对牛膝植物资源的成分进行系统分析,为牛膝的品种分类鉴别和资源开发利用提供了基础。展开更多
目的:建立反相高效液相色谱法同时测定怀牛膝中牛膝皂苷II和β-蜕皮甾酮的含量方法。方法:Sun Fire ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇—0.5 m L/L磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 m L/min,最大吸收波长(牛膝皂苷II 240 nm,β...目的:建立反相高效液相色谱法同时测定怀牛膝中牛膝皂苷II和β-蜕皮甾酮的含量方法。方法:Sun Fire ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇—0.5 m L/L磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 m L/min,最大吸收波长(牛膝皂苷II 240 nm,β-蜕皮甾酮250 nm)下检测。结果:牛膝皂苷II在1.42-14.20μg、β-蜕皮甾酮在0.220 8-2.208 0μg范围内,线性关系良好,相关系数分别为0.999 6,0.999 8,平均回收率牛膝皂苷II为98.31%(RSD=2.43%),β-蜕皮甾酮为100.00%(RSD=2.88%)。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于怀牛膝的定量控制。展开更多
目的:观察牛膝总皂苷对类风湿关节炎大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡和滑膜组织中白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:将50只SD大鼠按照体质量随机分为正常对照组,模型对照组,牛膝总...目的:观察牛膝总皂苷对类风湿关节炎大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡和滑膜组织中白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:将50只SD大鼠按照体质量随机分为正常对照组,模型对照组,牛膝总皂苷低、中、高剂量组5组。皮下注射Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂建立类风湿关节炎模型。造模后第7 d开始给药。牛膝总皂苷低、中、高剂量组分别以牛膝总皂苷60,120,240μg/g灌胃,正常对照组和模型对照组灌胃等体积的纯水,1 d 1次,连续28 d。以流式细胞术检测外周血Th17和Treg水平;用酶联免疫吸附法检测滑膜组织匀浆中IL-2、IL-6和TNF-α;以苏木精-伊红染色,观察大鼠关节组织病理变化。结果:与正常对照组对比,模型对照组大鼠外周血中Th17水平升高,Treg水平降低,滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01);踝关节组织炎性改变。与模型对照组对比,牛膝总皂苷中、高剂量组外周血中Th17水平降低,Treg水平升高,滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);踝关节组织炎性病变明显改善。结论:牛膝总皂苷可能通过逆转Th17/Treg的失衡、抑制炎症因子分泌来发挥治疗类风湿关节炎的作用。展开更多
文摘目的建立超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(ultra performance liquid chromatography quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)结合多元统计分析技术的分析方法,比较不同品种牛膝的化学成分差异。方法基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对怀牛膝Achyranthes bidentata、川牛膝Cyathula officinalis、红牛膝Cyathula capitata和土牛膝Achyranthes aspera的化学成分进行分析与鉴别,并运用多元统计分析筛选不同品种牛膝的差异性成分。结果共初步指认出230种化学成分,其中皂苷类81种、生物碱类26种、甾酮类12种、有机酸类75种、木脂素类19种和黄酮类17种。根据变量重要性投影(variable importance in projection,VIP)值>1,t检验(P<0.05)从4种牛膝中共筛选出25个化学标志物。其中,竹节参皂苷、牛膝皂苷在怀牛膝中占比居多;竹节参皂苷IVa在红牛膝中的占比最高;甾醇、黄酮醇、有机酸和糖苷类成分在川牛膝中的占比最高;齐墩果烷型皂苷和酪胺类生物碱类成分则在安徽土牛膝中占比最多。结论该方法快速、全面地对牛膝植物资源的成分进行系统分析,为牛膝的品种分类鉴别和资源开发利用提供了基础。
文摘目的:观察牛膝总皂苷对类风湿关节炎大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡和滑膜组织中白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:将50只SD大鼠按照体质量随机分为正常对照组,模型对照组,牛膝总皂苷低、中、高剂量组5组。皮下注射Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂建立类风湿关节炎模型。造模后第7 d开始给药。牛膝总皂苷低、中、高剂量组分别以牛膝总皂苷60,120,240μg/g灌胃,正常对照组和模型对照组灌胃等体积的纯水,1 d 1次,连续28 d。以流式细胞术检测外周血Th17和Treg水平;用酶联免疫吸附法检测滑膜组织匀浆中IL-2、IL-6和TNF-α;以苏木精-伊红染色,观察大鼠关节组织病理变化。结果:与正常对照组对比,模型对照组大鼠外周血中Th17水平升高,Treg水平降低,滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01);踝关节组织炎性改变。与模型对照组对比,牛膝总皂苷中、高剂量组外周血中Th17水平降低,Treg水平升高,滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);踝关节组织炎性病变明显改善。结论:牛膝总皂苷可能通过逆转Th17/Treg的失衡、抑制炎症因子分泌来发挥治疗类风湿关节炎的作用。