牛乳源金黄色葡萄球菌EsxB蛋白的表达及免疫效应分析 被引量：2

1

作者 张雪静 易鸳鸯 +2 位作者 杨志荣 马晓慧 苏艳 《新疆农业大学学报》 CAS 2019年第1期53-58,共6页

为分析牛乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)EsxB蛋白的免疫特性,扩增EsxB基因并构建了pET-28a-EsxB重组质粒,转化后的重组菌经诱导表达后用SDS-PAGE和Western blotting检测重组蛋白;以纯化的EsxB蛋白免疫小鼠,检测其抗体水平... 为分析牛乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)EsxB蛋白的免疫特性,扩增EsxB基因并构建了pET-28a-EsxB重组质粒,转化后的重组菌经诱导表达后用SDS-PAGE和Western blotting检测重组蛋白;以纯化的EsxB蛋白免疫小鼠,检测其抗体水平、滴度及亚型、测定攻击保护率和观察小鼠肺、肾病理组织学变化。结果显示,成功纯化了EsxB蛋白,且该蛋白具有良好的抗体反应特性。免疫小鼠的血清抗体水平与对照组相比显著升高;抗体滴度可达1∶24 300,抗体亚型以IgG1和IgG2b为主,免疫小鼠的攻击保护率可达75%;且免疫后降低了S.aureus攻击对小鼠肺脏及肾脏的病理损伤。重组EsxB蛋白具有良好的免疫原性和保护效果。 展开更多

关键词 牛源金黄色葡萄球菌 EsxB蛋白 表达与纯化 免疫效应

下载PDF 职称材料

重组牛乳源金黄色葡萄球菌GapC蛋白优势B细胞抗原表位的预测和筛选

2

作者 陈晓萌 张雪静 +2 位作者 张欢 张宝江 苏艳 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期306-313,共8页

旨在表达牛乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)GapC蛋白并对其B细胞抗原表位进行预测与鉴定,本研究利用实验室分离鉴定的S.aureus分离株15119扩增GapC基因并构建重组表达质粒pET-28a-GapC,诱导纯化得到分子量为44 kD重组蛋白Ga... 旨在表达牛乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)GapC蛋白并对其B细胞抗原表位进行预测与鉴定,本研究利用实验室分离鉴定的S.aureus分离株15119扩增GapC基因并构建重组表达质粒pET-28a-GapC,诱导纯化得到分子量为44 kD重组蛋白GapC,以此免疫新西兰大白兔,获得特异多克隆抗体。利用生物信息学方法,对GapC蛋白的二级及三级结构进行分析,预测其B细胞抗原表位,并利用特异性抗体对筛选的表位进行鉴定。结果表明,GapC蛋白具有良好的免疫原性,筛选出7个线性B细胞抗原表位,利用兔抗重组GapC蛋白多克隆抗体鉴定得到了PL 5(^(221)IPEIDGKLDGGAQRVP^(236))多肽和PL 7(^(264)KNASNESFGYTEDEIVSSDVVGM^(286))2个优势B细胞表位。本研究成功制备了GapC蛋白,预测并鉴定了2个优势抗原表位,为其嵌合表位疫苗的开发提供了技术支持。 展开更多

关键词 牛源金黄色葡萄球菌 GapC蛋白 表达 B细胞抗原表位 预测与鉴定

下载PDF 职称材料

一例鸡源金黄色葡萄球菌的分离鉴定与耐药性分析 被引量：19

3

作者 赵鹤庭 严红亚 +4 位作者 何辉 罗文华 字吉祥 常志顺 信爱国 《云南畜牧兽医》 2019年第4期5-7,共3页

采集关节肿胀、关节囊内有浆液性渗出物患病鸡肝脏及骨髓进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、革兰氏染色、生理生化试验、PCR鉴定、16SrDNA序列测定和药敏试验。结果从病鸡样品中分离出一株在普通琼脂平板上形成湿润、表面光滑、隆... 采集关节肿胀、关节囊内有浆液性渗出物患病鸡肝脏及骨髓进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、革兰氏染色、生理生化试验、PCR鉴定、16SrDNA序列测定和药敏试验。结果从病鸡样品中分离出一株在普通琼脂平板上形成湿润、表面光滑、隆起的圆形菌落,菌落在血琼脂平板上能产生β溶血;分离菌为革兰氏阳性,符合金黄色葡萄球菌生化培养特性;PCR检测结果显示金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因呈阳性,细菌16SrDNA核酸序列Blast比对结果显示为金黄色葡萄球菌;分离菌对阿莫西林、四环素、青霉素G、氯霉素、复方新诺明和氨苄西林具有耐药性。结果为云南鸡源金黄色葡萄球菌病的临床诊断和防治提供了依据。 展开更多

关键词 鸡源金黄色葡萄球菌 分离鉴定 耐药性

下载PDF 职称材料

猪源致病性金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其耐药性分析 被引量：15

4

作者 邵士慧 李槿年 +1 位作者 王评评 阎家舜 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期308-311,共4页

目的鉴定引起猪渗出性皮炎的病原,并分析猪源致病性金黄色葡萄球菌的耐药性,为临床用药提供依据。方法采集患渗出性皮炎的仔猪标本进行细菌分离培养,联合应用形态学检查、生理生化试验和PCR方法鉴定分离菌株,并进行致病性和药物敏感性... 目的鉴定引起猪渗出性皮炎的病原,并分析猪源致病性金黄色葡萄球菌的耐药性,为临床用药提供依据。方法采集患渗出性皮炎的仔猪标本进行细菌分离培养,联合应用形态学检查、生理生化试验和PCR方法鉴定分离菌株,并进行致病性和药物敏感性试验。结果先后从病猪标本中分离鉴定获得PSA1、PSA2、PSA3和PSA4四株金黄色葡萄球菌,其中PSA1和PSA3分离株的致病性较强。药敏试验结果显示PSA1、PSA2和PSA3分离株为MRSA菌株,PSA4分离株为MSSA菌株。MRSA菌株对14种抗菌药物均呈现不同程度的耐药,尤其是对青霉素、链霉素、四环素、强力霉素、环丙沙星和氧氟沙星等6种抗菌药物的耐药率达100%。所有分离株对万古霉素与替考拉宁均敏感。结论合肥地区猪渗出性表皮炎的病原为金黄色葡萄球菌。猪源致病性金黄色葡萄球菌合肥分离株具有多重耐药性,治疗猪渗出性皮炎应建立在体外药敏试验的基础上,有针对性选择抗菌药物。 展开更多

关键词 猪源金黄色葡萄球菌 分离鉴定 致病性 耐药性 耐甲氧西林菌株

原文传递

牛乳源金黄色葡萄球菌EsxA蛋白的表达及免疫原性分析 被引量：6

5

作者 易鸳鸯 赵亚南 +2 位作者 马鹏睿 李斌 苏艳 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期694-702,共9页

为分析牛乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)EsxA蛋白的免疫原性,构建EsxA-p ET-28a重组表达质粒,重组质粒经诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。用纯化后重组EsxA蛋白免疫小鼠,用间接ELISA检测免疫小鼠血清中的IgG... 为分析牛乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)EsxA蛋白的免疫原性,构建EsxA-p ET-28a重组表达质粒,重组质粒经诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。用纯化后重组EsxA蛋白免疫小鼠,用间接ELISA检测免疫小鼠血清中的IgG、IgG1和IgG2a水平;免疫小鼠经S.aureus菌株攻击后,检测小鼠肝、脾、肾组织荷菌数和免疫保护率,观察S.aureus菌株攻击后小鼠肝、脾、肾病理组织学变化。结果表明,成功诱导表达了EsxA重组蛋白,该重组蛋白免疫小鼠后血清抗体效价可达1∶900,与对照相比,重组蛋白免疫后可减少小鼠肝、脾、肾组织的荷菌数,减轻这些脏器的病理损伤,对免疫小鼠保护率达75%。上述结果表明,该重组Esx A蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多

关键词 牛乳源金黄色葡萄球菌 EsxA蛋白 原核表达 免疫原性

原文传递

仔猪源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量：2

6

作者 党冰 《特种经济动植物》 2024年第3期4-5,68,共3页

为了解山东省乳山地区规模化猪场及散养户中仔猪源金黄色葡萄球菌流行情况、致病性及耐药性情况,于2021—2023年采集山东省乳山地区规模化猪场及散养户中患病仔猪的鼻拭子、关节液、肺脏及肝脏等病料组织141份,采用细菌分离培养、形态... 为了解山东省乳山地区规模化猪场及散养户中仔猪源金黄色葡萄球菌流行情况、致病性及耐药性情况,于2021—2023年采集山东省乳山地区规模化猪场及散养户中患病仔猪的鼻拭子、关节液、肺脏及肝脏等病料组织141份,采用细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定及PCR方法等进行金黄色葡萄球菌分离与鉴定,采用人工感染小鼠试验和K-B药敏纸片法分别检测金黄色葡萄球菌分离菌株的致病性和耐药性情况。结果显示:从141份病料样品中分离到89株金黄色葡萄球菌,分离率为63.1%(89/141),通过人工感染小鼠试验,60株金黄色葡萄球菌可以引起小鼠发病与死亡,被鉴定为致病性菌株;60株金黄色葡萄球菌对新霉素、氟苯尼考、大观霉素等9种药物耐药率在50%以上,对其他的药物耐药率为6.7%~28.3%。研究可为该地区仔猪源金黄色葡萄球菌合理用药及防控提供参考。 展开更多

关键词 仔猪 仔猪源金黄色葡萄球菌 分离鉴定 致病性 药敏试验

下载PDF 职称材料

百里香酚对犊牛源生物被膜阳性金黄色葡萄球菌耐药性的消除作用 被引量：1

7

作者 赵红霞 顾珂瑞 +5 位作者 宋晨 李培锋 孙月 樊宏亮 郭宇 徐文琦 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期66-71,共6页

为了了解内蒙古地区犊牛病料中生物被膜阳性金黄色葡萄球菌的流行情况、耐药情况及百里香酚对生物被膜阳性金黄色葡萄球菌耐药性的消除作用。本试验采用生化鉴定和PCR方法,对采集到的104份犊牛病料进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定;采用K-... 为了了解内蒙古地区犊牛病料中生物被膜阳性金黄色葡萄球菌的流行情况、耐药情况及百里香酚对生物被膜阳性金黄色葡萄球菌耐药性的消除作用。本试验采用生化鉴定和PCR方法,对采集到的104份犊牛病料进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定;采用K-B法检测了金黄色葡萄球菌分离株对18种抗菌药物的敏感性;采用改良结晶紫染色法测定分离株的生物被膜形成能力;选取2株生物被膜强阳性菌株,采用微量肉汤稀释法测定百里香酚对分离株的最小抑菌浓度,并进行百里香酚耐药性消除试验。结果显示,在104份犊牛病料中共分离鉴定获得43株金黄色葡萄球菌。药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌分离株对氨苄西林、头孢西丁、卡那霉素、复方新诺明和红霉素5种抗菌药物的耐药率达到50.0%以上;74.4%(32/43)的分离株为多重耐药株。生物被膜形成能力强、中、弱和无生物被膜形成能力的分离株分别占比23.3%(10/43)、16.3%(7/43)、32.6%(14/43)和27.9%(12/43);生物被膜阳性株中83.9%(26/31)为多重耐药株。百里香酚对2株生物被膜强阳性株的最小抑菌浓度均为256 mg/mL,经百里香酚处理后均恢复了对头孢噻肟的敏感性。结果表明,百里香酚对生物被膜阳性金黄色葡萄球菌具有一定的耐药消除作用。 展开更多

关键词 犊牛源金黄色葡萄球菌 生物被膜 多重耐药性 百里香酚 耐药消除

下载PDF 职称材料

一株羊源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及16S rRNA测序分析

8

作者 刘亚波 四朗玉珍 +3 位作者 格桑卓嘎 班旦 富国文 樊月圆 《当代畜牧》 2024年第8期47-50,共4页

葡萄球菌感染会导致羊只生产力下降、死亡率增加、提高非必要人工及药物成本。本试验对羔羊腹泻样本中的疑似菌进行了分离培养、革兰氏染色及镜检、生化试验以及同源性分析。普通琼脂上可见生长湿润、表面光滑、微微隆起的单个菌落;血... 葡萄球菌感染会导致羊只生产力下降、死亡率增加、提高非必要人工及药物成本。本试验对羔羊腹泻样本中的疑似菌进行了分离培养、革兰氏染色及镜检、生化试验以及同源性分析。普通琼脂上可见生长湿润、表面光滑、微微隆起的单个菌落;血琼脂上产生β溶血现象;革兰氏染色呈蓝紫色,大多数细菌呈球状、葡萄状或者链状排列,判定为革兰氏阳性菌。生化鉴定结果显示,该菌能分解葡萄糖、果糖、麦芽糖、甘露醇,不产生H2S,与金黄色葡萄球菌的特征相符。16S rRNA测序及同源性比对结果显示,该菌与MRSA-1、MRSA-3、MRSA-2参考毒株同源性较高(达到99%)。以上结果证明,引起此次腹泻的致病菌是金黄色葡萄球菌。该结果为云南羊源金黄色葡萄球菌病的临床诊断和防治提供了依据。 展开更多

关键词 羊源金黄色葡萄球菌 分离鉴定 16S rRNA测序

原文传递

猪源金黄色葡萄球菌分离鉴定及16srRNA基因遗传进化分析

9

作者 张小冬 郭晓银 +2 位作者 王贵平 胡仕凤 尹崇 《兽医导刊》 2020年第2期180-181,共2页

从湖南省养猪场采集猪拭子和肺脏300份进行金黄色葡萄球菌(S.aureus)分离.用生化试验和PCR进行鉴定;选择5株分离菌进行遗传进化分析.结果显示,所有分离株触酶试验、糖发酵试验、VP试验、溶血试验和耐热核酸酶试验均为阳性.92.3%的分离... 从湖南省养猪场采集猪拭子和肺脏300份进行金黄色葡萄球菌(S.aureus)分离.用生化试验和PCR进行鉴定;选择5株分离菌进行遗传进化分析.结果显示,所有分离株触酶试验、糖发酵试验、VP试验、溶血试验和耐热核酸酶试验均为阳性.92.3%的分离株血浆凝固酶试验为阳性.PCR鉴定均为阳性.分离株16s rRNA和nuc部分基因片段与Genbank公开的相关序列相似性分别为98.0%以上和99.0%以上.5株分离株与S.aureus GHA10等处于同一进化分支.S.aureus分离率21.67%.肺脏、拭子、母猪和仔猪分离率分别是21.52%、21.79%、19.71%和23.41%.本研究结果对湖南地区S.aure-us致病性、耐药性和耐药机制的研究提供了素材. 展开更多

关键词 猪源金黄色葡萄球菌 分离鉴定 遗传进化

下载PDF 职称材料

吉林省动物源性金黄色葡萄球菌和链球菌的耐药性监测 被引量：5

10

作者 李乾学 阎继业 +1 位作者 邓旭明 王学林 《吉林畜牧兽医》 2002年第6期7-8,共2页

金黄色葡萄球菌和链球菌是临床上常见的病原菌,它们的共同点是都可引起各种化脓创和败血症,及各内脏器官的严重感染。这两类细菌感染性疾病常用青霉素类、喹诺酮类等药物治疗。随着药物的广泛使用,耐药菌株逐渐发展起来。我们对临床分离... 金黄色葡萄球菌和链球菌是临床上常见的病原菌,它们的共同点是都可引起各种化脓创和败血症,及各内脏器官的严重感染。这两类细菌感染性疾病常用青霉素类、喹诺酮类等药物治疗。随着药物的广泛使用,耐药菌株逐渐发展起来。我们对临床分离的47株金黄色葡萄球菌和24株链球菌进行了20种常用药物的耐药性监测。 展开更多

关键词 吉林 耐药性监测 动物源性金黄色葡萄球菌 动物源性链球菌 抗菌药物

下载PDF 职称材料

牛源金黄色葡萄球菌耐药现状及药敏检测方法探讨 被引量：1

11

作者 李娟 《中国畜牧兽医文摘》 2017年第3期64-64,共1页

文章以"牛源金黄色葡萄球菌"为主要研究对象,就其耐药现状以及具体的药敏监测方法展开深入、细致的研究与分析,希望能为进一步做好抗生素的使用提供有力的依据和参考。

关键词 牛源金黄色葡萄球菌 耐药 药敏检测方法

下载PDF 职称材料