利用16S rDNA克隆文库及限制性内切酶片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP）技术分析脆肉鲩鱼在冷藏条件下的特定腐败菌。分别提取新鲜鱼肉及腐败的脆肉鲩鱼肉样品中的细菌总DNA并利用通用引物27F/1492R进行...利用16S rDNA克隆文库及限制性内切酶片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP）技术分析脆肉鲩鱼在冷藏条件下的特定腐败菌。分别提取新鲜鱼肉及腐败的脆肉鲩鱼肉样品中的细菌总DNA并利用通用引物27F/1492R进行PCR扩增,所得PCR产物用于构建克隆文库,阳性克隆子用RFLP进行分析。结果表明：新鲜鱼肉的克隆文库中细菌种类比较丰富,达15种类型,而腐败鱼肉的细菌种类只有7种,且有2种分型的细菌占优势,共占克隆子总数的88.4%。序列比对分析表明,这2种优势菌的16S rDNA序列与假单孢菌属（Pseudomonas）细菌的核苷酸序列的相似性高达99%,说明脆肉鲩鱼在冷藏条件下的特定腐败菌是假单孢菌（Pseudomonassp.）。展开更多
文摘应用限制性片段长度多态性（RFLP）、双向逆转录-聚合酶链式反应（BD-PCR）、序列分析等技术对我国部分地区柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus，CTV）柚类分离株进行了鉴定分析。结果表明：柚类以受相对单一的CTV株系侵染为主；柚类上的优势流行株系属于p25／Hin f ⅠRFLP6组群（占79．4％）和p23／BD-PCRⅢ组群（占84．1％）；在对柚类CTV分离株S051～S058及国外CTV分离株PB61、T30、T36、T385、SY568、VT、NUAGA的p23、p25基因序列分析中，S051与弱毒株PB61的同源性最高；S052与弱毒株T30、T385的同源性最高；S053、S054、S055、S056、S057、S058与其它CTV分离株的同源关系均较远，并在系统发生树上形成了独立的分枝。
