腹腔注射烟草烟雾提取物制备小鼠慢性阻塞性肺疾病模型的评价 被引量：10

1

作者 张倩 黄萍 +4 位作者 李艳 姚秀娟 孙英 王炜 孙永昌 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期279-285,共7页

目的 对烟草烟雾提取物（CSE）腹腔注射诱导小鼠慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）模型进行评价并探讨可能的发病机制.方法 6～8周龄体重为21～23 9的SPF级近交系C57BL/6雄性小鼠36只,按照随机数字表法分为2组,每组18只,腹腔注射CSE建立小鼠... 目的 对烟草烟雾提取物（CSE）腹腔注射诱导小鼠慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）模型进行评价并探讨可能的发病机制.方法 6～8周龄体重为21～23 9的SPF级近交系C57BL/6雄性小鼠36只,按照随机数字表法分为2组,每组18只,腹腔注射CSE建立小鼠慢阻肺模型,测定小鼠肺力学参数、肺泡灌洗液中细胞总数和细胞分类数目、观察肺组织病理学改变同时测量平均内衬间隔（MLI）及肺泡破坏指数（DI）;检测基质金属蛋白酶12（MMP12）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）和金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP1）及肺组织匀浆中促炎细胞因子[肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-1β及IL-6]、Th1型细胞因子IFN-γ 、Th2型细胞因子IL-5、IL-13和中性粒细胞趋化因子的表达水平.结果 实验21、41和61 d,CSE组小鼠肺总量（TLC）分别为（0.73±0.02）、（0.83±0.04）和（0.97±0.02）ml,均显著高于对照组的（0.65土0.01）、（0.67±0.02）和（0.71±0.04） ml,差异有统计学意义（t值分别为4.109、3.666和5.994,均P＜0.01）;41和61 d呼吸系统顺应性（compliance）分别为（0.041土0.002）和（0.039±0.001） ml/cmH2O（1 cmH2O=0.098 kPa）,较对照组的（0.030±0.001）和（0.032±0.003） ml/cmH2O均显著增加,差异有统计学意义（t值分别为4.788和2.508,均P＜0.05）;41和61 d呼吸系统阻力分别为（0.959±0.016）和（0.976±0.020） cmH_2O·s·ml^-1,均显著低于对照组的（1.043±0.022）和（1.085±0.043） cmH_2O·s·ml^-1,差异有统计学意义（t值分别为2.928和2.321,均P＜0.05）.21、41和61 d肺泡灌洗液中细胞总数分别为（23.83±2.63） ×10^4、（20.67±1.69）×10^4、（18.67±1.56）×10^4,明显高于对照组的（7.33±0.61） ×10^4、（7.67±0.76）×10^4、（6.67±0.88）×10^4,差异有统计学意义（t值分别为6.119、7.027、6.685,均P＜0.01）,其中以中性粒细胞和巨噬细胞为主.肺组织出现慢阻肺典型病理学改变,包括炎症细胞 展开更多

关键词 肺疾病 慢性阻塞性 肺气肿 模型 动物 烟草烟雾提取物

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硫化氢通过NCOA4介导的铁自噬调控铁死亡而减轻CSE诱导的肺泡上皮细胞损伤 被引量：5

2

作者 王莹 廖莎 +4 位作者 潘子涵 蒋思敏 樊静 陈亚红 张静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期33-39,共7页

目的:探究硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的肺泡上皮细胞损伤的作用及其机制。方法:使用肺泡上皮BEAS-2B细胞进行实验,细胞经不同浓度(0、1%、3%、5%、7%和9%)的CSE处理24 h,通过Weste... 目的:探究硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的肺泡上皮细胞损伤的作用及其机制。方法:使用肺泡上皮BEAS-2B细胞进行实验,细胞经不同浓度(0、1%、3%、5%、7%和9%)的CSE处理24 h,通过Western blot法检测环加氧酶2(cyclooxygenase 2,COX2)和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达量,CCK-8法检测细胞活力,以确定CSE的最适浓度。按照不同干预因素将细胞分为对照组、CSE组、CSE+NaHS(100μmol/L)组、CSE+NaHS(200μmol/L)组、CSE+NaHS(400μmol/L)组及单纯NaHS(400μmol/L)组进行后续实验。H2S供体NaHS预处理30 min后加入CSE,CCK-8法检测细胞活力的变化,铁离子检测试剂盒测定活性铁含量,共聚焦荧光显微镜采集脂质活性氧(lipid reactive oxygen species,Lip ROS)图片,流式细胞术测定细胞内总活性氧(reactive oxygen species,ROS)及Lip ROS含量,谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)检测试剂盒测定各自含量,Western blot检测核受体辅激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)、铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)、COX2和GPX4的表达情况。结果:Western blot检测结果显示,随着CSE浓度的增加,GPX4表达水平逐渐降低,COX2表达水平逐渐升高,细胞活力也逐渐降低但在CSE浓度为5%时显著降低(P<0.01),故选择5%浓度处理24 h作为后续CSE的刺激条件。与单纯CSE刺激组相比,NaHS(尤其是中、高浓度)预处理使细胞活力显著增加(P<0.05),抗氧化酶GSH-Px含量和GPX4表达水平显著增加(P<0.05),NCOA4、FTH1和COX2表达量及Fe2+含量显著降低(P<0.05),ROS和Lip ROS水平及MDA含量显著降低(P<0.05)。结论:H2S可通过抑制NCOA4介导的铁自噬-铁死亡减轻CSE诱导的肺泡上皮细胞损伤。 展开更多

关键词 肺泡上皮细胞 烟草烟雾提取物 硫化氢 核受体辅激活因子4 铁自噬 铁死亡

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碱性成纤维细胞生长因子在烟草烟雾诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用 被引量：4

3

作者 耿雷 刘闺男 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期345-350,共6页

目的探讨烟草烟雾提取物对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及碱性成纤维细胞生长因子在其中的作用。方法按不同浓度烟草烟雾提取物(0、2.5%、5%、10%和20%)分为对照组、低浓度、中等浓度、高浓度和过高浓度烟草烟雾提取物组刺激血管平滑... 目的探讨烟草烟雾提取物对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及碱性成纤维细胞生长因子在其中的作用。方法按不同浓度烟草烟雾提取物(0、2.5%、5%、10%和20%)分为对照组、低浓度、中等浓度、高浓度和过高浓度烟草烟雾提取物组刺激血管平滑肌细胞,采用MTT法观察细胞增殖变化,免疫细胞化学法测定碱性成纤维细胞生长因子和增殖细胞核抗原蛋白的表达,同时用逆转录-聚合酶链反应法检测碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达。用筛选出的最适烟草烟雾提取物浓度处理大鼠血管平滑肌细胞不同时间(0、4、8、12 h和24 h)后,检测碱性成纤维细胞生长因子mRNA及碱性成纤维细胞生长因子和增殖细胞核抗原蛋白的变化。用碱性成纤维细胞生长因子抗体和最适浓度烟草烟雾提取物干预血管平滑肌细胞24 h后检测细胞增殖及碱性成纤维细胞生长因子和增殖细胞核抗原蛋白表达的变化。结果 (1)与对照组相比,低浓度烟草烟雾提取物组(P<0.05)和中浓度组血管平滑肌细胞增加明显(P<0.01),而高浓度组和过高浓度组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。碱性成纤维细胞生长因子mRNA、蛋白和增殖细胞核抗原蛋白在对照组中有少量表达,低浓度烟草烟雾提取物组表达增加(P<0.01),中浓度烟草烟雾提取物组达到高峰,高浓度和过高浓度烟草烟雾提取物组仍高于对照组(P<0.01)。(2)对照组(不加烟草烟雾提取物组即0 h组)血管平滑肌细胞中有少量碱性成纤维细胞生长因子mRNA、蛋白和增殖细胞核抗原蛋白表达。低浓度烟草烟雾提取物刺激4 h后细胞内碱性成纤维细胞生长因子mRNA、蛋白和增殖细胞核抗原蛋白表达增加(P<0.01),碱性成纤维细胞生长因子mRNA于8 h达高峰;碱性成纤维细胞生长因子和增殖细胞核抗原蛋白于12 h达高峰。(3)碱性成纤维细胞生长因子抗体可显著抑制5%烟草烟雾提取物诱导的血 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 碱性成纤维细胞生长因子 血管平滑肌细胞 细胞增殖

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红霉素抑制PI3K/Akt通路增加Nrf2蛋白表达减轻烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应的效果研究

4

作者 孙雪皎 陈琳 +2 位作者 陈慧 李程 蓝官引 《重庆医学》 CAS 2023年第4期486-490,共5页

目的研究红霉素通过抑制PI3K/Akt通路增加Nrf2蛋白表达从而减轻烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应的效果。方法以人单核细胞株(U937)为研究对象,采用烟草烟雾提取物(CSE)制造细胞氧化应激模型,分为空白对照(NC)组、CSE组(CSE刺激细胞)、... 目的研究红霉素通过抑制PI3K/Akt通路增加Nrf2蛋白表达从而减轻烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应的效果。方法以人单核细胞株(U937)为研究对象,采用烟草烟雾提取物(CSE)制造细胞氧化应激模型,分为空白对照(NC)组、CSE组(CSE刺激细胞)、红霉素组(红霉素预孵育+CSE刺激细胞)、抑制剂组(PI3K通路抑制剂LY294002预孵育+CSE刺激细胞)等4组。根据转染Nrf2-siRNA干扰细胞中Nrf2蛋白的表达,分为siRNA NC对照组、siRNA NC+CSE组、NC+CSE+红霉素组、Nrf2-siRNA组、Nrf2-siRNA+CSE组、Nrf2-siRNA+CSE+红霉素组等6组。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组细胞中Akt mRNA、Nrf2 mRNA的表达。采用Western blotting检测各组细胞内Akt、PAkt、Nrf2、核因子(NF)-κB p65蛋白的水平。结果与空白对照组比较,CSE组白细胞介素-8(IL-8)水平明显升高,PAkt及NF-κB p65蛋白的表达水平上升,Nrf2蛋白及Nrf2 mRNA的表达水平下降。红霉素组和抑制剂组IL-8水平较CSE组下降,PAkt及NF-κB p65蛋白的表达水平下降,Nrf2蛋白及Nrf2 mRNA的表达水平有所升高。不同细胞氧化应激模型组Akt mRNA水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。Nrf2-siRNA组Nrf2的表达水平较siRNA NC组明显降低,但与Nrf2-siRNA+CSE组、Nrf2-siRNA+CSE+红霉素组比较无明显差异;siRNA NC-CSE组Nrf2表达水平下降,而NC-CSE+红霉素组表达水平上升;siRNA NC-CSE组及Nrf2-siRNA+CSE组NF-κB p65及PAkt表达水平上升,但siRNA NC-CSE+红霉素组、NC-CSE+红霉素组表达水平下降。Nrf2-siRNA组与siRNA NC组NF-κB p65及PAkt表达水平无明显差异。不同干扰组间Akt蛋白的表达水平无明显差异。结论红霉素可通过抑制PI3K/Akt通路增加Nrf2蛋白的表达减轻烟草烟雾暴露下单核细胞的炎性反应。 展开更多

关键词 红霉素 烟草烟雾提取物 单核细胞 Nrf2蛋白 PI3K/Akt通路炎症

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烟草烟雾提取物通过ROS/NLRP3炎性小体信号通路介导人子宫内膜上皮细胞焦亡

5

作者 黄渝婷 王应雄 《毒理学杂志》 CAS 2023年第5期375-382,共8页

目的探讨烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱发人子宫内膜上皮细胞(HEEC)焦亡的机制。方法将永生化HEEC细胞,与不同浓度的(0%、0.5%、1.0%和2.0%)CSE共培养24 h。使用荧光探针(DCFH-DA)试剂盒检测细胞活性氧(reactive oxyge... 目的探讨烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱发人子宫内膜上皮细胞(HEEC)焦亡的机制。方法将永生化HEEC细胞,与不同浓度的(0%、0.5%、1.0%和2.0%)CSE共培养24 h。使用荧光探针(DCFH-DA)试剂盒检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量;CCK-8试剂盒检测细胞活性及Western blot检测NOD-like receptor protein 3(NLRP3);Apoptosis-associated speck-like protein with CARD domain(ASC)、Caspase-1、Gasdermin D(GSDMD)和interleukin(IL)-1β蛋白表达。随后,分别给予ROS清除剂(Tempol)与NLRP3选择性抑制剂(MCC950)对CSE暴露的HEEC细胞进行干预,检测细胞内ROS的含量;观察细胞的形态变化,检测NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD和IL-1β蛋白表达情况。结果与对照组相比,CSE促进HEEC细胞内ROS的蓄积(F=298.60;P<0.001),抑制细胞活性(F=295.80;P<0.01;P<0.001),诱导NLRP3蛋白表达(F=191.70;P<0.001),差异有统计学意义。此外,CSE破坏HEEC细胞膜完整性,导致细胞膜形成肿胀的囊泡(即焦亡小体);而超氧化物歧化酶(SOD)类似物Tempol能改善CSE导致的ROS蓄积(F=1029.00;P<0.001)以及抑制CSE诱导的HEEC细胞焦亡小体的形成和NLRP3炎性小体相关蛋白NLRP3(F=135.00;P<0.01);ASC(F=563.40;P<0.01);Caspase-1(F=88.09;P<0.01);GSDMD(F=48.21;P<0.01);IL-1β(F=74.43;P<0.01)的表达,差异有统计学意义;然而使用MCC950抑制NLRP3的活性(F=174.70;P<0.05),能够改善CSE诱导的HEEC细胞焦亡小体的形成,但并不能改变CSE对细胞内ROS蓄积的影响,差异无统计学意义(F=863.00;P>0.05)。结论CSE通过促进ROS蓄积,激活NLRP3炎性小体信号通路来介导HEEC细胞发生焦亡。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 人子宫内膜上皮 活性氧 NLRP3 焦亡

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烟草烟雾提取物促进髓样树突状细胞共刺激分子的表达 被引量：3

6

作者 牙蕾蕾 刘积锋 +2 位作者 何志义 白晶 钟小宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期502-504,共3页

目的通过体外实验研究烟草烟雾提取物(CSE)对小鼠髓样树突状细胞(mDC)成熟的影响及可能的机制。方法小鼠骨髓来源的单个核细胞加入粒-单集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和含100 mL/L胎牛血清的RPMI1640培养液诱导出可供实验... 目的通过体外实验研究烟草烟雾提取物(CSE)对小鼠髓样树突状细胞(mDC)成熟的影响及可能的机制。方法小鼠骨髓来源的单个核细胞加入粒-单集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和含100 mL/L胎牛血清的RPMI1640培养液诱导出可供实验用的高纯度的未成熟DC(iDC),分空白对照组和CSE刺激组;CSE刺激组按15 mL/L的终浓度加入CSE,两组继续培养24 h,流式细胞检测技术检测mDC的共刺激分子CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达。结果空白对照组的mDC低表达CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ;CSE刺激后mDC表达CD40、CD80和MHC-Ⅱ比空白对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论烟草烟雾提取物促进小鼠骨髓来源的mDC的CD40、CD80和MHC-Ⅱ的表达。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 树突状细胞 共刺激分子

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烟草烟雾提取物激活NLRP3炎性小体促进肺腺癌PC-9细胞侵袭 被引量：3

7

作者 李久康 陈虹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期2214-2219,共6页

目的探讨烟草烟雾(cigarette smoke extract,CSE)提取物对肺腺癌PC-9细胞侵袭能力的影响及机制。方法体外培养PC-9细胞,与0%、1%、2%、4%烟草烟雾提取物共培养96 h。Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测NLRP3、Caspase-1、I... 目的探讨烟草烟雾(cigarette smoke extract,CSE)提取物对肺腺癌PC-9细胞侵袭能力的影响及机制。方法体外培养PC-9细胞,与0%、1%、2%、4%烟草烟雾提取物共培养96 h。Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测NLRP3、Caspase-1、IL-1β及MMP-2蛋白表达。予以4%烟草烟雾提取物与MCC950(NLRP3抑制剂)共同处理96 h后,细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测NLRP3、Caspase-1、IL-1β及MMP-2蛋白表达。结果与对照组相比,烟草提取物处理组中发生侵袭的PC-9细胞数量呈浓度(1%~4%CSE)依耐性增多(P<0.05,P<0.01)。NLRP3、Caspase-1、IL-1β及MMP-2的蛋白水平在烟草提取物处理组中呈浓度依耐性上调(P<0.01)。MCC950干预后,可显著抑制烟草烟雾提取物诱导的PC-9侵袭细胞的增多(P<0.05)以及NLRP3、Caspase-1、IL-1β、MMP-2表达的上调(P<0.05)。结论烟草烟雾提取物可增强肺腺癌细胞侵袭能力,可能与激活NLRP3炎性小体有关。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 肺腺癌 NLRP3炎性小体 侵袭

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热休克蛋白27在烟草烟雾提取物介导的牙龈成纤维细胞损伤中的表达变化 被引量：3

8

作者 周芹 孙睿男 朱震坤 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期17-22,共6页

目的观察在不同质量分数烟草烟雾提取物（CSE）干预下，热休克蛋白（HSP）27在人牙龈成纤维细胞（HGFs）损伤过程中的表达。方法取原代培养并经过鉴定的3～8代HGFs，采用细胞划痕试验检测不同刺激质量分数（0、2．5％、5．0％、12．5％... 目的观察在不同质量分数烟草烟雾提取物（CSE）干预下，热休克蛋白（HSP）27在人牙龈成纤维细胞（HGFs）损伤过程中的表达。方法取原代培养并经过鉴定的3～8代HGFs，采用细胞划痕试验检测不同刺激质量分数（0、2．5％、5．0％、12．5％、25．0％、50．0％）的CSE对HGFs体迁移的影响，并采用Westernblot方法检测HSP27在HGFs中的表达。结果CSE质量分数越高，细胞的迁移能力越弱；HSP27在正常HGFs中呈弱阳性表达，在CSE刺激后的HGFs中呈强阳性表达，且随CSE质量分数的增高，HSP27的相对表达量有逐渐增高的趋势，与细胞迁移能力相反。结论HSP27在CSE介导的HGFs损伤中表达升高，在CSE介导的上皮损伤中有重要作用。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 热休克蛋白27 人牙龈成纤维细胞 上皮损伤

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烟草烟雾刺激通过骨桥蛋白对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响 被引量：3

9

作者 耿雷 刘闺男 《中国现代医生》 2010年第8期7-9,F0003,共4页

目的探讨烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响及骨桥蛋白(osteopontin,Opn)在其中的作用。方法体外培养VSMC,用不同浓度CSE刺激,并且设置对照组,采用MTT法检... 目的探讨烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响及骨桥蛋白(osteopontin,Opn)在其中的作用。方法体外培养VSMC,用不同浓度CSE刺激,并且设置对照组,采用MTT法检测CSE对大鼠VSMC增殖活性的影响,用免疫细胞化学检测CSE作用后VSMC中骨桥蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果①MTT结果示2.5%、5%CSE组吸光度(A值)增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。10%、20%CSE组A值与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。对照组VSMC中有少量Opn和PCNA蛋白表达。2.5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达增加。5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达达到高峰,此后逐渐下降。10%、20%CSE组仍高于高于对照组。②Opn抗体可显著抑制5%CSE诱导的MTTA值和Opn、PCNA蛋白表达增加。结论①低浓度CSE(2.5%、5.0%)对大鼠VSMC的增殖逐渐增加,高浓度(10%、20%)时增殖趋势逐渐下降。②CSE可通过增加Opn的表达促进大鼠VSMC的增殖。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 骨桥蛋白 增殖细胞核抗原 血管平滑肌细胞 增殖

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白藜芦醇对烟草烟雾提取物诱导的骨骼肌细胞衰老的保护作用及机制 被引量：2

10

作者 邓招惠 李超 +3 位作者 郑桂贤 梁毅 白晶 何志义 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期1881-1885,共5页

目的研究白藜芦醇(Res)对烟草烟雾提取物(CSE)所致骨骼肌细胞衰老的保护作用及其机制。方法将C2C12成肌细胞培养分化为骨骼肌细胞,用CSE诱导细胞衰老,分别用Res、N-乙酰半胱氨酸(NAC)和过氧化氢(H 2O 2)干预,β-半乳糖苷酶染色法检测衰... 目的研究白藜芦醇(Res)对烟草烟雾提取物(CSE)所致骨骼肌细胞衰老的保护作用及其机制。方法将C2C12成肌细胞培养分化为骨骼肌细胞,用CSE诱导细胞衰老,分别用Res、N-乙酰半胱氨酸(NAC)和过氧化氢(H 2O 2)干预,β-半乳糖苷酶染色法检测衰老细胞阳性率,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法分别检测抗衰老分子组蛋白去乙酰化酶(HDAC)2 mRNA和蛋白水平,观察骨骼肌细胞中氧化应激产物丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、活性氧(ROS)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。结果与空白对照组比较,CSE和H 2O 2可促进骨骼肌细胞的衰老,同时伴有骨骼肌细胞中ROS水平和MDA含量升高,GSH-Px、SOD的活性减弱,HDAC2 mRNA及蛋白的水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。和CSE组相比较,Res干预后,骨骼肌细胞的衰老下调,同时MDA含量降低,ROS水平下降,而GSH-Px和SOD的活性增强,HDAC2的mRNA及蛋白水平提高,差异有统计学意义(P<0.05)。与NAC比较,Res抗衰老作用更明显,在增加SOD活性和提高HDAC2 mRNA水平方面作用更强(P<0.05)。结论Res通过减少CSE诱导的骨骼肌细胞氧化应激和提高抗衰老分子HDAC2的表达来延缓骨骼肌细胞衰老,其作用强于NAC。 展开更多

关键词 白藜芦醇 烟草烟雾提取物 氧化应激 组蛋白去乙酰化酶2 细胞衰老

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烟草烟雾提取物诱导人小气道上皮抗原R对转录因子snail表达的影响 被引量：2

11

作者 顾宪民 王星光 +2 位作者 孙健 王娜 姜淑娟 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期515-519,共5页

目的观察烟草烟雾提取物（CSE）刺激的小气道上皮中人抗原R的表达情况，探讨人抗原R对上皮间质转化（EMT）关键转录因子snail的调控作用。方法体外培养人小气道上皮细胞（HSAEpiC）并给予CSE刺激，按CSE浓度和时间分为对照组、1%-24 h组... 目的观察烟草烟雾提取物（CSE）刺激的小气道上皮中人抗原R的表达情况，探讨人抗原R对上皮间质转化（EMT）关键转录因子snail的调控作用。方法体外培养人小气道上皮细胞（HSAEpiC）并给予CSE刺激，按CSE浓度和时间分为对照组、1%-24 h组、3%-24 h组、1%-48 h组及3%-48 h组。应用实时荧光定量PCR法、Western blot法检测CSE刺激下人抗原R mRNA和蛋白水平。采用小RNA（siRNA）干扰技术特异性降低人抗原R表达，根据转染情况分为对照组、转染对照组及转染组，观察转染后mRNA和蛋白表达的变化，检测CSE刺激及人抗原R干扰时转录因子snail、上皮细胞标志物E-钙黏蛋白及间叶细胞标志物波形蛋白表达水平变化。结果CSE刺激后，人抗原R mRNA及蛋白水平表达均升高，1%-24 h组mRNA吸光度值从（1.12±0.04）升高到（1.26±0.05），蛋白表达量从（1.17±0.06）升高到（1.42±0.06）；3%-48 h组mRNA吸光度值从（1.41±0.06）升高到（1.49±0.06）；蛋白表达量从（1.35±0.08）升高到（1.42±0.06），组内前后比较差异有统计学意义（均P〈0.05）。人抗原R siRNA转染后，mRNA[（0.33±0.06），（1.02±0.10）]及蛋白表达水平明显降低[（0.46±0.07），（0.97±0.06），均P〈0.01]；对照siRNA转染后人抗原R表达变化无统计学意义[mRNA：（1.02±0.10），蛋白：（0.97±0.06），均P〉0.05]。3%CSE刺激48 h后，人抗原R（1.47±0.11）、snail（1.46±0.05）和波形蛋白（1.56±0.05）表达升高，E-钙黏蛋白（0.49±0.05）表达降低；人抗原R siRNA转染后，人抗原R（0.84±0.06）、snail（1.22±0.06）、波形蛋白（1.11±0.09）表达降低，E-钙黏蛋白表达升高（0.73±0.06，均P〈0.05）。结论CSE促进了小气道上皮细胞中人抗原R的表达；人抗原R参与了EMT关键转录因子snail的调控过程，并可能通过该作用调控EMT进程。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 人抗原R 上皮细胞 上皮间质转化

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PI3K/Akt-FoxO1信号通路在烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应中的作用及机制 被引量：1

12

作者 孙雪皎 陈琳 +3 位作者 陈慧 黄尤 刘琼霞 宁宇 《吉林医学》 CAS 2022年第3期587-588,共2页

目的:通过应用PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002及FoxO1-siRNA的作用,明确PI3K/Akt-FoxO1信号通路在烟草烟雾暴露下单核细胞细胞株炎性反应中的重要作用及机制。方法:以U937细胞为研究对象,分为对照组、烟草烟雾提取物(CSE)组、PI3K抑制... 目的:通过应用PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002及FoxO1-siRNA的作用,明确PI3K/Akt-FoxO1信号通路在烟草烟雾暴露下单核细胞细胞株炎性反应中的重要作用及机制。方法:以U937细胞为研究对象,分为对照组、烟草烟雾提取物(CSE)组、PI3K抑制剂组。应用Brdu法确定实验中CSE的合适浓度。PI3K抑制剂组的细胞给予LY294002预孵育2 h后给予CSE刺激过夜,之后给予TNF-α刺激过夜;CSE组不应用LY294002,其余同抑制剂组;对照组仅给予肿瘤坏死因子(TNF)-α。应用ELISA检测细胞培养上清液中IL-8的水平,应用Western印迹检测PI3K/Akt通路关键蛋白Akt、p-Akt蛋白以及FoxO1及p-FoxO1蛋白的表达。结果:CSE组的IL-8水平明显高于PI3K抑制剂组及对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PI3K抑制剂组的p-Akt表达较CSE组减弱,但较对照组增强,p-FoxO1表达较CSE组增强,但较对照组减弱,差异有统计学意义(P<0.05),Akt及FoxO1表达无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PI3K抑制剂LY294002可明显减弱通路关键蛋白p-Akt的表达,增强p-FoxO1的表达,进而明显减弱烟草烟雾暴露下单核细胞的炎性反应,PI3K/Akt信号通路活性及其下游FoxO1蛋白的表达与烟草烟雾暴露的单核细胞炎性反应表达有关。 展开更多

关键词 PI3K/AKT抑制剂 FoxO1蛋白 烟草烟雾提取物 炎性反应 慢性阻塞性肺疾病

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芹菜素对烟草烟雾提取物诱导血管内皮细胞损伤的作用 被引量：2

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作者 时文波 于常声 甘为 《实用药物与临床》 CAS 2016年第1期22-25,共4页

目的探讨芹菜素改善烟草烟雾提取物诱导的血管内皮细胞损伤的机制。方法培养人脐静脉内皮细胞株,给予烟雾提取物(CSE)模拟吸烟环境和不同浓度芹菜素。实验分为正常对照组、CSE组、芹菜素组,检测细胞存活率、凋亡率、细胞内活性氧ROS水平... 目的探讨芹菜素改善烟草烟雾提取物诱导的血管内皮细胞损伤的机制。方法培养人脐静脉内皮细胞株,给予烟雾提取物(CSE)模拟吸烟环境和不同浓度芹菜素。实验分为正常对照组、CSE组、芹菜素组,检测细胞存活率、凋亡率、细胞内活性氧ROS水平,以及细胞上清液中IL-6、TGF-β、INF-γ各因子的表达。结果芹菜素在24 h和48 h均能显著缓解不同浓度CSE诱导的内皮细胞存活率的降低,降低不同浓度CSE诱导的内皮细胞的凋亡率,同时芹菜素可抑制CSE诱导的细胞内ROS水平,以及上清液中炎性因子IL-6、TGF-β、INF-γ的升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论芹菜素以血管内皮细胞凋亡和炎性反应为标靶,抑制吸烟引起的血管内皮细胞损伤,为临床治疗提供理论依据。 展开更多

关键词 芹菜素 烟草烟雾提取物 血管内皮细胞

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烟草烟雾提取物对人牙龈成纤维细胞在3Y-TZP表面生长状态的影响 被引量：1

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作者 吴溪溪 余占海 +2 位作者 卢立志 赵弼洲 邓蕾 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1094-1097,共4页

目的:观察比较不同浓度烟草烟雾提取物(Cigarette Smoke Extract,CSE)对人牙龈成纤维细胞(HumanGingival Fibroblasts,HGFs)在3mol%氧化钇作为稳定剂的四方氧化锆多晶体陶瓷(3Y-TZP)种植材料表面粘附、增殖、形态伸展及细胞状态的影响... 目的:观察比较不同浓度烟草烟雾提取物(Cigarette Smoke Extract,CSE)对人牙龈成纤维细胞(HumanGingival Fibroblasts,HGFs)在3mol%氧化钇作为稳定剂的四方氧化锆多晶体陶瓷(3Y-TZP)种植材料表面粘附、增殖、形态伸展及细胞状态的影响。方法:原代培养HGFs并进行细胞来源鉴定;SRB法检测不同浓度CSE作用下HGFs在材料表面粘附、增殖情况;免疫荧光染色,病理图像分析系统计数评价HGFs细胞铺展面积及形状系数改变;激光共聚焦显微镜下观察拍照,观察凋亡形态;扫描电镜观察细胞粘附的形态结构改变。结果:细胞波形丝蛋白染色阳性,角蛋白染色阴性;随CSE浓度升高,HGFs在材料表面粘附、增殖、铺展面积、形状系数及形态伸展均呈下降趋势,各实验组与对照组间均存在显著差异(P<0.05),抑制作用随浓度升高更加明显,呈浓度依赖性。结论:CSE对HGFs在3Y-TZP种植材料表面的生长可产生明显抑制作用。提示吸烟对陶瓷种植体植入后的软组织界面产生不良影响,其损害程度可能与烟草有害物质的接触量有相关性。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 人牙龈成纤维细胞 3Y-TZP 生长状态

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烟草烟雾通过TGF-β1/Smad2通路诱导RLE-6TN发生上皮间质转化 被引量：1

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作者 巫凤苹 陈虹 +4 位作者 余秀英 廖科 张慧 张露 陈亚娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期615-619,共5页

目的:探讨烟草烟雾提取物(Cigarette smoke extract,CSE)在诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN发生上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用及机制。方法:以不同浓度(0.25%,0.5%及1%)CSE刺激RLE-6TN细胞株;TGF-β1... 目的:探讨烟草烟雾提取物(Cigarette smoke extract,CSE)在诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN发生上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用及机制。方法:以不同浓度(0.25%,0.5%及1%)CSE刺激RLE-6TN细胞株;TGF-β1受体抑制子(SB431542)预处理后,加入1%CSE共培养。实时定量PCR(RT-PCR)检测E-cadherin和Vimentin RNA表达;印迹法(Western blot)检测TGF-β1、Smad2、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达量。结果:经不同浓度的CSE作用,E-cadherin无论是在RNA还是在蛋白水平表达均下调,而Vimentin表达均上调;同时,TGF-β1、p-Smad2和N-cadherin蛋白表达量增加;TGF-β1受体抑制子(SB431542)干预后,p-Smad2表达量明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量较对照组明显增加(P<0.05),N-cadherin和Vimentin蛋白表达量较对照组明显降低(P<0.05)。结论:CSE可能通过激活TGF-β1/Smad2信号通路,参与调节E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达,从而诱导RLE-6TN发生EMT。 展开更多

关键词 大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞 烟草烟雾提取物 上皮间质转化 TGF-Β1 p-Smad2

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研究烟草烟雾提取物对人牙龈成纤维细胞增值的影响

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作者 陈嘉彤 金鼎 +1 位作者 杜旸 王雪松 《中国现代药物应用》 2022年第11期187-190,共4页

目的 研究烟草烟雾提取物(CSE)对人牙龈成纤维细胞(HGF)增值的影响。方法 采用组织块法原代培养HGF并鉴定其来源,制备含有不同浓度CSE培养液,采用四唑盐(MTT)比色法测定不同浓度烟草烟雾对HGF增殖的影响。结果 作用24、48、72 h时,空白... 目的 研究烟草烟雾提取物(CSE)对人牙龈成纤维细胞(HGF)增值的影响。方法 采用组织块法原代培养HGF并鉴定其来源,制备含有不同浓度CSE培养液,采用四唑盐(MTT)比色法测定不同浓度烟草烟雾对HGF增殖的影响。结果 作用24、48、72 h时,空白对照的光密度(OD)值分别为(0.2812±0.0296)、(0.3894±0.0298)、(0.5059±0.0269), 2.5%CSE的OD值分别为(0.1832±0.0342)、(0.2959±0.0214)、(0.3153±0.0219), 5.0%CSE的OD值分别为(0.1379±0.0298)、(0.1423±0.0134)、(0.1586±0.0379), 10.0%CSE的OD值分别为(0.1060±0.0246)、(0.1031±0.0169)、(0.0920±0.0161), 20.0%CSE的OD值分别为(0.0861±0.0142)、(0.0789±0.0190)、(0.0726±0.0159)。空白对照、2.5%CSE、5.0%CSE、10.0%CSE、20.0%CSE的OD值均逐渐降低,且2.5%CSE、5.0%CSE、10.0%CSE、20.0%CSE的OD值均低于空白对照,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 烟草烟雾可抑制HGF的增殖,并随着培养液浓度的增大,抑制作用愈来越明显,具有浓度依赖性。 展开更多

关键词 人牙龈成纤维细胞 烟草烟雾提取物 四唑盐比色法

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PLTP在香烟诱导A549细胞合成白介素8中的作用 被引量：1

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作者 余秀英 陈亚娟 +3 位作者 巫凤苹 邹琳琳 陈雨晗 黎友伦 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期318-322,共5页

目的:研究磷脂转运蛋白(Phospholipid transfer protein,PLTP)对香烟诱导人肺泡上皮A549细胞合成白介素8(Interleukin-8,IL-8)的影响。方法:体外培养人肺泡上皮A549细胞株24 h,加入不同浓度的烟草提取物(Cigarette smoking extracts,CSE... 目的:研究磷脂转运蛋白(Phospholipid transfer protein,PLTP)对香烟诱导人肺泡上皮A549细胞合成白介素8(Interleukin-8,IL-8)的影响。方法:体外培养人肺泡上皮A549细胞株24 h,加入不同浓度的烟草提取物(Cigarette smoking extracts,CSE)共培养24 h;1.0%CSE与A549细胞株共培养6、12、24、48 h;PLTP siRNA预处理后,加入CSE共培养24 h。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测A549细胞增殖情况;实时定量PCR(RT-PCR)检测PLTP和IL-8 mRNA的表达量;蛋白质印迹法(Western blot)检测PLTP的表达量;酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测IL-8相对含量。结果:0.125%烟草提取物促进A549细胞增殖,0.25%、0.5%、1.0%CSE浓度对A549细胞生长无明显影响,而2.0%、4.0%CSE浓度抑制A549细胞增殖;不同浓度的(0.25%、0.5%、1.0%)CSE作用24 h后,PLTP和IL-8 mRNA及蛋白表达量增加,并且IL-8蛋白分泌呈现一定时间依赖性;PLTP siRNA处理后,IL-8表达量明显升高(P<0.001)。结论:PLTP基因缺失促进香烟诱导A549细胞合成IL-8。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 人肺泡上皮细胞 A549 PLTP IL-8

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烟草烟雾提取物通过抑制Sirt1和Sirt6的表达诱导小鼠骨骼肌细胞衰老的机制研究 被引量：1

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作者 邓招惠 李超 +2 位作者 郑桂贤 谢婷 白晶 《广西医科大学学报》 CAS 2020年第4期617-620,共4页

目的:研究烟草烟雾提取物(CSE)诱导小鼠骨骼肌细胞衰老的机制。方法:诱导C2C12成肌细胞分化成骨骼肌细胞,用CSE诱导骨骼肌细胞衰老,将实验分为正常(N)组(不加任何干预培养24 h)和CSE组(加终浓度为60 mL/L的CSE孵育24 h),用β-半乳糖苷... 目的:研究烟草烟雾提取物(CSE)诱导小鼠骨骼肌细胞衰老的机制。方法:诱导C2C12成肌细胞分化成骨骼肌细胞,用CSE诱导骨骼肌细胞衰老,将实验分为正常(N)组(不加任何干预培养24 h)和CSE组(加终浓度为60 mL/L的CSE孵育24 h),用β-半乳糖苷酶染色和衰老标记蛋白30(SMP30)表达水平来检测骨骼肌细胞的衰老,qPCR和蛋白质免疫印迹法检测骨骼肌细胞中抗衰老因子Sirt1和Sirt6以及它们对应mRNA的表达。结果:与N组相比较,在CSE的干预下,骨骼肌细胞中衰老阳性细胞的比例增多,同时SMP30 mRNA和蛋白的表达下降,抗衰老因子Sirt1和Sirt6的mRNA和蛋白表达下降。结论:CSE可能通过减少抗衰老因子Sirt1和Sirt6的的表达来诱导小鼠骨骼肌细胞的衰老。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 骨骼肌细胞 衰老 SIRT1 Sirt6

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烟草烟雾提取物影响主动脉平滑肌细胞GATA-2的表达

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作者 徐晶华 刘闺男 张晶 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第41期7235-7240,共6页

背景:吸烟是动脉粥样硬化形成的主要危险因素之一。目的:观察烟草烟雾提取物对大鼠血管平滑肌细胞中GATA-2浓度的影响及早期生长反应因子1在其中的作用。方法:体外培养大鼠血管平滑肌细胞,用不同浓度(0,5%,10%,20%)烟草烟雾提取物刺激,... 背景:吸烟是动脉粥样硬化形成的主要危险因素之一。目的:观察烟草烟雾提取物对大鼠血管平滑肌细胞中GATA-2浓度的影响及早期生长反应因子1在其中的作用。方法:体外培养大鼠血管平滑肌细胞,用不同浓度(0,5%,10%,20%)烟草烟雾提取物刺激,采用RT-PCR的方法检测烟草烟雾提取物对GATA-2的影响。用筛选出的最适合的烟草烟雾提取物浓度处理大鼠血管平滑肌细胞不同时间(0,4,8,12,24 h)后,检测GATA-2 mRNA的变化,以及加入生长反应因子1抑制剂后GATA-2 mRNA的变化。结果与结论:与0浓度烟草烟雾提取物相比,5%低浓度烟草烟雾提取物刺激后,GATA-2 mRNA表达较10%中浓度和20%高浓度增加的更显著。不加烟草烟雾提取物组即0 h组血管平滑肌细胞中有少量GATA-2的mRNA,5%烟草烟雾提取物刺激后于4 h内开始增加,8 h达高峰。加入生长反应因子1抑制剂后5%烟草烟雾提取物诱导的血管平滑肌细胞GATA-2 mRNA表达明显降低。提示烟草烟雾提取物可通过生长反应因子1促进GATA-2增加,抑制生长反应因子1后,GATA-2的表达减少。 展开更多

关键词 组织构建 血管组织构建 烟草烟雾提取物 生长反应因子1 GATA-2 基质金属蛋白酶2 血管平滑肌细胞 国家自然科学基金

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PLTP在香烟诱导HBECs合成IL-8中的作用

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作者 余秀英 黎友伦 +1 位作者 巫凤苹 陈亚娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期952-956,961,共6页

目的:研究磷脂转运蛋白(PLTP)对香烟诱导人支气管上皮细胞(HBECs)合成白介素8(IL-8)的影响。方法:Wistar大鼠连续3 d被动吸烟,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木精-伊红(HE)染色,免疫组织化学法(IHC)检测蛋白表达;体外培养HBECs,不同浓... 目的:研究磷脂转运蛋白(PLTP)对香烟诱导人支气管上皮细胞(HBECs)合成白介素8(IL-8)的影响。方法:Wistar大鼠连续3 d被动吸烟,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木精-伊红(HE)染色,免疫组织化学法(IHC)检测蛋白表达;体外培养HBECs,不同浓度烟草提取物(CSE)刺激;PLTP siRNA干扰后,进行CSE刺激。MTT法检测细胞增殖,同时检测IL-8含量及PLTP表达。结果:烟熏组BALF白细胞计数以及分类计数较对照组均明显升高(P<0.01),IHC显示烟熏组PLTP和IL-8蛋白表达高于对照组;高浓度CSE(2%、4%)抑制HBECs增殖(P<0.001);不同浓度的CSE作用24 h后,IL-8mRNA及蛋白表达量增加,而PLTP蛋白表达量下降,并且IL-8蛋白分泌呈现时间依赖性;PLTP siRNA处理后,IL-8表达量明显升高(P<0.001)。结论:PLTP基因缺失促进香烟诱导HBECs合成IL-8。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 人支气管上皮细胞 磷脂转运蛋白 白介素8

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