以脱脂火麻仁粉(defatted hemp seed meal,HPM)为原料,采用两种方法进行火麻仁蛋白(hemp seed protein isolate,HPI)的提取分离,碱提/酸沉法制备得到碱提蛋白(hemp seed protein isolate-alkaline extraction,HPI-AE),盐溶/盐析法制备...以脱脂火麻仁粉(defatted hemp seed meal,HPM)为原料,采用两种方法进行火麻仁蛋白(hemp seed protein isolate,HPI)的提取分离,碱提/酸沉法制备得到碱提蛋白(hemp seed protein isolate-alkaline extraction,HPI-AE),盐溶/盐析法制备得到盐提蛋白(hemp seed protein isolate-salt extraction,HPI-SE)。HPI-SE的蛋白含量(94.8%)高于HPI-AE的蛋白含量(85.9%);并且HPI-SE的外观色泽更加亮白。蛋白质凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)结果表明,两种方法提取的火麻仁蛋白主要成分均为火麻仁球蛋白,二者氨基酸组成相似,均含有丰富的精氨酸。不同pH值条件下,HPI的溶解性曲线均呈U型,但是在相同pH值条件下,二者的溶解性存在较大的差异。火麻仁蛋白的起泡性和蛋白质的溶解性呈现出正相关,当pH值远离等电点时,同种电荷的静电斥力提高了蛋白质的溶解性,从而改善了蛋白质的起泡性。荧光光谱显示,在不同pH值条件下,HPI的蛋白构象不随pH值变化发生明显改变,但HPI-SE的荧光强度高于HPI-AE的荧光强度,显示HPI-SE的蛋白质聚集程度高于HPI-AE。展开更多
采用pH-stat和甲醛滴定法测定碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L FG、风味蛋白酶Flavourzyme、复合蛋白酶Protamex、中性蛋白酶Neutrase、胰蛋白酶Typsin和木瓜蛋白酶Papain等6种常用商业蛋白酶酶解火麻仁粕蛋白水解度。结果表明,2种方法测定结...采用pH-stat和甲醛滴定法测定碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L FG、风味蛋白酶Flavourzyme、复合蛋白酶Protamex、中性蛋白酶Neutrase、胰蛋白酶Typsin和木瓜蛋白酶Papain等6种常用商业蛋白酶酶解火麻仁粕蛋白水解度。结果表明,2种方法测定结果无显著性差异,且碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L FG水解效果最佳。相比内切酶,当蛋白酶是外切酶时,pH-stat法测定结果比甲醛滴定法测定结果低。在单因素实验基础上,选取加酶量、温度、时间为自变量,水解度为响应值,利用响应面分析法,在底物浓度50 g/L、pH8.5条件下,确定Alcalase 2.4 L FG酶解火麻仁粕蛋白最佳工艺为:加酶量10190 U/g、酶解温度62.04℃、时间4.21 h。在此条件下,平均水解度为21.87%,接近理论值21.94%,说明回归模型具有一定的指导意义。展开更多
文摘以脱脂火麻仁粉(defatted hemp seed meal,HPM)为原料,采用两种方法进行火麻仁蛋白(hemp seed protein isolate,HPI)的提取分离,碱提/酸沉法制备得到碱提蛋白(hemp seed protein isolate-alkaline extraction,HPI-AE),盐溶/盐析法制备得到盐提蛋白(hemp seed protein isolate-salt extraction,HPI-SE)。HPI-SE的蛋白含量(94.8%)高于HPI-AE的蛋白含量(85.9%);并且HPI-SE的外观色泽更加亮白。蛋白质凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)结果表明,两种方法提取的火麻仁蛋白主要成分均为火麻仁球蛋白,二者氨基酸组成相似,均含有丰富的精氨酸。不同pH值条件下,HPI的溶解性曲线均呈U型,但是在相同pH值条件下,二者的溶解性存在较大的差异。火麻仁蛋白的起泡性和蛋白质的溶解性呈现出正相关,当pH值远离等电点时,同种电荷的静电斥力提高了蛋白质的溶解性,从而改善了蛋白质的起泡性。荧光光谱显示,在不同pH值条件下,HPI的蛋白构象不随pH值变化发生明显改变,但HPI-SE的荧光强度高于HPI-AE的荧光强度,显示HPI-SE的蛋白质聚集程度高于HPI-AE。
文摘采用pH-stat和甲醛滴定法测定碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L FG、风味蛋白酶Flavourzyme、复合蛋白酶Protamex、中性蛋白酶Neutrase、胰蛋白酶Typsin和木瓜蛋白酶Papain等6种常用商业蛋白酶酶解火麻仁粕蛋白水解度。结果表明,2种方法测定结果无显著性差异,且碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L FG水解效果最佳。相比内切酶,当蛋白酶是外切酶时,pH-stat法测定结果比甲醛滴定法测定结果低。在单因素实验基础上,选取加酶量、温度、时间为自变量,水解度为响应值,利用响应面分析法,在底物浓度50 g/L、pH8.5条件下,确定Alcalase 2.4 L FG酶解火麻仁粕蛋白最佳工艺为:加酶量10190 U/g、酶解温度62.04℃、时间4.21 h。在此条件下,平均水解度为21.87%,接近理论值21.94%,说明回归模型具有一定的指导意义。
