补肾调经方对小鼠体外培养卵泡卵母细胞BMPRⅡ/ALK6-Smads表达的影响 被引量：5

1

作者 孙晓换 范丽洁 +5 位作者 李丽 魏学聪 刘亚华 耿丹丹 谷向向 杜惠兰 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1241-1246,共6页

目的观察补肾调经方对小鼠体外培养窦前卵泡成活数及卵母细胞骨形成蛋白Ⅱ型受体(bone morphogenetic protein receptorⅡ,BMPRⅡ)/激活素受体样激酶6-Smads(activin receptor-like kinase6-drosophila mothers against decapentaplegic... 目的观察补肾调经方对小鼠体外培养窦前卵泡成活数及卵母细胞骨形成蛋白Ⅱ型受体(bone morphogenetic protein receptorⅡ,BMPRⅡ)/激活素受体样激酶6-Smads(activin receptor-like kinase6-drosophila mothers against decapentaplegic proteins,ALK6-Smads)信号通路的影响,探讨其提高体外生长卵泡卵母细胞质量的作用机制。方法 65只12日龄健康雌性昆明小鼠,采用机械法分离其窦前卵泡,分别以正常大鼠血清、高、中、低剂量补肾调经方大鼠含药血清、高剂量补肾调经方大鼠含药血清+K02288孵育,分为对照组、补肾高、中、低剂量组(即补肾组)、抑制剂组,普通法体外培养。培养第6天比较补肾组与对照组窦前卵泡成活数,实时荧光定量PCR法检测卵母细胞中BMPRⅡ、ALK6、Smad1、Smad5、Smad8mRNA表达;细胞免疫荧光法检测上述指标和磷酸化的Smad1/5/8(phospho-Smad1/5/8,p-Smad1/5/8)蛋白表达水平。结果与对照组比较,补肾高剂量组窦前卵泡成活数增加,补肾各剂量组BMPRⅡ、ALK6、Smad5、Smad8 mRNA表达水平升高,上述指标及p-Smad1/5/8蛋白表达水平升高,补肾高、中剂量组Smad1 mRNA及其蛋白表达水平升高(P<0.05)。与补肾高剂量组比较,抑制剂组p-Smad1/5/8蛋白表达降低(P<0.05)。结论补肾调经方能增加体外培养窦前卵泡成活数,提高卵母细胞质量,其作用机制可能与调控卵母细胞中BMPRⅡ/ALK6-Smads信号通路有关。 展开更多

关键词 补肾调经方 窦前卵泡 卵母细胞 骨形成蛋白Ⅱ型受体 激活素受体样激酶6 信号通路

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激活素受体样激酶4,5和7抑制剂体外高通量筛选模型的构建 被引量：2

2

作者 龙隆 李菲菲 +1 位作者 刘洪英 王莉莉 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期581-589,共9页

目的构建适于高通量筛选的激活素受体样激酶4(ALK4),ALK5和ALK7抑制剂的筛选模型。方法利用Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统,构建ALK4激酶结构域(ALK4kd),ALK5kd和ALK7kd及Smad2和Smad3蛋白的病毒表达系统,转染Sf9昆虫细胞,表达目的蛋白... 目的构建适于高通量筛选的激活素受体样激酶4(ALK4),ALK5和ALK7抑制剂的筛选模型。方法利用Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统,构建ALK4激酶结构域(ALK4kd),ALK5kd和ALK7kd及Smad2和Smad3蛋白的病毒表达系统,转染Sf9昆虫细胞,表达目的蛋白;通过谷胱甘肽S-转移酶(GST)亲和柱纯化,获得纯化的目的蛋白;分别以纯化的ALK4,ALK5,ALK7激酶片段与纯化的Smad3和ATP构建ALK4,ALK5,ALK7激酶活性测定体系,优化各反应底物浓度及反应条件,建立适于通量化分析的筛选模型;以已知ALK激酶抑制剂SB431542为工具分子,检测其对激酶的抑制活性,确证筛选模型的可靠性。结果经酶切和PCR鉴定,所得重组Bacmid均正确。转染Sf9昆虫细胞后纯化获得相应目的蛋白。经条件优化,反应体系中激酶和底物蛋白Smad3最佳浓度均为10 mg·L^(-1),ATP最佳初始浓度为10 nmol·L^(-1)。所得ALK4,ALK5和ALK7激酶抑制剂筛选体系的Z′因子分别为0.71,0.51和0.74,符合高通量筛选要求。已知SB431542在所建模型上对ALK4kd,ALK5kd和ALK7kd的抑制活性IC50值分别为22,188和91 nmol·L^(-1)。结论成功构建了ALK4,ALK5和ALK7激酶抑制剂的体外筛选模型。 展开更多

关键词 激活素受体样激酶 BAC to Bac昆虫杆状病毒表达系统 高通量筛选分析 SMAD3蛋白

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激活素受体样激酶2及其在颅面部生长发育中的作用

3

作者 张雪 徐召南 +2 位作者 刘麒麟 李超 孙宏晨 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期235-238,共4页

人类的ALK2基因位于染色体2q23~24,其内含子大都在0.5~6.5 kb,其3’非编码区对ALK2基因表达起着重要的调节作用。ALK2蛋白由胞外区、跨膜区和富含丝氨酸-苏氨酸序列的胞内区组成,在组成上高度保守。ALK2是骨形态发生蛋白(BMP)家族受体... 人类的ALK2基因位于染色体2q23~24,其内含子大都在0.5~6.5 kb,其3’非编码区对ALK2基因表达起着重要的调节作用。ALK2蛋白由胞外区、跨膜区和富含丝氨酸-苏氨酸序列的胞内区组成,在组成上高度保守。ALK2是骨形态发生蛋白(BMP)家族受体中的一员并转导BMP信号。ALK2信号转导通路分为经典的Smad信号转导通路和非Smad信号转导通路,前者在促进骨、软骨和牙发生方面发挥着重要的作用。ALK2蛋白广泛表达于机体的不同组织,如骨、软骨、牙体和心脏等。ALK2在颅骨发生发育早期促进成骨,在成熟期抑制成骨;ALK2基因突变增强可导致异位骨化,体现了ALK2独特于其他BMP受体的重要生理病理学意义。 展开更多

关键词 激活素受体样激酶 骨 基因敲除

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益气化瘀法中药对糖尿病大鼠肉芽增生期创面TGF-β/ALK5/Smad2/3通路的影响 被引量：8

4

作者 张臻 阙华发 《新中医》 CAS 2015年第6期270-272,共3页

目的 :探讨益气化瘀法中药对糖尿病大鼠肉芽增生期创面转化生长因子-β(TGF-β)/激活素受体样激酶(ALK)5/Smad蛋白2/3通路的影响。方法 :将50只大鼠随机分为益气化瘀组、益气组、化瘀组、糖尿病对照组、正常对照组。通过腹腔注射链脲佐... 目的 :探讨益气化瘀法中药对糖尿病大鼠肉芽增生期创面转化生长因子-β(TGF-β)/激活素受体样激酶(ALK)5/Smad蛋白2/3通路的影响。方法 :将50只大鼠随机分为益气化瘀组、益气组、化瘀组、糖尿病对照组、正常对照组。通过腹腔注射链脲佐菌素和外科方法建立糖尿病大鼠全层皮肤缺损模型,运用Westernblot技术手段分别检测各组肉芽增生期创面成纤维细胞ALK5/Smad2/3的表达水平。结果:糖尿病对照组ALK5表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);益气化瘀组ALK5表达水平明显低于糖尿病对照组(P<0.05),其与益气组、化瘀组、正常对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。糖尿病对照组smad2表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);益气化瘀组smad2表达水平与各组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病对照组smad3表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);益气化瘀组smad3表达水平低于化瘀组(P<0.05),明显低于糖尿病对照组、益气组(P<0.01),高于正常对照组(P<0.05)。结论:糖尿病创面难以愈合及瘢痕形成的机制可能与ALK5/Smad2/3通路有关,益气化瘀中药可能通过抑制ALK5/Smad2/3通路,加速创面愈合,减少瘢痕形成。 展开更多

关键词 糖尿病 溃疡 益气化瘀法 转化生长因子-β(TGF-β)/激活素受体样激酶(ALK)5/Smad蛋白2/3通路

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TGF-β1受体ALK1和ALK5在翼状胬肉和正常结膜组织中的差异表达 被引量：3

5

作者 张灿 王贺 +2 位作者 陈冬燕 赵凯 李明新 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期1962-1967,共6页

目的:研究不同种类的转化生长因子β-1(TGF-β1)激活素受体样激酶(ALK)在翼状胬肉和正常结膜组织中的表达及其意义。方法:前瞻性研究。选取2020-06/12在徐州医科大学附属医院眼科就诊的40例手术中切除的翼状胬肉标本和40例白内障手术获... 目的:研究不同种类的转化生长因子β-1(TGF-β1)激活素受体样激酶(ALK)在翼状胬肉和正常结膜组织中的表达及其意义。方法:前瞻性研究。选取2020-06/12在徐州医科大学附属医院眼科就诊的40例手术中切除的翼状胬肉标本和40例白内障手术获取的正常结膜标本纳入本次研究。使用ALK1、ALK5免疫组织化学染色观察TGF-β1受体在胬肉和正常结膜组织中的表达定位,并统计染色阳性细胞比例;使用RT-PCR检测ALK1、ALK5 mRNA在胬肉和结膜组织中的表达;并以Western Blot检测ALK1、ALK5蛋白的表达。结果:根据免疫组织化学染色结果,ALK1在翼状胬肉组中的表达水平较正常结膜组明显升高,并且在整个翼状胬肉上皮细胞中均有表达,而在正常结膜组织中仅在上皮细胞的基底层中有表达;两组上皮细胞基底层均检测到ALK5,而翼状胬肉组ALK5水平较正常结膜组下降。两组间ALK1、ALK5阳性细胞比例有显著的差异(均P<0.05)。RT-PCR结果显示,与结膜组织相比,ALK1 mRNA在翼状胬肉中的表达明显增强,ALK5的表达明显减弱,两组间有显著差异(均P<0.05),Western Blot结果显示ALK1、ALK5蛋白的表达差异与RT-PCR结果基本一致。结论:翼状胬肉和正常结膜ALK的表达谱有明显的差异。与正常结膜组织相比,翼状胬肉组织的ALK1表达增强,ALK5表达减弱,表明TGF-β信号通路处于不同的活化状态,对于进一步研究翼状胬肉的发病机制提供实验依据。 展开更多

关键词 翼状胬肉 转化生长因子β-1(TGF-β1) 激活素受体样激酶(ALK) 信号通路 发病机制

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刺山柑总生物碱对系统性硬皮病转化生长因子-β_1/Smad4通路的调控作用 被引量：3

6

作者 康小龙 田红林 +1 位作者 何承辉 卢军 《医药导报》 CAS 北大核心 2018年第11期1307-1310,共4页

目的研究刺山柑总生物碱对系统性硬皮病(SSc)转化生长因子-β_1(TGF-β_1) Smad4通路的调控作用。方法将90只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、青霉胺组(125 mg·kg^(-1))及刺山柑总生物碱小(225 mg·kg^(-1))、中(45... 目的研究刺山柑总生物碱对系统性硬皮病(SSc)转化生长因子-β_1(TGF-β_1) Smad4通路的调控作用。方法将90只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、青霉胺组(125 mg·kg^(-1))及刺山柑总生物碱小(225 mg·kg^(-1))、中(450 mg·kg^(-1))、大(900 mg·kg^(-1))剂量组。除正常对照组外,其余5组小鼠背部注射盐酸博莱霉素建立SSc模型,成模后受试药组小鼠背部外敷刺山柑总生物碱乳膏,青霉胺组给予青霉胺灌胃,正常对照组、模型对照组背部外敷不含药基质,每天1次,连续60 d。末次给药后,Western blotting检测皮肤TGF-β_1表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠皮肤组织激活素受体样激酶1(ALK1)、Smad4及核因子-κB (NF-κB)水平。结果与模型对照组比较,刺山柑总生物碱各剂量组TGF-β_1及刺山柑总生物碱大剂量组ALK1和Smad4表达明显降低(P<0.05或P<0.01),皮肤NF-κB含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论刺山柑总生物碱能下调SSc小鼠TGF-β_1、ALK1与Smad4异常表达,对SSc小鼠TGF-β_1/Smad4通路有一定抑制作用。 展开更多

关键词 刺山柑总生物碱 系统性硬皮病 转化生长因子-β1 激活素受体样激酶1 SMAD4 核因子-ΚB

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GDF11通过上调ABCA1表达促进小鼠体内胆固醇逆转运 被引量：3

7

作者 汪雄 张玲 陶凌 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2018年第4期329-334,共6页

目的研究生长分化因子11（GDF11）对巨噬细胞胆固醇逆转运的影响,并探究GDF11发挥作用的具体机制。方法提取小鼠腹腔巨噬细胞后给予氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）、GDF11和激活素受体样激酶7（ALK7）抑制剂SB431542孵育24 h。利用油红O... 目的研究生长分化因子11（GDF11）对巨噬细胞胆固醇逆转运的影响,并探究GDF11发挥作用的具体机制。方法提取小鼠腹腔巨噬细胞后给予氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）、GDF11和激活素受体样激酶7（ALK7）抑制剂SB431542孵育24 h。利用油红O染色观察细胞脂质蓄积,提取总m RNA和总蛋白后,利用realtime PCR和Western blot检测GDF11、三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）和三磷酸腺苷结合盒转运体G1（ABCG1）的m RNA和蛋白表达水平。给予小鼠腹腔注射外源GDF11,提取腹腔巨噬细胞用3H标记的胆固醇孵育后注射回小鼠腹腔内,每8 h收集一次小鼠粪便,48 h后收集小鼠肝脏和血液样本,检测样本3H含量,计算胆固醇逆转运水平。结果 ox-LDL孵育24 h显著诱导巨噬细胞内脂质蓄积,同时抑制GDF11 m RNA及蛋白的表达。GDF11处理能有效抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞脂质蓄积,同时显著诱导ABCA1 m RNA及蛋白的表达。经外源补充GDF11后显著提高小鼠体内胆固醇逆转运水平。GDF11孵育巨噬细胞后,在给予巨噬细胞ALK7抑制剂SB431542孵育后,GDF11对ox-LDL诱导细胞内脂质蓄积的抑制作用被拮抗,对ABCA1表达的调控作用也被抑制。结论 GDF11通过ALK7调节ABCA1的表达,从而促进巨噬细胞胆固醇逆转运。 展开更多

关键词 生长分化因子11 胆固醇逆转运 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 激活素受体样激酶7

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转化生长因子-β与新生血管形成

8

作者 于灵芝 姜丽 曾因明 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2008年第1期90-93,共4页

文章综述近年来对TGF—β及其受体和信号传导通路在血管新生中的作用，包括：两条TGF—β信号级联反应，ALKl一Smadl／5通路和ALK5一Smad2／3通路同时存在于内皮细胞表面，使TGF—β对血管新生呈现相反的作用；TGF—β作用的剂量依赖性... 文章综述近年来对TGF—β及其受体和信号传导通路在血管新生中的作用，包括：两条TGF—β信号级联反应，ALKl一Smadl／5通路和ALK5一Smad2／3通路同时存在于内皮细胞表面，使TGF—β对血管新生呈现相反的作用；TGF—β作用的剂量依赖性；细胞外环境对其作用的影响以及血管新生化与脑缺血的研究进展。 展开更多

关键词 转化生长因子-Β 激活素受体样激酶-1 激活素受体样激酶-5 血管新生化

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大鼠肝再生模型中上皮细胞黏附分子及转化生长因子-β的动态表达 被引量：1

9

作者 龚先锋 徐丽红 +4 位作者 杨宏强 郁晓峰 张洋 胡慧 王艳 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1502-1506,共5页

目的观察肝再生模型中上皮细胞黏附分子（EpCAM）和转化生长因子-β（TGF-β）的动态表达。 方法 将35只雄性F344大鼠（Fisher344大鼠）随机分为假手术组、肝切除组（PH组）和2-乙酰氨基芴组（2-AAH/PH组），采用免疫组织化学染色法观... 目的观察肝再生模型中上皮细胞黏附分子（EpCAM）和转化生长因子-β（TGF-β）的动态表达。 方法 将35只雄性F344大鼠（Fisher344大鼠）随机分为假手术组、肝切除组（PH组）和2-乙酰氨基芴组（2-AAH/PH组），采用免疫组织化学染色法观察不同时间点EpCAM阳性细胞在肝组织中的增殖及分布；应用Western blot和反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测不同时间点TGF-β和激活素受体样激酶-5（ALK-5）的蛋白表达和基因表达。结果 EpCAM阳性细胞在假手术组很难见到；PH组在术后第7天可见少量EpCAM阳性细胞，术后14 d可见阳性细胞向肝内迁移，术后21 d仅见很少量的阳性细胞；2-AAF/PH组术后7、14 d可见与PH组相似结果，但EpCAM阳性细胞明显增多且术后21 d依然可见多量的EpCAM阳性细胞。RT-PCR的结果显示：假手术组TGF-β和ALK-5三时间点的表达差异无统计学意义（TGF-β 2－ΔΔCt值：7 d：1.00±0.00、14 d：1.09±0.16、21 d：1.08±0.13，FTGF-β＝0.57，PTGF-β＝0.595；ALK-5 2－ΔΔCt值：7 d：1.00±0.00、14 d：1.10±0.14、21 d：1.07±0.16，FALK-5＝0.54，P＝0.610）；PH组和2-AAF/PH组TGF-β和ALK-5三时间点表达差异有统计学意义（TGF-β PH组和2-AAF/PH组2－ΔΔCt值：7 d：8.66±0.72、7.79±0.58，14 d：5.36±0.53、4.04±0.42，21 d：7.64±0.64、6.88±0.68，FTGF-β PH＝21.52，PTGF-β PH＝0.002，FTGF-β2-AAF/PH＝35.10，PTGF-β2-AAF/PH＝0.001；ALK-5 PH组和2-AAF/PH组：7 d：4.32±0.52、5.91±0.54，14 d：7.79±0.74、9.73±1.04，21 d：4.85±0.46、5.90±0.89，FALK-5PH＝30.43，PALK-5 PH＝0.001，FALK-52-AAF/PH＝20.33，P＝0.002）。Western blot的结果显示：假手术组TGF-β和ALK-5三时间点的表达差异无统计学意义（TGF-β灰度值：7 d：456.4±46.8、14 d：454.8±47.1、21 d：458.8±55.6，FTGF-β＝0.14，P＝0.805；ALK-5灰度值：7 d：20.9±4.5、14 d：21.3±7.9、21 d：22.4±6.5，FALK-5＝0.42，P＝0.960）；PH组和2-AAF/PH� 展开更多

关键词 上皮细胞黏附分子 转化生长因子-Β 激活素受体样激酶5 动物模型

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ALK2对小鼠前成骨细胞增殖和分化的影响

10

作者 赵欢 史册 +6 位作者 张雪 李媛 胡月 刘苍维 闫广兴 周怡君 孙宏晨 《口腔生物医学》 2017年第3期141-144,共4页

目的:研究激活素受体样激酶2(ALK2)对小鼠前成骨细胞增殖和分化的影响。方法:体外培养小鼠颅骨前成骨细胞,利用siRNA方法沉默Alk2基因,流式细胞术检测转染效率,实时定量RT-PCR方法检测沉默效率和成骨标志基因的表达,MTT法检测细胞增殖,... 目的:研究激活素受体样激酶2(ALK2)对小鼠前成骨细胞增殖和分化的影响。方法:体外培养小鼠颅骨前成骨细胞,利用siRNA方法沉默Alk2基因,流式细胞术检测转染效率,实时定量RT-PCR方法检测沉默效率和成骨标志基因的表达,MTT法检测细胞增殖,茜素红染色检测矿化程度。结果:正常小鼠颅骨前成骨细胞形态不规则,多呈三角形和多角形,有较多突起;流式细胞术和实时定量RT-PCR显示siRNA可以使小鼠前成骨细胞内Alk2的表达降低至13%;MTT显示Alk2沉默后细胞数量增加;实时定量RT-PCR结果表明Alk2沉默后Runt相关转录因子2基因(Runx2)表达明显下降(P<0.05),碱性磷酸酶基因(Alp)表达有下降趋势;茜素红染色结果表明Alk2沉默后细胞矿化能力明显减弱。结论:ALK2可以抑制小鼠前成骨细胞的增殖,而促进其向成骨细胞的分化。 展开更多

关键词 激活素受体样激酶2 前成骨细胞 增殖 分化

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激活素受体样激酶2调控骨重塑的研究进展

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作者 赵欢 史册 +5 位作者 张雪 李媛 刘杰 李杏 胡月 孙宏晨 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1278-1281,共4页

激活素受体样激酶2(ALK2)是Ⅰ型骨形成蛋白(BMP)受体之一,在胚胎期和出生后骨量的调节中有明显作用,编码ALK2的基因特定位点的获得性突变还可引起人类进行性肌肉骨化症(FOP)。ALK2所介导的BMP信号通路可以负性调节骨量。以ALK2或其下游... 激活素受体样激酶2(ALK2)是Ⅰ型骨形成蛋白(BMP)受体之一,在胚胎期和出生后骨量的调节中有明显作用,编码ALK2的基因特定位点的获得性突变还可引起人类进行性肌肉骨化症(FOP)。ALK2所介导的BMP信号通路可以负性调节骨量。以ALK2或其下游信号分子为靶点治疗骨缺损等疾病具有重要的实际意义和应用前景。本文阐述了骨重塑和BMP信号通路的基本过程,总结了ALK2对骨重塑不同阶段调控作用的研究现状,并概括了ALK2的病理性作用及其机制。 展开更多

关键词 激活素受体样激酶2 骨重塑 骨形成蛋白 信号通路 间充质干细胞 成骨细胞 破骨细胞

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ALK2基因敲除对小鼠股骨骨形成及骨吸收影响的研究

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作者 李超 刘麒麟 +3 位作者 张雪 郑嵘 孙宏晨 吴立鹏 《北京口腔医学》 CAS 2016年第4期191-194,共4页

目的探究激活素受体样激酶2(Alk2)功能缺陷对出生后小鼠股骨骨形成、骨吸收的影响,并探讨其相关机制。方法首先用Cre-loxp重组酶系统培育出Alk2条件基因敲除小鼠,通过基因型鉴定筛选出实验组(基因型:Osx-Cre;Alk2fx/fx)和对照组(基因型:... 目的探究激活素受体样激酶2(Alk2)功能缺陷对出生后小鼠股骨骨形成、骨吸收的影响,并探讨其相关机制。方法首先用Cre-loxp重组酶系统培育出Alk2条件基因敲除小鼠,通过基因型鉴定筛选出实验组(基因型:Osx-Cre;Alk2fx/fx)和对照组(基因型:Osx-Cre;Alk2fx/+)。于出生后21天取材、固定,HE染色观察股骨骨量的差异。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,比较破骨细胞的差异。提取股骨组织的RNA,通过Real-Time PCR检测成骨相关基因Col1、Alp、Runx2、Bsp、Ocn基因的表达。结果小鼠股骨HE染色结果显示,基因敲除组小鼠股骨的骨量明显大于对照组。TRAP染色结果提示,对照组中破骨细胞多于基因敲除组。股骨组织中提取RNA的Real-Time PCR结果,基因敲除组中Col1、Alp、Runx2、Bsp的表达升高,Ocn的表达明显降低。结论 Alk2基因敲除导致小鼠股骨骨量减少,这一作用是通过成骨细胞和破骨细胞双向介导的。 展开更多

关键词 激活素受体样激酶2 条件基因敲除 成骨细胞

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ALK2对小鼠髁突软骨细胞增殖分化的影响

13

作者 张琦 张雪 +4 位作者 赵亮 胡月 史册 孙宏晨 黄洋 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第1期6-9,共4页

目的:探讨ALK2对小鼠髁突软骨细胞增殖及成软骨分化的作用。方法:采用酶消化法提取小鼠髁突软骨细胞并鉴定。体外采用siRNA沉默小鼠髁突软骨细胞中Alk2基因的表达,通过MTT法检测细胞增殖。通过实时定量RT-PCR方法检测软骨细胞标志基因... 目的:探讨ALK2对小鼠髁突软骨细胞增殖及成软骨分化的作用。方法:采用酶消化法提取小鼠髁突软骨细胞并鉴定。体外采用siRNA沉默小鼠髁突软骨细胞中Alk2基因的表达,通过MTT法检测细胞增殖。通过实时定量RT-PCR方法检测软骨细胞标志基因的表达。结果:倒置显微镜观察体外培养的小鼠髁突软骨细胞形态。免疫组化染色显示COLⅠ强阳性,AGGRECAN弱阳性,COLⅡ弱阳性。Pellet培养后实时定量RT-PCR检测发现ColⅡ,ColⅩ和ColⅠ表达上调。证实所分离的细胞是髁突软骨细胞。MTT结果显示Alk2沉默后细胞数量增加,实时定量RT-PCR结果显示Alk2沉默后软骨细胞基因表达下调,并有显著统计学意义。结论:ALK2抑制小鼠髁突软骨细胞的增殖,促进小鼠髁突软骨细胞的成软骨分化。 展开更多

关键词 髁突软骨细胞 激活素受体样激酶2(ALK2) 增殖 分化

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逍遥丸对人卵巢壁颗粒细胞ALK5／Smads通路的影响 被引量：7

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作者 梁莹 赵胜男 +1 位作者 常秀峰 杜惠兰 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2013年第9期754-757,共4页

目的研究逍遥丸治疗不孕症的可能作用机制。方法 60例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕症患者中肝郁证者21例(治疗组),其余39例患者为对照组。对照组采用西医常规方案促排卵,治疗组在对照组的基础上口服逍遥丸,每次20丸,早晚分... 目的研究逍遥丸治疗不孕症的可能作用机制。方法 60例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕症患者中肝郁证者21例(治疗组),其余39例患者为对照组。对照组采用西医常规方案促排卵,治疗组在对照组的基础上口服逍遥丸,每次20丸,早晚分服。测定两组患者成熟卵泡壁颗粒细胞激活素受体激酶5(ALK5)、Smad2、Smad3和Smad 4mRNA和蛋白的表达。结果治疗组颗粒细胞ALK5和Smad2 mRNA及蛋白的表达显著高于对照组(P<0.05);Smad3、Smad4 mRNA和蛋白的表达两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论逍遥丸治疗不孕症的机制可能与上调壁颗粒细胞受体ALK5和Smad2 mRNA及蛋白,调节ALK5/Smads信号通路而达到促进卵泡发育目的 ,调节卵巢功能。 展开更多

关键词 逍遥丸 不孕症 卵巢 壁颗粒细胞 激活素受体激酶5 信号通路

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