胃癌微环境转化后骨髓间充质干细胞的体内致瘤性 被引量：7

1

作者 汪永锋 刘喜平 +4 位作者 崔国宁 董俊刚 李沛清 明海霞 张炜 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第1期32-37,共6页

背景:临床胃癌组织及裸鼠体内致瘤组织分离得到的胃癌间质干细胞,其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似,并证明是肿瘤微环境的重要组成部分,可促进肿瘤的生长。目的:观察经胃癌微环境转化后的骨髓间充质干细胞在体内是否具有致瘤能力。方... 背景:临床胃癌组织及裸鼠体内致瘤组织分离得到的胃癌间质干细胞,其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似,并证明是肿瘤微环境的重要组成部分,可促进肿瘤的生长。目的:观察经胃癌微环境转化后的骨髓间充质干细胞在体内是否具有致瘤能力。方法:设立骨髓间充质干细胞单独常规培养为对照组,实验组采用Transwell小室将人胃癌BCG-823细胞与大鼠骨髓间充质干细胞非接触共培养建立胃癌微环境。收集骨髓间充质干细胞,分别在裸鼠腋下部位行皮下接种对照组细胞或实验组共培养转化后的骨髓间充质干细胞,观察裸鼠皮下有无结节形成;免疫组织化学法检测肿瘤组织潜伏膜蛋白LMP1及抑癌基因TCF21的表达;透射电镜观察肿瘤组织的超微结构。结果与结论:(1)肿瘤结节:对照组裸鼠接种单独培养的骨髓间充质干细胞7-14 d后,始终未形成肿瘤结节。实验组在第7天皮下开始出现肿瘤结节,至14 d肿瘤结节显著增大并稳定;(2)免疫组织化学显示,实验组潜伏膜蛋白LMP1呈显著现高表达状态,抑癌基因TCF21呈低表达状态;(3)透射电镜结果显示肿瘤体组织体积较大,形态不规则,细胞微绒毛异常增多,表面有许多树枝状突起,细胞内成分发生明显改变;(4)结果表明,经胃癌微环境转化的骨髓间充质干细胞具有体内致瘤能力。 展开更多

关键词 干细胞 肿瘤干细胞 胃癌BCG-823细胞 骨髓间充质干细胞 共培养 胃癌微环境 胃癌干细胞 体内实验 致瘤性 抑癌基因TCF21 潜伏膜蛋白lmp1 超微结构 国家自然科学基金

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EB病毒LMP1与细胞信号转导

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作者 张雪雁 马桂璋 《广州医学院学报》 2003年第4期94-98,共5页

EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)是Epstein和Barr于1964年最先从非洲恶性淋巴瘤组织培养中发现的一种病毒,在分类学上将EBV归入疱疹病毒γ亚科嗜淋巴细胞病毒属的DNA病毒.

关键词 EBV 潜伏膜蛋白lmp1 信号转导

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EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌细胞中通过STAT3促进VEGF表达 被引量：13

3

作者 谭运年 陶永光 +4 位作者 李力力 刘素芳 唐敏 顾焕华 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期427-431,共5页

探讨了EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过STAT3调控诱导血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的表达 .利用蛋白质印迹的方法对HNE2、HNE2 LMP1以及瞬时转染STAT3显性负性突变体STAT3β的HNE2 LMP1细胞中VEGF含量进行检测 ,发现LMP1可以... 探讨了EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过STAT3调控诱导血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的表达 .利用蛋白质印迹的方法对HNE2、HNE2 LMP1以及瞬时转染STAT3显性负性突变体STAT3β的HNE2 LMP1细胞中VEGF含量进行检测 ,发现LMP1可以上调VEGF的表达 ,而STAT3β可以抑制VEGF的上调 ;利用LMP1可控表达细胞系tet on LMP1 HNE2进行LMP1时间和剂量诱导表达研究 ,发现VEGF可以随LMP1的动态表达而表达 ;将VEGF野生型报告基因和VEGF潜在的STAT3转录因子突变体报告基因与LMP1表达载体分别共转染研究发现 ,LMP1可以激活VEGF的转录 ,这种转录通过VEGF启动子区STAT3转录因子的结合位点发挥作用 ;电泳迁移率变动分析 (EMSA)确证了STAT3的这种DNA位点的特异性活性 .结果表明 :EB病毒编码的LMP1在鼻咽癌细胞中可以增加VEGF的转录和表达 。 展开更多

关键词 EB病毒 潜伏膜蛋白1(lmp1) STAT3 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 鼻咽癌

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EB病毒及其癌基因LMP1对上皮细胞的转化作用 被引量：7

4

作者 章晓鹏 贺智敏 陈主初 《生命的化学》 CAS CSCD 2003年第2期143-145,共3页

EB病毒 (EBV)是一种人群感染率较高的致癌性疱疹病毒 ,与伯基特氏淋巴瘤、鼻咽癌的关系最为明确。近年来EBV在上皮源性肿瘤发生、发展中的作用受到众多学者的关注 ,而其癌基因LMP1在上皮源性肿瘤发病的病因学方面的作用更成为研究的热... EB病毒 (EBV)是一种人群感染率较高的致癌性疱疹病毒 ,与伯基特氏淋巴瘤、鼻咽癌的关系最为明确。近年来EBV在上皮源性肿瘤发生、发展中的作用受到众多学者的关注 ,而其癌基因LMP1在上皮源性肿瘤发病的病因学方面的作用更成为研究的热点。本综述就EBV进入上皮细胞、永生化上皮细胞的机制。 展开更多

关键词 EB病毒(EBV) 潜伏膜蛋白1(lmp1) 上皮源性肿瘤

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EBV-LMP1C端RNA的体外转录合成及其靶脱氧核酶的初步筛选 被引量：4

5

作者 杨玉成 王袆琴 +3 位作者 钱迪 何芸 黄江菊 洪苏玲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第24期2426-2429,共4页

目的探讨用体外转录方法制备EBV-LMP1C端RNA并用该RNA对其靶脱氧核酶进行初步筛选。方法用巢式PCR方法从绒猴淋巴细胞系B95-8细胞中扩增EBV-LMP1exonc,重组入pGEM-11zf载体,并用T7RNA聚合酶对其进行体外转录制备EBV-LMP1C端RNA。根据该... 目的探讨用体外转录方法制备EBV-LMP1C端RNA并用该RNA对其靶脱氧核酶进行初步筛选。方法用巢式PCR方法从绒猴淋巴细胞系B95-8细胞中扩增EBV-LMP1exonc,重组入pGEM-11zf载体,并用T7RNA聚合酶对其进行体外转录制备EBV-LMP1C端RNA。根据该RNA的一、二级结构设计合成3种靶向10～23脱氧核酶,据体外剪切效率筛选高效特异的靶向脱氧核酶。结果成功地构建含EBV-LMP1exonc基因的重组质粒,用体外转录方法用1μg质粒转录出40.25μg高纯度的EBV-LMP1C端RNA,有1种脱氧核酶DZ1对该RNA体外剪切效率达89%。结论用T7RNA聚合酶体外转录方法成功制备了高纯度的EBV-LMP1C端RNA,经体外剪切筛选出高效特异的1种脱氧核酶,为进一步研究奠定了基础。 展开更多

关键词 体外转录 EB病毒 潜伏膜蛋白1(lmp1) 脱氧核酶

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EB病毒潜伏膜蛋白LMP-1在鼻咽癌中的表达及临床意义 被引量：4

6

作者 林锦 郭巧娟 +4 位作者 韩露 陈奇松 宗井凤 潘建基 林少俊 《实用癌症杂志》 2010年第6期564-567,共4页

目的观察EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)在鼻咽癌(NPC)鼻咽拭子中的表达,探讨LMP-1表达与NPC临床病理特征的关系。方法纳入2007年～2008年福建省肿瘤医院放疗科收治的经病理检查确诊为NPC且同意参加该试验的初治患者129例,均在治疗前应... 目的观察EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)在鼻咽癌(NPC)鼻咽拭子中的表达,探讨LMP-1表达与NPC临床病理特征的关系。方法纳入2007年～2008年福建省肿瘤医院放疗科收治的经病理检查确诊为NPC且同意参加该试验的初治患者129例,均在治疗前应用鼻咽拭子法取鼻咽部黏膜脱落细胞,提取DNA,采用PCR法检测LMP-1基因的表达。结果 129例患者中有114例患者LMP-1呈阳性表达,另15例呈阴性表达,阳性率为88.37%(114/129);对照组中无1例呈阳性表达。LMP-1阳性表达率有颈部淋巴结转移组明显高于无颈部淋巴结转移组。LMP-1表达与患者年龄、性别、临床分期、T分期及M分期无相关性。结论 PCR法检测鼻咽拭子中LMP-1的检出率高于免疫组化法,LMP-1表达与鼻咽癌患者颈部淋巴结转移密切相关,临床中可预测鼻咽癌患者的转移潜能,LMP-1可能做为抗肿瘤转移靶向治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 鼻咽癌 EB病毒 潜伏膜蛋白lmp-1

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EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP的研究进展 被引量：3

7

作者 刘涛 赵菊梅 梁传余 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第4期757-759,共3页

EB病毒与鼻咽癌、Burkitt's淋巴瘤、传染性单核细胞增多症、霍奇金病和某些因机体免疫力下降而产生的淋巴增生性疾病密切相关,其中EB病毒与鼻咽癌的关系尤为受到重视。EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)在细胞的恶性转化中起着相当重要的作用... EB病毒与鼻咽癌、Burkitt's淋巴瘤、传染性单核细胞增多症、霍奇金病和某些因机体免疫力下降而产生的淋巴增生性疾病密切相关,其中EB病毒与鼻咽癌的关系尤为受到重视。EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)在细胞的恶性转化中起着相当重要的作用,又与鼻咽癌病人的治疗和预后有着密切的关系,本文就EB病毒潜伏膜蛋白1的研究近况与鼻咽癌治疗与预后判断进行综述。 展开更多

关键词 EB病毒 潜伏膜蛋白1(lmp1) 鼻咽癌

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EBV-LMP1 cDNA克隆与真核表达载体的构建及体外表达

8

作者 赵菊梅 刘涛 +1 位作者 田聆 梁传余 《华西医学》 CAS 2005年第3期426-429,共4页

目的:从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)cDNA,构建真核表达质粒pIRES-LMP1,并检测其在体外的表达。方法:利用分子生物学技术,提取鼻咽癌总RNA,逆转录PCR获得LMP1cDNA,克隆入pDriveCloningVector并测序,利用引物上设计的酶切位... 目的:从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)cDNA,构建真核表达质粒pIRES-LMP1,并检测其在体外的表达。方法:利用分子生物学技术,提取鼻咽癌总RNA,逆转录PCR获得LMP1cDNA,克隆入pDriveCloningVector并测序,利用引物上设计的酶切位点NheI和EcoRI将LMP1插入真核表达质粒pIRES中,测定序列后,用脂质体包裹转染COS细胞,采用RT-PCR和Westernblot检测LMP1的表达。结果:扩增的LMP1cDNA为1301bp,核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确,该表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1分子。结论:实验所构建的pIRES-LMP1表达质粒能在体外表达LMP1分子。 展开更多

关键词 潜伏膜蛋白1(lmp1) c-DNA克隆 核酸测序 真核表达载体 质粒pIRES

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EB病毒潜伏膜蛋白LMP1、VEGF和cyclinD1在乳腺癌中的表达及其相关性 被引量：4

9

作者 谢闵 朱永云 许增祥 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第12期1901-1905,共5页

目的:探讨乳腺癌中EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和细胞周期蛋白D1(cyclinD 1)的表达及其相关性。方法:收集乳腺癌标本构... 目的:探讨乳腺癌中EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和细胞周期蛋白D1(cyclinD 1)的表达及其相关性。方法:收集乳腺癌标本构建组织芯片,应用免疫组化方法检测LMP1、VEGF和cyclinD 1的表达,并结合临床病理因素进行相关分析。结果:乳腺癌组织中LMP1、VEGF及cyclinD 1的表达率分别为17.8%(19/107)、85.0%(91/107)和64.5%(69/107);LMP1和cyclinD 1的表达与患者年龄、肿瘤大小、病理学类型、淋巴结转移及脉管侵犯均无明显相关性(P>0.05),而两者的表达均与组织学分级有关(P<0.05);VEGF的表达与患者年龄、肿瘤大小、病理学类型、组织学类型及脉管侵犯均无明显相关(P>0.05),而与淋巴结转移存在相关性(P<0.05);LMP1的表达与VEGF和cyclinD 1均明显相关(P<0.05),同时,VEGF与cyclinD 1表达明显相关(P<0.05)。结论:乳腺癌中LMP1可能直接上调VEGF的表达,或者LMP1通过促进cyclinD 1的表达来上调VEGF的表达,从而对乳腺癌的淋巴转移及发生发展起到促进作用。 展开更多

关键词 乳腺癌 EB病毒潜伏膜蛋白1(lmp1) 血管内皮生长因子(VEGF) 细胞周期蛋白D1(cyclinD1)

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潜伏期膜蛋白1与疾病关系的研究进展 被引量：4

10

作者 商蕾 赵鹏翔 +1 位作者 杨林麒 马雪梅 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期912-916,共5页

EB病毒(EBV)是一种普遍存在的致癌病毒,是高度相关的淋巴和上皮肿瘤的来源和发展,包括伯基特淋巴瘤和鼻咽癌(NPC)等,EBV基因几乎可以在所有细胞中。EBV感染通常与少数潜伏病毒功能的蛋白质表达,包括潜伏膜蛋白LMP1和LMP2A等和巴尔核抗原... EB病毒(EBV)是一种普遍存在的致癌病毒,是高度相关的淋巴和上皮肿瘤的来源和发展,包括伯基特淋巴瘤和鼻咽癌(NPC)等,EBV基因几乎可以在所有细胞中。EBV感染通常与少数潜伏病毒功能的蛋白质表达,包括潜伏膜蛋白LMP1和LMP2A等和巴尔核抗原1(EBNA1)。LMP1是肿瘤坏死因子受体超家族的成员,被认为是EBV的主要致瘤蛋白。在EB病毒中通过2个C末端结构域编码基因蛋白LMP1信号来驱动细胞生长,存活和转化。LMP1蛋白目前是惟一已被证实的EB病毒的癌基因,LMP1的表达参与了肿瘤的发生与发展,是目前癌症方面研究的重点。 展开更多

关键词 潜伏期膜蛋白1(lmp1) EB病毒(EBV) 肿瘤

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LMP1调控的细胞生存与死亡程序及其在抗肿瘤免疫中的意义(英文) 被引量：3

11

作者 张湘宁 黄培春 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期831-837,共7页

EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)基因组编码数种恶性转化必需的蛋白质,如潜伏期膜蛋白1(latent membraneprote in1,LMP1)。LMP1能上调抗凋亡的蛋白质以支持病毒的复制,同时也能增强细胞凋亡,提示一种病毒的蛋白质既能支持病毒的生存,亦... EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)基因组编码数种恶性转化必需的蛋白质,如潜伏期膜蛋白1(latent membraneprote in1,LMP1)。LMP1能上调抗凋亡的蛋白质以支持病毒的复制,同时也能增强细胞凋亡,提示一种病毒的蛋白质既能支持病毒的生存,亦能刺激宿主的防御机制,导致受感染的细胞裂解。病灶浸润的CD8阳性T淋巴细胞通过合成Fas配体等效应分子发挥抗肿瘤免疫功能。作为一种核因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)依赖性的分子,Fas可被LMP1诱导。根据我们报道的LMP1对刺激物依赖性的细胞凋亡调节模型,LMP1能增强Fas诱导的细胞凋亡。有结果显示,Fas配体介导的细胞毒性对于EBV相关的鼻咽癌具有明显的治疗效果。近来也有报道提示,影响Fas介导细胞凋亡的基因突变可显著地降低个体对肿瘤的易感性。我们认为,在肿瘤细胞精确地调控Fas水平的细胞因子疗法,仍有可能增强癌症患者的抗肿瘤免疫。 展开更多

关键词 EB病毒 潜伏期膜蛋白1(lmp1) Fas/APO-1/CD95 Fas配体/CD178 抗肿瘤免疫 细胞毒性T淋巴细胞 NF—KB

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过表达EB病毒潜伏期膜蛋白1(LMP1)的人B淋巴细胞株的建立

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作者 张令歌 赵旋 +5 位作者 辛苗苗 王丽芹 温大蔚 高岩岩 罗兵 孙明姝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期206-210,共5页

目的构建EB病毒潜伏期膜蛋白1(LMP1)基因的真核表达载体,通过电穿孔法转染人B淋巴瘤细胞株Ramos细胞,建立稳定的LMP1表达细胞株。方法扩增带有EcoRⅠ与BamHⅠ酶切位点的LMP1编码基因,克隆至pcDNA3.1-EF1a-mcs-3FLAG-CMV-EGFP真核表达载... 目的构建EB病毒潜伏期膜蛋白1(LMP1)基因的真核表达载体,通过电穿孔法转染人B淋巴瘤细胞株Ramos细胞,建立稳定的LMP1表达细胞株。方法扩增带有EcoRⅠ与BamHⅠ酶切位点的LMP1编码基因,克隆至pcDNA3.1-EF1a-mcs-3FLAG-CMV-EGFP真核表达载体,挑取阳性单克隆感受态细胞行PCR以及测序后将重组质粒通过电穿孔法转染Ramos细胞, G418筛选稳定表达LMP1的细胞株, PCR和Western blot法分别检测LMP1 mRNA和蛋白在Ramos细胞中的表达。结果 PCR与测序证实成功构建了LMP1重组质粒,建立了稳定转染的Ramos细胞,且LMP1蛋白可在细胞中成功表达。结论成功建立了稳定表达LMP1的Ramos细胞。 展开更多

关键词 EB病毒潜伏期膜蛋白1(lmp1) Ramos细胞 B细胞

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